酶标比色法同步微量测定高密度脂蛋白胆固醇与总胆固醇

<正> 我们用高密度脂蛋白胆固醇试剂盒(酶法),同步测定高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇结果满意。报告如下: 材料和方法 一、材料 1.仪器:南京DG—3022A型酶标光度计。 2.酶标反应板。 二、试剂 1.东南生化制药厂一血清高密度脂蛋白胆固醇(酶法)测定试剂盒。 三、标本 本院门诊及住院病人血清。 四、方法 取微量离心管标明标准、测定(高)、测定(总),分别加标准液50μl于标准管,加血清50μl于     

国产甘油三酯液体试剂在全自动生化分析仪上的使用

<正> 在全自动生化分析仪上血清甘油三酯(简称TG)常采用甘油磷酸氧化酶法。该法使用进口干粉试剂,需复溶方可使用,因此试剂质量受到蒸馏水的质量和实验室条件限制,故浪费较大。且进口试剂较昂贵。我们采用国产的TG液体试剂来测定血清TG,获得了较为理想的结果。 1.材料与方法 仪器:VITALAB Selectra、全自动生化分析仪。 试剂:(1)TG液体试剂,东瓯公司产品;(2)TG干粉试剂(酶法),长征公司产品。 测定方法,自动分析参数:波长505nm,反应温度37℃,标准2.0mmol/L,试剂空白是,样品空白否,标本3l;试剂300l;稀释重做标本2l;试剂30l,测定方法终点法。     

血清铁蛋白基质液变色后对铁蛋白检测结果的影响及措施

目的:研究基质液变色后对铁蛋白检测造成的影响及应采取的措施。方法:同一批号均未过期的铁蛋白试剂(其中试剂一基质液变为淡红色,试剂二基质液为原来的浅黄色),在同一实验条件下用磁性分离酶联免疫测定法检测血清铁蛋白,对所得的结果进行对比分析。结果:试剂一因基质液变色,测定时如按说明书中的空白管(90μl基质液+300μl终止液)调零,标准液吸光度太小,工作自动停止,结果测不出来;如用蒸馏水调零,所得结果与用试剂二检测所得的结果比较接近,相关性好。结论:如遇基质液变色时,不能再用空白管(90μl基质液+300μl终止液)调零,而应该用蒸馏水调零。     

介绍一种葡萄糖氧化酶尿糖定量测定法

我们将北京化工厂临床试剂分厂生产的血浆葡萄糖氧化酶试剂盒测定方法略加改进,应用于尿糖定量测定,结果较理想,现报道如下。测定将尿标本按班氏法尿糖定性不足(?)不稀释,(?)～(?)10倍稀释,(?)20倍稀释。分别取20μl 葡萄糖标准液(5.56mmol/L)和20μl 尿液于2支试管中,加酚试剂和     

肝脏疾病患者血清和胸腹水TBA相关性研究

血清总胆汁酸 ( total bile acid,TBA)测定作为反映肝脏损伤 ,特别是肝硬化疾病的灵敏生化指标已被广泛应用于辅助临床诊治工作。重度肝硬化患者中多数伴随有腹水 ,为了探讨腹水中是否可测到 TBA及其变化对辅助疾病诊疗的临床意义 ,我们比较研究了患者血清和腹水中 TBA的相关性变化。1　材料和方法1.1　试剂 :TBA测定试剂采用 RANDOX公司生产的试剂盒。仪器 :日立 7150全自动生化分析仪。1.2　分析参数 :样品 2 0 μl,试剂 R12 2 0 μl,R2 55μl,测定温度 37℃ ,测定波长 546nm,结果计算 :样品浓度 =(测定管吸光度 /标准管吸光度 )…     

加样间隔时间对ELISA竞争抑制法检测结果的影响

目的:探讨“加样间隔时间”对酶联免疫吸附试验(ELISA)竞争抑制法检测人血清HBeAb、HBcAb结果的影响。方法:随机检测91份HBeAb、HBcAb阴性的血清样本,加样后室温25℃分别放置0min、5min、10min、15min、20min、30min[1]再加入酶标抗体(HBeAb组先加中和试剂),其后严格按试剂盒说明操作。结果:0min、5min、10min、15min、20min、30min时,HBeAb组阳性率为0、3.3%、10.9%、16.5%、24.2%、37.3%;HBcAb组阳性率分别为0、4.3%、12%、18.6%、26.3%、40.6%;与加入酶结合物0min组标本A值比较,HBeAb、HBcAb均5min、10min组P>0.05,其余各组P<0.01。结论:随着加入样本与酶标抗体间隔时间的延长,HBeAb、HBcAb测定的假阳性率逐渐增加,应在加样后10min内加入酶标抗体,避免标本先与固相抗原结合引起的假阳性。     

