结肠癌中COX-2对VEGF—C表达的影响

目的：探讨COX-2和血管内皮生长因子C（VEGF—C）在人结肠癌组织中的表达及二者之间的关系。方法：首先选择56例结肠癌标本,应用免疫组织化学染色方法,检测COX-2和VEGF—C在人结肠癌组织中的表达,对两者之问的相关性进行统计学分析;其次以COX-2诱导剂PMA及特异抑制剂塞来昔布作为干预因素,检测单独PMA孵育和PMA＋塞来昔布联合孵育后,结肠癌细胞HCTll6中VEGF—CmRNA及蛋白表达的变化。结果：COX-2在结肠癌组织中的阳性表达率为78．6％,VEGF—C结肠癌组织中的阳性表达率为65．9％。COX-2阳性的结肠癌组织中VEGF—C的阳性率高于COX-2阴性组中VEGF—C阳性率（P〈0．05）,而且COX-2表达与VEGF—C表达呈正相关。结肠癌细胞HCT116中当使用COX-2表达诱导剂PMA后,VEGF—C的表达也相应升高;而加入COX-2的特异抑制剂后,该效应也相应被削弱。结论：COX-2可通过诱导结肠癌组织中VEGF—C的表达促进结肠癌的淋巴结转移。     

HMGB1在结肠癌中的表达及其对VEGF-C的影响

目的：探讨HMGB1和血管内皮生长因子C（VEGF-C）在人结肠癌组织中的表达及二者之间的关系。方法：应用免疫组织化学染色方法,检测HMGB1和VEGF-C在70例人结肠癌组织中的表达,同时对其与临床病理参数的关系,两者之间的相关性进行统计学分析;以HMGB1作为干预因素,检测不同剂量HMGB1刺激后,结肠癌细胞HCT116中VEGF-CmRNA表达的变化趋势。结果：HMGB1在结肠癌组织中的阳性表达率为72.9%,其中有淋巴结转移的表达率为83.3%,无淋巴结转移的表达率为57.1%,差异有统计学意义。VEGF-C结肠癌组织中的阳性表达率为60%。而且HMGB1表达与VEGF-C表达呈正相关。结肠癌细胞HCT116中VEGF-CmRNA的表达也与HMGB1的作用剂量成量效关系。结论：HMGB1可通过诱导结肠癌组织中VEGF-C的表达,从而促进结肠癌的淋巴结转移。     

ＨＭＧＢ１表达载体转染结肠癌细胞对ＶＥＧＦ-Ｄ表达的影响

目的：构建ＨＭＧＢ１表达载体,转染结肠癌细胞,研究其对结肠癌细胞中血管内皮生长因子Ｄ（ＶＥＧＦ-Ｄ）表达的影响。方法：将分离得到的淋巴细胞总ＲＮＡ反转录合成ｃＤＮＡ,以此为模板进行ＰＣＲ扩增得到ＨＭＧＢ１基因;随后酶切转入载体ｐＭＤ１８Ｔ,通过亚克隆转入载体ｐＬｘｓｎ,得到重组质粒。重组体质粒经酶切鉴定后,并对插入的ＨＭＧＢ１基因片段进行测序,将已鉴定的阳性重组质粒用脂质体介导转染ＨＣＴ１１６细胞。通过ＲＴ-ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测ＨＭＧＢ１和ＶＥＧＦ-Ｄ的表达情况。结果：成功构建含ＨＭＧＢ１的表达载体。ＲＴ-ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测发现转染表达ＨＭＧＢ１载体的ＨＣＴ１１６细胞中ＨＭＧＢ１和ＶＥＧＦ-Ｄ的表达均增高。结论：ＨＭＧＢ１可以通过促进结肠癌细胞中ＶＥＧＦ-Ｄ的表达,诱导淋巴管生成,从而促进其淋巴结转移。     

