脾气虚证小肠运动异常的VIP/NO信号转导机制初探

目的探讨脾气虚小肠运动异常的细胞信号转导机制。方法Wistar健康大鼠30只,随机分为正常组、模型组、四君子汤防治组,每组10只。采用“破气苦降加饥饱失常法”塑造大鼠脾气虚证模型,分别采用放射免疫法、硝酸还原酶法及分光光度法测定各组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌中血管活性肠肽(VIP)、一氧化氮(NO)含量与一氧化氮合酶(NOS)活性;同步观察各组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌张力变化。结果模型组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌中VIP、NO含量与NOS活性明显低于正常组和四君子汤组,四君子汤组和正常组之间无显著差别;模型组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌张力较正常组和四君子汤组明显增强,但四君子汤组和正常组之间未见明显改变。结论脾气虚证与小肠平滑肌VIP/NO信号通路之间具有较好的相关性,该信号通路变化可能是脾虚证小肠运动异常以及脾虚证主要病理生理机制之一。     

实验性脾虚大鼠与冷应激大鼠回肠段SP、VIP含量的变化

目的 研究实验性脾虚大鼠与冷应激大鼠引起胃肠功能紊乱可能的共同机理。方法 应用放射免疫分析方法（RIA），对实验性脾虚证大鼠及冷应激大鼠回肠始段P物质（SP）、血管活性肠肽（VIP）进行测定，并与对照组进行比较。结果 发现脾虚组SP含量显著升高（P＜0．005），VIP含量显著降低（P＜0．005）；应激组回肠段SP含量无明显改变（P＞0．10），VIP含量明显降低（P＜0．05）。结论 脾虚大鼠与冷应激大鼠回肠始段SP、VIP含量有改变，并可能与脾虚或应激引起的胃肠功能紊乱有关。结合其它研究可能设想：胃肠激素含量的变化是脾虚大鼠或冷应激大鼠引起胃肠功能调节的共同中间机理之间。     

实验性脾虚证平滑肌细胞VIP受体信号传导障碍

【目的】以血管活性肠肽(VIP)受体为研究对象，在胃肠肽平滑肌细胞受体(信号接收系统)水平测定实验性脾气虚证大鼠胃肠动力紊乱的信号传导障碍以及香砂六君子汤治疗机制。【方法】逆转录聚和酶链反应(RT—PCR)法测定胃、空肠和降结肠的VIP两种受体VIPRl和VIPR2mRNA的分布及半定量分析。【结果】在胃窦部，仅有VIPR2表达。与对照组相比，脾气虚组VIPR2mRNA含量降低；治疗组VIPR2含量明显升高。在空肠和降结肠，各组VIPRl和VIPR2均有表达，各组VIPRlmRNA含量均明显高于VIPR2。脾气虚组VIPRl、VIPR2mRNA含量低于对照组；治疗组VIPRl、VIPR2mRNA含量明显高于自然恢复组。【结论】VIP受体在胃肠道不同部位的分布差异可能与脾气虚所致胃与肠道肠动力紊乱表现的截然不同有一定关系，香砂六君子汤在大鼠实验性脾气虚胃肠肽受体水平的异常有调理作用。     

奥瑞凝胶对反流性食管炎模型大鼠NOS及VIP表达的影响

目的 探讨奥瑞凝胶治疗反流性食管炎的作用机制。方法 采用半幽门结扎加贲门肌切开术复制反流性食管炎大鼠模型。大鼠随机分为假手术组,赋形剂组,奥瑞凝胶高、中、低剂量组,雷尼替丁组,模型复制术后7 d开始给药,连续给药14 d后,观察各组大鼠食管黏膜一氧化氮合酶(NOS)及血管活性肠肽(VIP)的表达。结果 奥瑞凝胶各剂量组与赋形剂组比较,大鼠食管黏膜NOS和VIP表达明显下调(P ＜ 0.01)。结论 奥瑞凝胶通过影响食管黏膜组织NOS和VIP的分泌以提高下食管括约肌的压力,减少一过性下食管括约肌松弛,从而达到治疗反流性食管炎的目的。     