微孔板自动化筛查Rh(D)阴性血的结果分析

传统的Rh血型筛查,采用手工操作,比较繁锁,肉眼判断结果,不易于标准化管理。采用微孔板自动化筛查,经酶标仪扫描自动判定结果,易于管理。1材料与方法1.1标本来源经EDTA-K2抗凝的本站无偿献血者的全血标本。1.2设备与软件AT全自动加样系统(瑞典)、Z-380平板离心机、Anthos编程孵育振荡器、AnthosHT3酶标仪(奥地利)、96孔U-微孔板(国产)。1.3试剂抗D(单克隆IgM)血型试剂(加拿大)。1.4操作步骤使用AT全自动加样系统在微孔板中加入15μl预稀释的血球(1∶10),再加入抗D(1∶2)45μl。将微孔板在震荡器上300r/min离心2min,振幅2;再于平板离…     

1220名献血员乙肝病毒血清学标志的酶联法检测

<正> 材料与方法 待检血清样品为我院常规献血员,梅毒螺旋体试验均为阴性,肝动能正常。①表面抗原的测定方法,采用的酶联试剂EIA诊断试剂盒为厦门新创科技有限公司配制。该试剂盒为干包被微孔条,献血员血清不同稀释直接加样,每孔加样100μl每孔加酶联试剂1滴(50μl)置45℃40min,取出后甩去孔内液体,用PBST洗涤液充分洗涤,每次洗后均需拭干,共洗5次,然后每孔加Color A、Color B液各1滴,避光置室温15～20min,凡待测样品中有明显蓝色者为酶际反应阳性。②核心抗体(抗—HBC)的测定方法,抗—HBC     

血清甘油三酯乙酰丙酮荧光比色法的探讨

<正> 作者根据国外有关资料的介绍,尝试用乙酰丙酮荧光比色法(简称荧光法)测定血清甘油三酯(TG),获得成功。介绍如下。一、测定方法原理:本法原理同目前国内常用的乙酰丙酮比色法(简称比色法)类似,利用Hantz-sch反应产生二甲基吡啶衍生物,这是一种荧光物质,其荧光强度同TG含量呈正比。用测定管和标准管比较,即可得出待测标本中TG的含量。试剂:本法所用的试剂与比色法相同,但在配制皂化剂时可增加适量异丙醇(按比例),目的是将以前单独加异丙醇合并到加皂化剂步骤内,以节省时间。     

肝细胞型肝癌组织中谷胱甘肽含量初探

本文报道10例肝细胞型肝癌患者手术切除标本中癌、癌周和远处肝组织的谷胱甘肽含量测定结果。 材料和方法 肝癌患者10例(男9例,女1例),中位年龄54岁(42～60岁)。于手术时分别切取肝癌、癌周和远处肝组织各一块。剪碎后分别用冰生理盐水洗涤5次,除去血液和血块后用滤纸吸干。减量法称取湿重约200mg组织,加冰生理盐水2ml制备匀浆。2000g离心10min后吸取上清液10μl,加入无水乙醇50μl沉淀组织蛋白质。再次以2000g离心5min后吸取上清液20μl,经邻苯二甲醛柱     

钙试剂致血清磷测定结果假性升高的原因分析及处理方法

目的探讨血清钙试剂引起血清磷测定结果升高的原因及处理方法。方法随机选取20例健康体检者新鲜血清标本,先单独测定血清磷(P0组),再做钙、磷同测(P1组),接着分别做试剂针的加水清洗200μL(P2组)、加wash1 200μL/加水清洗200μL(P3组)、加wash2 200μL/加水清洗200μL(P4组),在以上3种情况下钙、磷同测,共得到5组血清磷的测定数据。将后4组数据分别与P0组用配对t检验的方法进行统计学分析;调整项目测试顺序并加清洗(Probe,From Test,To Test P)后,随机选择当天含钙、磷两个检测项目的病人标本20份记录血清磷测定结果,然后对这20份标本做血清磷的单独测定,再将两组数据用配对t检验的方法进行统计学分析。结果 P0组与P1组,P0组与P2组,P0组与P3组,P0组与P4组进行比较差异均存在显著性意义(P<0.01);调整项目测试顺序后差异无显著性意义,P>0.05。结论残留的血清钙试剂可对磷的测定造成非常严重的正干扰,通过加设特殊清洗的方法只能降低干扰程度,只有调整项目测试顺序才能彻底消除钙试剂可对磷的测定干扰。     

