转化生长因子-β与腹膜纤维化的研究进展

转化生长因子 β(transforminggrowthfactorbeta ,TGF β)是一种强效的致纤维化因子 ,在腹膜纤维化的形成过程中起重要的作用     

结缔组织生长因子与腹膜纤维化

腹膜透析（peritoneal dialysis，PD）是终末期肾脏病的主要替代疗法之一，而腹膜纤维化是长期腹膜透析常见的并发症。近来研究显示，由腹膜纤维化导致的腹膜超滤功能丧失逐渐成为腹膜透析失败的主要原因。目前认为转化生长因子（Transforming growth factor，TGF-β）和结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）与腹膜纤维化密切相关。其中，TGF-β在腹膜纤维化形成中起关键的调控作用，但由于TGF-β是多功能细胞因子，正常表达时具有抑制炎症和细胞增殖等作用，因此完全拮抗TGF-β的负面效应也可能会带来不良反应.CTGF是TGF-β下游的重要介质，主要介导TGF-β的负效应。因此将CTGF做为靶点，为防治腹膜纤维化提供了新的思路。     

三七总皂苷对腹膜纤维化大鼠转化生长因子-β_1的影响

目的：探讨三七总皂苷对腹膜纤维化大鼠转化生长因子-β1的影响。方法：21只惠斯脱（WISTAR）大鼠分成三组：（1）对照组（n=7）：每日腹腔内加入一次生理盐水100 ml/kg;（2）模型组（n=7）：每日腹腔内加入一次4.25%葡萄糖腹透液100 ml/kg,同时在第1、3、5、7天联合脂多糖腹腔注射,按0.6 mg/kg;（3）试验组（n=7）：每日腹腔内加入一次4.25%葡萄糖腹透液100 ml/kg同时每天加入一次三七总皂苷35 mg/kg,在第1、3、5、7天联合脂多糖腹腔注射,按0.6 mg/kg;透析4周后行1 h腹膜平衡试验,并分别测定透析液和血浆尿素氮的比值（D/P）、葡萄糖重吸收值（D1/D0）、超滤容积,透析液中白细胞总数、用ELISA方法行腹膜透析液转化生长因子-β1（TGF-β1）。结果：模型组、试验组与对照组相比较,超滤量均显著下降（P〈0.05）;而透析液中TGF-β1、表达均显著增多,腹膜组织增厚也均显著增多（P〈0.05）。试验组与模型组比较,其超滤量明显改善（P〈0.05）,而透析液中TGF-β1显著减少（P〈0.05）,腹膜组织增厚明显改善（P〈0.05）。结论：PNS可以通过下调腹膜分泌TGF-β1,从而改善试验性腹膜纤维化,在一定程度上保护腹膜功能。     

RhoA-Rock信号通路在转化生长因子β1诱导大鼠腹膜间皮细胞转分化中的作用

目的　探讨RhoA-Rock信号通路在转化生长因子β1（TGF-β1）诱导大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）转分化中的作用。 方法　体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞,静止24 h后,采用随机数字表法随机分为以下4组：正常对照组、TGF-β1（10 μg/L）刺激组、TGF-β1（10 μg/L）＋Y-27632（Rock特异性抑制剂,10 μmol/L）组（Y-27632预处理2 h）、Y-27632（10 μmol/L）组。用TGF-β1（10 μg/L）刺激RPMC不同时间,观察α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,E钙黏素（E-cadherin）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）的表达。RT-PCR法检测E-cadherin、α-SMA 和ColⅠmRNA表达。Western印迹法检测RhoA（包括总RhoA及活化的RhoA）、E-cadherin、α-SMA、ColⅠ和波形蛋白（vimentin）表达。活化的RhoA由膜蛋白提取试剂盒提取。 结果 （1）TGF-β1（10 μg/L）刺激RPMC能诱导RhoA活化,于10 min开始出现活性升高,为对照组的（2.57±0.52）倍（P < 0.05）;1 h达高峰,为对照组的（4.35±0.41）倍（P < 0.05）。（2）TGF-β1（10 μg/L）刺激RPMC能导致E-cadherin mRNA和蛋白表达下调,α-SMA、ColⅠmRNA和蛋白表达上调,呈时间依赖性。（3）Rock特异性抑制剂Y-27632能显著下调α-SMA、ColⅠmRNA的表达,较TGF-β1刺激组各降低了53.8%和55.7%（均P < 0.05）,并且能下调α-SMA、ColⅠ和vimentin蛋白的表达,较TGF-β1刺激组分别降低了42.6%、60.1%和58.1%（均P < 0.05）,但不能上调E-cadherin mRNA和蛋白的表达。 结论　TGF-β1可通过RhoA-Rock信号通路介导大鼠腹膜间皮细胞转分化,抑制该通路可作为防治腹膜纤维化的潜在靶点。     