结肠癌组织ＨＭＧＢ１和ＶＥＧＦ-Ｄ的表达及其相关性

目的：探讨高迁移率族蛋白１（ＨＭＧＢ１）和血管内皮生长因子Ｄ（ＶＥＧＦ-Ｄ）在人结肠癌组织中的表达及其二者之间的相关性。方法：收集２００３～２００５年手术切除的７０例结肠癌组织标本,用免疫组织化学染色法检测结肠癌组织ＨＭＧＢ１和ＶＥＧＦ-Ｄ的表达情况,同时对两者行相关性分析。ＨＭＧＢ１作为干预因素,检测经ＨＭＧＢ１刺激后结肠癌细胞ＨＣＴ１１６中ＶＥＧＦ-ＤｍＲＮＡ表达的变化。结果：ＨＭＧＢ１在结肠癌组织中的阳性表达率为７２.９％,其中伴有淋巴结转移的表达率为８３３％,无淋巴结转移的表达率为５７.１％,两者差异有统计学意义。ＶＥＧＦ-Ｄ在结肠癌组织中的阳性表达率为３０％。ＨＭＧＢ１表达与ＶＥＧＦ-Ｄ表达呈正相关。结肠癌细胞ＨＣＴ１１６中ＶＥＧＦ-ＤｍＲＮＡ的表达受ＨＭＧＢ１的影响。结论：ＨＭＧＢ１可能通过诱导结肠癌组织中ＶＥＧＦ-Ｄ的表达,从而促进结肠癌的淋巴结转移。     

结肠癌相关性调节性B细胞介导淋巴管生成的体外研究

目的：通过共培养模型,验证结肠癌相关性Breg细胞促进淋巴管生成的作用及相关机制。方法：利用结肠癌细胞CT26及MC38与B细胞构建共培养模型,诱导结肠癌相关性Breg细胞,流式细胞术鉴定CD19⁺IL-10⁺Breg细胞比例。ELISA法检测结肠癌相关性Breg细胞条件培养基中VEGF-A、VEGF-C和VEGF-D的分泌水平。利用划痕实验及管腔形成实验检测Breg条件培养基干预后淋巴结内皮细胞SVEC4-10的迁移及管腔形成能力。结果：与24h共培养体系相比,Breg^CT26诱导组[(4.90±0.05)%vs.(27.63±1.12)%]和Breg^MC38诱导组[(5.85±0.86)%vs.(24.27±2.27)%]在48 h共培养体系中能诱导更多的Breg细胞,且结肠癌相关性Breg诱导组VEGF-A和VEGF-C的表达水平与空白组相比显著增加(P<0.05)。管腔形成实验及划痕实验结果表明,结肠癌相关性Breg细胞能增强SVEC4-10的成管和迁移能力。结论：在肿瘤微环境中,结肠...     

HMGB1对结肠癌细胞VEGF-C表达的影响

目的:探讨高迁移率族蛋白(high mobility group protein box1,HMGB1)对结肠癌细胞血管内皮生长因子C(vascular endothelia growth factor C, VEGF-C)的表达影响及核转录因子(nuclear factor κB, NF-κB )在其中的作用.方法:以HMGB1作为干预因素,通过RT-PCR方法检测在HMGB1作用不同时间后,结肠癌细胞HCT116中VEGF-C表达的变化.构建NF-κB干扰质粒,检测比较干扰前后HMGB1对结肠癌细胞VEGF-C表达影响的变化.结果:HMGB1可诱导HCT116细胞中VEGF-C的表达,随着对结肠癌细胞作用时间的延长,VEGF-C的表达逐渐增强,在2、4、8、12和24 h几个时间点中,以12 h时HMGB1对VEGF-C的表达影响最明显.抑制NF-κB可削弱HMGB1对VEGF-C的诱导作用.结论:结肠癌细胞中HMGB1可通过刺激NF-κB活化的途径,诱导VEGF-C.     

塞来昔布对人结肠癌细胞VEGF-C表达的影响

[目的]探讨塞来昔布对体外培养的结肠癌细胞血管生长因子C（VEGF-C）表达的影响。[方法]以人结肠癌细胞HT29为研究对象,以不同浓度的塞来昔布（0、25、50、100μmol/L）进行处理。采用RT-PCR等方法检测四组细胞中VEGF-C的表达情况。[结果]塞来昔布可抑制人结肠癌HT29细胞VEGF-C的表达,抑制作用与塞来昔布的浓度相关。[结论]塞来昔布可能通过对肿瘤细胞中VEGF-C基因表达的抑制发挥其抗肿瘤作用。     

HMGB1对U937细胞VEGF-C/D表达影响的研究

目的:探讨HMGB1对单核巨噬细胞U937 VEGF-C/D表达的影响及其在淋巴管生成中的作用.方法:以HMGB1作为干预因素,剂量效应组分别用含0、0.1、1、10、20、50和100 mg/L HMGB1的培养液与单核巨噬细胞U937共培养8 h,以RT-PCR检测U937中VEGF-C mRNA表达的变化.时间效应组以含HMGB1的培养液分别培养U937细胞0、2、4、8、12和24 h ,以RT-PCR和Western blot检测细胞中VEGF-C/D mRNA和蛋白的变化.结果:HMGB1可有效诱导U937细胞中VEGF-C/D的表达.U937中VEGF-C mRNA的表达与HMGB1剂量成量效关系.对VEGF-C/D的诱导作用分别在12和4 h时达到峰值.结论:HMGB1可诱导单核巨噬细胞U937中淋巴管生成因子VEGF-C/D的表达.     

