Y-STR--法医学的新工具

哺乳动物细胞内有 3种DNA ,即常染色体DNA、性染色体DNA和线粒体DNA。其中男性Y 染色体DNA多态性有其独特之处 ,在人类进化、法医学、群体遗传学研究中发挥重要作用 ,已引起广大学者的注意。1　Y染色体结构及相关研究人类Y染色体是近端着丝粒染色体 ,由长臂 (Yq)和微小的短臂 (Yp)两部分组成。流式细胞仪方法检测得Y染色体由约 5 0Mb核苷酸组成 ,分为两个遗传功能不同的区域 :拟常染色体区和Y 特异区[1] ,拟常染色体区在男性减数分裂过程中 ,参与同X染色体的联会配对。Y 特异区存在与性别决定有关的基因SRY(sex determingregion…     

核化线粒体的进化加速作用与转基因人模型分析

生物分子钟的应用在当代生物研究领域具有十分重要的意义。然而，分子钟仅能用于粗略估计不同种群生物间的进化时程，间接表明进化可能不是或不仅仅是由于中性突变通过遗传渐变所造成；相反，染色体DNA与外源性DNA之间，以及染色体DNA相互之间的大量基因重组，则可能是推动进化进程的更大动力之一。鉴于人体内的线粒体DNA是一种外源性环状DNA，人类可认为是一种天然发生的整合了外源性线粒体DNA的转基因物种。本文引入转基因人分析法并应用这一方法探讨与人类进化过程相关的基因重组。通过对人、小鼠、大鼠进行核化线粒体组学分析，发现人类染色体基因组含有大量与线粒体DNA同源的核酸片段；人体基因组内核化线粒体基因在重组数与总碱基长度上均较小鼠和大鼠高出数倍。人体内大量存在的线粒体DNA介导的基因重组可能在促进人类进化中发挥了一定的作用。     

河北汉族人群四个Y-STR位点遗传多态性的研究

长期以来 ,Y染色体一直被用做性别鉴定。 2 0世纪 80年代后 ,对人类Y染色体的研究已进入了DNA多态性分析阶段。随着PCR技术的不断发展 ,已开始采用微卫星DNA (microsatelliteDNA)标记对DNA多态性位点进行研究。常染色体中DNA多态性来源除了突变外 ,还有可能来自减数分裂中的重组 ,而Y染色体除了长臂和短臂末端的拟常染色体区 (pseudoautosomalregion)在减数分裂中与X染色体发生重组外 ,其余的大部分Y染色体特异区(95 % )不发生重组 ,而是以单倍体形式从父亲遗传给儿子 ,称为非联合Y染色体。而发生与Y染色体非重组部分的DNA序列…     

线粒体基因突变糖尿病的现状及筛查与诊治的建议

线粒体基因组是细胞内惟一独立于细胞核染色体之外的遗传物质。由于受精卵的线粒体几乎全部来源于卵细胞，线粒体基因突变所致疾病呈母系遗传，即女性患者的子女均可能从母亲一方遗传获得致病基因而患病，而男性患者的子女理论上均不得病。1981年Anderson等发表了人类线粒体DNA（mtDNA）的全序列，从此开辟了研究mtDNA突变与人类疾病的新领域。本文在总结线粒体基因突变相关糖尿病国内研究现状基础上提出在中国人中进行筛查及诊治的初步建议。     

贵州省侗族人群mtDNA 9 bp序列缺失频率及DYS287位点多态性研究

目的:分析贵州省侗族人群线粒体DNA 9 bp序列缺失频率及Y染色体DYS287位点的多态性.方法:用PCR-聚丙烯酰胺凝胶法(PAGE)分析mtDNA 9 bp缺失多态性,DNA序列分析法验证结果;用PCR-琼脂糖凝胶电泳检测法分析DYS287位点多态性.结果:在96例侗族男性个体中,mtDNA 9 bp缺失多态频率为13.54％ (13/96),DYS287全部显示为YAP-.结论:获得贵州省侗族人群mtDNA 9 bp序列缺失频率及Y染色体DYS287位点多态数据,为该民族群体遗传分析及起源提供了相关遗传背景资料.     

新Y染色体基因座DYS716在山西汉族人群中的遗传多态性研究

目的：筛选新的Y染色体基因座，调查其在山西汉族人群中的等位基因频率分布。方法：在Y染色体基因组DNA中查找候选的基因座，用GDB基因库引物序列进行PCR扩增，再用银染方法显带。结景：本研究选择了Y染色体基因座DYS716，该基因座为5-核苷酸复杂重复序列，重复单位是cactc＆cattc。在114例山西汉族无关男性个体血样中共检出了5个等位基因，20例女性DNA无扩增产物且50组家系调查无突变。其基因多样性为0，6361，在法医学应用方面，其个人识别能力（DP）和非父排除率（PE）均为0．6361。结论：新Y染色体基因座DYS716具有较高的遗传多态性，在法医学及人类遗传学方面具有应用价值。     

