精制清开灵及其组分对中风后大鼠内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的：清开灵是一种治疗脑中风的传统中药复方。精制清开灵是从清开灵衍生出的有效成分复方,既往研究证明,此药具有减轻大脑中动脉栓塞（MCAO）大鼠血管内皮细胞损伤和抑制炎症过程的作用,从而体现出神经保护的效果。而内皮型一氧化氮合酶（eNOS）来源的一氧化氮在脑缺血发作后的病理过程中起到重要的保护作用,是近年药理学研究的热点之一。本实验研究了大鼠持久性局灶性脑缺血72h后精制清开灵及其各组分对抗脑缺血损伤的作用以及它们对eNOS表达的影响。方法：以线栓法复制SD大鼠持久性大脑中动脉栓塞（PMCAO）模型。缺血72h后,取出脑组织做冠状切片,1TrC染色计量梗死程度,并以酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆内皮细胞凝血因子Ⅷ相关抗原（血管性假血友病因子,vWF）含量。以免疫组织化学染色方法观察大鼠脑组织eNOS的表达情况。并根据免疫组织化学分析的结果,取缺血侧脑组织以免疫印记法验证精制清开灵及其各组分对eNOS表达水平的影响。结果：PMCAO72h,模型组大鼠eNOS蛋白在缺血半暗带的血管内皮细胞表达增加。与模型组动物相比,精制清开灵及其各组分治疗组动物eNOS蛋白的表达明显增加,而脑梗死范围则显著缩小。结论：持久性局灶性脑缺血后,在缺血半暗带血管内皮细胞表达增加的eNOS可能具有重要的代偿作用。精制清开灵及其各组分能够不同程度地促进缺血后半暗带eNOS的表达,这可能是它们阻抑脑缺血损伤的重要机制之一。     

精制清开灵及其组分对中风后大鼠内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的：清开灵是一种治疗脑中风的传统中药复方。精制清开灵是从清开灵衍生出的有效成分复方,既往研究证明,此药具有减轻大脑中动脉栓塞（MCAO）大鼠血管内皮细胞损伤和抑制炎症过程的作用,从而体现出神经保护的效果。而内皮型一氧化氮合酶（eNOS）来源的一氧化氮在脑缺血发作后的病理过程中起到重要的保护作用,是近年药理学研究的热点之一。本实验研究了大鼠持久性局灶性脑缺血72h后精制清开灵及其各组分对抗脑缺血损伤的作用以及它们对eNOS表达的影响。方法：以线栓法复制SD大鼠持久性大脑中动脉栓塞（PMCAO）模型。缺血72h后,取出脑组织做冠状切片,TTC染色计量梗死程度,并以酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆内皮细胞凝血因子Ⅷ相关抗原（血管性假血友病因子,vWF）含量。以免疫组织化学染色方法观察大鼠脑组织eNOS的表达情况。并根据免疫组织化学分析的结果,取缺血侧脑组织以免疫印记法验证精制清开灵及其各组分对eNOS表达水平的影响。结果：PMCAO 72h,模型组大鼠eNOS蛋白在缺血半暗带的血管内皮细胞表达增加。与模型组动物相比,精制清开灵及其各组分治疗组动物eNOS蛋白的表达明显增加,而脑梗死范围则显著缩小。结论：持久性局灶性脑缺血后,在缺血半暗带血管内皮细胞表达增加的eNOS可能具有重要的代偿作用。精制清开灵及其各组分能够不同程度地促进缺血后半暗带eNOS的表达,这可能是它们阻抑脑缺血损伤的重要机制之一。     

川芎油对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的：观察川芎油口服给药对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法：线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤（MCAO）模型，脑缺血2小时、再灌注后22小时检测大鼠神经功能评分和脑梗死灶体积，测定各组大鼠脑组织匀浆中一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。结果：川芎油能明显改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能，减小脑梗死灶体积，降低脑组织匀浆中NO、MDA含量。结论：川芎油对大鼠脑缺血再灌注损伤有显著的保护作用，其作用可能与抗氧化有关。     

