DD3基因不同外显子在前列腺癌组织中的特异性表达

目的 探讨DD3基因不同外显子在前列腺癌组织中的特异性表达。方法 根据基因库所收录的DD3 mRNA序列，设计跨越不同外显子的3对DD3 mRNA序列特异的引物，应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）对61例前列腺组织和70例前列腺外的其他肿瘤组织及癌旁组织进行DD3 mRNA检测，并对前列腺癌组织DD3 mRNA进行全序列分析。结果 跨越DD3 mRNA外显子1与3、外显子1与4及外显子3与4之间设计的引物所检测DD3 mRNA结果完全一致，21例前列腺癌组织与1例前列腺上皮内肿瘤组织中DD3 mRNA均为阳性，39例良性前列腺增生组织和70例其他肿瘤组织及癌旁组织中DD3 mRNA均为阴性。21例前列腺癌组织DD3 mRNA序列之间完全一致（GenBank登陆号为AY894120），与国外报道序列（AF103907）之间有99．8％同源。结论 DD3 mRNA仅在前列腺癌中特异性表达，外显子3和外显子4均可作为DD3 mRNA特异的外显子。     

DD3基因与前列腺癌的诊断、治疗进展

DD3mRNA仅高度表达于前列腺癌细胞中 ,是新近发现的前列腺癌特异性、敏感性很高的基因。这使DD3mRNA成为一个早期诊断或 /和提示前列腺癌预后的有前途的标志物。     

PSA值增高患者前列腺按摩后尿液中DD3mRNA定量检测无侵入性诊断前列腺癌的意义

目的:探讨PSA值增高患者前列腺按摩后尿液沉渣中DD3mRNA检测在前列腺癌诊断中的应用价值.方法:在前列腺穿刺活检前或术前麻醉后收集患者前列腺按摩后患者的尿液,离心取细胞沉淀物,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应(Real time RT-PCR)方法检测DD3mRNA和PSAmRNA含量,以PSAmRNA作为管家基因校正沉渣中的前列腺细胞,以DD3mRNA/PSAmRNA比值表示DD3mRNA含量.SPSS13.0分析相关数据,以穿刺活检或术后病理检查结果为金标准,同时探讨了前列腺按摩后尿液中DD3Mrna含量与前列腺癌病理分级之间的关系.结果:PSA值增高患者中前列腺癌患者前列腺液DD3mRNA表达量明显高于BPH,差异具有统计学意义.不同病理分级之间DD3mRNA的含量差异无统计学意义(P>0.05).结论:PSA值增高的患者行前列腺按摩后尿液沉渣中DD3mRNA含量检测,较前列腺活检的损伤更小,作为前列腺癌的一种非损伤性诊断方法具有良好的应用前景.     

前列腺癌特异性基因DD3在前列腺癌患者外周血中表达的意义

目的探讨前列腺癌特异性基因DD3在前列腺癌患者外周血中表达及临床意义.方法采集44例中晚期前列腺癌（PCa）患者、20例良性前列腺增生（BPH）患者及18例健康男子外周血,分离单个核细胞,提取总RNA.RT-PCR琼脂糖电泳法检测DD3 mRNA,以β-actin为内参照,以出现311-bp和184 bP片段为DD3 mRNA阳性,仅出现184 bp片段为DD3 mRNA阴性. 结果 20例BPH患者和18例健康青年男子外周血标本中均无DD3 mRNA表达,44例PCa血标本中DD3mRNA表达13例（29.5%）.B期、C期及D期患者DD3 mRNA阳性率分别为0%（0/3）、18%（2/11）及37%（11/30）,各期之间差异无统计学意义（P＞0.05）.PCa伴骨转移患者外周血中DD3 mRNA阳性率为44%（10/22）,而无骨转移者其阳性率为14%（3/22）,组间差异有统计学意义（P＜0.05）.PCa未治疗组、去势治疗组的DD3 mRNA阳性率分别为64%（7/11）、18%（6/33）,组间差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 PCa患者外周血中可检测到DD3 mRNA表达,DD3 mRNA可望作为诊断PCa血行转移和治疗监测的良好标志物.     

二氢二醇脱氢酶2在前列腺癌中的表达及意义

目的探讨二氢二醇脱氢酶(DD)在前列腺癌中的表达及意义. 方法以β-actin为内参基因,应用逆转录聚合酶链反应方法检测DD亚型之一DD2在前列腺癌组织(11例)及正常前列腺组织(10例)中的表达水平.应用密度扫描技术定量分析RT-PCR产物电泳条带的密度. 结果 DD2 mRNA在前列腺癌组织中表达明显增高,吸光度比值0.550～1.018,中位数0.726;在正常前列腺组织中的表达水平较低,吸光度比值0.248～0.420,中位数0.333.癌与正常前列腺组织间DD2 mRNA表达差异有显著性意义(P<0.001). 结论 DD2 mRNA在前列腺癌中的高表达提示DD可能在前列腺癌的发生发展中发挥重要作用.     

