重组腺相关病毒介导的CD151基因转移对大鼠缺血心肌血管密度的影响

目的通过将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒（rAAV）载体注入缺血心肌,观察CD151基因对缺血心肌血管密度的影响。方法结扎冠状动脉前降支制作大鼠急性心肌梗死模型,将rAAV-CD151注入缺血心肌处。4周后取注射部位心肌,用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测外源性CD151 mRNA的表达、Western blot检测CD151的表达、Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色并计数注射部位心肌毛细血管数目,评价外源CD151对毛细血管密度的影响。结果术后4周,CD151组心肌组织检测到外源性CD151 mRNA的表达,假手术组、缺血对照组、GFP组未检测到外源性CD151 mRNA的表达,且CD151组心肌组织CD151蛋白表达水平高于假手术组、缺血对照组、GFP组（P<0.01）;CD151组血管密度与缺血对照组、GFP组比较显著增加（P<0.01）。结论rAAV-CD151可以有效地转染大鼠心肌组织,促进缺血心肌的血管生成。     

CD151基因转移对大鼠缺血后肢Rac1和Cdc42信号通路的影响

目的 观察CD151在大鼠后肢缺血模型中的表达以及对Rac1和Cdc42信号通路的影响,进一步研究CD151促血管新生的分子机制.方法 将实验大鼠随机分为4组,分别给予生理盐水,rAAV-GFP和rAAV-CD151分点注射至大鼠左后肢肌肉组织内,基因转染1w后行股动脉切除术建立大鼠后肢缺血模型,假手术组不切除股动脉.6 w后用Western印迹方法检测各组大鼠缺血肢体局部CD151以及Rac1和Cdc42的表达.结果 术后5 w,Western印迹检测CD151组的CD151蛋白表达水平明显高于其余各组(P＜0.05),同时CD151组p-Rac1/Cdc42蛋白表达水平明显高于其余各组(P＜0.05).结论 CD151蛋白表达可以激活Rac1和Cdc42信号通路,促进缺血组织的血管新生.     

rAAV-CD151转染心肌梗死小型猪增加缺血心肌血流灌注

目的:观察CD151重组腺相关病毒转染心肌梗死小型猪模型对缺血心肌血流灌注的影响,以明确CD151在体内血运重建中的作用.方法:结扎小型猪左前降支建立心肌梗死动物模型.包装CD151、antiCD151和GFP重组腺相关病毒,分点注射至梗死心肌及周围心肌进行基因转染.8周后13N- NH3 PET评价心肌血流灌注.结果:CD151基因转染促进心肌组织局部CD151表达增高,明显促进缺血心肌血流灌注.rAAV-CD151组灌注图像心肌缺血总分值为10.82±2.36,明显小于rAAV-GFP组19.33±1.67(P＜0.01),而rAAV-antiCD151组缺损总分值25.18±2.73,明显大于rAAV-GFP组和rAAV-CD151组(P＜0.01).结论:CD151在体内具有明显的促血管生成作用,能明显促进心肌梗死后血运重建并增加缺血心肌血流灌注.     

CD151对小型猪急性心肌梗死心肌细胞凋亡和Bax/Bcl-2蛋白的影响

目的:探讨腺相关病毒介导的CD151在小型猪急性心肌梗死(AMI)后对心肌细胞凋亡和Bax/Bcl-2蛋白的影响。方法:建立猪AMI模型,随机分为4组,分别给心肌内注入腺相关病毒介导的GFP基因(rAAV-GFP组)、腺相关病毒介导的CD151基因(rAAV-CD151组)、腺相关病毒介导的反义CD151基因(rAAV-an-tiCD151组)、假手术组(Control组)。AMI后2个月处死,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,WesternBlot法检测各组CD151、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:凋亡指数,rAAV-CD151组(3.3±0.4)小于rAAV-GFP组(9.2±1.3)及rAAV-antiCD151组(10.1±1.5)(P<0.05);rAAV-CD151组略多于Control组(2.4±0.8),2组差异无统计学意义,rAAV-CD151组CD151表达高于其他组,Bax/Bcl-2(1.13±0.11)较rAAV-GFP组(3.21±0.12)及rAAV-antiCD151组(3.53±0.09)明显降低(P<0.05),与Control组(0.93±0.04)比较差异无统计学意义...     

