乳腺癌APC/β-catenin信号通路变化的研究

目的:研究乳腺癌发生、发展过程中APC/β-catenin信号通路的变化.方法:应用PCR-SSCP、微卫星标记、甲基化特异性PCR方法检测乳腺癌和癌旁正常乳腺组织中β-catenin基因外显子3和APC基因突变密集区突变、APC基因杂合缺失(LOH)和启动子1A区甲基化状态,用RT-PCR检测APC基因mRNA表达 ;并用免疫组织化学法检测APC和β-catenin蛋白表达.结果:乳腺癌中β-catenin异常表达率为53.9%,β-catenin异常表达与乳腺癌组织学分级、TNM分期及腋淋巴结转移呈正相关,未发现β-catenin基因突变.乳腺癌中APC蛋白表达阴性率为47.6%,APC蛋白表达阴性同TNM分期和β-catenin异常表达呈正相关,未发现APC基因突变.APC基因启动子1A区甲基化率为36.8%,甲基化与mRNA表达减少、蛋白表达缺失及TNM分期呈正相关.APC基因LOH发生率达32.6%,LOH和甲基化呈正相关.结论:在乳腺癌发生、发展过程中APC/β-catenin通路出现异常改变.β-catenin蛋白异常表达不是该基因突变所致,而是由于APC蛋白表达缺失导致破坏复合体功能障碍所致.乳腺癌中APC基因突变非常罕见,该基因LOH和启动子1A区甲基化是该基因失活的主要机制,是蛋白表达缺失的原因.     

乳腺癌APC基因突变和杂合缺失及甲基化的研究

目的:探讨结肠腺瘤性息肉病基因(adenomatous polyposis coli, APC)基因在乳腺癌发生发展中的作用.方法: 应用PCR-SSCP、微卫星分析、甲基化特异性PCR和RT-PCR方法检测乳腺单纯性增生、非典型增生和癌组织中APC基因突变密集区突变状况、APC基因杂合性缺失(LOH)、启动子1A区甲基化状态以及mRNA表达.结果: 乳腺癌组织中未发现APC基因突变.乳腺癌组织中APC基因启动子1A区甲基化率为36.8%,甲基化与TNM分期呈正相关,P《0.05.乳腺癌组织中非甲基化组织APC mRNA表达为0.55±0.09,甲基化组织表达为0.21±0.14,两者比较差异有统计学意义,P《0.05.APC基因LOH发生率达32.6%,LOH和甲基化呈正相关,P《0.05.结论: 乳腺癌发生发展过程中APC基因出现异常改变.乳腺癌组织中APC基因失活的机制不是基因突变,而是该基因LOH和启动子1A区甲基化.     

APC、β-catenin及其意义和c-myc在大肠癌中的表达

摘要：目的探讨APC、β-catenin和c-myc在大肠癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化方法检测30例正常大肠黏膜、30例大肠腺瘤、10例大肠腺瘤恶变及50例大肠癌组织中APC、pcatenin和c-myc蛋白的表达情况。结果大肠癌和大肠腺瘤恶变APC阳性率分别为44．0％、40．0％，显著低于大肠腺瘤（86．7％）和正常大肠黏膜（100％）（P〈0.01）。大肠癌、大肠腺瘤恶变和大肠腺瘤β-catenin胞浆和（或）胞核异位表达率分别为62．0％、50．0％、30．0％，显著高于正常大肠黏膜（0）（P〈0.01），大肠癌8Icatenin异位表达率显著高于大肠腺瘤（P〈0.01）。大肠癌、大肠腺瘤恶变、大肠腺瘤c-myc阳性率分别为56．0％、60．0％、46．7％，显著高于正常大肠黏膜（0）（P〈0.01）。大肠癌中8-catenin膜表达缺失率为：46．0％，显著高于大肠腺瘤（10．0％）和正常大肠黏膜（0）（P〈0.01），且与大肠癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期有关。APC蛋白表达与大肠癌组织分化程度有关。大肠癌中8Icatenin异位表达与c-myc阳性表达呈正相关关系（r=0．63，P〈0.01），而与APC阳性表达呈负相关关系（r=一0．39，P％0．05）。结论APC失表达和（或）pcatenin异位表达，激活癌基因c-myc过表达与大肠癌的发生、发展密切相关，可能是大肠癌发生的早期事件；pcatenin膜表达缺失与大肠癌的侵袭、转移有关。     

