耻骨联合可作为组织工程种子细胞的供区？

背景：耻骨联合是与关节盘、半月板或椎间盘具有相同性质的组织,但是将其作为组织工程种子细胞供区的研究,至今鲜有报道。目的：观察耻骨联合作为组织工程种子细胞供区的可行性。方法：取大鼠的耻骨联合组织进行苏木精-伊红、阿尔新蓝及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,观察细胞外基质的组织学特征。再将分离自大鼠耻骨联合组织的细胞,在体外培养扩增后,与藻酸盐凝胶支架复合立体培养,通过活细胞荧光标记方法,观察细胞存活率,通过21d长期培养观察细胞增殖情况。测量8具成年男性骨盆标本的耻骨联合软骨区的体积,判断其是否有利于分离足够数量的种子细胞。结果与结论：苏木精-伊红染色显示,大鼠耻骨联合组织有大量平行或交叉排列的纤维束,细胞单独散在、成对或成行排列分布于纤维束之间的陷窝内。阿尔新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色发现,大鼠耻骨联合组织广泛着色,细胞及陷窝附近着色较深。藻酸盐凝胶支架为多孔结构,孔隙间交互通连,孔隙直径为（27．0±16．7）pm,孔隙壁较光滑。在支架上细胞存活率为（72．4±4．5）％。在体外长期培养过程中,支架上的细胞呈圆球形,逐渐形成“同源细胞群”,培养13d时观察到的细胞团,在第21天时明显增大,所含细胞数明显增多。成年男性耻骨联合组织的体积为（1．13±0．21）cm3。结果证实,大鼠耻骨联合组织细胞具有软骨细胞的排列特征,细胞外间质有软骨组织特异性基质成分。取自大鼠耻骨联合的细胞,在体外立体培养具有持续的增殖能力,耻骨联合组织可作为软骨组织工程种子细胞供区。成年男性耻骨联合组织量较大,有利于分离获取较多的原代细胞。     

组织工程脊髓种子细胞

目的：组织工程技术在脊髓损伤修复中前景广阔，其中组织工程支架和种子细胞是组织工程中的两项重要内容，对有关脊髓种子细胞的研究进行综述，以了解其进展。资料来源：应用计算机检索Medline 1999-07／2004-06期间的相关章，检索词为“spinal cord injury,regeneration,cell transplantation”，并限定章语言为English。同时检索http：／／WWW．wanfangdata．com．cn／1999-07／2004-06期间相关的章，检索词为“脊髓损伤，修复，细胞移植”，限定章语言种类为中。资料选择：对资料进行初审，选择较近期及对进一步试验有指导意义的献。纳入标准：①选取对脊髓损伤后进行细胞移植治疗的献。②随机对照实验研究。③单一样本研究。排除标准：①较陈旧的献。②综述献。③重复研究。资料提炼：共收集到40篇关于细胞移植的献，其中有17篇符合纳入标准，排除的23篇章系重复的同一研究和综述献。资料综合：将17篇献中分别对各个种子细胞移植后对脊髓损伤修复的促进作用进行了综合。结论：作为种子细胞，均能促进脊髓损伤的修复，但是最有应用前景的主要有：神经干细胞，骨髓基质干细胞，许旺细胞和嗅鞘细胞。     

组织工程脊髓种子细胞

目的:组织工程技术在脊髓损伤修复中前景广阔,其中组织工程支架和种子细胞是组织工程中的两项重要内容,对有关脊髓种子细胞的研究进行综述,以了解其进展。资料来源:应用计算机检索Medline1999-07/2004-06期间的相关文章,检索词为“spinalcordinjury,regeneration,celltransplantation,并限定文章语言为English。同时检索http://www.wanfangdata.com.cn/1999-07/2004-06期间相关的文章,检索词为“脊髓损伤,修复,细胞移植”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选择较近期及对进一步试验有指导意义的文献。纳入标准:①选取对脊髓损伤后进行细胞移植治疗的文献。②随机对照实验研究。③单一样本研究。排除标准:①较陈旧的文献。②综述文献。③重复研究。资料提炼:共收集到40篇关于细胞移植的文献,其中有17篇符合纳入标准,排除的23篇文章系重复的同一研究和综述文献。资料综合:将17篇文献中分别对各个种子细胞移植后对脊髓损伤修复的促进作用进行了综合。结论:作为种子细胞,均能促进脊髓损伤的修复,但是最有应用前景的主要有:神经干细胞,骨髓基质干细胞,许旺细胞和嗅鞘细胞。     

