普通血袋常温保存分离后富含血小板血浆24 h再制备浓缩血小板的质量观察

目的探讨普通血袋常温分离富含血小板血浆(PRP)后保存24 h再制备的浓缩血小板(PC)质量。方法将采集的400 mL全血50袋,保存在20-24℃的恒温保存箱内,采集后4 h经1次轻离心分离出PRP,容量(200±10)mL/份,再每份均分成2袋存放于普通血袋中,分别标识为实验组:将PRP放置20-24℃的恒温保存箱内过夜,次日2次重离心,分出上清血浆,制备成PC,从全血采集时间算起,24 h完成制备;对照组:将PRP立即2次重离心,分出上清血浆,制备成PC,从全血采集时间算起,6 h完成制备。采集后24和48 h,分别检测2组PC中血小板、红细胞含量和pH值。结果 2组PC中红细胞混入量和pH值差异甚小(P0.05),实验组与对照组血小板含量(×1010/袋)分别为1.36±0.33和2.63±0.46(P0.05);对照组3项指标均合格,实验组只有红细胞混入量与pH值合格。结论分离PRP后,在普通血袋常温保存24 h再制备浓缩血小板,质量达不到《全血与成分血质量要求》。     

一种用国产设备和血袋制备血小板浓缩液的新方法

<正> 血小板输注在近10年来有了较大的发展,我国通常采用制备浓缩血小板(PC)的方法是先用全血制备富含血小板血浆(PRP),然后用PRP经重离心制备PC,这种PC制成时血小板沉积于袋底即压积血小板浓缩液(PPC),需静置1～2小时后方可混匀使用。曾有报道,PPC与PRP中的血小板比较,显示异常的聚集和分泌反应,提示离心后沉积的血小板可以引起血小板体外功能的降低。为此,近     

血小板制备和保存的新动向

由全血制备临床用血小板制剂的经典方法是首先制备富血小板血浆(PRP),再经第二步离心将血小板球聚并重悬于小量血浆中,欧洲则流行用另一种方法制备浓缩血小板(PC):首先沉降全部血细胞,回收上清血浆和“白膜(BC)”,再沉降BC中红细胞和白细胞,收获上清即得PC。后一方法的优点是在较柔和的初始离心条件下即可获得相当数量的血浆,PC成品悬浮于含少量血浆的添加液中,其中混杂的白细胞和红细胞很少。     

用前到腺素E_1制备的浓缩血小板在体内的恢复与存活

贮存5-7天的浓缩血小板(PC)在输注后恢复和存活不如新鲜血小板。作者首先在新鲜富血小板血浆(PRP)中加入一种生化激活剂后进行制备,并与常规PC制备法对照。方法:采集至少10天未服药的男性献血者全血,枸橼酸-磷酸-葡萄糖(CPD)抗凝,室温离心(1000g,7分钟)制备PRP。加入用正常盐水稀释的前列腺素E_1(PGE_1)使其最终浓度为1.3×10(~-8)M,然后室温3500g离心7分钟制备PC。PC于22℃±1℃贮存5天后,在使用前2-3小时以自身血浆浸泡血小板,然后弃液体,计数血小板、白细胞,测定pH,按Kunickl法作形态学积分,每个单位浓缩血小板加入250μCi铬酸钠(~(51)Cr)标记,22℃孵育30分钟,以自身血浆洗涤后配成30ml悬液,于输入后1.5、2.0、24、     

不同规格全血制备富血小板血浆的最佳离心条件研究

目的研究不同规格全血分离制备富血小板血浆(PRP)的最佳离心条件。方法共采集54例健康献血者的新鲜全血,根据离心次数和离心条件分为两次离心组(A、B、C三种分离方法)和三次离心组(D、E、F三种分离方法)共6组,每组含200、300和400 ml全血各6袋。检测每组制备PRP的血小板计数和红细胞混入量,计算血小板回收率并进行比较。结果两次离心法所制备PRP的血小板回收率最高,但红细胞混入量较多,其中200 ml全血采用方法A最佳(即初次850g离心8 min,第2次4 650 g离心5 min),300 ml全血为方法B(初次1 000 g离心6 min,第2次4 650 g离心5 min),400 ml全血为方法C(初次1 220 g离心5 min,第2次4 650 g离心6 min)。三次离心法与二次离心法相比,红细胞混入量明显减少(P0.05),但血小板回收率有所降低。结论不同规格全血制备PRP应采用不同的离心条件,两次离心法适用于制备新鲜PRP或血小板胶,而三次离心法更适合冰冻或冻干PRP或血小板胶。     

