HPLC法同时测定重楼属药用植物中10种核苷和碱基

目的对不同品种、不同产地的重楼属药用植物中核苷(胞苷、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷、2′-脱氧腺苷)和碱基(尿嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤)量进行对比研究,为合理开发利用重楼属药用植物提供理论依据。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Venusil MP C_(18)(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,柱温35℃,检测波长260 nm。运用上述方法对16批重楼药材进行测定,并对测定结果进行聚类分析。结果测定了重楼药材中10种核苷和碱基的量,在线性范围内线性关系良好(r20.999 1),平均回收率为96.04%~104.34%,RSD≤2.94%。采用聚类分析能将不同产地的16批重楼药材分为3类。16批重楼样品中10种核苷和碱基均可检测到,不同品种重楼药材中10种核苷和碱基的质量分数及组成结构比存在着显著性差异,各核苷和碱基总量平均值为735.390 1~1 612.807 3μg/g,质量分数高低排序为巴山重楼长药隔重楼卵叶重楼五指莲重楼狭叶重楼华重楼滇重楼花叶重楼小重楼毛重楼。同一品种不同产地重楼药材中10种核苷和碱基的质量分数及组成结构比亦存在着较大差异。结论该方法简单,准确可靠,重复性好,适用于重楼药材中10种核苷和碱基的测定。同时亦为全面客观地认识重楼药材功效物质基础,丰富和发展重楼药材多指标评价体系研究提供科学依据。     

HPLC法测定天麻丸中天麻素的含量

目的：建立测定天麻丸中天麻素含量的方法。方法：采用HPLC法,以C18为固定相,乙腈-0.05M磷酸溶液（3：97）为流动相,检测波长为220nm,流速为1ml/min。结果：天麻素在0.106μg-1.060μg范围内线性良好,平均回收率为99.58%,RSD=0.76%（n=6）。结论：所建方法可用于天麻丸中天麻素的含量测定。     

HPLC法测定天麻配方颗粒中天麻素的含量

目的建立天麻配方颗粒中天麻素的含量测定方法.方法采用HPLC法测定天麻配方颗粒中天麻素的含量.LiChrospherR100(4.6×250mm,5μm)色谱柱;甲醇-磷酸盐溶液(含磷酸二氢钾和磷酸氢二钠各为0.1mol/L)-水(1.5∶3∶95.5)为流动相;检测波长为270nm;结果天麻素在1.638～14.742μg范围内呈现良好的线性关系;回收率为98.17%,RSD为1.39%(N=5).结论该方法简便、准确,重现性好,可用于天麻配方颗粒的质量控制.     

HPLC法测定天麻丸中天麻素的含量

目的:建立测定天麻丸中天麻素含量的方法.方法:采用HPLC法,以C18为固定相,乙腈-0.05M磷酸溶液(3:97)为流动相,检测波长为220nm,流速为1ml/min.结果:天麻素在0.106μg-1.060μg范围内线性良好,平均回收率为99.58%,RSD=0.76%(n=6).结论:所建方法可用于天麻丸中天麻素的含量测定.     

五灵脂中四种核苷、碱基类成分的HPLC法分析研究

<正> 五灵脂为鼯鼠科动物复齿鼯鼠Trogopterus xan thipes Mile—Edwards的干燥粪便。具有活血化瘀、止痛之功效。杨东明及Atushi等人对五灵脂成分进行了研究,从中分离出了次黄嘌呤、尿嘧啶等核苷、碱基类成分,但对此类成分的含量测定未见报道。本文采用高效液相色谱法,以水—甲醇—四氢呋喃(100:0.1:0.05)作流动相,用260nm为检测波长,在反相C_(18)柱上建立了四种核苷、碱基类成分的分离及含量测定方法。方法灵敏、快速、结果可靠。     

HPLC法测定天麻配方颗粒中天麻素的含量

目的建立天麻配方颗粒中天麻素的含量测定方法.方法采用高效液相色谱法,Shim-pack VP-ODS色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(3:97),流速:0.5 mL/min,检测波长:220nm,柱温:25℃,进样量:5μL.结果天麻素线性范围:0.1020～0.6120μg,r=0.9999;平均回收率为100.5%,RSD=1.01%(n=5).结论该方法分离度好,快速简便,适用于天麻配方颗粒中天麻素的含量测定,可作为该产品的质量控制方法.     