重组腺相关病毒介导CD151转染心肌梗死小型猪促进心肌功能性血管形成

目的 观察重组腺相关病毒(rAAV)介导的CD151基因转染促小型猪心肌梗死后心肌血管形成的有效性.方法 结扎小型猪冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,梗死区及梗死周围心肌分别注射rAAV-CD151、rAAV-anti-CD151和rAAV-绿色荧光蛋白(rAAV-GVP).8周后用Western blot分析心肌组织CD151蛋白表达,免疫组化检测心肌微血管密度和小动脉密度,用13N-NH3电子发射计算机断层心脏显影(PET)评价心肌血流灌注.结果 CD151基因转染促进心肌组织局部CD151高表达.rAAV-CD151组心肌微血管密度为(83.8±6.7)个/mm2,明显高于正常对照组的(33.2±4.5)个/mm2和rAAV-GFP组的(41.6±5.6)个/mm2,均P＜0.05;rAAV-CD151组小动脉密度为(16.4±2.5)个/mm2,也明显高于正常对照组的(6.6±2.3)个/mm2和rAAV-GFP组(8.4±1.6)个/mm2,均P＜0.05.rAAV-anti-CD151组心肌微血管密度和小动脉密度明显低于其他各组.13N-NH3 PET心肌血流灌注显像示rAAV-CD151组缺血区心肌血流灌注明显增加,rAAV-anti-CD151组血流灌注减少.结论 CD151基因转染能增加小型猪局部心肌组织的CD151表达,明显增加缺血心肌微血管和小动脉的生成,并显著增加心肌血流灌注.     

CD151基因治疗改善小型猪心肌梗死后心功能的研究

目的 研究重组腺相关病毒(rAAV)介导的CD151基因转染小型猪心肌梗死模型对心肌梗死后心功能的影响,以明确CD151体内促血管新生的作用.方法 实验用小型猪分为4组:(1)正常对照组4只;(2)rAAV-含绿色荧光蛋白序列(GFP)组6只;(3)rAAV-CD151组6只;rAAV-antiCD151组6只.结扎猪冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型.包装正义及反义CD151腺相关病毒,分点注射至梗死区及梗死周围心肌进行基因转染.基因转染8周行Westernblot测定心肌组织CD151蛋白表达,氮-13-氨水(13N-NH3)电子发射计算机断层显影(PET)评价心肌血流灌注,超声心动图检测心功能.结果 CD151基因转染促进心肌组织局部CD151高表达.与rAAV-GFP组比较,基因转染8周时rAAV-CD151组心肌缺损面积减小[(11.3±2.4)%与(21.1±2.6)%,t=-5.67,P<0.01],心功能各指标左心室射血分数[(65.7±4.6)%与(54.7±5.3)%,t=3.98,P<0.05]、左心室短轴缩短率[(36.0±2.9)%与(27.6±3.1)%,t=3.35,P<0.05]、左心室前侧壁的增厚率[(55.4±4.9)%与(36.8±7.8)%,t=3.34,P<0.05]和室间隔的增厚率[(35.2±6.0)%与(26.7±4.4)%,t=9.27,P<0.01]均增加,左心室前侧壁和室间隔的厚度亦增加(P<0.05).rAAV-antiCD151组各参数则低于rAAV-CD151组(均P<0.05).结论 rAAV-CD151能有效转染小型猪心肌,增加缺血心肌血流灌注,减小梗死面积,明显增加心肌收缩力并改善心功能.     

IGF-1/IGF-1R在大鼠梗死心肌组织中的表达与干预

目的通过观察大鼠梗死心肌组织中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其受体(IGF-1R mRNA、蛋白变化,探讨IGF-1/IGF-1R通路在心肌梗死中的作用及厄贝沙坦对其影响。方法结扎大鼠前降支,将术后24 h内存活大鼠随机分为药物组(n=9)和对照组(n=9)。另设假手术组(n=9),组内大鼠左冠状动脉只穿线不结扎。药物组给予厄贝沙坦50 mg·kg/d灌胃,对照组、假手术组等体积生理盐水灌胃,每日一次。4周后处死大鼠,HE染色观察缺血心肌病理改变,qRT-PCR、Western Blot法检测大鼠梗死心肌组织中IGF-1、IGF-1R mRNA及蛋白水平。结果 HE染色见假手术组心肌细胞排列整齐,药物组及对照组大鼠心肌细胞肿胀、炎症细胞浸润,对照组改变较药物组明显。药物组大鼠左心室重量低于对照组(P0.05)。各组大鼠心肌组织中均检测到IGF-1、IGF-1R mRNA及蛋白含量,药物组及对照组IGF-1、IGF-1R mRNA及蛋白含量均高于假手术组(P均0.05),药物组IGF-1、IGF-1R mRNA及蛋白含量低于对照组(P均0.05)。结论大鼠心肌组织中可检测到心肌IGF-1、IGF-1R mRNA及蛋白表达,心肌梗死后IGF-1、IGF-1R mRNA及蛋白含量增加,厄贝沙坦应用4周时可明显降低梗死心肌组织中IGF-1、IGF-1R mRNA及蛋白水平,可明显改善梗死大鼠心肌组织损伤。     