脑脉舒宁对小鼠急性脑缺血保护作用的实验研究

目的：观察脑脉舒宁（NMS）对小鼠脑缺血损伤的保护作用。方法：采用小鼠双侧颈总动脉和迷走神经结扎法制作脑缺血模型并观察NMS对其的影响。结果；急性脑缺血时脑内丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）明显增加（P＜0．05），超氧化物歧化酶（SOD）减少，而NMS可明显增加SOD，降低MDA，NO（P＜0．05）。结论：NMS对小鼠急性脑缺血具有一定的保护作用。     

土鳖虫提取液对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究土鳖虫对脑缺血缺氧的保护作用。方法：采用结扎双侧颈总动脉和迷走神经的方法后观察小鼠存活时间；采用化学法测量缺血再灌注小鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合成酶（NOS）活性，一氧化氮（NO）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）的含量。结果：土鳖虫水提取液能明显延长小鼠耐缺氧时间；增强脑组织中SOD的活性，降低NOS活性，增加GSH含量和降低NO、MDA的含量。结论：土鳖虫提取液对脑缺血再灌注小鼠具有一定的保护作用。     

乙酰葛根素对大鼠脑缺血再灌注VEGF表达的影响

目的探讨脑缺血再灌注后乙酰葛根素的脑保护作用及其机制。方法 线栓法制作脑缺血再灌注模型,分别对假手术组、脑缺血再灌注组、葛根素组、乙酰葛根素低（10mg·kg-1）、中（50mg·kg-1）、高剂量（250mg·kg-1）干预组实验标本作HE染色,采用免疫组化方法观察测定各组大鼠脑内的VEGF的表达情况并进行神经功能缺损评分。结果 脑缺血再灌注组与假手术组比较,VEGF表达增多（P〈0.01）,药物干预组较缺血再灌注组VEGF表达均增多（P〈0.01）,且神经元损伤较轻,且三个剂量的表达有显著差别（P〈0.01）。结论 乙酰葛根素对脑缺血再灌注有明显的保护作用,诱导VEGF表达可能是其对脑缺血再灌注损伤起保护作用的机制之一。     

牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血后大鼠脑组织一氧化氮合酶的影响

目的：探讨牛珀至宝微丸对大鼠局灶性脑缺血后脑组织一氧化氮合酶（NOS）的作用。方法：采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血模型。应用免疫组织化学技术检测脑组织NOS3种亚型（eNOS,nNOS,iNOS)的表达。观察牛珀至宝微丸对脑缺血后NOS3种亚型表达的影响。并进行神经病学评分。结果：牛珀至宝微丸组的缺血侧大脑皮层nNOS,iNOS表达显著低于缺血对照组（P<0.05,P<0.01),eNOS表达高于缺血对照组（P<0.05)。并可减轻神经损伤症状（P<0.05)。结论：牛珀至宝微丸能下调脑缺血所致nNOS,iNOS的异常表达，上调eNOS表达，这可能是其治疗缺血性脑血管病的机理之一。     

康脑液1号预处理对大鼠脑缺血再灌注病灶和GFAP表达的影响

目的观察康脑液1号预处理对SD大鼠脑缺血再灌注后病灶和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响,探讨其对脑缺血再灌注保护作用的可能机制。方法将180只大鼠随机分为5组（各36只）,假手术组、模型（缺血再灌注）组、盐酸法舒地尔注射液组、康脑液1号A组、康脑液1号B组。采用线栓法复制SD大鼠大脑中动脉梗死模型（MCAO）,分别于缺血2h后再灌注1d、7d、14d。观察康脑液1号预处理对大鼠脑缺血再灌注神经功能、梗死面积和病理形态学的影响。采用免疫组化法检测缺血半暗带和病灶中心区星形胶质细胞GFAP表达的变化。结果模型组与假手术组相比,GFAP表达阳性细胞数增多;康脑液1号预处理可不同程度地降低实验性脑缺血大鼠的神经功能评分、减小梗死面积和减轻病理形态改变（P〈0.05）;康脑液1号各组大鼠脑组织缺血半暗带GFAP表达减少,而梗死灶中心GFAP表达却增多;康脑液1号A组与康脑液1号B组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论康脑液1号预处理可能通过调节脑缺血再灌注后GFAP表达而促进脑损伤修复及重塑,从而发挥脑保护作用。     