单采血小板的保存

由于同种免疫反应的关系,血小板减少的病人最好是用HLA配型相合、单一献血员通过自动血液分离器采集的血小板。但因配型和单采均需在地区输血中心才能办到,因而确定采集到输用之间的保存条件有明显的重要性。Katz指出单采的血小板保存在2000ml血袋中优于300ml血袋。为解释这些不同,本文就用自动细胞分离器单采的血小板,在大小不同的血袋、不等量的血浆和血小板与血袋表面积不同比率等保存情况进行了研究。本实验用Haemanetics 30型血液分离器制备血小板浓缩悬液(PC)。5名献血员各采2次,间隔两周,每次作为一份(200ml),一次装入300ml袋,另一次装入2000ml袋中(Fenwal PL146)。在22℃常规血小板保存条件下,保存48小时。所有样品在采集后1小时,24小时,48小时分别进行pH,     

采用特制顶—底联袋制备浓缩血小板初步实验

<正> 富含血小板的白膜层(BC)制备浓缩血小板悬液(BC—PCs)方法已被越来越多的血站采用,其优点是降低了红、白细胞的污染,且这种非压积血小板的体外聚集功能显著好于经典的富血小板血浆法(PRP—PC)制备的血小板。然而其获得率仅为56％、57.2％、52％和59％,远远低于方静致等报告采用PRP—PC法制备血小板的得率(74.7％)。Prins等和Piertersz等认为全血重离心后,在白膜层中含有约占全血90％的血小板。笔者在实际工作中发现,分离白膜时不同程度的粘袋现象,致使大量白膜丢失,此白膜中血小板含量差别很大,降低了终产品血小板回收率。笔者参考国     

底顶系统;血液成分制备和贮存的新技术

为了使正常离心后的血液成分分开,作者采用1种新型的光电控制分离器操纵3或4联袋,收集血袋顶部和底部都有出口。全血经离心后,放在上述装置上,血液成分可同时从顶部和底部被挤压出来,首次分离即可得到3个血液成分:少白细胞的SAGM红细胞悬液、CPD血浆和白膜。这一系统已在(A、B)两个实验室试用。为得到最大产率的少细胞血浆采用高速离心,白细胞从红细胞中分开也最完全。剩余的白细胞数是0.46±0.25(A)和0.5±0.4(B)×10~9/红细胞单位,血小板浓缩物可以用正常方法从PRP或从白膜层制备。 ~(51)Cr标志红细胞自身输血24小时后的存活率,     

用添加液从汇集白膜中制备血小板浓缩物

本文介绍了一种制备血小板浓缩物的新方法:保存在室温下6～12小时的CPD全血分别经3500rpm10分钟、4000rpm12.5分钟离心制备成两组白膜,一组汇集6单位和另一组汇集4单位白膜。第一组大约42g白膜被挤入子袋,而第二组留存大约55g白膜。第一组白膜在血小板浓缩物(PC)的制备中加入添加液(PAS)250ml,而第二组加入300ml,制备后的PC(第二组)在贮存前,分装成相等的两部分。将贮存1、2、4、7天的PC取4毫升进行     

富含血小板血浆法和白膜回浆法制备浓缩血小板比较

目前，浓缩血小板广泛应用于出血性疾病和肿瘤治疗及心脏外科病人，血小板浓缩液（PC）中的血小板质量对于临床治疗效果十分重要。1996～1997年，笔者采用了富含血小板血浆法（PRP－PC法）和白膜回浆法（BC－PC法）所制备的浓缩血小板分别是780u和850u，现就两种制作方法进行比较。1材料和方法1．1材料：大容量低温冷冻离心机（美国贝克曼J6－HC）、密闭采用连袋（由上海市血液中心生产）。1．2制备方法1．2．1PRP－PC法：（1）采用采集后4～6小时内的全血（内含ACD保养液）。全血采集要求一针见血，血流呈一直线，采4O0ml全血应…     