脾虚泄泻患者肠粘膜中SP和VIP初步探讨

本研究用放射免疫技术对30例脾虚泄泻患者回肠末端、横结肠和乙状结肠粘膜中 P 物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)进行测定,发现脾虚泄泻组回肠末端 SP 含量(120.95±90.70pg/mg 湿重)较无腹泻组(47.86±35.49pg/mg 湿重)和非脾虚泄泻组(52.50±42.49pg/mg 湿重)显著增加;脾虚泄泻组乙状结肠粘膜 VIP 含量(510.63±265.22pg/mg 湿重)较无腹泻组(308.67±204.49pg/mg 湿重)也显著增加;与非脾虚泄泻组比较(398.97±240.80pg/mg 湿重)有增加趋势,但无统计学差异,提示 SP 和 VIP 可能与脾虚泄泻的腹泻症状有关。根据脾虚临床表现和 VIP 的功能,脾虚泄泻中 VIP 可能起更重要作用。     

实验性脾虚证大鼠回肠电—机械活动变化与P物质及血管活性肠肽的关系研究

本研究用双银球电极-应变片记录了实验性脾虚证大鼠回肠始段的电-机械活动,并采用放射免疫分析（RIA）方法对实验性脾虚证大鼠回肠始段P物质（SP）,血管活性肠肽（VIP）进行测定,发现脾虚组慢波和运动平均频率增高,快波明显增多,SP含量显著升高,VIP含量显著降低;自然恢复组慢波,快波及运动频率和振幅与脾虚组比较无显著差异,SP含量明显恢复但与对照组比较仍有显著差异,VIP含量无明显改变;加味四君子汤治疗组与脾虚组比较,运动振幅显著下降,快波显著减少,SP含量降低至正常（与对照组比较）。结果提示：脾虚证大鼠回肠始段SP、VIP含量改变可能与脾虚证大鼠回肠电-机械活动紊乱有关,加味四君子汤对脾虚证大鼠回肠始段电-机械活动及胃肠肽的分泌异常有一定的调理作用。     

脾虚对大鼠脑NO、NOS影响的研究

学习记忆应属于中医情志(主要是意、思)的范畴，脾藏意主思，因此，脾与学习记忆生理、病理上必然密切相关。意主要指意识、回忆或未成定见的思维，是精神活动的一种表现形式，脾藏意体现了脾主运化水谷，化生营气，以营养意的生理；思主要表现为思考、思虑，是对外界事物的内在心理转变，脾主     

眼针对IBS模型大鼠结肠组织VIP含量及基因表达的影响

目的:观测眼针对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠血清、结肠组织血管活性肠肽(VIP)含量及基因表达的影响,探讨眼针治疗D-IBS的作用机制。方法:采用慢性应激与束缚相结合的方法复制D-IBS模型后进行眼针治疗,然后采用ELISA方法检测血清和结肠组织中VIP含量的变化;采用RT-PCR和免疫组化检测VIP的基因表达水平变化。结果:与对照组比较,模型组血清、结肠组织中VIP含量及基因表达明显增高和上调;与模型组比较,眼针组血清、结肠组织中VIP含量及基因表达明显下降和下调。结论:眼针治疗D-IBS的机制之一可能与抑制结肠组织VIP的释放、下调VIP基因表达有关。     

