S期激酶相关蛋白2与人类恶性肿瘤关系的研究进展

S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)是F-box蛋白家族中的一员,主要通过泛素蛋白酶体途径对细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(Cyclin dependent kinase inhibitor,CKI)中的p27的降解进行调控。研究发现,Skp2与多种肿瘤的发生密切相关。文中就Skp2在多系统肿瘤中的研究进展作一综述。     

S期激酶相关蛋白2与恶性血液病

肿瘤发生的共同特征是细胞周期调控机制的紊乱,导致细胞的失控性生长。Skp2是F_box蛋白家族成员,通过对多种靶蛋白的泛素化降解而与细胞周期调控及肿瘤的发生、发展密切相关。这在大量实体瘤的研究中已经得到证实:多种肿瘤中均发现有Skp2表达增加,其表达越高预示肿瘤恶性程度越     

人类S期激酶相关蛋白2表达质粒的构建

目的:克隆人类S期激酶相关蛋白2(Skp2)基因,构建其表达质粒,为今后进一步研究Skp2的生物学功能提供基础。方法:采用RT-PCR技术扩增人类Skp2 eDNA全长序列,运用DNA重组技术将其重组于pcDNA3.1/myc- His A质粒,构建Skp2表达质粒。结果:通过酶切电泳分析及DNA测序分析证实,实验成功构建了Skp2表达质粒。结论:Skp2表达质粒pcDNA3.1/mye-His A-Skp2构建成功,为进一步研究Skp2的生物学功能及其在肿瘤发生、发展、诊断和预后中的作用奠定了基础。     

膀胱移行细胞癌组织中S期激酶相关蛋白2的表达及临床意义

目的:探讨膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell cancinoma,BTCC)组织中S期激酶相关蛋白2(S-phase kinaseassociated protein 2,Skp2)的表达与临床病理的关系。方法:用免疫组织化学S-P法检测63例BTCC和15例正常膀胱组织中Skp2的表达情况。结果:Skp2在BTCC和正常膀胱组织中的阳性率分别为47.6%和6.7%,差异有统计学意义(P0.01)。Skp2阳性率在膀胱肿瘤病理分级和临床分期中差异均有统计学意义(P0.01)。结论:Skp2可能参与BTCC的发生、发展,检测Skp2的阳性率有助于BTCC的诊断、恶性程度及预后判断。     

SCF-Skp2与肿瘤关系的研究

肿瘤的发生与细胞周期的失控密切相关，泛素蛋白酶体(SCF)途径降解细胞周期调控因子、而S期激酶相关蛋白2(Skp2)是泛素连接酶复合物的底物识别序列，对细胞周期G1期关卡起调控作用，在多数恶性肿瘤中表达增高。研究发现SCF—Skp2与肿瘤的进程、治疗、预后均有密切关系。     

上调的细胞周期相关蛋白在胃癌中的作用研究

目的 进一步研究胃癌发病机制.方法 富集分析3个GEO数据集筛选出的差异基因,利用STRING数据库绘制蛋白质相互作用图,使用Cytoscape软件筛选关键基因.通过TCGA数据库验证关键基因的差异表达.利用Western blotting和实时荧光定量PCR (qPCR)检测胃癌组织中细胞周期相关基因的蛋白和mRNA...     

人细胞周期蛋白依赖性激酶2与抑制剂roscovitine作用的理论研究

目的:研究人细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)与抑制剂roscovitine相互作用的机制。方法:利用分子动力学模拟的方法研究roscovitine与CDK2之间的相互作用。结果:和空载CDK2相比,roscovitine的存在会使RMSD和RMSF值略微降低,但roscovitine会显著影响CDK2活性位点残基侧链二面角。Roscovitine在分子动力学模拟过程中会与Ile10和Leu83形成稳定的氢键作用。结论:Roscovitine对CDK2骨架运动影响不大,但会使CDK2活性位点残基的侧链构象发生变化。Roscovitine与Ile10和Leu83之间的氢键作用是CDK2对roscovitine进行识别的重要途径。     

食管癌组织中S期激酶相关蛋白2mRNA的表达意义

目的：探讨S期激酶相关蛋白2mRNA在食管癌及其癌旁组织中的表达及其与食管癌临床病理特征的关系．方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测S期激酶相关蛋白2mRNA在45例手术切除的食管癌组织及癌旁组织中的表达．结果：S期激酶相关蛋白2mRNA表达率在食管癌中为66．6％（30／45）,而癌旁组织中为24．4％（11／45）,差异有显著性（P〈0．05）．S期激酶相关蛋白2mRNA阳性表达率与患者年龄、性别、肿瘤大小、及有无淋巴结转移无关,与肿瘤分化程度及TNM分期有关（P〈0．05）．结论：S期激酶相关蛋白2的高水平表达促进了食管癌的发生发展．并将可能为食管癌的早期诊断和治疗提供新的手段．     