组织工程血管的种子细胞

血管移植物数量和功能的不足制约着许多疾病的治疗，因此组织工程血管成为研究的热点。种子细胞作为组织工程血管重要组成部分，如何达到正常血管内皮细胞及平滑肌细胞的生理功能，是人们关注的焦点。干细胞因具备多向分化潜能，被视为理想的种子细胞，然而干细胞种类较多，在组织工程血管的构建过程中，哪种干细胞更适合作为种子细胞，尚无定论。文章对造血干细胞、骨髓间充质干细胞、脂肪干细胞等多种干细胞进行比较，简述各自的特点，试图全面了解干细胞的功能，为进一步实验奠定一定的基础。     

人骨髓间质干细胞作为软骨组织工程种子细胞的鉴定

目的 为软骨组织工程寻求一种新的种子细胞来源,对从人骨髓中所分离培养的骨髓间质干细胞( mesenchymal stem cells, MSCs)进行鉴定. 方法利用流式细胞仪对所分离培养的细胞表面标志物( CD29,CD44,CD14,CD34,CD45)进行分析鉴定. 结果细胞表面抗原抗 CD29,CD44抗体为阳性,抗 CD14,CD34,CD45抗体为阴性. 结论采用流式细胞仪对人 MSCs鉴定结果可为组织工程种子细胞的获得提供基础.     

传代培养骺板软骨细胞作为组织工程种子细胞的生物学研究

目的：定量观测体外培养骺板软骨细胞合成蛋白多糖聚集体的变化，评价其不同代次生物学功能活性。方法：酶消化分离原代骺板软骨细胞，传代培养至第6代。改进的二甲基亚甲蓝(DMB)比色法测定各代细胞胞外基质的硫酸糖胺多糖(Glycosaminoglycans,GAG)含量，细胞-玻片甲苯胺蓝染色光镜观察。结果：原代软骨细胞具有最高的硫酸GAG分泌活性，(70&;#177;8)μg／cm^2，至第3代则出现了非常明显的下降，(53&;#177;10)μg／cm^2，第4代以后很低下；甲苯胺蓝染色显示原代细胞对甲苯胺蓝呈明显的红色异染反应，第3代异染反应明显减弱，第4代以后异染反应微弱，其结果与硫酸GAG含量变化相一致。结论：骺板软骨细胞在体外培养过程中，随传代次数的增加而功能活性逐渐降低，第3代以后的细胞不适于作为骺板组织工程种子细胞和用于细胞生物学等方面研究。     

人骨髓间质干细胞作为软骨组织工程种子细胞的鉴定

目的：为软骨组织工程寻求一种新的种子细胞来源，对从人骨髓中所分离培养的骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)进行鉴定。方法：利用流式细胞仪对所分离培养的细胞表面标志物(CD29,CD44,CD14，CD34，CD45)进行分析鉴定。结果：细胞表面抗原抗CD29，CD44抗体为阳性，抗CD14,CD34,CD45抗体为阴性。结论：采用流式细胞仪对人MSCs鉴定结果可为组织工程种子细胞的获得提供基础。     

传代培养骺板软骨细胞作为组织工程种子细胞的生物学研究

目的:定量观测体外培养骺板软骨细胞合成蛋白多糖聚集体的变化,评价其不同代次生物学功能活性。方法:酶消化分离原代骺板软骨细胞,传代培养至第6代。改进的二甲基亚甲蓝(DMB)比色法测定各代细胞胞外基质的硫酸糖胺多糖(Glycosaminoglycans,GAG)含量,细胞-玻片甲苯胺蓝染色光镜观察。结果:原代软骨细胞具有最高的硫酸GAG分泌活性,(70±8)μg/cm2,至第3代则出现了非常明显的下降,(53±10)μg/cm2,第4代以后很低下;甲苯胺蓝染色显示原代细胞对甲苯胺蓝呈明显的红色异染反应,第3代异染反应明显减弱,第4代以后异染反应微弱,其结果与硫酸GAG含量变化相一致。结论:骺板软骨细胞在体外培养过程中,随传代次数的增加而功能活性逐渐降低,第3代以后的细胞不适于作为骺板组织工程种子细胞和用于细胞生物学等方面研究。     