HMGB1对U937细胞VEGF-C／D表达影响的研究

目的：探讨HMGB1对单核巨噬细胞U937VEGF-C／D表达的影响及其在淋巴管生成中的作用。方法：以HMGB1作为干预因素，剂量效应组分别用含0、0．1、1、10、20、50和100mg／LHMGB1的培养液与单核巨噬细胞U937共培养8h，以RT-PCR检测U937中VEGF-CmRNA表达的变化。时间效应组以含HMGB1的培养液分别培养U937细胞0、2、4、8、12和24h，以RT-PCR和Westernblot检测细胞中VEGF-C／DmRNA和蛋白的变化。结果：HMGB1可有效诱导U937细胞中VEGF-C／D的表达。U937中VEGF-CmRNA的表达与HMGB1剂量成量效关系。对VEGF-C／D的诱导作用分别在12和4h时达到峰值。结论：HMGB1可诱导单核巨噬细胞U937中淋巴管生成因子VEGF-C／D的表达。     

胃癌组织COX-2、VEGF-C表达与淋巴结转移及预后关系的研究

目的:探讨环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)在胃癌组织中的表达及其与淋巴管生成、淋巴结转移及预后的关系.方法:采用免疫组织化学SABC法检测 51例胃癌及相应的癌旁组织COX-2、VEGF-C及受体VEGFR-3表达,计数肿瘤内淋巴管密度(LVD),并结合临床病理特征和随访资料进行分析.结果:胃癌组织COX-2、VEGF-C表达阳性率分别为62.8%(32/51),60.7%(31/51).COX-2表达与VEGF-C(r=O.74,P＜0.05)、临床分期(r=0.34,P＜0.05)、淋巴管密度(r=0.69,P＜0.01)和淋巴结转移(r=0.57,P＜0.01)呈正相关,与病理分化呈负相关(r=-0.58,P＜0.01).VEGF-C表达与淋巴管密度(r=0.45,P＜0.01)、淋巴结转移呈正相关(r=0.46,P＜0.05).随访5年,胃癌组织COX-2表达与生存率呈负相关,COX-2表达阴性组5年生存率(36.8%)显著高于COX-2表达阳性组(15.6%)(P＜0.05).结论:在胃癌组织中,COX-2、VEGF-C高表达,COX-2与VEGF-C、淋巴管密度、淋巴结转移呈正相关.推测COX-2通过诱导VEGF-C表达参与淋巴结转移.胃癌组织COX-2检测可能对推测预后具有重要意义.     

VEGF-C、COX-2在细支气管肺泡癌中的表达及其意义

目的探讨细支气管肺泡癌（BAC）中VEGF．C、COX-2蛋白表达及意义。方法BAC60例为实验组,肺腺癌伴BAC20例和肺腺癌22例为对照组,采用免疫组化法分别检测VEGF—C、COX-2蛋白在3种组织中的表达并分析其临床意义。结果VEGF．C在BAC、肺腺癌伴BAC和肺腺癌中阳性率分别为66．7％、90．0％和95．5％,各组间表达差异有统计学意义（P〈0．05）;VEGF—C在BAC非黏液型表达阳性率显著高于黏液型（P〈0．05）,伴淋巴结转移组阳性率明显高于无转移组（P〈0．05）,VEGF—C表达与性别、年龄、肿块部位、大小及TNM分期均无关联（P〉0．05）。COX-2在BAC、肺腺癌伴BAC和肺腺癌中阳性率分别为63．3％、75．0％和77．3％,各组间表达差异无统计学意义（P〉0．05）;COX-2在BAC伴淋巴结转移组表达阳性率明显高于无转移组（P〈0．05）,肿块直径≥3cm组阳性率明显高于肿块直径〈3cm组（P〈0．05）,COX-2表达与性别、年龄、肿块部位、病理类型及TNM分期均无关（P〉0．05）。VEGF-C与COX-2表达呈正相关（r=0．269,P〈0．05）。结论VEGF—C联合COX-2检测可用于BAC侵袭、转移特性的评估及预测。     