伤寒与副伤寒的实验室快速诊断法

目的:改进伤寒、副伤寒的实验方法,缩短实验时间,提前发出实验报告,尽早对伤寒、副伤寒的鉴别诊断提供实验依据。方法:分别在每10ml各种诊断菌液内各加入20.0g/L美兰溶液5μl,按Widal方法稀释血清和滴加菌液,充分摇匀,37℃水浴10min,放微型振荡器震荡5min,从稀释倍数低至高的试验管开始用500r/min以下的速度离心5min,按传统的肥达氏实验操作方法观察和报告结果。结果:在93例实验对照的994管凝集管中,快速法有503管凝集,原法有491管凝集,两法比较:差异无显著性(P>0.05);共有157管存在凝集程度的差异,其中快速法粗于原法的有115管(73.25%),原法粗于快速法的有42管(26.75%),快速法较原法敏感。两法比较:差异有非常显著性(P<0.01)。结论:改进后的伤寒、副伤寒实验方法,具有凝集结果明显,方法敏感度较高,实验时间短等特点。     

脂血对血液分析仪测定血常规指标的影响

目的:分析脂血对血液分析仪测定血常规指标的影响。方法:将体检中心收集的40例健康体检者的无溶血、黄疸、脂血标本均分为4管,作为A、B、C、D四组,A组不作任何处理,作为对照,B、C、D三组分别以1 000 r/min速率离心10 min,B组吸出上层血浆5μl,并加入同等剂量的脂肪乳剂,C组吸出上层血浆10μl,并加入10μl脂肪乳剂,D组吸出上层血浆50μl,加50μl脂肪乳剂。并测定每组三酰甘油水平,按脂血水平分级,并测定每组血常规指标,对A组进行对照。结果:轻度脂血组血常规指标有一定程度的上升,但与加脂前对比差异无统计学意义(P>0.05);而中度脂血组MCH与MCHC分别为(30.64±1.72)pg、(340.06±10.00)g/L,显著高于对照B组,组间对比差异有统计学意义(P<0.05),且重度脂血组Hb、MCH与MCHC分别为(137.03±20.01)g/L、(33.46±2.62)pg、(383.03±7.00)g/L,与加脂前对比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:为避免脂血对血液分析仪检测患者血常规指标的影响,若放置后血浆标本有乳白色浑浊表现,或血涂片中提示沉溺在不着色脂肪球,必须确认其是否为脂血标本。并离心后去上层血浆,加入稀释液,混合均匀后作血常规测定,以降低脂血对标本测定结果的影响。     

血清ALT活力过高时的测定

我们从 1999年至今 ,曾利用 70 0D型BECKMAN自动生化分析仪测定血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)活力过高 5例 ,现将方法介绍如下 :材料 :70 0D型BECKMAN自动生化分析仪 (美国产 ) ;试剂 :上海长征医学科学有限公司生产的ALT试剂 ;标本 :住院患者 4例 ,门诊病人 1例 ,均晨空腹采血 ,分离血清作ALT测定。方法 :按ALT试剂说明书在自动生化分析仪上自编程序 ,采用速率法 ,温度 37℃ ,波长 34 0nm ,反应时间 6 0s ,试剂量 6 0 0 μl,标本量 6 0 μl。将住院患者血清吸入样品瓶内放于样品盘 1号位置 ,样品盘 2～ 32号位置均不放置血清 ;将…     

微量元素与心钠素关系的研究

本文着重研究微量元素对体内血浆心钠素(ANP)分泌、代谢的影响,以及两者之间的某些内在联系。材料与方法:1.将30只大鼠分三组、饲养于木笼中,以普通饲料饲养10天后,Cu组每隔日加喂硫酸铜0.2mg,Zn组每隔日加喂硫酸锌0.6mg。30天后,用麻醉方法,颈动脉取血。测定血清四种微量元素和血浆ANP的含量。2.用放兔法测定ANP含量,取100μl血浆、100μl抗ANP血清和100μl~(125)I标记ANP,混匀后,于4℃温育17h,用3％DCC分离。计算B/B_0(％),依标准曲线查出待检样品的     