灯盏花素对缺血再灌注大鼠心肌Caspase-9蛋白及mRNA表达的影响

目的观察灯盏花素(Bre)对缺血再灌注(IR)大鼠心肌Caspase-9蛋白及mRNA表达的影响。方法 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、BreⅠ组(25 mg.kg-1.d-1腹腔注射,7 d)和BreⅡ组(50 mg.kg-1.d-1腹腔注射,连续7 d)。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备心肌IR模型。应用TTC染色的方法检测各组大鼠心肌梗死面积,western印迹技术检测大鼠心肌组织Caspase-9蛋白表达的变化,RT-PCR技术检测大鼠心肌组织Caspase-9 mRNA表达的变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死面积明显增加(P<0.01),Bre明显改善了IR大鼠心肌梗死面积,BreⅡ组比BreⅠ组心肌梗死面积小(P<0.05);模型组大鼠的Caspase-9蛋白及mRNA表达水平较假手术组明显增加(P<0.01),Bre组大鼠心肌的Caspase-9蛋白及mRNA表达水平较模型组明显减少(P<0.01)且BreⅡ组大鼠心肌的Caspase-9蛋白及mRNA表达水平比BreⅠ组减少(P<0.05)。结论 Bre可以减轻IR大鼠心肌梗死面积,其机制可能与减少大鼠心肌的Caspase-9蛋白及mRNA表达有关。Bre对IR损伤心肌的保护作用呈剂量依赖性。     

养心通脉方含药血清预处理内皮祖细胞对急性心肌梗死兔心肌bFGF、VEGF水平的影响

目的观察养心通脉方含药血清预处理内皮祖细胞(EPCs)对急性心肌梗死(AMI)兔心肌血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平的影响。方法从35只雄性SPF级兔中随机选取25只建立急性心肌梗死兔模型,随机分为模型组、中药EPCs心肌注射组、中药EPCs耳缘静脉注射组、EPCs心肌注射组、EPCs耳缘静脉注射组,每组5只,另设正常组和假手术组,各5只,通过移植干预后14 d取梗死心肌区及缺血心肌区组织,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测bFGF、VEGF的mRNA表达,蛋白质印迹法(Western Blot)检测bFGF、VEGF蛋白表达。结果在梗死心肌区及缺血心肌区,中药EPCs心肌注射组和中药EPCs耳缘静脉注射组bFGF、VEGF的mRNA及蛋白表达明显高于假手术组、模型组、EPCs心肌注射组、EPCs耳缘静脉注射组,差异均有统计学意义(P<0.05),但中药EPCs心肌注射组bFGF、VEGF的mRNA及蛋白表达与中药EPCs耳缘静脉注射组比较差异均无统计学意义(P>0.05),EPCs心肌注射组bFGF、VEGF的mRNA及蛋白表达与EPCs耳缘静脉注射组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论养心通脉方含药血清预处理EPCs,能够明显增加损伤心肌bFGF、VEGF表达,但耳缘静脉注射与心肌注射疗效相当。     

miR-126及VEGF在大鼠心肌梗死交界区表达的动态变化

目的 观察大鼠心肌梗死(MI)后MI交界区微小RNA-126(miR-126)及血管内皮生长因子（VEGF）表达的动态表达变化,初步探讨miR-126及VEGF对缺血局部血管新生的影响。方法 雄性SD大鼠结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型组(AMI组),另设假手术对照组(Sham组),每组30只。于术后7 d、14 d和28 d分别处死10只大鼠,进行MI面积百分比测定,实时荧光定量PCR法检测心梗交界区miR-126、VEGF mRNA表达水平,免疫组织化学方法检测各组大鼠MI交界区VEGF蛋白的表达。结果 Sham组术后7 d、14 d和28 d心肌组织 miR-126 mRNA和VEGF mRNA的表达均无明显区别,AMI组术后7 d、14 d和28 d,MI交界区mir-126 mRNA表达与相应的Sham组相比,均有不同程度的下降(P<0.01),而VEGF mRNA的表达则均有不同程度的增高(P<0.01);在AMI组,随着MI时间的延长,miR-126和VEGF mRNA的表达均逐渐升高,且在AMI 14 d达到高峰（P<0.05）。VEGF 的蛋白表达情况与其基因表达基本一致。结论 大鼠MI后VEGF mRNA及其蛋白的表达明显升高的同时伴随miR-126基因表达的降低,随着缺血时间延长,miR-126 mRNA表达有所恢复。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.