COX-2和VEGF-C在大肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨环氧合酶（COX-2）和血管内皮生长因子-C（VEGF-C）在大肠癌中的阳性表达率与临床病理特点,特别是与淋巴结转移的关系。方法选择经病理确诊的大肠癌60例,同体癌组织远端5 cm以外的正常大肠组织30例和大肠腺瘤30例为研究对象。采用免疫组化S-P染色法,检测三组的COX-2和VEGF-C的表达率,进行比较及关联性分析,并将大肠癌的阳性表达率与淋巴结转移等临床病理特点进行相关性分析。结果 （1）COX-2正常大肠组织不表达;大肠癌和大肠腺瘤的阳性表达率均高于正常大肠组织（P〈0.017）;COX-2大肠癌的阳性表达率,在中低分化、浸及浆膜、有淋巴结转移和C＋D期均比相应的高分化、未及浆膜、无淋巴结转移和A＋B期增高（P〈0.05,OR〉1,其95%可信区间内不包含1）。（2）VEGF-C在正常大肠组织和大肠腺瘤均不表达;大肠癌的阳性表达率均高于大肠腺瘤和正常大肠组织（P〈0.017）;VEGF-C阳性表达率,在中低度分化、有淋巴结转移和C＋D期均比相应的高分化、无淋巴结转移和A＋B期高（P〈0.01,OR〉1,其95%可信区间内不包含1）。（3）大肠癌中,COX-2和VEGF-C的表达有关联性,即COX-2表达高,VEGF-C亦高（P〈0.05,OR〉1,其95%可信区间内不包含1）。结论在大肠癌中,COX-2和VEGF-C均呈高表达,且有关联性;阳性表达率与淋巴结转移、Dukes分期和组织分化有相关性。     

COX-2-mediated stimulation of the lymphangiogenic factor VEGF-C in human breast cancer

Increased expression of COX-2 or VEGF-C has been correlated with progressive disease in certain cancers. Present study utilized several human breast cancer cell lines (MCF-7, T-47D, Hs578T and MDA-MB-231, varying in COX-2 expression) as well as 10 human breast cancer specimens to examine the roles of COX-2 and prostaglandin E (EP) receptors in VEGF-C expression or secretion, and the relationship of COX-2 or VEGF-C expression to lymphangiogenesis. We found a strong correlation between COX-2 mRNA expression and VEGF-C expression or secretion levels in breast cancer cell lines and VEGF-C expression in breast cancer tissues. Expression of LYVE-1, a selective marker for lymphatic endothelium, was also positively correlated with COX-2 or VEGF-C expression in breast cancer tissues. Inhibition of VEGF-C expression and secretion in the presence of COX-1/2 or COX-2 inhibitors or following downregulation of COX-2 with COX-2 siRNA established a stimulatory role COX-2 in VEGF-C synthesis by breast cancer cells. EP1 as well as EP4 receptor antagonists inhibited VEGF-C production indicating the roles of EP1 and EP4 in VEGF-C upregulation by endogenous PGE2. Finally, VEGF-C secretion by MDA-MB-231 cells was inhibited in the presence of kinase inhibitors for Her-2/neu, Src and p38 MAPK, indicating a requirement of these kinases for VEGF-C synthesis. These results, for the first time, demonstrate a regulatory role of COX-2 in VEGF-C synthesis (and thereby lymphangiogenesis) in human breast cancer, which is mediated at least in part by EP1/EP4 receptors.     

血管内皮生长因子_C和环氧合酶_2表达与口腔鳞癌淋巴结转移的关系

背景与目的： 探讨血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)和环氧合酶-2(cyclooxyenase-2,COX-2)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及其与淋巴管生成、淋巴结转移的关系。 材料与方法： 采用免疫组化SP法检测60例OSCC、23例口腔黏膜癌前病变、19例其它口腔黏膜良性病变组织中COX-2、VEGF-C及VEGFR-3受体的表达,计数肿瘤组织中淋巴管密度(lymphatic vessels density,LVD),结合临床病理因素进行分析。 结果： OSCC中VEGF-C、LVD和COX-2表达明显高于口腔癌前病变和其它良性病变。OSCC中VEGF-C蛋白表达、LVD与淋巴结转移呈明显正相关关系(P<0.05);COX-2蛋白表达与肿瘤的淋巴结转移、临床分期明显相关(P<0.05)。VEGF-C和COX-2的表达呈正相关(r=0.519,P<0.01),两者表达与LVD有正相关关系(r=0.661,P<0.01;r=0.485,P<0.01)。 结论： OSCC中VEGF-C和COX-2高表达,COX-2可能参与VEGF-C淋巴管生成通路,在肿瘤淋巴转移中发挥重要作用。     