RP-HPLC测定天麻丸中天麻素含量

天麻丸为中国药典 2 0 0 0年版一部收载品种 ,由天麻、羌活、独活等 10味药组成 ,具有驱风除湿 ,舒筋活络等功效。天麻素为其活性成分 ,现行药典仅用薄层鉴别方法和常规检查来控制其质量 ,无含量测定方法。我们参考文献资料[1,2 ] ,对天麻素含量测定方法进行研究 ,现报道如下。1　仪器与试药GILSON高效液相色谱仪 ,HP110 0DAD检测器 ,eppen dorf柱温箱 ,Unipoint工作站。天麻素对照品由中国药品生物制品检定所提供 ,天麻丸购自重庆市中药材公司。乙睛为色谱纯 (Fisher公司 ) ,水为超纯水 ,其余试剂均为分析纯。2　色谱条件色谱柱 :Dia…     

不同地区人工培育天麻中天麻素含量的HPLC法测定

目的：对甘肃各地培育的天麻进行质量考察,并与国内其他主要产区比较,了解甘肃人工天麻的质量状况。方法：色谱柱,大连依利特（250mm×4．6mm,5μm）;乙腈-0．05%磷酸（5：95）为流动相;检测波长为220nm;流速1．0mL／min;柱温：室温。结果：天麻素在0．22～1．15μg范围内呈良好的线性关系。平均回收率为96．42％,RSD为1．83％（11=6）。甘肃培育天麻中天麻素含量在0．281％～0．774％之间。结论：甘肃栽培天麻质量符合中国药典的规定。     

HPLC测定不同商品规格天麻中天麻苷与天麻苷元的含量

目的:建立天麻药材中天麻苷及天麻苷元的测定方法,测定天麻不同商品规格中天麻苷和天麻苷元的含量。方法:采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱,流动相0.1%磷酸水-甲醇(95∶5)为,检测波长为220 nm,柱温为25℃,流速为1 mL.min-1。结果:天麻苷、天麻苷元的进样量与峰面积均呈良好的线性关系,平均回收率分别为100.78%(n=6)和101.59%(n=6),不同产地、商品规格的药材含量相差较大。结论:操作简便、准确、具有良好的重复性,是一种适宜于不同商品规格天麻中天麻苷与天麻苷元的含量的有效方法,结果能够为天麻药材的合理应用、质量控制及商品规格新标准制定奠定基础。     

RP-HPLC同时测定天麻中4种成分的含量

目的：建立RP-HPLC同时测定天麻药材中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇-0.1%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长270 nm,柱温35 ℃。结果：天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛分别在19.1～383 μg·mL^-1(r=0.999 9),0.620～12.4 μg·mL^-1(r=0.999 9),2.45～49.0 μg·mL^-1(r=0.999 9),0.280～5.63 μg·mL^-1(r=0.999 6)与峰面积线性关系良好;平均加样回收率(n=9)均在96.7%～97.7%,RSD均小于1.6%。结论：本法准确可靠,分离度好,适用于天麻药材中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量测定。     

RP-HPLC同时测定天麻中4种成分的含量

目的:建立RP-HPLC同时测定天麻药材中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量.方法:采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.1%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长270 nm,柱温35℃.结果:天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛分别在19.1～383(r=0.999 9),0.620～12.4(r=0.999 9),2.45～49.0(r=0.999 9),0.280～5.63 mg·L~(-1)(r=0.999 6)与峰面积线性关系良好;平均加样回收率(n=9)均在96.7%～97.7%,RSD均小于1.6%.结论:本法准确可靠,分离度好,适用于天麻药材中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量测定.     

UFLC-QTRAP-MS-MS同时测定蚁巢伞属3种鸡中氨基酸核苷含量及PCA分析

建立高分离度快速液相色谱质谱联用（UFLC-QTRAP-MS-MS）同时测定蚁巢伞属3种鸡中15种氨基酸和12种核苷类成分的方法。采用Waters XBridge Amide色谱柱（2.1 mm×100 mm,3.5 μm）,流动相为0.2%甲酸水-0.2%甲酸乙腈,梯度洗脱,柱温30℃,流速0.6 mL·min^-1,采用电喷雾正离子源（ESI+）,多反应离子监测（MRM）模式进行检测。采用PCA主成分分析法对不同品种的蚁巢伞属鸡进行综合评价。结果15种氨基酸成分和12种核苷成分在一定浓度范围内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.997 3,精密度,重复性和稳定性良好;加样回收率在95.14%~105.0%,RSD均小于5.0%。PCA分析显示在氨基酸中,鸡综合评价指数分最高;在核苷中,黄鸡综合评价指数最高。所建立的方法准确、重复性好,可用于蚁巢伞属3种鸡中15种氨基酸和12种核苷类成分的同时测定,为蚁巢伞属鸡资源内在质量的综合评价、全面控制以及合理开发应用提供新的方法参考。     

Modulation of LPS-stimulated neuroinflammation in BV-2 microglia by Gastrodia elata: 4-hydroxybenzyl alcohol is the bioactive candidate

Ethnopharmacological relevance

Gastrodia elata Blume (Orchidaceae, GE) a traditional plant in Oriental countries is known for its enormous benefits to treat headaches, dizziness, vertigo and convulsive illnesses. In the present study, the ethnopharmacological role of GE in neuroinflammation mediated by activated microglia and the mechanisms underlying were reported.