DD3和PSA基因在前列腺癌组织中的定量表达分析

目的探讨DD3 mRNA和PSA mRNA在前列腺组织中表达的临床意义及诊断前列腺癌(PCa)的价值。方法荧光定量RT—PCR法分析21例PCa组织、39例良性前列腺增生(BPH)组织DD3 mRNA和PSA mRNA的表达,ROC曲线对DD3 mRNA、PSA mRNA和DD3 mRNA／PSA mRNA比值诊断PCa的价值进行分析。结果PCa组织中DD3 mRNA、PSA mRNA表达量和DD3 mRNA／PSA mRNA比值均显著高于BPH组织,差异有统计学意义(P<0．01)。不同临床分期和分化程度之间DD3 mRNA、PSA mRNA和DD3 mRNA／PSA mRNA比值差异无统计学意义(P值均>0．05)。ROC曲线分析结果显示,DD3 mRNA、PSA mRNA和DD3 mRNA／PSA mRNA的曲线下面积分别为0．937、0．755和0．839。当DD3 mRNA、PSA mRNA和DD3 mRNA／PSA mRNA临界值分别为1．4×105拷贝／mg组织、3．0×107拷贝／mg组织和5．0×10-3时,敏感性分别为90．5％、81．0％和81．0％,特异性分别为85．0％、62．0％和66．7％。若将DD3 mRNA和PSA mRNA联合用于PCa的诊断,其特异性与DD3 mRNA相同,为85．0％,敏感性可达100．0％。结论PCa组织中DD3 mRNA和PSA mRNA表达量均增加,但组织中DD3 mRNA的定量检测更具诊断价值,联合检测有利于提高诊断敏感性,对PCa的诊断具有一定临床应用价值。     

前列腺癌患者前列腺液中DD3 mRNA检测及临床意义

目的检测前列腺癌（PCa）患者前列腺液中DD3基因的表达,讨论其临床意义。方法收集31例PCa患者、59例前列腺增生（BPH）患者前列腺液,离心取细胞沉淀物,提取总RNA,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）琼脂糖电泳法方法检测其中DD3 mRNA的水平。同时用2χ检验分析比较不同Gleason分级的PCa患者DD3 mRNA阳性率是否存在差异。结果 PCa患者前列腺液中DD3 mRNA阳性率（77.42%）明显高于BPH患者（5.08%）,两者具有显著性差异（P〈0.01）。DD3 mRNA表达阳性率诊断PCa的灵敏度为77.42%,特异度为94.91%,不同Gleason分级的PCa患者DD3 mRNA表达阳性率无显著统计学差异（P〉0.05）。结论检测前列腺液中DD3 mRNA诊断PCa是一种有效的无侵入性的良好方法。     

环介导等温扩增法检测血浆游离DD3mRNA在前列腺癌诊断中的价值

目的：采用环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术进行前列腺癌（PCa）特异基因DD3检测,探讨其诊断PCa的可行性.方法：选择血清PSA异常者60例,行前列腺穿刺活检的同时留取血标本;另留取15例正常男性血进行DD3检测,将DD3检测结果和前列腺病理检查结果进行比较,探讨血DD3mRNA在PCa诊断中的临床应用价值.结果：60例血清PSA异常者中,27例病理检查诊断为PCa,这些患者均检测到DD3表达,33例前列腺增生患者中有1例DD3阳性表达,15例正常对照组均未见DD3阳性表达.结论：LAMP法检测DD3与病理检测具有极高的一致性,方法简单、快速,可大大减少不必要的前列腺穿刺活检,对PCa的诊断具有重要的临床指导价值.     