软骨组织工程种子细胞研究进展

自1907年HARISON开创组织培养技术以来，商品化细胞营养成份和酶的出现，使组织细胞体外培养技术取得了迅猛发展。组织工程研究的发展为组织器官损伤和缺损的治疗提供了新的手段。较其它组织而言。由于软骨特殊的组织学和生物学特性，软骨的组织工程研究开展较早，相对较为成熟，但有效合理的种子细胞来源限制使其成为限制临床应用的瓶颈。软骨细胞和问充质干细胞是目前研究的主要细胞类型，下面主要针对这两种细胞类型对近年来软骨组织工程种子细胞的研究进行总结。     

组织工程血管种子细胞的培养

目的：为构建组织工程血管提供种子细胞。方法：全麻下取兔的主动脉，分别采用酶消化法和组织块贴壁法培养血管内皮细胞和平滑肌细胞，并传代，免疫组化鉴定及倒置显微镜下形态学观察。结果：成功地培养出血管内皮细胞和平滑肌细胞并传代，倒置显微镜下血管内皮细胞呈“鹅卵石”形态，平滑肌细胞呈典型的“峰—谷”状。免疫组化鉴定内皮细胞Ⅷ因子（ ），平滑肌细胞α—肌动蛋白( )。结论：所培养的血管内皮细胞和平滑肌细胞为研究组织工程血管提供了细胞来源。     

组织工程心脏瓣膜的种子细胞

应用计算机检索Pubmed数据库1995—01／2008—01期间和CNKI、维普数据库2001-01／2008—01期间与组织工程心脏瓣膜种子细胞相关的44篇资料显示：l临床应用的机械瓣和生物瓣存在一些缺点，而组织工程心脏瓣膜优点包括无需抗凝治疗、抗感染、有活力、具有生长和修复能力，具有很好的前景。组织工程心脏瓣膜种子细胞可来源于：血管、骨髓、血液、脐带、绒毛膜和胚胎干细胞等，这些细胞具有相应特异的细胞表型，并适合产生用作组织工程的细胞外基质。组织工程心脏瓣膜研究已经取得了相当大的进展和令人鼓舞的成绩，但有许多技术问题和临床实际问题尚待解决和克服。要想组织工程心脏瓣膜成功应用于临床，需要更深入的研究：比如可降解多聚物支架材料特性、干细胞分化、尽量发挥自体细胞功能、使用无创技术评价瓣膜生长和重构的速度及质量等，这样就会催生更新进的技术应用于体内安全性实验以及临床前期研究。     

组织工程血管种子细胞的培养

目的:为构建组织工程血管提供种子细胞。方法:全麻下取兔的主动脉,分别采用酶消化法和组织块贴壁法培养血管内皮细胞和平滑肌细胞,并传代、免疫组化鉴定及倒置显微镜下形态学观察。结果:成功地培养出血管内皮细胞和平滑肌细胞并传代。倒置显微镜下血管内皮细胞呈“鹅卵石”形态,平滑肌细胞呈典型的“峰-谷”状。免疫组化鉴定内皮细胞Ⅷ因子(+),平滑肌细胞α-肌动蛋白(+)。结论:所培养的血管内皮细胞和平滑肌细胞为研究组织工程血管提供了细胞来源。     

组织工程中种子细胞粘附的研究进展

1987年美国麻省理工学院化学工程师Rober Langer与波士顿麻省大学医院医生Josephe P Vacanti等Ⅲ共同提出组织工程学(tissue engineering)的概念，并与1988年由美国国家科学基金会的一个专门工作小组对组织工程的内涵做了如下界定：应用组织工程学和生命科学的原理和方法来解释正常和病理的哺乳动物组织器官的结构功能关系，并且发展具有生物活性的人工替代物来恢复、维持或提高组织器官的     