Materials and methods

BV-2 microglia activated by lipopolysaccharide (LPS) was employed and the effects of GE on corresponding neuroinflammatory parameters were assessed.

Results

GE extract inhibited LPS-stimulated production of inflammatory cytokines and down regulated the c-Jun NH₂-Terminal Kinase (JNK) and nuclear factor-kappa B (NF-κB) signaling pathways, which are known to be involved in neuroinflammation. Further, inhibition of NO and iNOS by 4-hydroxybenzyl alcohol (4-HBA), one of the active constituent of GE in LPS-stimulated BV-2 cells suggest that 4-HBA might be the bioactive candidate.

Conclusion

GE extract and its active constituent 4-HBA could be further exploited to mitigate microglial activation and may be developed as a new therapeutic remedy in treating various neuroinflammatory diseases.     

贵州仿野生栽培红天麻的生活史及物候期研究

为掌握仿野生栽培红天麻的生活史及物候期,在贵州大方县采用林下仿野生模式栽培红天麻,观察并记录其生长发育各阶段特征。整理的历时24个月的贵州仿野生栽培红天麻生活史,将贵州仿野生栽培红天麻无性繁殖与有性繁殖中箭麻繁育物候期各自划分出5个时期,并详述各期特点。其结果可明确贵州红天麻仿野生栽培流程,为仿野生栽培天麻技术标准的研究与制订提供理论支撑。     

The neuroprotective effects of an extract of Gastrodia elata

Ethnopharmacological relevance

Gastrodia elata (GE) Blume (family Orchidaceae) is a traditional Chinese herbal medicine for treating headaches, dizziness, tetanus, and epilepsy, indicating neuronal protective functions.

Aim of the study

To evaluate the neuroprotection of GE and its molecular mechanism in preventing serum deprivation-induced PC12 cell apoptosis.

Materials and methods

An MTT assay and Hoechst staining were used to respectively validate serum deprivation-induced cell death and apoptosis. Cyclic (c)AMP formation and protein kinase (PK)A activity were also measured after GE treatment. Western blotting was used to detect the phosphorylation of the cAMP response element-binding (CREB) protein. Transient transfection of a dominant negative CREB was used to validate the importance of CREB.

Results

GE targeted the adenosine A_2A receptor (A_2A-R). GE increased cAMP formation, PKA activity, and phosphorylation of the CREB protein. GE-induced CREB protein phosphorylation and protection was blocked by a PKA inhibitor and overexpression of the dominant negative CREB, respectively.

Conclusions

These results support the neuroprotective effects of GE. The protective mechanism might be mediated through an A_2A-R/cAMP/PKA/CREB-dependent pathway.     

天麻及其伪品的毛细管电泳鉴别及天麻素的测定

目的：利用毛细管电泳法鉴别天麻及其4种常见伪品以及测定天麻中有效成分天麻素,方法：电泳分离条件为24mmol/L硼酸盐（pH=9.4),运行电压为16kV。结果：在该分离条件下,通过比较电泳谱图和天麻素加标实验,4种伪品与天麻可以很容易鉴别,天麻中的天麻素可以达基线分离,定量测定在15min之内完成,线性相关方程为Y＝－0．048＋7．79X(r=0.999)。结论：方法简便,加快,准确,可以作为中药天麻的质量控制方法。     

HPLC测定野菊花药材中8种黄酮和有机酸的含量

建立同时测定野菊花药材中绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、3,4-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷及木犀草素等8 种成分含量的方法.采用HPLC,Shim pack VP-ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm);以甲醇(A)-0.3%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1;检测波长326 nm;柱温35 ℃.8种成分在40 min内均达到基线分离,线性关系良好(r>0.999 5, n=7);平均回收率均在97.03%~102.3% (RSD<2.0%,n=6).结果表明该方法操作简单,准确性和重现性良好,为野菊花药材的质量控制提供科学依据.