Skp2在前列腺癌中的研究进展

Skp2是F-box蛋白家族成员之一,参与多种细胞周期调节蛋白的泛素依赖性蛋白水解过程,从而调控细胞周期,并在多种肿瘤细胞中过表达。Skp2在前列腺癌的发生与发展、分级、分期、术后复发中起着重要的作用。探讨前列腺癌患者中Skp2的不同表达与疾病发生、进展及预后的关系,可进一步明确恶性肿瘤的发生机制,并可以作为抗肿瘤治疗的新靶点。     

S期激酶相关蛋白2在宫颈上皮内肿瘤和宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 探讨S期激酶相关蛋白2(Skp2)在正常宫颈上皮、宫颈上皮内肿瘤(CIN)、宫颈鳞状细胞癌(SCC)中的表达及其在宫颈癌演进过程中作用和意义.方法 用鼠抗人Skp2单克隆抗体,免疫组化两步法标记12例正常宫颈组织、30例宫颈上皮内肿瘤、30例宫颈鳞状细胞癌组织.结果 正常宫颈组织、宫颈上皮内肿瘤和宫颈鳞状细胞癌Skp2表达阳性率分别为0%、76.6%、83.3%.正常宫颈组织与宫颈上皮内肿瘤、正常宫颈组织与宫颈癌Skp2的表达有显著差异(P＜0.01).而宫颈上皮内肿瘤与宫颈癌比较Skp2的表达无显著性差异(P＞0.05).结论 Skp2参与了正常宫颈组织向宫颈上皮内肿瘤的演变,可能与宫颈鳞状细胞癌的发生和发展有关.     

COX-2表达和微血管生成与胃癌的关系

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)在胃癌组织中的表达与微血管生成的相关性及其与胃癌生物学行为之间的关系,从而为临床治疗和判断预后提供新的依据。方法应用免疫组化SP法对90例胃癌患者胃癌及癌旁组织中COX-2蛋白表达和微血管密度(MVD)进行检测,分析其与胃癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移和预后的关系。结果胃癌组织COX-2的阳性表达率(667%)明显高于癌旁肠化及非典型增生COX-2阳性表达率(356%),P<001。COX-2阳性者MVD值(4866±1789)显著高于阴性者MVD值(2414±1217),P<001。COX-2的阳性表达与胃癌组织分化程度无关,而与胃癌浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<005);胃癌组织MVD值(4049±1988)明显高于癌旁肠上皮化生及非典型增生MVD值(1981±1133);MVD与胃癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<005)。结论COX-2可促进肿瘤血管形成,从而进一步促进肿瘤的浸润、转移。COX-2、MVD均可作为反映胃癌生物学行为的指标之一。     

COX-2蛋白和mRNA表达与胃癌生物学行为的关系

目的探讨环氧合酶-2(COX-2)蛋白和mRNA表达与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学SP法和原位杂交检测57例胃癌组织中COX-2蛋白和mRNA的表达情况。结果COX-2蛋白和mRNA表达均与肿瘤大小、浆膜侵犯、淋巴结转移、TNM分期及Lauren分型明显相关,而尚不能认为与组织分化相关。结论检测COX-2基因对判断胃癌的生物学行为有一定价值;COX-2基因在胃癌的发展过程中可能起重要作用。     

不同粘液物质与胃癌关系的研究

目的:通过对胃癌及肠上皮化生中粘液成分的分析,探讨粘液类型与癌变的关系,为胃癌早期的诊断提供帮助。方法:应用粘液组织化学方法(阿利辛蓝-雪夫氏法和高铁二胺-阿利辛蓝法),对75例胃癌和60例慢性胃炎伴肠上皮化生所含粘液物质进行染色,将胃癌分为肠型(酸性粘液)及胃型(中性粘液),将肠化分为大肠型(硫酸粘液)及小肠型(唾液酸粘液)。结果:肠型胃癌及癌旁肠化以分泌硫酸粘液(大肠型)为主,慢性胃炎伴肠化及胃型胃癌以分泌唾液酸粘液(小肠型)为主,二者差异有统计学意义(P<0.01)。高中分化腺癌和低分化腺癌都以肠型胃癌为主,二者差异无统计学意义(P>0.05)。不同组织学类型的胃癌分泌的粘液物质类型差异无统计学意义(P>0.05)。结论:含硫酸粘液的大肠型肠化生与胃癌的发生关系密切,加强对含硫酸粘液的慢性胃炎伴大肠型化生患者进行密切随访可能有利于胃癌的早期发现。     