软骨组织工程种子细胞的调控因素

研究软骨组织工程种子细胞生命活动的状况并使其大量扩增，是利用组织工程学修复软骨缺损的基础，但要使其分化为软骨细胞并维持正常表型则受到众多复杂因素的调控。综述细胞因子、应力、微重力及其他一些重要因素对软骨工程种子细胞的调控影响。     

软骨组织工程种子细胞的调控因素

研究软骨组织工程种子细胞生命活动的状况并使其大量扩增,是利用组织工程学修复软骨缺损的基础,但要使其分化为软骨细胞并维持正常表型则受到众多复杂因素的调控。综述细胞因子、应力、微重力及其他一些重要因素对软骨工程种子细胞的调控影响。     

软骨组织工程中种子细胞的应用

成人软骨组织中没有血管和神经,因此受伤后自行修复的能力有限。组织工程技术的出现使修复甚至再造软骨成为可能。但实现组织工程化软骨的重要条件之一是必须获得大量的     

关节软骨组织工程修复中的种子细胞

目的:阐述关节软骨组织工程修复的种子细胞及其应用的研究现状,对其来源、体外扩增、以及基因修饰进行了探讨,并提出其进一步应用的前景。资料来源:检索PubMed1994-01/2006-04与关节软骨组织工程修复的种子细胞相关的文章,检索词为“cartilage,joint,tissue engineering,stem cell,cell culture,gene modification”,并限定语言种类为英语。其他文章经清华同方和维普数据库检索具体的杂志名称和文章题名收集。资料选择:对收集到的资料进行初筛,选择与关节软骨组织工程修复的种子细胞相关的文章,筛除明显不符合原文的文章,对剩余的文献手工检索查找全文。资料提炼:共收集相关文章89篇,纳入34篇,排除55篇。资料综合:用于构建人工软骨组织的细胞主要有自体或异体软骨细胞、骨膜和软骨膜细胞、间充质干细胞以及胚胎干细胞,其均可于体外经特定的培养体系进行有效的培养和扩增,在一定条件下还可以经不同的策略和方法进行基因修饰,从而修复关节软骨缺损。结论:种子细胞以其自身多方面的特点在组织工程技术修复关节软骨缺损中发挥重要作用。     

软骨组织工程种子细胞来源的最新研究进展

耳、鼻、喉和气管主要由软骨构成,软骨组织工程技术的进展为这些器官的修复开辟了新的途径。软骨细胞是软骨组织工程修复重建的原动力。在体外培养过程中,随着传代次数的增多,软骨细胞容易失去表型,丧失形成软骨的能力。组织工程软骨形成的重要条件之一是必须获得大量的有功能和活力的种子细胞,因此寻求广泛的种子细胞来源是软骨组织工程修复首先需要解决的关键问题。理想的软骨种子细胞必须具备取材方便、体外有较强的繁殖和定向分化能力等优点。     

组织工程动脉血管平滑肌种子细胞的构建

目的:为组织工程动脉提供种子细胞,从而构建出组织工程化动脉。方法:实验于2004-03/05在首都医科大学宣武医院外科实验室完成。采用组织贴块法培养成年狗主动脉平滑肌细胞,并进行细胞传代、鉴定及形态学观察。结果:通过严格取材即可获得高纯度培养的平滑肌细胞,其形态学特征明显,但随培养代次的增加,其增殖能力及形态出现改变。结论:成年狗主动脉平滑肌细胞可作为动脉组织工程的种子细胞,其增殖能力有待于进一步加强。     

组织工程动脉血管平滑肌种子细胞的构建

目的：为组织工程动脉提供种子细胞。从而构建出组织工程化动脉。方法：实验于2004—03／05在首都医科大学宣武医院外科实验室完成。采用组织贴块法培养成年狗主动脉平滑肌细胞，并进行细胞传代、鉴定及形态学观察。结果：通过严格取材即可获得高纯度培养的平滑肌细胞。其形态学特征明显，但随培养代次的增加，其增殖能力及形态出现改变。结论：成年狗主动脉平滑肌细胞可作为动脉组织工程的种子细胞，其增殖能力有待于进一步加强。