核外基因—mt DNA及其表达体系

生物的遗传物质不是只构成一个信息系统,而是几个信息系统。例如,在动物特别是多细胞动物中,一般有两个遗传信息系统指导它的整个生命活动,即核染色体DNA(nDNA)和线粒体DNA(m-tDNA);而在真核植物细胞里,一般有三个遗传信息系统,即nDNA、mt-DNA和叶绿体DNA(cpDNA)。很多人把线粒体和叶绿体的遗传信息系统称为真核细胞的第二遗传信息系统,或称     

中国保安族线粒体DNA D-环区遗传多态性的研究

目的：以遗传群体为对象，观察线粒体DNA的群体遗传特点，为研究西北少数民族的起源提供科学依据，并为法医学鉴定提供线粒体DNA序列多态性的基础数据。方法：应用PCR扩增产物直接测序法，对98例保安族无关个体线粒体DNA D-环区HVSⅠ进行测序分析。结果：在mtDNA高变区Ⅰ(HVSⅠ)16091～16418之间与Anderson序列比较共发现有66处碱基突变，62个单倍型，碱基突变的主要形式为碱基替代，其中转换87％，颠换11％，碱基插入1％，碱基缺失0．5％．保安族线粒体DNA HVS Ⅰ区基因差异度为0．9862，偶合概率为0.0237。结论：保安族与其他群体比较有其独特的线粒体DNA序列遗传特点，与亚洲其他人种及高加索人种有明显差异。保安族线粒体DNA序列多态性不仅有别于西方人种，也与其他东亚人种不同，线粒体DNA控制区HVS Ⅰ序列多态性可用于法医学个体识别及亲权鉴定。     

核外基因——mtDNA及其表达体系

生物的遗传物质不是只构成一个信息系统，而是几个信息系统。例如，在动物特别是多细胞动物中，一般有两个遗传信息系统指导它的整个生命活动，即核染色体DNA(nDNA)和线粒体DNA(m-tDNA)；而在真核植物细胞里，一般有三个遗传信息系统，即nDNA、mt-DNA和叶绿体DNA(cpDNA)。很多人把线粒体和叶绿体的遗传信息系统称为真核细胞的第二遗传信息系统，或称核外基因及其表达体系。     

研究表明人类Y染色体进化快于其他染色体

日韩联合研究小组发现，黑猩猩与人类Y染色体DNA碱基序列的差异为1．78％，大于基因组碱基序列的整体差异，表明人类Y染色体的进化速度比其他染色体快。     

荧光原位杂交法检测特纳氏综合征患者的微小标记染色体

目的确定特纳氏综合征（Turner's syndrom)患者微小标记染色体（Small marker chromosome,smr)的来源。方法用 Ｘ和Ｙ染色体着丝粒特异的ＤＮＡ探针进行荧光原位杂交（Fluorescence in situ bybridization,FISH),检测３例核型为 ４５, Ｘ／４６, Ｘ＋smr的特纳氏综合征患者的smr。结果 ２例患者smr染色体来源于Ｙ染色体, １例来源于Ｘ染色体。结论 ＦＩＳＨ技术可快速准确鉴别微小标记染色体,对临床诊断和治疗方案的选择有重要指导作用。     

无精子症患者的遗传学诊断

目的 :了解精子发生障碍的遗传学原因。　方法 :对 1 0 7例无精子症患者进行染色体核型分析及Y染色体微缺失的检测。　结果 :检出染色体异常核型 1 3例 (1 2 .1 % ) ,均涉及性染色体数目、结构畸变 ,其中 1 0例为 4 7,XXY ,1例为 4 7,XXY ,t(4 ;1 2 ) ,1例为 4 6X ,del(Y) ,1例为 4 6 ,XX。 4 6X ,del(Y)和 4 6 ,XX除检出SRY外 ,未检出Y染色体上与精子发生相关的其他DNA片段。检出 8例患者有Y染色体微缺失 ,AZFb AZFc缺失 2例 ,AZFc缺失 6例 ,共占 7.5 % (8/ 1 0 7)。 1例AZFb AZFc缺失患者 ,睾丸活检病理显示唯支持细胞综合征 ,1例生精阻滞在初级精母细胞阶段。 6例AZFc缺失患者精液细胞学检测 ,1例见初级精母细胞 ,5例见各级生精细胞。　结论 :染色体核型分析和Y染色体微缺失的检测有助于无精子症的遗传学病因诊断。     

男性胃癌病人Y染色体缺失的原位杂交检测及其意义

建立了用染色体特异的探针检测细胞染色体畸变的原位杂交法。用生物素标记的ＰＹ３．４探针对１２例男性胃癌标本进行原位杂交，检测Ｙ染色体的丢失，我们发现：胃癌组织细胞的Ｙ染色体丢失率很高，Ｙ染色体丢失很可能是胃癌细胞的一个染色体标志，胃癌组织细胞的Ｙ染色体丢失与肿瘤的分化程度和肿瘤的转移有一定关系，这对胃癌的诊断和估计预后有一定帮助。     