脾不统血证相关疾病与血液神经递质变化关系研究

目的:比较血液神经递质在脾不统血证的不同疾病中表达差异,探讨脾主统血理论的物质基础。方法:抽取符合纳入标准的ITP、功能失调性子宫出血、消化道肿瘤患者,并选择健康人为对照,分别空腹抽取静脉血,ELISA法检测血液神经递质表达水平。结果:4组组间比较5-HT、VIP、β-EP均具有统计学意义(P0.05);与正常人比较,功能失调性子宫出血、消化道肿瘤及ITP患者5-HT、VIP、β-EP检测值均较下调;但ITP患者5-HT检测值较其他三组显著上调,而VIP检测值较正常人明显下调。组间两两比较,消化道肿瘤患者与正常人比较,5-HT、VIP、β-EP检测值下调明显(P0.05);功能失调性子宫出血患者与消化道肿瘤患者比较,VIP、β-EP检测值下调明显(P0.05)。ITP患者与正常人、功能失调性子宫出血患者及消化道肿瘤患者比较,5-HT、VIP检测值均下调明显(P0.05)。β-EP检测值比较中,ITP患者较功能失调性子宫出血患者有所下调(P0.05)。结论:5-HT、VIP、β-EP含量与"脾主统血"理论存在一定关联,但不同疾病间5-HT、VIP、β-EP含量改变存在差异。     

羟乙葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

 目的研究异黄酮类化合物羟乙葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶 (NOS)活性的影响,为羟乙葛根素用于治疗缺血性脑血管病提供实验资料。方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组; 缺血再灌注组;尼莫地平0.4 mg·kg^-1·d^-1组;羟乙葛根素30,60,120mg·kg^-1·d^-1组。以大脑中动脉栓线阻断法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,以硝酸还原酶法测定脑组织中的NO水平,以化学比色法测定总NOS活性,并测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力,观察羟乙葛根素对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO水平和NOS活性的影响,并探讨可能的作用机制。结果大鼠脑缺血1 h,再灌注48h后,脑组织中NO水平显著升高,总NOS和iNOS活性显著增加。羟乙葛根素30,60, 120 mg·kg^-1·d^-1均可显著降低缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO含量和总NOS,iNOS活力。结论羟乙葛根素可能通过降低 NO对脑缺血再灌注损伤后的神经毒性作用而发挥保护缺血性脑损伤的作用。     

肝郁脾虚证大鼠海马Notch 信号通路改变及逍遥散的调节作用

目的：观察肝郁脾虚证模型大鼠海马Notch信号通路各相关分子表达的变化并探讨逍遥散的调节作用。方法：雄性SD大鼠随机分成4组,分别是正常组、模型组、模型+逍遥散组、模型+氟西汀组,每组12只。采用慢性束缚应激的方法制备大鼠肝郁脾虚证模型,造模持续21天。通过尼氏染色、蛋白免疫印迹及实时荧光定量PCR方法检测各组大鼠海马尼氏小体数量、Notch信号通路中NICD、Hes1、Hes5及Jad1的表达情况。结果：与正常组相比,模型组尼氏小体数明显减少（P ＜ 0.01）,逍遥散和氟西汀有逆转作用（P ＜ 0.01）;与正常组相比,模型组Notch信号通路相关蛋白表达均显著降低（P ＜ 0.01）,逍遥散和氟西汀能逆转NICD、Hes5、Jag1蛋白表达量（P ＜ 0.05或P ＜ 0.01）;与正常组相比,模型组各基因mRNA表达量均降低（P ＜ 0.01）,逍遥散和氟西汀能逆转NICD、Hes1、Hes5 mRNA表达（P ＜ 0.05,P ＜ 0.01）。结论：肝郁脾虚证模型大鼠海马神经元损伤尼氏小体减少,Notch信号通路各分子蛋白及基因表达均降低,逍遥散可能通过调节海马相关分子的表达水平进而保护神经元,起到治疗作用。     

健脾益气中药对脾气虚证2型糖尿病大鼠胰岛素介体的影响

目的观察健脾益气中药对脾气虚证2型糖尿病大鼠肝细胞膜胰岛素介体的影响.方法采用中剂量链脲佐菌素(30mg/kg,qd×3)腹腔内注射与过度劳倦、饥饱失常及肥甘饮食的方法造成2型糖尿病病证结合(脾气虚证)大鼠模型,设中药治疗组、模型组及正常对照组,治疗前及治疗3周后检测空腹血糖、血浆胰岛素,并于治疗结束后检测肝细胞膜胰岛素介体释放量.结果中药治疗组与模型组比较,肝细胞膜介体释放量显著增加(P<0.05),中药治疗前后比较,空腹血糖明显下降(P<0.05),胰岛素敏感性显著上升(P<0.05).结论健脾益气中药能增加肝细胞膜释放的抑制腺苷酸环化酶活力的胰岛素介体量,改善高胰岛素血症,提高胰岛素敏感性.     