β-catenin基因在乳腺癌中的表达和突变

 目的　探讨β-catenin基因在乳腺癌中的表达和突变情况。方法　应用免疫组织化学SP法检测119例乳腺癌、72例乳腺腺病和40例正常乳腺组织中β-catenin的表达,分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。应用PCR和基因测序的方法检测44例乳腺癌β-catenin外显子3的突变情况。结果　40例正常乳腺组织中β-catenin在细胞膜中强表达。乳腺癌β-catenin异常表达率78.15 %（93／119）明显高于乳腺腺病44.44 %（32／72）,组间比较差异有统计学意义（P＜0.01）。β-catenin异常表达与淋巴结转移相关。44例乳腺癌组织中未检测到β-catenin基因外显子3的突变,β-catenin的异常表达率为77.30 %（34／44）。结论　β-catenin异常表达可作为评估乳腺癌转移预后、指导治疗的指标。乳腺癌组织中β-catenin异常表达不是由β-catenin基因突变所致,可能存在其他机制,有待于进一步研究。     

乳腺癌APC基因甲基化状况及其蛋白表达

背景与目的:结肠腺瘤性息肉病基因(adenomatous polyposis coli,APC)蛋白表达产物是Wnt信号转导途径重要组成部分,该基因失活使β-catenin蛋白降解障碍,从而使Tcf/Lef激活,引起基因异常转录,最终产生癌变.启动子区甲基化是导致抑癌基因转录失活的重要机制.本研究探讨乳腺癌APC基因启动子1A区甲基化状态与其蛋白表达的关系,并分析APC基因异常甲基化与乳腺癌临床病理特征的关系.方法:应用甲基化特异性PCR和免疫组织化学方法检测76例乳腺癌及相应癌旁乳腺组织中APC基因启动子1A区甲基化状态以及蛋白表达.结果:癌旁乳腺组织中均未发现APC基因启动子1A区甲基化,乳腺癌组织中APC基因启动子1A区甲基化率为36.8%.癌旁乳腺组织中APC蛋白阳性率为100%,乳腺癌中APC蛋白阳性率为52.4%.乳腺癌组织中APG基因甲基化与APC蛋白表达呈负相关(r=-0.351,P＜0.05),与TNM分期呈正相关(r=0.335,P＜0.05).结论:乳腺癌发展过程中APC基因启动子1A区出现异常甲基化,是导致该蛋白表达缺失的主要原因,是导致该基因失活的重要机制之一.     

韧带样型纤维瘤病Wnt通路中APC/β-catenin基因异常

背景与目的：APC和β—catenin基因作为Wnt通路上重要的成员．其异常在肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用。本研究分析了韧带样型纤维瘤病中APC和β-eatenin基因突变．探讨Wnt通路中Ape／β-atenin基因异常在肿瘤发生中的作用。方法：采用PCR—DHPLC—Sequence的方法分析韧带样型纤维瘤病中APC和β-catenin基因的突变．免疫组织化学EnVision^＋两步法检测β-catenin、cyelinDl和cmyc蛋白的表达。结果：APC基因发生碱基置换突变，均为体系突变．突变率为26．1%（18／69），突变不产生截短APC蛋白。β-catenin基因发生碱基转换．突变率为18．8％（13／69），导致第3外显子的eodon41处苏氨酸磷酸化位点转变为丙氨酸。β-atenin蛋白异常表达阳性率为47．8％（33／69）．在APC、β-eatenin基因突变阳性和阴性病例间．其异常表达阳性率没有显著差异。β-catenin异常表达阳性病例的c-myc蛋白阳性率（69．7％，23／33）显著高于阴性病例的c-myc阳性率（22．2％．8／36）．两者之间有正相关关系（Pearson＇s r=0．477）．而cyelinD1的表达没有显示出这种相关性和差异。结论：韧带样型纤维瘤病中APC、β-catenin基因存在体系突变．β-eatenin蛋白存在异常表达。可能引起c-myc表达增加。韧带样型纤维瘤病中Wnt通路存在异常．可能在肿瘤发生中起重要作用。     