DD3 mRNA在前列腺癌组织中定量表达分析

目的:探讨DD3基因在前列腺组织中表达的临床意义。方法:用荧光定量RT-PCR方法对21例前列腺癌(PCa)组织、27例非前列腺部位的肿瘤组织、39例良性前列腺增生(BPH)组织和15例正常前列腺组织中的DD3的表达进行了定量分析,用ROC曲线对DD3 mRNA诊断PCa的性能进行了分析。结果:27例非前列腺组织中均未检测到DD3基因的表达。DD3在PCa组、BPH组和正常前列腺组表达量的中位数分别为7.2×106、2.5×104、1.5×104拷贝/mg组织。PCa组较BPH组和正常前列腺组DD3的表达量显著增高(P<0.01),而BPH组和正常前列腺组间则差异无显著性(P>0.05)。DD3表达量与临床分期和分化程度之间均无明显相关性。DD3 mRNA曲线下面积(AUC-ROC)为0.937(95%CI:0.879～0.995)。当临界值为1.4×105拷贝/mg组织时,灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、阳性拟然比(+LR)、阴性拟然比(-LR)分别为90.5%、85.0%、86.7%、76.0%、94.3%、6.03和0.11。结论:DD3 mRNA的表达仅限于前列腺组织,具有良好的组织特异性。DD3 mRNA表达在PCa组织中显著升高,在正常前列腺和BPH组织中差异无显著性。DD3 mRNA可作为PCa诊断的良好标志物,在PCa早期诊断、微转移诊断、预后判断、指导治疗等方面也具有潜在的应用价值。     

前列腺癌DD3基因与Ras-MAPK信号通路的相关性

前列腺癌是泌尿系统常见恶性肿瘤之一,其发病率呈现上升趋势[1].在前列腺癌的发生、发展进程中可经历激素依赖和激素非依赖的阶段,其转变的机制目前尚未完全清楚,多种信号传导通路可能参与其中[2-3].近年来随着MAPK信号通路研究的深入,该通路在前列腺癌发生、发展中所发挥的重要作用备受关注,多因素所致的信号转导异常可能导致前列腺癌的发生以及前列腺癌激素非依赖性的产生.DD3基因具有高度前列腺癌特异性,其表达呈现激素依赖性,DD3基因与Ras-MAPK信号途径的相关性研究,有助于揭示前列腺癌发生、发展中DD3基因和Ras-MAPK信号途径所发挥的重要作用.     

DD3在前列腺癌研究中的最新进展

DD3基冈是新近发现的前列腺癌特异性、敏感性很高的基因,在前列腺癌的早期诊断、治疗以及提示预后方面发挥着重要作用.DD3有望成为一个早期诊断、治疗以及提示预后的有前途的早期标志物.     

前列腺癌患者尿液中DD3 mRNA检测及临床意义

目的:观察PCa患者尿液中DD3 mRNA的表达,并讨论其临床意义。方法:从48例PCa患者、23例BPH患者和9例健康男性志愿者(对照组)前列腺按摩后初始尿液中分离细胞,采用RT-PCR方法检测其中DD3mRNA的表达情况。结果:BPH和对照组未见DD3 mRNA阳性表达,而PCa患者DD3 mRNA阳性率为81.3%(39/48),两者差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:尿液中DD3 mRNA的检测有望成为早期诊断PCa的一种无创、简单、敏感的方法,也有望成为PCa治疗后监测的一种方法。     

靶向前列腺癌并携带SATB1基因shRNA溶瘤腺病毒的构建

目的:构建DD3启动子调控并携带SATB1基因shRNA溶瘤腺病毒,研究其对前列腺癌的特异抗肿瘤作用。方法:以pSilencer3.1-SATB1为模板,通过PCR扩增出SATB1-shRNA表达框并克隆至pZD55载体,构建重组质粒pZD55-SATB1-shRNA。EcoRⅤ和XbaⅠ分别酶切pZD55-SATB1-shRNA和pZXC2-DD3-E1A,将目的片段连接重组,获得质粒pDD3-ZD55-SATB1,将其与腺病毒包装质粒pBHGE3共转染293细胞。PCR鉴定正确者即为溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SATB1。扩增,纯化,测病毒滴度。结晶紫染色观察对前列腺癌细胞毒性;Western印迹检测E1A在列腺癌细胞中的表达;RT-PCR和Western印迹检测列腺癌细胞中SATB1基因沉默效果。结果:成功构建DD3启动子调控同时携带SATB1-shRNA的溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SATB1,初步证实DD3-ZD55-SATB1复制具有高度的前列腺癌靶向性和特异的SATB1基因沉默效果。结论:成功构建的溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SATB1为进一步体内外研究其对前列腺癌的治疗作用奠定基础。     

前列腺癌患者尿液DD3mRNA表达及其意义的研究进展

随着前列腺癌在老年男性中的发病率的升高,早期诊断对其治疗及预后评价有着重要意义.DD3是近年来发现的在前列腺癌细胞特异性表达的一种新的肿瘤标志物,与传统的肿瘤标记物(如PSA等)相比具有更高的敏感性和特异性.对前列腺癌患者进行尿液DD3检测为一种既方便又理想的方法,本文对该方面的研究进展进行了综述.     