"脾虚"大鼠胃黏膜组织一氧化氮含量及补中益气汤的作用

目的：研究“脾虚”大鼠胃黏膜组织一氧化氮（NO）含量的变化及补中益气汤的作用。方法：采用Griess试剂法和紫外分光光度法检测胃黏膜组织的一氧化氮代谢产物（NO2^-和NO3^-）和过氧化亚硝酸（ONOO^-）。结果：大黄“脾虚”大鼠胃黏膜组织中NO3^-、iNOS及ONOO^-水平均低于正常大鼠，经补中益气汤治疗后能恢复到接近正常水平。结论：“脾虚”大鼠胃黏膜组织一氧化氮（NO）含量低于正常，补中益气汤能升高“脾虚”大鼠胃黏膜组织中NO的含量。     

化痰降气胶囊对哮喘模型豚鼠一氧化氮及一氧化氮合成酶的影响

目的观察化痰降气胶囊对哮喘豚鼠肺组织一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶(NOS)的影响,探讨其治疗哮喘的机理。方法健康杂色豚鼠40只,随机分为4组,即正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、化痰降气胶囊组(C组)、桂龙咳喘宁组(D组)。用卵蛋白成功诱发豚鼠哮喘后,给予化痰降气及桂龙咳喘宁胶囊进行治疗,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)与血清中NO、血清与肺组织匀浆中NOS的变化。结果与正常对照组相比,模型组BALF中NO水平无明显变化,模型组血清中NO、NOS及肺组织匀浆中NOS均显著提高,用药组NO、NOS均较模型组降低,用药组间无显著差异。结论化痰降气胶囊可下调血清、肺组织匀浆中NOS与血清中NO水平,从而降低哮喘气道炎症及高反应性,达到治疗哮喘的目的。     

糖脂平颗粒对糖尿病肾病大鼠肾组织NO,NOS的影响

目的:通过观察糖脂平颗粒对糖尿病肾病大鼠肾组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平的影响。探讨糖脂平颗粒对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法:Wistar大鼠60只,雌雄各半,采用高脂饲料加小剂量(40 mg·kg-1)ip链脲佐菌素(STZ)造模,按体重编号,以随机数字表法分为4组:模型组、糖脉康颗粒组、糖脂平颗粒高、低剂量组,分别给与生理盐水、糖脉康颗粒、糖脂平颗粒进行干预,测定干预后各组大鼠肾组织匀浆NO和NOS,制备肾组织切片,观察肾组织形态学改变。结果:治疗后各治疗组NO为(37.24±4.16)～(44.74±6.08)μmol.g-1与模型组(30.47±8.33)μmol.g-1比较升高,NOS各治疗组为(0.44±0.13)～(0.61±0.17)U.mg-1与模型组(0.27±0.14)U.mg-1比较亦升高,均有显著性差异(P<0.05),糖脂平颗粒小剂量组与糖脉康颗粒组比较,指标均没有显著性差异;而糖脂平颗粒大剂量组与糖脉康颗粒组比较,NO及NOS均有显著性差异糖脂平颗粒高剂量组治疗效果优于低剂量组和糖脉康颗粒组。肾组织切片显示:糖脂平颗粒2个高、低剂量组和糖脉康颗粒组肾脏组织均有不同程度的修复,糖脂平颗粒高剂量组优于其他各给药组。结论:糖脂平颗粒可升高糖尿病肾病大鼠肾组织匀浆一氧化氮及NOS,同时促进肾脏受损组织的修复,对糖尿病肾脏具有保护作用     