β-catenin、APC及C-myc与大肠癌的关系

大肠癌是世界上高发恶性肿瘤之一,欧美国家大肠癌的发病率排在恶性肿瘤的第2位,在我国为第4-6位,近年更有上升趋势。目前倍受关注的APC-β-catenin-Tcf-4通路在大肠癌的发生中起着重要的作用,其致癌的关键是β-catenin降解障碍致使细胞质内游离的β-catenin积聚,并进入到细胞核     

食管癌APC／MCC,DCC的基因杂合丢失的研究

目的 研究ＡＰＣａｄｅｎｏｍａｔｏｕｓ ｐｏｌｙｐｏｓｉｓ ｃｏｌｉ）,ＭＣＣ（ｍｕｔａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ和ＤＣＣ（ｄｅｌｅｔｅｄ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｒ）基因在人食管癌组织中的变化。方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及限制性片段长度多态现象（ＲＦＬＰ）法检测了４６例食管癌组织中ＡＰＣ、ＭＣＣ和ＤＣＣ基因的杂合缺失。结果 ＡＰＣ、ＭＣＣ和ＤＣＣ位点的杂     

乳腺癌患者外周血清中APC基因启动子甲基化异常的检测及其意义

背景与目的:检测肿瘤患者外周血中肿瘤相关标志物是当前肿瘤研究的热点之一,恶性肿瘤患者外周血中存在游离的肿瘤相关DNA已引起肿瘤学界的极大关注,人们曾在多种肿瘤患者血清中发现与原发肿瘤相同的DNA变异.本研究以APC(adenomatous polyposis coli)基因启动子甲基化作为肿瘤标志物,探讨乳腺癌患者外周血清中游离的肿瘤相关DNA与肿瘤组织及临床病理参数的相关性.方法:采用甲基化特异性PCR(methylation specific-PCR,MSP)方法,分别检测84例乳腺癌组织、癌旁正常腺体组织及外周血清中游离DNA APC基因启动子甲基化状况.结果:84例乳腺癌组织APC基因启动子甲基化频率为45.2%(38/84),相应外周血清中同样DNA变异阳性检出率为31.0%(26/84).外周血清中DNA甲基化变异与肿瘤组织的甲基化状况显著相关(r=0.977,P=0.002).检测外周血清中APC基因甲基化的敏感性为68.4%,特异性为97.8%.肿瘤组织及外周血清中游离DNA甲基化异常与临床分期、病理类型、肿块大小及受体状况无相关性(P＞0.05).肿瘤组织未检测到甲基化患者的血清中及健康人血清中均未检测到该基因甲基化变异.结论:乳腺癌患者外周血清中肿瘤相关DNA甲基化与肿瘤组织中相同基因的变异显著相关.     

大肠癌组织APC／MCC和DCC基因杂合缺失的研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，并配合限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析，对４１例大肠癌组织ＡＰＣ／ＭＣＣ和ＤＣＣ基因的杂合缺失（ＬＯＨ）进行研究。ＡＰＣ基因ＬＯＨ率为２８．０％（７／２５），ＭＣＣ基因ＬＯＨ率为３６．４０％（８／２２），两者综合分析ＬＯＨ率为３８．９％（１４／３８）。ＤＣＣ基因ＬＯＨ率为５５．３％（２１／３８）。ＤＣＣ基因在有淋巴结转移组的ＬＯＨ率（８０．０％），显著高于无淋巴     

抑癌基因PTEN的突变缺失与乳腺癌

PTEN基因是具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，大量研究表明，乳腺癌的发生常伴有PTEN蛋白表达的缺失或减弱，提示该基因的突变失活与乳腺癌的发生、发展及预后密切相关。现简要综述PTEN与乳腺癌关系的研究进展。     

β-catenin在NSCLC中的表达和突变研究

目的 探讨β-连环素(β-catenin)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达和突变，及其与各临床病理因素和预后的关系。方法 采用免疫组化检测120例NSCLC标本β-catenin的表达情况，采用Western Blotting和直接测序法检测53例新鲜NSCLC标本β-catenin蛋白表达和基因突变情况。结果 高、中分化和低分化NSCLC中，β-catenin的异常表达率分别为69．2％和92．7％，差异有显著性(P=0．003)。有、无淋巴结转移NSCLC中β-catenin异常表达率分别为86．5％和69．6％，差异有显著性(P=0．044)。对53例肺癌及其自身正常肺组织Western Blotting检测结果进行灰度测定和分析，发现NSCLC中β-catenin的含量明显高于正常肺组织(t=2．935，P=0.005)。扩增53例标本β-catenin基因第3外显子进行直接测序未发现突变。结论 β-catenin的异常表达率与NSCLC的分化程度和有无淋巴结转移相关。β-catenin基因第3外显子的突变不是NSCLC中β-catenin蛋白异常表达的主要原因。     