针刺对大鼠脑缺血再灌注损伤后ICAM-1表达的影响

目的 观察针刺对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织中细胞间粘附分子-1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）表达的影响，探讨针刺在脑缺血再灌注损伤中的保护作用机制。方法 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，应用免疫组化方法观察假手术组、模型组（再灌注6h、24h、72h）、针刺组（再灌注6h、24h、72h）ICAM-1表达的变化。结果 缺血再灌注后6h，脑组织微血管内皮细胞表达ICAM-1出现增高趋势，并于24h达到高峰，模型组与针刺组及模型组与假手术组间均有显著差异（P〈0．01或P〈0．05）。结论 脑缺血后1CAM—l表达增加，针刺可降低1CAM．1的表达，从而减轻缺血后ICAM—l导致的缺缺血性脑损伤。说明针刺对缺血性腑损伤的保护作用机制可能与其抑制脑内ICAM-1的表达有关。     

生脉散预防脑局部缺血的机理探讨

目的：研究生脉散在大脑缺氧后的抗氧化损伤作用。方法：将大鼠随机分为三组，即生理盐水组、生脉散组和MK－801组，在建立脑缺血模型后，用生脉散等注入十二指肠，观察生脉散对脑缺血的影响。结果：生脉散在脑缺血后，可能是通过阻断脑组织中一氧化氮的合成，使大鼠因脑缺血而引起的皮质梗死明显减轻（脑梗塞面积减少68．2％）。结论：生脉散有较好的预防脑局部缺血的作用。     

电针督脉经穴对急性脑缺血大鼠一氧化氮及内皮素的影响

30只大鼠随机分成对照组、脑缺血组和电针组。夹闻双侧顿总动脉使局部脑组织血流量急剧下降，造成急性脑缺血。分别测定正常、关闭时和电针督脉经穴后，大鼠脑组织及血中一氧化氮和内皮素的含量。结果发现：急性脑缺血时脑组织一氧化氮和内皮素含量增加，血浆内皮素水平升高和血清一氧化氮水平下降。电针督脉经穴后，脑组织及血中的一氧化氮和内皮素水平基本恢复到正常。提示电针督脉经穴可保护脑缺血所致神经元损伤，一氧化氮和内皮素可能参与电针的调整作用。     

EFFECT OF ELECTROACUPUNCTURE OF DUMAI-ACUPOINTS ON CEREBRAL NO AND BLOOD ENDOTHELIN CONTENTS IN RATS WITH ACUTE CEREBRAL ISCHEMIA

Ｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓ,ｔｈｅｓｔｕｄｙｏｎａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｃｕｔｅｉｓｃｈｅｍｉｃｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓ ｅａｓｅｓｈａｓａｃｈｉｅｖｅｄｇｒｅａｔｅｒｐｒｏｇｒｅｓｓ[1 ] .Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｓｔｕｄｙｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｉｓｃｈｅｍｉｃｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅｓ,ｗｅｏｂｓｅｒｖｅｄｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＥＡｏｆＢａｉｈｕｉ(ＧＶ 2 0 )ａｎｄＤａｚｈｕｉ(ＧＶ 1 4)ｏｎｎｉｔｒｉｃｏ…     