芎芷石膏汤对硝酸甘油致偏头痛大鼠血浆NO, NOS, CGRP及脑中5-HT, 5-HIAA含量的影响

目的:研究芎芷石膏汤的镇痛作用及对硝酸甘油致偏头痛大鼠血浆一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)和降钙素基因相关肽(CGRP)及脑组织中5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响。方法:将小鼠和大鼠分为空白、模型、实验药物3个剂量和阳性对照组(阿司匹林0.2 g·kg-1),以芎芷石膏汤低、中、高剂量(小鼠:6,12,24 g·kg-1·d-1;大鼠:3,6,12 g·kg-1·d-1)灌胃给药干预7 d。福尔马林实验末次给药后30 min后小鼠右后足跖皮下注射浓度为2.5%的福尔马林20μL(正常对照组除外)记录小鼠给福尔马林后第Ⅰ时相(0~5 min)和第Ⅱ时相(10~60 min)内小鼠舔右后足的累计时间。热板法于末次给药后15,30,60,90,120 min,在热盘痛觉测试仪(55±0.5)℃上记录每只小鼠首次舔后足或跳跃时间(s)。硝酸甘油所致大鼠偏头痛实验,末次给药后30 min,除空白对照组大鼠以相应剂量95%乙醇sc外,其余各受试组均sc硝酸甘油注射剂10 mg·kg-1,复制偏头痛模型。分光光度法和放免法测大鼠血浆NO,NOS和CGRP含量,高效液相-电化学法测脑组织中5-HT,5-HIAA含量。结果:与正常组比较,福尔马林实验模型组小鼠右后足跖皮下注射福尔马林后,第Ⅰ时相舔足时间,第Ⅱ时相舔足时间均明显增多。在注射硝酸甘油造模后,与空白对照组相比,模型组30 min内大鼠前肢挠头次数较空白对照组均明显增加(P<0.01),大鼠血浆中的NO,NOS,CGRP明显升高(P<0.01),5-HT明显下降(P<0.05)。芎芷石膏汤能有效抑制福尔马林致小鼠疼痛反应,明显减少小鼠I时相舔足时间和Ⅱ时相舔足时间,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),并对热板致痛小鼠的物理疼痛镇痛效果明显,能显著提高小鼠的痛阈值,与空白对照组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。硝酸甘油致偏头痛模型组大鼠血浆NO,NOS,CGRP与空白对照组相比均明显增高(P<0.05),而脑中5-HT,5-HIAA含量与空白对照组相比明显下降(P<0.05)。与模型组相比,经不同剂量芎芷石膏汤灌胃后大鼠血浆NO,NOS,CGRP增加受到抑制,同时脑中5-HT向5-HIAA的代谢减少,5-HT的量增加,尤以中、高剂量组明显(P<0.05,P<0.01)。结论:芎芷石膏汤具有明显镇痛作用,可能通过降低血浆中NO,NOS,CGRP含量和升高脑中5-HT含量,发挥对偏头痛的治疗作用。     

补气活血泄浊法治疗马兜铃酸肾病68例临床观察

目的:观察补气活血泄浊法治疗马兜铃酸肾病的临床疗效.方法:选取冠心苏合丸致慢性肾小管间质性肾病68例,西医予基础对症治疗,中医分为脾肾气虚、肾阳虚衰、气阴两虚三型辨证治疗,观察患者临床症状改善及临床疗效,包括血肾功能、尿肾功能、24 h尿蛋白定量.结果:患者临床症状明显改善,总有效率达89.70％.治疗后血肌酐(Ser)、尿素氮(BUN)、尿N-乙酰葡萄胺酶(NAG)、β2微球蛋白(β2-MG)、24 h尿蛋白定量(Tupr)均有不同程度下降(P＜0.05);肌酐清除率(Ccr)有所升高,肾功能较治疗前有一定程度好转(P＜0.05).脾肾气虚型有效率为93.55％,气阴两虚型为90％,肾阳虚衰型为82.35％.结论:补气活血泄浊法治疗马兜铃酸肾病疗效显著.