非小细胞肺癌组织COX-2和VEGF-C及C-erbB-2的表达与淋巴结转移的关系

目的研究COX-2、VEGF-C、C-erbB-2在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化方法检测52例非小细胞肺癌组织中COX-2、VEGF-C及C-erbB-2的表达水平,结合临床资料进行分析。结果52例肺癌中,COX-2阳性34例(65.4%),VEGF-C阳性33例(63.4%),C-erbB-2阳性35例(67.3%)。COX-2、VEGF-C、C-erbB-2的表达与临床分期、淋巴结转移呈正相关;COX-2、VEGF-C、C-erbB-2之间的表达呈正相关。结论COX-2、VEGF-C、C-erbB-2的表达呈正相关,它们可能在基因水平相互调控;COX-2、VEGF-C及C-erbB-2在NSCLC中的高表达,与肿瘤的发展、淋巴结转移有密切的联系。     

117例乳腺癌组织中COX-2和VEGF-C表达及临床意义

目的:分析117例乳腺癌患者癌组织中环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达和两者的相关性,探讨其与临床病理特征,淋巴结转移及预后的关系.方法:收集117例乳腺癌患者的一般情况、临床病理特征和癌组织蜡块,构建乳腺癌组织芯片.应用免疫组化SP法检测COX-2和VEGF-C 的表达. 结果: 117 例乳腺癌组织中COX-2、VEGF-C表达分别为 55.8%、58.1%,且二者呈正相关(r=0.356,P<0.001).COX-2 和VEGF-C的表达均与临床分期、淋巴结转移及有否复发呈正相关,与肿块大小,PR,病理类型,组织学分级无关.COX-2的表达还与ER、Her-2表达呈正相关.结论:COX-2和VEGF-C在乳腺癌组织中均呈高表达且两者呈正相关,检测两者对评估乳腺癌患者的预后有一定的临床意义.     

HER2、COX-2在非小细胞肺癌中的表达意义

目的：探讨人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2,HER2）和环氧化酶2（cyclooxygenase-2,COX-2）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中的表达,其各自与临床特征之间的关系及二者在NSCLC中表达的相互关系。方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（streptavidin-peroxidase,SP）法检测72例NSCLC中HER2、COX-2的表达情况。结果①72例NSCLC中, HER2、COX-2的阳性表达率分别为55.6%、65.3%;②HER2在NSCLC中的阳性表达与组织学类型、分化程度、肿块大小、淋巴结转移及临床分期相关（P＜0.05）,而与性别、年龄、吸烟、病变部位无关（P＞0.05）;③COX-2的阳性表达与年龄、组织学类型、肿块大小、淋巴结转移及临床分期相关（P＜0.05）,而与性别、吸烟、病变部位及分化程度无关（P＞0.05）;④HER2、COX-2在NSCLC中的阳性表达呈正相关关系。结论 HER2、COX-2可以作为判断NSCLC恶性程度的生物学指标。     

乳腺癌COX-2和MMP-2的表达与新辅助化疗的关系

目的研究COX-2、MMP-2在乳腺癌新辅助化疗前后的表达变化,及其与新辅助化疗疗效的关系。方法应用免疫组织化学法检测48例乳腺癌新辅助化疗前后标本中COX-2、MMP-2的表达。结果新辅助化疗有效率为70.8%。化疗前后COX-2表达变化显著,由化疗前的62.5%降到化疗后的41.7%,(P<0.05);MMP-2表达无明显变化。化疗前后COX-2表达与MMP-2正相关,(P<0.05)。新辅助化疗前COX-2表达阳性者,化疗效果差(P<0.05),MMP-2表达与化疗疗效无关,(P>0.05)。结论COX-2可作为指导乳腺癌化疗并预测化疗敏感性的分子生物学指标,而MMP-2尚不能预测化疗疗效。