转化生长因子-β对结核性胸膜纤维化作用的研究进展

【摘要】〓胸膜纤维化是结核性胸膜炎疾病进展中一个重要的病理改变。目前大多数研究集中于抗结核药物治疗和胸膜纤维板剥脱手术,对于结核性胸膜纤维化机制的研究相对较少。但实际上,胸膜纤维化对该疾病的预后更具有指导意义。已有研究发现,转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)与结核性胸膜纤维化的关系密切,本文就TGF-β在结核性胸膜纤维化中的作用予以综述,以进一步提高对结核性胸膜纤维化的理论认识。     

腹膜透析相关性腹膜纤维化及治疗

腹膜透析是终末期肾病的重要替代疗法，其所导致的腹膜纤维化也越来越引起人们的重视。本文就腹膜纤维化的机制及治疗作一综述。     

腹膜透析对转化生长因子β1在残存肾中表达的影响

探讨清除循环中毒素后生长因子和残存肾小球的改变。方法采用分子杂交技术和组织病理分析方法在肾次全切除的残存肾大鼠模型上研究腹膜透析（ＰＤ）对转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）ｍＲＮＡ在残存肾中表达的影响和肾小球硬化的变化。分模型组和ＰＤ组，第８周ＰＤ组开始作腹膜透析至第１２周。分别在第７周和１２周各组杀检６只作肾病理检查（ＨＥ．ＰＡＳ染色）和ＴＧＦ－β１ｃＤＮＡ缝隙点样杂交。结果在实验的第７周两组间肾小球硬化指数（ＧＳＩ）及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达均无显著性差异。第十二周，ＰＤ组的ＧＳＩ及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达均显著低于模型组。ＧＳＩ改变程度与ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达丰度变化呈明显正相关（ｒ＝０．６５Ｐ＜０．０５）。结论腹膜透析可明显减少ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达并延缓残存肾小球的硬化     

腹膜透析相关性腹膜纤维化及治疗

腹膜透析是终末期肾病的重要替代疗法,其所导致的腹膜纤维化也越来越引起人们的重视。本文就腹膜纤维化的机制及治疗作一综述。     

转化生长因子β1对人腹膜间皮细胞结缔组织生长因子的影响

目的 观察转化生长因子(TGF)β1对人腹膜间皮细胞(HPMCs)结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA和蛋白表达影响并探讨其可能的机制。方法 原代培养HPMCs，用5ng／ml TGF-β1刺激第3代细胞，采用免疫组织化学染色、Western印迹、ELISA和RT-PCR等方法，观察CTGF的mRNA和蛋白表达、纤连蛋白(FN)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的mRNA和蛋白表达，细胞内磷酸化Smad2／3(p-Smad2／3)的蛋白表达以及在细胞内的迁移。结果 (1)刺激组CTGF的mRNA表达与对照组比均显著增加，其中48h为峰值；对照组细胞内仅有少量CTGF的蛋白表达，在TGF-β1刺激后24h表达明显增加，48h达峰值。(2)刺激组FN和ColⅠ的mRNA表达与对照组比均呈时间依赖性显著增加，上清液FN和细胞内ColⅠ的蛋白表达与对照组比也呈时间依赖性显著增加。(3)对照组细胞内几乎不表达p-Smad2／3(阳性细胞率3％)，在刺激后15min表达增加(29％)，细胞着色主要分散在胞质中；1h增加最明显(84％)，细胞着色加深且集中在胞核及周边；2h明显回落(37％)，细胞着色转淡并又分散至胞质中。结论TGF-β1在致腹膜纤维化过程中诱导了HPMCs内CTGF的转录和蛋白表达，可能与TGF-β1激活了HPMcs内Smad信号通路有关。     

转化生长因子β1与肝纤维化

肝纤维化是以包括胶原在内的细胞外基质(ECM)的过度积聚,是多种原因引起的慢性肝病.转化生长因子-β1(TGF-β1)是肝纤维化最关键的因子,与肝纤维化发生发展、ECM代谢关系最为密切.大量研究证明TGF-β1在肝纤维化形成、发生及发展中有着重要的作用.就TGF-β1与肝纤维化的关系作—综述.     