Y染色体微缺失与男性不育相关

目的：探讨Y染色体微缺失原因不明性无精症、少精症所致男性不育的相关性。方法；特发性少精症18例、特发性严重少精症12例，特发性无精症5例及正常已生育健康男性10例作为研究对象和正常对照，应用多重PCR技术，对精液基因组DNA进入Y染色体上连续的18个序列标记位点检测。结果：少精症18例中发现Y染色体微缺失2例，严重少精症12例中发现Y染色体微缺失3例，无精症5例和正常已生育男性10例均末发现Y染色体微缺失，缺失形式3种。结论：Y染色体微缺失与精子发生障碍相关。     

用生物素标记Y特异DNA探针对一例Y染色体结构异常患者的研究

用生物素标记Y特异3.4kbDNA为探针,应用染色体原位杂交技术对一例表型异常、常规染色体显带技术为小Y染色体的患者进行了研充:该患者不能与3.4kbDNA杂交,与~3H标记探针的染色体原位杂交结果一致。进一步以生物素标记此探针对患者的基因组DNA进行Southern印迹杂交分析,患者缺少一部分可检测的男性特异性片段,结合其临床特征,提示该患者为Yq的中间缺失。     

Identification of cultured male epidermal allografts by detecting Y chromosome DNA fragments in female burn victims

ltiswellknownthattheskinofextensivelyburnedcasesthemselvesisinsufficienttoprovidecoverageforwounds.Thoughallogeneicskincancoverthewoundstemporari1y,itwillberejectedwithin2-3weeks.Thiscanthreatenthepatient'slifeifthereisnoenoughautogenousskintoreplacetherejectedoneontime.GreenetalL1]reportedthattheburnwoundsofpatientswithextensiveburnscouldbetreatedbytransplantingepidermalautograftsafterautologousepidermalcellsmulti-plyforthousandsoftimesinvltrowithinashortperiodoftime-Butittakesatleast2-3weeks…     

器官移植术后嵌合现象的研究

选择3例接受男性移植物的女性移植患者作为研究对象，其中1例小肠移植，2例肾移植患者，利用PCR技术扩增Y染色体特异性DNA片段，结果在小肠移植女性受体外周血及皮肤组织中出现Y染色体特异性DNA片段，肾移植外周血中也出现Y染色体特异性DNA片段，表明在器官移植术后存在着供体细胞向受体组织的移居嵌合。联合的发现不仅丰富了免疫耐受的理论，而且对移植临床具有指导意义。促进嵌合的出现及保持嵌合的平衡，将有利于防治排异反应和GVHD。     

智力低下患儿Y染色体长臂变异及其意义

对85例智力低下患儿进行了遗传咨询,发现7例大Y染色体。在染色体异常病人中,仅次于21三体,但二者表现相似,故在遗传咨询中,大Y染色体综合征是不可忽视的智力低下患儿的病因之一。     

45,X,der(Y)t(Y;13)不育男性患者的临床细胞和分子遗传学研究

目的:了解核型为45, X, der (Y) t (Y; 13)(q11.1; q12), -13伴无精子症、双侧乳腺轻微发育和多发性皮下结节男性患者的分子遗传学特点. 方法:进行常规染色体核型分析,用荧光原位杂交(FISH)进一步确定患者核型.用PCR-STSs以确定Yq上的断裂点.用DNA多态性方法检测位于13q12 上的BRCA 2基因拷贝数.对患者的睾丸和皮下结节进行活检. 结果:细胞遗传学和FISH证实患者SRY基因和Y染色体着丝粒位于13号染色体上.因此,患者核型为45,X,der(Y)t(Y;13)(q11.1;q12),-13.ish der(Y)(SRY , DYZ3 , wcp13 ).Y染色体长臂上的AZFa,b,和C区域全部丢失,断裂点位于sY82以下.BRCA 2基因的多态性检测无拷贝数的丢失.睾丸活检结果为唯支持细胞综合征.皮下结节病理检查为血管脂肪瘤. 结论:患者的男性表型是由于基因组中存在SRY基因.无精子症、睾丸体积小与病理结果一致,是由于Y染色体Yq11.1 → Yqter 片段丢失所致.但血管脂肪瘤的分子机制仍然不清楚.     

生物素标记DNA探针测定人性别

白细胞或胎儿绒毛组织染色体DNA经限制酶Hae (?)消化后,用光生物素(photo-biotin)标记人Y染色体特异的3.4 kb DNA片段作探针,进行Southern印迹杂交,并以生物素结合蛋白-碱性磷酸酶体系显示生物素探针杂交信号。结果表明,0.1μg男性DNA可显示清晰的信号,而5μg女性DNA则无信号出现;平行试验证明生物素探针测定人性别的结果与32P标记探针完全一致。提示生物素探针可用于X连锁遗传病、性异常,运动员体检,法医学及异性别骨髓移植方面的性别分析。