前列腺癌患者尿液DD3mRNA表达及其意义的研究进展

随着前列腺癌在老年男性中的发病率的升高,早期诊断对其治疗及预后评价有着重要意义.DD3是近年来发现的在前列腺癌细胞特异性表达的一种新的肿瘤标志物,与传统的肿瘤标记物(如PSA等)相比具有更高的敏感性和特异性.对前列腺癌患者进行尿液DD3检测为一种既方便又理想的方法,本文对该方面的研究进展进行了综述.     

前列腺癌患者DD3 mRNA表达及其意义的研究进展

前列腺癌对中老年男性生命健康构成严重威胁,有关前列腺癌诊断方法成为目前研究的热点,DD3仅高度表达于前列腺癌细胞中,是新近发现的前列腺癌敏感性高、特异性最好的基因,在前列腺癌早期诊断和判断预后方面具有很好的临床应用前景.本文对其最新研究作如下综述.     

DD3基因在前列腺癌诊断中的研究进展

近年来,有关前列腺癌(Prostate cancer,Pca)诊断方法的研究成为了研究的热点,研究发现DD3是一种非编码RNA的基因,仅在Pca细胞中表达,而在其他正常组织和癌组织以及细胞系中均不表达,为Pca特异性基因之一,DD3的发现极大提高了Pca诊断的特异性与灵敏度.本文就DD3最新研究进展作一综述.     

E2F3在前列腺癌中的表达及意义

目的探讨E2F3在前列腺癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组化技术检测26例前列腺癌、20例良性前列腺增生和10例正常前列腺组织中E2F3 mRNA及蛋白的表达。结果E2F3 mRNA及蛋白的表达与临床分期有关,晚期（C＋D期）E2F3 mRNA及蛋白的表达水平明显高于早期（A＋B期,P〈0．05）,低分化癌E2F3 mRNA及蛋白的表达明显高于高中分化癌（P〈0．05）。前列腺癌中E2F3表达水平明显高于良性前列腺增生（P〈0．05）及正常前列腺组织（P〈0．05）。结论E2F3表达可能与前列腺癌的恶性程度有关,E2F3在前列腺癌的发生发展中起到促进作用。     

前列腺癌细胞系及组织中α-1,6岩藻糖基转移酶的表达及意义

目的 探讨α-1,6岩藻糖基转移酶(α-1,6 fucocyltransferase,FUT8)在不同前列腺癌细胞系、癌及癌旁组织中的表达差异及其意义.方法 培养前列腺正常上皮细胞(RWPE-1)、4种前列腺癌细胞(22RV1、LNCap、PC-3、DU145)及2种其他类型泌尿系统肿瘤细胞(T-24、786-O),收集15对前列腺癌及癌旁组织,提取总RNA,采用RT-PCR检测不同细胞系、癌及癌旁组织中FUT8 mRNA的表达,并进行差异比较.结果 FUT8 mRNA在前列腺癌细胞系中的表达高于前列腺正常上皮细胞系(RWPE-1)、膀胱癌细胞系(T-24)以及肾癌细胞系(786-O).雄激素非依赖性前列腺癌细胞系(PC-3、DU145)中FUT8 mRNA的表达高于雄激素依赖性前列腺癌细胞系(LNCap);前列腺癌转移灶细胞系(PC-3、DU145)中FUT8 mRNA的表达高于前列腺癌原发灶细胞系(22RV1).同时还发现,FUT8 mRNA在前列腺癌组织中的表达高于癌旁组织.以上差异均有统计学意义(P<0.01).结论 FUT8在不同前列腺癌细胞系、癌及癌旁组织中存在差异表达,可能参与前列腺癌的雄激素非依赖性转化及进展转移等过程.     

不同来源前列腺基质细胞对前列腺癌细胞IGF-1和p-AKT表达的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子在前列腺癌肿瘤-基质交互作用中的地位及其作用机制.方法 将前列腺癌旁基质细胞和良性前列腺基质细胞分别与前列腺癌细胞系PC-3细胞分隔共培养(并设空白对照),之后检测前列腺癌细胞中IGF-1 mRNA(半定量RT-PCR)和p-AKT蛋白表达(Western blot).结果 与空白对照组相比较,癌旁基质细胞共培养组IGF-1 mRNA表达有所上调、p-AKT蛋白表达有所上调,但无统计学意义(P＞0.05);良性基质细胞共培养组IGF-1 mRNA和p-AKT蛋白表达显著下调(P＜0.05).相关性分析显示各组前列腺癌细胞IGF-1 mRNA与p-AKT蛋白表达呈正相关.结论 良性前列腺基质细胞通过水溶性因子抑制前列腺癌细胞中IGF-1及其下游因子表达,前列腺癌旁基质细胞则丧失了该抑制作用.