转化生长因子β1及其信号蛋白在大鼠急性腹膜炎模型腹膜组织中的表达及作用

目的 通过观察转化生长因子β1(TGF-β1)及其信号蛋白Smads的表达水平和活性状况,探讨其在细菌性腹膜炎介导腹膜纤维化过程中的可能作用。方法 通过腹腔注射E.coli ATCC25922造成大鼠急性细菌性腹膜炎的动物模型。应用激光共聚焦显微镜检测TGF-β1、p-Smad2／3和Smad7在大鼠腹膜组织的表达和活化,以单位面积的平均荧光强度半定量地分析其蛋白水平的表达及动态变化。应用RT-PCR的方法分析TGF-β1、Smad3和Smad7在基因水平的表达。结果 E.coli腹腔注射后大鼠血白细胞显著降低而腹水白细胞显著升高。组织学显示间皮下层水肿样增厚,脏层和壁层腹膜大量炎症细胞灶性浸润。免疫荧光结果显示TGF-β1和p-Smad2／3广泛表达于炎症细胞、间皮细胞和血管内皮细胞。半定量的免疫荧光结果显示TGF-β1、p-Smad2／3和Smad7的表达都呈双峰样上调,但Smad7的整体表达水平一直很低。TGF-β1、Smad3和Smad7 mRNA的表达水平与其蛋白表达水平基本一致。结论炎症状态下腹膜组织TGF-β1／Smad信号通路显著上调和激活。腹膜间皮细胞的活化以及其TGF-β1和p-Smad2／3的高表达,抑制性信号蛋白Smad7的低表达,可能参与了腹膜炎介导腹膜纤维化的过程。     

姜黄素调控TGF-β1/Smad信号通路改善大鼠腹膜透析相关腹膜纤维化及机制研究

目的 探讨姜黄素对大鼠腹膜透析(peritoneal dialysis, PD)相关腹膜纤维化(peritoneal fibrosis, PF)的影响及可能作用机制。方法 随机选取10只雄性Wistar大鼠作为正常组(生理盐水),剩余大鼠随机分为模型组(生理盐水)及姜黄素低(15 mg·kg^-1·d^-1)、中(30 mg·kg^-1·d^-1)、高(60 mg·kg^-1·d^-1)剂量组,每组各10只,给药同时腹腔内注射4.25%葡萄糖PD溶液(100 mL/kg),连续30 d。4 h腹膜平衡试验评估腹膜功能;测量腹膜厚度;腹膜组织行HE和Masson染色观察腹膜病理变化;ELISA法检测腹膜组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)及白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)水平;蛋白质印迹法检测腹膜组织中转化生长因子-β1(transforming...     

肾小管间质纤维化中转化生长因子β1的表达特征

目的 研究大鼠肾小管间质纤维化中转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）的表达特征。方法 以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化实验模型,应用免疫组织化学（组化）、逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、原位杂交及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测６只正常及３０只模型大鼠肾组织ＴＧＦ－β１蛋白及基因表达。结果 ６只正常大鼠肾组织ＴＧＦ－β１主要位于皮髓交界处肾小管上皮细胞,ＴＧＦ－β１免疫组化平均阳性表达率为（     

上调Smad7表达对腹膜纤维化大鼠腹膜间皮细胞转分化的影响

目的探讨上调TGF-β抑制性信号蛋白Smad7表达对大鼠腹膜纤维化模型腹膜间皮细胞转分化的影响。方法30只160～170 g SD雄性大鼠.随机分为4组：正常对照组（n=6）;腹膜纤维化模型组（n=12）：予腹腔注射4.25%腹膜透析液与脂多糖;空载体组（n=6）：模型成功后转染pTRE与pEFpurop-Tet-on质粒;Smad7治疗组（n=6）：模型成功后转染pTRE- m2 Smad7与pEFpurop-Tet-on质粒。第14、28天杀检大鼠,取脏层腹膜组织,用RT-PCR方法检测TGF-B1、α-SMA、E-钙黏蛋白（E-cadherin）基因的表达;用Western杂交或间接免疫荧光的方法检测TGF-β1、Smad7、磷酸化（p）-Smad2/3、α-SMA、E-cadherin的表达。结果与正常对照组比较,模型组TGF-β1、p-Smad2/3及α-SMA的表达显著上调（p〈0.01）;E-cadherin的表达显著下调（P〈0.01）。与模型组、空载体组比较,Smad7治疗组p-Smad2/3及α-SMA表达水平显著下调（P〈0.01）;E-cadherin的表达显著上调,但仍低于正常对照组（P〈0.05）。结论Smad7可通过抑制受体调控信号蛋白Smad2/3的活化,阻止高糖透析液及脂多糖介导的腹膜间皮细胞转分化,从而防止腹膜纤维化的发生和发展。     