乳腺癌组织β-catenin表达及与预后关系的分析

目的:分析β-catenin在乳腺癌组织中的表达特点及与预后的关系,以寻找新型的乳腺癌预后标志。方法:用组织芯片及免疫组织化学的方法检测β-catenin在213例乳腺癌组织中的表达,采用ROC曲线确定β-catenin表达高低的分界值,采用单变量及多变量分析β-catenin表达与乳腺癌预后的关系。结果:213例乳腺癌患者中,71.4%(152/213)为β-catenin高表达,28.6%(61/213)为β-catenin低表达;单变量分析显示,β-catenin高表达的患者总生存率(P=0.003)、无进展生存率(P=0.040)及无远处转移生存率(P=0.024)均低于β-catenin低表达的患者;多变量分析显示,β-catenin与乳腺癌患者总生存率(RR=5.961,95%CI:0.238～0.855,P=0.015)和无远处转移生存率(RR=3.888,95%CI:0.269～0.996,P=0.049)相关。结论:乳腺癌患者中β-catenin呈高表达,且表达越高预后越差。β-catenin可作为判断乳腺癌预后的一个新型、独立的指标。     

Wnt/β-catenin信号通路在肿瘤耐药中的研究进展

Wnt/β-catenin信号通路参与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,并且诱导肿瘤的耐药,是介导组织癌变的关键通路.体外实验表明,靶向抑制Wnt/β-catenin能够增强化疗药物的敏感性.因此对Wnt/β-catenin介导肿瘤耐药的深入研究将为肿瘤的治疗提供可能途径和潜在靶点.     

食管癌APC/MCC、DCC基因杂合丢失的研究

目的研究ＡＰＣ（ａｄｅｎｏｍａｔｏｕｓｐｏｌｙｐｏｓｉｓｃｏｌｉ）、ＭＣＣ（ｍｕｔａｔｉｏｎｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ）和ＤＣＣ（ｄｅｌｅｔｅｄｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｒ）基因在人食管癌组织中的变化。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及限制性片段长度多态现象（ＲＦＬＰ）法检测了４６例食管癌组织中ＡＰＣ、ＭＣＣ和ＤＣＣ基因的杂合缺失。结果ＡＰＣ、ＭＣＣ和ＤＣＣ位点的杂合性丢失的发生频率分别为２９．０％（９／３１）、３３．３％（８／２４）和３２．４％（１２／３７）。然而,这些基因位点的杂合性丢失与肿瘤病理学类型、肿瘤的大小、浸润性及转移性无统计学的显著相关性（Ｐ＞０．０５）。结论ＡＰＣ、ＭＣＣ和ＤＣＣ基因位点的杂合性丢失在一定程度上是食管癌基因改变的普遍现象,并可能在肿瘤的发生中起作用。     

散发性结直肠腺癌APC、β-catenin基因的表达及其意义

目的探讨APC、β-catenin在散发性结直肠肿瘤发生、发展中的作用和意义。方法采用SP免疫组化方法检测55例散发性结直肠腺癌、33例结直肠腺瘤组织标本中APC、β-catenin基因蛋白产物的表达水平。结果APC基因蛋白产物在结直肠腺癌组织中阳性表达率(23.6%)明显低于正常结直肠黏膜组织(86.7%)和结直肠腺瘤组织(72.7%),差异有显著性(P<0.05)。结直肠腺瘤、结直肠腺癌组织中β-catenin阳性表达率(69.7%、81.8%)明显高于正常结直肠黏膜组织(0%),差异有显著性P<0.05。结直肠腺癌中APC的表达与β-catenin的表达呈负相关关系γ=-0.514,P<0.05。结论APC、β-catenin基因在散发性结直肠腺癌的发生、发展过程中有重要作用。散发性结直肠腺癌组织中β-catenin细胞核聚集的主要原因可能是APC蛋白产物功能的失活。β-catenin细胞核异位表达是散发性结直肠腺癌发生发展过程中的早期改变。     