针刺对暂时性脑缺血脑内一氧化氮合酶及神经细胞死亡的影响

采用暂时性脑缺血再灌注模型和组织化学、TUNEL细胞标记等实验技术 ,观察神经细胞死亡和一氧化氮合酶 (NitricOxideSynthase,NOS)水平的变化。实验结果表明 ,暂时性脑缺血再灌注时脑内NOS表达显著增加 ,且引起延迟性细胞死亡 ,包括坏死与凋亡。电针可明显减少神经细胞坏死 ,在存活细胞增多的基础上 ,TUNEL阳性细胞的比例有所增加 ;与此同时 ,电针亦使脑内NOS表达显著减弱。提示电针具有神经保护作用 ,且可能与其下调NOS、减少NO的过量生成有关     

The study of electroacupuncture on cerebral blood flow in rats with and without cerebral ischemia

Electroacupuncture (EA) is widely used to treat disorders of the nervous system, such as stroke. The aim of the present study was to investigate the effect of EA on cerebral blood flow (CBF) in cerebral ischemic rats. We developed an animal model of cerebral ischemia (CI) by occluding the blood flow of both common carotid arteries in Sprague-Dawley (SD) rats; 2 or 15 Hz EA was applied to both Zusanli acupoints. The levels of nitric oxide (NO) in the peripheral blood and amounts of calcitonin gene-related peptide (CGRP) in the cerebral cortex and thalamus were measured. In addition, L-N (G)-nitro arginine methyl ester (L-NAME) was used to measure the changes in CBF induced by EA in rats with and without CI. The results indicated that both 2 and 15 Hz EA increase the mean CBF in rats with and without CI. However, neither 2 nor 15 Hz EA induced changes in levels of NO in peripheral blood or changes in CGRP levels in cerebral cortex and thalamus. In addition, L-NAME did not change the increase in CBF. We concluded that both 2 and 15 Hz EA at both Zusanli acupoints induced the increase of CBF in rats with and without CI. Whether the effect of EA is related to NO or CGRP will be investigated in a future study.     

Electro-acupuncture attenuates nitric oxide release from rat striatum after transient middle cerebral artery occlusion

Nitric oxide (NO) is an important diffusible neurotransmitter, which also has neurotoxicity when it is overproduced. To investigate whether electro-acupuncture (EA) could inhibit the excessive NO release during cerebral ischemia, we detected NO directly by our self-made NO sensitive electrode. The electrode was placed into rat striatum after transient middle cerebral artery occlusion. NO level was significantly increased upon the onset of ischemia and reperfusion. EA apparently antagonized the ischemia-elicited rise of NO, although it could not suppress the NO level to baseline. The results indicated that EA might inhibit directly the elevation of NO following cerebral ischemia.     

STUDY ON INVOLVEMENT OF L-ARG-NO IN THE PROTECTIVE ACTION OF ELECTROACUPUNCTURE ON CEREBRAL ISCHEMIC INJURY IN THE RAT

In the present study, the involvement of L-arginine(L-Arg) NO on he protective action of electroacupuncture(EA) on cerebral ischemic injury was observed in acute ischemia-reperfusion(IR)rat model by taking regional cerebral blood flow(r-CBF), cerebral water content(CWC), and blood nitric oxide(NO) contents as indexes. Results showed that 1) EA could cause r-CBF and serum NO content to increase and CWC to lower, suggesting an protective action of EA on IR cerebral injury; 2) intravenous injection of L-Arg also had an protective effect on cerebral IR cerebral injury, while L-NNA had no this effect; and 3) pre-treatment with L-Arg might strengthen the effect of EA further, while pretreatment with L-NNA could weaken its effect. It indicates that L-Arg-NO may be involved in the effect of EA in protecting the brain from ischemic injury.     