丹参对实验性大鼠腹膜纤维化病变的影响

目的：探讨丹参对实验性大鼠腹膜纤维化病变的影响和可能的作用机制。方法：采用4.25%含糖透析液＋脂多糖致腹膜纤维化模型。将大鼠随机分成3组：对照组、模型组、丹参组。模型组每日腹腔内直接注射4.25%含糖透析液20ml,丹参组每日腹腔内直接注射4.25%含糖透析液20ml和丹参粉剂1g/kg,两组都在第3、5、7天予脂多糖（LPS）0.6mg/kg体重腹腔注射;对照组每日腹腔注射生理盐水20ml。30d后行4h腹膜平衡试验,处死各组大鼠,检测腹膜功能;留取壁层腹膜组织做HE及Masson染色,并留取血液和腹透液做ELISA法测转化生长因子-β。结果：模型组与对照组、丹参组相比超滤量和D/D0Glu明显减少,D/Pcr明显增加;模型组与对照组、丹参组相比,壁层腹膜厚度明显增厚,新生小血管明显增多,TGF-β的浓度也明显升高;差异有统计学意义。结论：丹参能有效的防治腹膜纤维化的进程。     

转化生长因子β与勃起功能的研究进展

转化生长因子β(TGF-β)是一种多功能细胞因子。其中转化生长因子β1与组织纤维化密切相关。血管性勃起功能障碍是由于海绵体结构改变所致。转化生长因子β1能增加海绵体平滑肌细胞胶原的含量,改变海绵体平滑肌与结缔组织的比例,从而导致勃起功能障碍(ED)。随着对分子生物学的深入研究,转基因疗法将成为临床上治疗勃起功能障碍的有效方法之一。     

转化生长因子—β在腹膜愈合中的作用

众多的生长因子和细胞因子与参与腹膜愈合的过程，其中以转化生长因子－β－的作用尤为重要，它对成纤维细胞和炎性细胞有趋化功能，促进细胞增殖，分化和血管发生，也调节细胞外基质多种在分的表达，腹膜损伤时，伤口组织和腹腔液中有转化生长因子－β高表达，应用其反义寡核苷酸可阻断巨噬细胞的转化生长因子－β－表达，提示这一技术有望应用于腹膜粘连的防治。     

TGF-β/Smad信号通路与腹膜纤维化

腹膜纤维化是长期腹膜透析患者最常见的并发症，转化生长因子-β（TGF—β）在此过程中发挥关键的作用。近年来研究发现丝／苏氨酸激酶受体（Smad）蛋自家族是TGF—β细胞内信号转导的重要分子，对TGF-β／Samad信号通路的研究为了解腹膜纤维化的分子机制与防治策略提供了新的思路。     

罗格列酮抑制大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化中TGF-β1和CTGF的表达

目的：观察罗格列酮（ RGZ）对腹膜透析相关性腹膜纤维化中TGF-β1和CTGF的表达的影响。方法：36只SD大鼠随机分为4组：空白对照组、模型组、低浓度RGZ组、高浓度RGZ组（每组n＝9）。除空白对照组外其余大鼠均置入腹透管,除空白组外其余组均采用高糖腹膜透析液＋红霉素制作慢性腹膜透析腹膜纤维化模型。低浓度RGZ组、高浓度RGZ组分别采用1．5 mg/kg RGZ、15 mg/kg RGZ治疗。透析8周后处死大鼠,取壁层腹膜行H-E及Masson染色,观察大鼠腹膜形态;免疫组化检测腹膜转化生长因子（ TGF-β1）和结缔组织生长因子（ CTGF）的表达情况。结果：与空白对照组相比,模型组间皮下基质增厚,血管增生及炎症细胞浸润明显增加（ P﹤0．05）;TGF-β1、CTGF表达水平明显增高（ P﹤0．05）;RGZ能改善上述病理改变,下调TGF-β1、CTGF表达（P﹤0．05）;两种剂量间差异无统计学意义（P﹥0．05）。结论：在大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化模型中加用罗格列酮能有效抑制TGF-β1及CTGF表达。     

丝裂素活化蛋白激酶信号通路在人腹膜纤维化的作用

目的 探讨丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对转化生长因子(TGF)β1致人腹膜间皮细胞(HPMC)高表达纤连蛋白(FN)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI)1的调控作用。方法 采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)评估TGF-β1和细胞外信号调节激素(ERK)及p38阻断剂对HPMC的增殖作用。采用酶联免疫双抗夹心法检测HPMC培养液中FN、PAI-1的蛋白质水平。采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HPMC细胞内FN、PAI-1mRNA的表达。结果 (1)TGF-β1能刺激HPMC增殖(P<0.05),且呈剂量时间依赖性,加ERK阻断剂组或p38阻断剂组较TGF-β1组有明显抑制作用(P<0.01)。(2)TGF-β1能引起HPMC FN、PAI-1蛋白水平显著增高(P<0.01);加ERK阻断剂组或p38阻断剂组能使上述高表达受到抑制(P<0.01)。(3)TGF-β1能使HPMC FN、PAI-1mRNA表达上调,加ERK阻断剂组或p38阻断剂组能使上调水平受到抑制。结论 MAPK对TGF-β1致人腹膜间皮细胞高表达FN和PAI-1起调控作用,为临床防治腹膜纤维化提供新的思路。