一次离心法制备大、小鼠富血小板血浆实验条件的优化

目的探讨一次离心法制备大、小鼠富血小板血浆(PRP)的最佳离心条件。方法分别采用股动脉插管和心脏穿刺的方法获取大、小鼠动脉血,14%CPDA-1抗凝,滤除白细胞后分装入无菌EP管中,不同条件下(离心力:300×g～600×g,离心时间:4～12min)离心制备大、小鼠PRP,利用血液分析仪分别对抗凝全血、滤除白细胞后的血样及PRP进行细胞计数,比较不同方法间的血小板回收率。结果大、小鼠抗凝全血滤除白细胞后分别以400×g和300×g的离心力离心8min时,血小板回收率最高。结论选择合适的离心力和离心时间,达到白膜形成前的临界状态,是一次离心法制备PRP的关键。     

去白膜法分离血小板的研究进展

目前,浓缩血小板的手工分离制备方法有:富含血小板血浆法(PRP法)和去白膜法(BC法)2种。我们就去白膜法分离血小板的研究进展做一综述。1富含血小板血浆法分离制备血小板(PRP法)20世纪70—80年代,富含血小板血浆法为血小板分离制备的标准方法。此方法是先将全血经轻离心后分离制     

骨组织及软组织修复作用中富血小板血浆的制作及其原理

目的:富血小板血浆(platelet-richplasma,PRP)含有多种高浓度生长因子,可促进骨愈合及软组织修复。探讨通过离心法制作富血小板血浆的原理,为临床利用PRP修复组织缺损提供实验依据。方法:从肘前静脉取血5mL,选用4种不同离心次数、离心力和离心时间的PRP制作方法,制作的PRP均为0.7mL,对比研究各种PRP和全血中的血小板计数和活化率。结果:全血标本的平均血小板计数是214.41×109L-1。在不同方法制作的PRP中,血小板计数均明显高于全血,分别是629.95×109L-1(Anitua法),1093.00×109L-1(Petrungaro法),1323.80×109L-1(Landesbergo法)和1347.05×109L-1(Aghaloo法),是全血血小板计数的2.92,5.10,6.17和6.28倍。PRP中血小板计数与全血血小板计数呈正相关,相关系数分别为rAnitua=0.79,rPetrungaro=0.83,rLandesberg=0.93和rAghaloo=0.89。活性检测,CD62P的表达在全血中是0.85%,Anitua法4.87%,Petrungaro法9.79%,Landesberg法6.05%,Aghaloo法9.12%。PRP的CD62P表达率与全血的CD62P表达率以及各PRP之间均呈显著性差异。结论:二次离心法制作的PRP其血小板浓度和血小板回收率显著高于一次离心法。在这4种方法中,以Landesberg法制作的PRP中血小板浓度高、活化率小。     

过滤对血小板浓缩物贮存的影响

作者采用混合的白膜层(BC)制备血小板浓缩液(PC):用含有CPD抗凝剂和氯化钠-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇添加剂的三联袋采集全血450～500ml,于2小时内冷至20℃。血袋于室温放置约20小时,经2960g离心5分钟,分出50±5ml白膜层。将4单位ABO血M型相同的BC于300ml带6个接头的PVC袋中混合,再加入这4名献血者之一的血浆200ml,充分混匀,并再连接一个300mlPVC空袋。混合物于22℃、400g离心7分钟,将富血小板血浆慢慢转移到300ml空袋中,当红细胞距袋子的出口约0.5～1cm时,中止转移。 为了减少差异,将上述3份PC混匀后再分成重量、体积等同的3份PC作为一组试验,其中1份     

富含血小板血浆凝胶的超微结构

目的观察富含血小板血浆(PRP)凝胶的超微结构。方法采用二次离心法制备PRP,分别计数全血和PRP血小板,用酶联免疫吸附法测定全血和PRP凝胶中转移生长因子(TGF)-β1及血小板源性生长因子(PDGF)-AB的浓度;同时,对PRP凝胶行大体观察、HE染色、透射及扫描电镜观察。结果 PRP中的血小板浓度达到全血的4.58倍;PRP凝胶中含有高浓度的TGF-β1、PDGF-AB;扫描电镜及透射电镜观察均显示PRP凝胶主要由大量纤维蛋白网和血小板构成。结论 PRP可能是构建可注射组织工程髓核的理想支架材料。     