电针内关对心肌缺血再灌注损伤NO及NOS的影响

目的 :探讨针刺内关抗心肌缺血再灌注损伤作用的内在机制。方法 :结扎家兔左冠状动脉前降支 4 0min ,再损伤 1h ,观察电针内关对心肌缺血再灌注损伤心肌组织一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶 (NOS)的影响。结果 :缺血再灌注模型组NO、NOS含量明显升高 ;针刺内关组与之比较显著降低 ,差异非常显著 (P <0 0 1)。结论 :电针“内关”穴对缺血再灌注心肌的保护作用可能与抑制NO及NOS的合成、释放 ,从而减轻其对心肌细胞的损害有关。     

Protective effects of total flavones of rhododendra on cerebral ischemia reperfusion injury

This study was to investigate the protective effects and possible mechanisms of total flavones of rhododendra (TFR) against cerebral ischemia reperfusion injury in rats and mice. Cerebral ischemia/reperfusion injury was induced by occluding the right middle cerebral artery (MCA). Infarct volume, neurological deficit, brain water content, levels of malondialdehyde (MDA), nitric oxide (NO) contents, lactate dehydrogenase (LDH) activity in plasma and brain, levels of superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) activities and mRNA expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), neuronal nitric oxide synthase (nNOS) and endothelial nitric oxide synthase (eNOS) in brain were evaluated 7 or 10 days after treatment. TFR significantly reduced infarct volume, ameliorated the neurological deficit and reduced the brain water content. The activities of SOD, LDH and GPX in brain were enhanced, while the activity of LDH in plasma and the contents of MDA and NO in plasma and brain were decreased. While, the expression of iNOS and nNOS mRNA in brain were down-regulated, the expression of eNOS mRNA in the brain was up-regulated. These results suggest that TFR has protective effects for cerebral injury in rats and mice, which might be associated with its antioxidant properties and ability to regulate the expression of NOS isoforms.     

大鼠侧脑室微量注射L-精氨酸对电针镇痛作用的影响

为探讨中枢一氧化氮在电针镇痛过程中的作用和作用机理,以钾离子透入引起大鼠甩尾反应的电流强度为痛反应指标,观察侧脑室微量注射一氧化氮（ＮＯ）前体物质和一氧化氮合酶（ ＮＯＳ）抑制剂对电针镇痛作用的影响。结果表明,电针大鼠双侧“足三里”后,侧脑室微量注射 Ｌ－精氨酸 １０ｍｍｏｌ,电针镇痛作用明显减弱（ Ｐ＜ ０． ０１）,并且表现出明显的剂量效应依赖关系。注射Ｄ－精氨酸和生理盐水,对电针镇痛的作用影响不明显;侧脑室内注射ＮＯＳ抑制剂Ｌ－ＮＡＭＥ,大鼠的电针镇痛效应升高非常明显,而注射Ｄ－ＮＡＭＥ后,电针大鼠双侧“足三里”,动物痛阈无显著性变化。提示ＮＯ在中枢神经系统内参与痛和电针镇痛的病理生理过程,脑内ＮＯ含量增加,有明显降低电针镇痛的效应,脑内ＮＯ浓度降低则在一定程度上具有增强电针镇痛的作用。     

川芎嗪对胰岛素抵抗大鼠急性局灶性脑缺血tPA,PAI,DD和ET-I含量的影响

目的 :探讨川芎嗪对胰岛素抵抗 (IR)大鼠脑缺血的防护作用。方法 :采用电凝大脑中动脉致急性局灶性脑缺血模型、川芎嗪对IR急性局灶性脑缺血大鼠血浆组织型纤溶酶原激活物 (tPA)及其抑制物 (PAI)、D-二聚体 (DD)、内皮素-1(ET-I)、超氧化物歧化酶 (SOD)和胰岛素敏感性指数 (IAI)变化。结果 :川芎嗪提高IAI(P<0.01) ,PAI 1含量 (P<0.01)和SOD活性 (P<0.01) ,降低血浆tPA活性 (P<0.01)、ET-I含量 (P<0.01)和DD含量 (P<0.01)。结论 :川芎嗪对IR大鼠急性局灶性脑缺血具有防护作用是由于改善纤溶功能、降低ET I和增加SOD活性有关。