Wnt/β-catenin信号通路与胰腺癌相关性的研究进展

Wnt信号通路是调节细胞增殖、分化及移型的经典通路之一.Wnt蛋白可与多种不同Wnt蛋白受体结合,激活细胞内不同的信号通路,研究证实Wnt/β-catenin信号通路与胰腺癌的发生发展密切相关.对Wnt/β-catenin信号通路在细胞周期、细胞凋亡、肿瘤干细胞及血管生成方面对胰腺癌发生发展的影响进行综述.     

侵袭性纤维瘤病中的APC和β-catenin基因及8号染色体异常

目的 探讨8号染色体、APC和β-catenin基因异常在侵袭性纤维瘤病发生机制中的作用.方法 采用荧光原位杂交(FISH)方法,检测20例侵袭性纤维瘤病患者8号染色体;采用聚合酶链反应-变性高效液相色谱技术-测序的方法,分析69例患者APC基因和β-catenin基因的突变.结果 在侵袭性纤维瘤病中,复发患者8号染色体三体(trisomy 8)的阳性率(62.5%,5/8)显著高于原发患者(8.3%,1.12).APC基因的体细胞碱基置换突变率为26.1%(18.69),β-catenin基因的体细胞碱基转换突变率为18.8%(13.69);β-catenin蛋白异常表达率为47.8%(33/69).APC基因和β-catenin基因突变阳性患者与阴性患者比较,差异无统计学意义(P=0.001).β-catenin异常表达阳性患者的c-myc表达率(69.7%,23/33)显著高于阴性患者(22.2%,8/36),两者之间有正相关关系.肿瘤中Ki-67表达阴性,细胞凋亡指数在0.01-0.05之间,c-myc和cylinD1表达阳性患者的凋亡指数显著低于阴性患者.结论 侵袭性纤维瘤病中trisomy 8可能用来确定某些具有高复发风险的侵袭性纤维瘤病亚型.侵袭性纤维瘤病中APC基因和B-catenin基因存在突变,Wnt通路存在异常,对肿瘤发生发展的促进作用可能是通过抑制细胞凋亡实现的.     

β-catenin通路相关基因在大肠癌组织中的表达及其临床意义

[目的]研究大肠癌组织中β-catenin、cyclinD1和c—myc蛋白的表达及临床意义。[方法]采用免疫组化法检测正常大肠黏膜和大肠癌组织中β-catenin、cyclinD1和c—mye蛋白的表达。[结果]正常大肠黏膜β-catenin蛋白表达定位于细胞膜，大肠癌组织β-catenin细胞浆和细胞核表达（异位表达）明显增加，细胞膜表达有不同程度的减少。大肠癌组织异位表达率为63．1％，细胞膜表达缺失率为70．8％，大肠癌组织β-catenin的异位表达率与肿瘤分化程度、临床分期和淋巴结转移有关。大肠癌组织中cyclinD1和c—myc表达明显高于正常大肠黏膜。大肠癌组织中β-catenin异位表达率与cyclinD1和c-myc阳性表达率均呈明显正相关。[结论]异常的β-catenin相关信号通路与大肠癌的发生发展有密切的关系，β-catenin的异常表达可能可以作为大肠癌患者诊断及预后评估的良好指标。     

Wnt通路成员APC、β-catenin、c-myc及黏附分子E-cadherin与大肠癌的关系

大肠癌是我国十分常见的恶性肿瘤,其发病率占全部胃肠肿瘤的第一至第二位。随着我国人民生活水平的提高及生活方式、饮食、环境因素的变化,我国大肠癌的发病率已呈明显上升的趋势。大肠癌的发生、发展机理至今尚未十分清楚,“正常结直肠上皮—畸变性腺窝灶—腺瘤性息肉—腺瘤恶变—侵袭性癌”病理转变是一个多阶段、多基因参与的过程,涉及到癌基因的激活和抑癌基因的失活。近年来,分子生物学研究发现,Wnt通路中各癌基因、抑癌基因及细胞黏附分子异常与大肠癌的发生、发展密切相关。一、Wnt通路、黏附分子的组成及与肿瘤的关系Wnt基因编码…