骨组织及软组织修复作用中富血小板血浆的制作及其原理

目的：富血小板血浆(platelet-rich plasma，PRP)含有多种高浓度生长因子，可促进骨愈合及软组织修复。探讨通过离心法制作富血小板血浆的原理，为临床利用PRP修复组织缺损提供实验依据。方法：从肘前静脉取血5mL，选用4种不同离心次数、离心力和离心时间的PRP制作方法，制作的PRP均为0．7mL，对比研究各种PRP和全血中的血小板计数和活化率。结果：全血标本的平均血小板计数是214．41&;#215;10^9L～^-1。在不同方法制作的PRP中，血小板计数均明显高于全血，分别是629．95&;#215;109L～^-1(Anitua法)，1093．00&;#215;109L～^-1(Petrungaro法)，1323．80&;#215;109L～^-1(Landesbergo法)和1347．05&;#215;109L～^-1(Aghaloo法)，是全血血小板计数的2．92，5．10，6．17和6．28倍。PRP中血小板计数与全血血小板计数呈正相关，相关系数分别为rAnitua=0．79，rpetrungaro=0．83，rLandesberg=0．93和rAghaloo=0．89。活性检测，CD62P的表达在全血中是0．85％，Anitua法4．87％，Petnmgaro法9．79％，Landesberg法6．05％，Aghaloo法9．12％。PRP的CD62P表达率与全血的CD62P表达率以及各PRP之间均呈显著性差异。结论：二次离心法制作的PRP其血小板浓度和血小板回收率显著高于一次离心法。在这4种方法中，以Landesberg法制作的PRP中血小板浓度高、活化率小。     

体外试验评价照射后贮存5天的浓缩血小板

为了评价照射后在标准条件下于室温贮存5天的浓缩血小板(PC),作者应用成对的山同一单位全血制备的PC进行研究。方法:15单位全血采于Fenwal 1618PL1240四联袋,于采血后立即制备PC,用Bcckman离心机1700 g离心4分钟,随后将富血小板血浆移至两个相同体积的袋中。然后再以2500 g离心10分钟,弃上层血浆,在每一袋中得到50-60mlPC,于室温放置60分钟,悬浮后每对PC中的一份立即应用Gamma Cell 2000,铯     

影响手工制备浓缩血小板数量因素的探讨

目的：探讨手工制备浓缩血小板的影响因素,提高手工浓缩血小板的质量。方法：2008年1～12月随机选择献血者且献血前72h内未服用过阿司匹林类药物,采集顺畅;采用两种形状的血袋及两种规格的血液,通过不同的离心条件及同一分离手法制备手工浓缩血小板。结果：按＂白膜法1＂制备浓缩血小板收集效果好;400ml全血制备浓缩血小板含量高。结论：手工制备浓缩血小板的数量除献血者本身因素外,离心条件、血液规格及血袋的形状对收集血小板均有影响。     

用白膜回浆法制备浓缩血小板

<正> 目前制备浓缩血小板大多采用富含血小板血浆法(简称PRP)。这种工艺制备的浓缩血小板中含有较多的红细胞和大量的白细胞,制备后的浓缩血小板要经过再悬浮处理,得率也不稳定。国内有人作过这方面研究,发现全血离心后的白膜中含有90%以上的血小板,于是便以白膜作为浓缩血小板。以上两种方法制备的浓缩血小板在输注前都必须进行交叉配血试验。这不仅使输注过程繁琐,更为不利的是,大量白细胞的混入更易引起病人发生输血反应。国外已有学者用多联袋从白膜中分     

人工介质加入血小板活化抑制剂-PGE_1和茶碱延长血小板的贮存

作者将血小板活化抑制剂与代血浆强化电介质溶液联合使用,延长了血小板的贮存期,减少了血小板功能和形态学的改变。方法 1.试剂血小板活化抑制剂—前列腺素:(PGE_1)、茶碱(theophylline),人工介质等。每250ml人工介质中含无乳酸盐林格氏液187.5ml,CPD42.5ml,50％葡萄糖1.35ml,90mEq KCI0.175ml,50％MgSO_40.10ml。2.浓结血小板(PC)健康献血者全血,采入CPDA-1抗凝血袋中,离心、制成富血小板血浆(PRP)。再将PRP挤入子袋,1/8容量的柠檬酸盐水(0.9％NaCl 7份加CPD1份)处理,