用反向间接血凝(R-PHA)法测定HBsAg时应注意非特异性凝集

我们用R-PHA法(兰州生物制品厂提供HBsAg诊断血球)对血员进行HBsAg的检查,共检出108名HBsAg阳性(1:8以上)者。同时将此108份阳性标本又做了中和试验(兰州生物制品厂提洪HBs-Ag抗血清)方法如下: 将V型板第1排每孔加稀释液一滴(25μl),第2排每孔加中和试剂一滴(25μl)。再用稀释棒取待检血清25μl,将两排倍比稀释至8孔以上。每孔加一滴(25μl)血球悬液,振荡一分钟,置37℃水浴箱60分钟观察结果。测定排凝集孔比中和孔高出2孔以上者,据据测定排的孔数报告阳性滴度。测定排和中和孔平行者为非特异性凝集(假阳性)。     

一种新的分离方法在放免测定中的应用

分配亲和配基分析法(PALA)是一种类似于两相体系提取的分离方法。我们采用这种分离方法测定血清 T_3浓度。在放免反应体系中,当抗原和抗体的结合反应达到平衡时,因结合抗原和游离抗原的物理性质不同,而分配在不同溶液中。这种分离方法不需经离心或洗涤,操作简便,有推广应用价值。材料和方法:1.标准管加入50μl 不同浓度的 T_3标准液(内含 T_3浓度为25、50、100、200、400、800ng/μl),用去激素血清配制。样品管加入50μl 待测血清。     

顶空气相色谱法测定非索非那定中有机溶剂残留量

目的建立了顶空气相色谱法测定非索非那定中甲醇、甲苯、正己烷、四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯、二硫化碳、乙醚和乙醇9种有机溶剂的残留量。方法采用HP-FFAP毛细管柱(50m×0.32mm×0.52μm),FID检测器,外标法进行定量。进样口180℃,检测器250℃,柱温45℃保持9min,以10℃/min程序升温至100℃,保持2min,分流比10:1。载气氮气流速:10ml/min;空气350ml/min;柱头压:氢气45ml/min。顶空瓶区域温度:90℃;样品进样阀:100℃,传输管温度:100℃;样品瓶加热平衡时间:10min;进样量:100μl。对分离条件、顶空平衡温度、平衡时间对残留有机溶剂测定的影响进行了研究。结果甲醇、甲苯、正己烷、四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯、二硫化碳、乙醚和乙醇的线性范围分别为1.58～31.60μg(r=0.9997)、1.73～34.60μg(r=0.9993)、6.65～13.30μg(r=0.9964)、1.32～26.40μg(r=0.9998)、2.52～50.40μg(r=0.9971)、2.52～50.40μg(r=0.9986)、2.66～53.20μg(r...     

应用国产酶试剂测定血清胆固醇的方法

本文介绍应用国产酶试剂快速测定血清总胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的方法。50μl血清(测定总胆固醇)或50μl用磷钨酸钠-Mg~(2+)沉淀低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)之后的上清液(测定HDL-C)分别与3ml酶试剂混和,于37℃保温15分钟后,所产生的颜色于500nm波长比色测定。本文对各种实验条件进行研究。初步结果表明,本法快速、简便、灵敏、精确,与Abell-Zlatkis法比较数值十分接近。本法不仅适于临床常规,而且也适于流行病学研究。     

对聚凝胺配血技术的改进实现“1+1”交叉配血

同时进行盐水交叉配血和聚凝胺交叉配血,称为“1 1”交叉配血。过去传统方法是盐水交叉配血,它只能检测完全抗体,近年来聚凝胺配血技术得到广泛应用,该方法敏感性高,操作简便、快速[1,2],对不完全抗体和不规则抗体检测十分有效,为了临床输血更安全,要求配血时两种方法同时进行,取长补短,发挥高效,我科血库通过几年的实践应用,对聚凝胺配血方法的第一步和第二步之间加一步“离心”,在同一方法同一试管中,实现两项配血技术,即“1 1”交叉配血。现报告如下。1材料与方法1.1材料患者来源:为我科每日须进行常规输血治疗的患者;聚凝胺试剂:BaSO企业有限公司,批号:060308;生理盐水:本室自备。1.2方法取两支试管标记,主侧,受血者血清两滴(100μl),供血者3%~5%红细胞悬液一滴(50μl)。次侧,供血者血清两滴(100μl),受血者3%~5%红细胞悬液一滴(50μl);1000rpm离心1min,轻摇试管,观察是否有凝集;如无凝集,各加0.7mL低离子介质液和两滴(100μl)聚凝胺溶液混匀;3400rpm离心10s,倾倒上清液,留少许(约100μl);轻摇试管,观察有无凝集,如无凝集,实验失败,查找原因;如凝集,...