胃癌神经内分泌分化的组织形态与c-erbB-2关系研究

目的:探讨胃癌伴神经内分泌分化的组织形态及其与c-erbB-2的关系。方法:采用免疫组化法检测168例手术切除石蜡包埋的胃癌标本CgA,Syn,NSE表达情况,阳性病例再通过电镜检查,超微结构下找到NE颗粒者为作为胃癌伴NE分化的阳性组,其余的均为阴性组。所有病例均进行c-erbB-2免疫组化检测。结果:在168例胃癌中,39例(23.4%)超微结构下发现NE颗粒。胃癌伴NE分化与胃癌的组织学类型,组织学分级,浸润深度,脉管内癌栓,淋巴细胞浸润量,淋巴结转移情况及c-erbB-2的高表达均无明显相关性(P>0.05),胃癌伴NE分化在Ⅲ期和Ⅳ期病例中比例(25/81)明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例中的比例(13/86),二者差异有统计学意义(P<0.05)。NE分化伴c-erbB-2表达总体预后差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胃癌伴NE分化与临床分期有关,而与c-erbB-2及胃癌的组织学类型,组织学分级等无明显相关性(P>0.05)。     

TIMP2与胃癌中医证型关系的研究

目的 :检测TIMP2在胃癌不同中医证型的表达 ,探讨TIMP2与中医证型的关系。方法 :应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测肝胃不和、脾胃虚寒、胃热伤阴、痰湿凝结、瘀毒内阻和气血双亏六型胃癌组织的TIMP2mRNA表达 ,并对其表达情况进行分析。结果 :不同证型之间TIMP2的表达存在很大差异 ,肝胃不和型表达较高 ,胃热伤阴、瘀毒内阻和气血双亏三型的表达有所下调 ,而脾胃虚寒和痰湿凝结两型表达明显下调 ,其中肝胃不和型与脾胃虚寒型、痰湿凝结型比较均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :TIMP2在不同证型发生转移的过程所起作用不同 ,不同证型的转移机制存在差异。TIMP2表达的差异可能是形成不同证型的物质基础之一。     

胃癌组织中EB病毒感染与Bcl-2基因表达关系研究

①目的　探讨胃癌组织中EB病毒(EBV)感染与Bcl-2基因表达间的关系,分析Bcl-2在与EBV相关胃癌发生中的作 用。②方法　经EBNA1PCR检测为EBV阳性的胃癌组织标本14例,同时随机抽取EBV阴性胃癌病例19例,以免疫组织化学法分析 Bcl-2蛋白表达,对其结果进行定性分析。③结果　EBV阳性和阴性胃癌组织中Bcl-2检测的阳性率分别为28.6%和26.3%,差异 无统计学意义(P>0.05)。④结论　胃癌组织中EBV感染与Bcl-2基因的表达无关。     

c-myc和Skp2在口腔鳞状细胞癌中的表达及关系

目的探讨c-myc、Skp2在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其相互关系。方法采用免疫组化SP法检测c-myc、Skp2在OSCC患者癌组织中的表达。结果在OSCC组织中,c-myc与Skp2阳性表达明显高于正常口腔组织,差异有统计学意义（P〈0．05）。OSCC的阳性表达与OSCC的病理分级及临床分期有关;与患者性别、年龄及肿瘤发生部位无关。c-myc与Skp2呈正相关。结论c-myc与Skp2蛋白的表达参与了OSCC的发生与发展,为OSCC的诊断及预后提供重要依据。     

胃癌组织Survivin表达及其与凋亡的关系

目的:研究胃癌组织中Survivin表达及其与凋亡的关系.方法:应用免疫组织化学S-P法检测20例正常胃粘膜及120例胃癌组织中Survivin的表达;采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术,检测其凋亡指数.结果:20例正常胃枯膜组织Survivin均不表达,胃癌组织中Survivin阳性率为64.2%(77/120),二者有显著性差异(P<0.01);Survivin表达与组织分化程度和TNM分期密切相关(P<0.05).胃癌组织凋亡指数(AJ)和TNM分期、组织分化程度密切相关(P<0.05).Survivin表达水平与凋亡指数呈显著负相关(P<0.01).结论:Survivin在胃癌中过表达,Survivin在胃癌的发生发展过程中可能起重要作用,检测Survivin和凋亡指数有利于判断胃癌的恶性程度,胃癌凋亡的抑制可能与PTEN蛋白表达上调有关.     

Skp2反义寡核苷酸对胃癌细胞SGC-7901生长增殖的影响

目的：研究S期激酶相关蛋白2反义寡核苷酸（Skp2 antisense oligodeoxynucleotide，Skp2 ASODN）对胃癌细胞SGC-7901生长增殖的影响及其可能机制。方法：采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000 Reagent包裹Skp2寡核苷酸（ODNs）转染SGC-7901细胞，通过显微镜和MTT实验观察细胞的生长和增殖情况；应用流式细胞术检测细胞周期；应用逆转录聚合酶链反应检测Skp2、P27mRNA表达变化；应用Western blot法检测Skp2蛋白及其底物p27蛋白表达变化。结果：Skp2ASODN对SGC-7901细胞的生长和增殖产生浓度依赖性抑制效应，且各组细胞的抑制率均在48h达到最高峰，其中200nmol／LASODN在48h对细胞的抑制率为42．4％，P〈0．01。200nmol／LASODN组细胞周期发生改变，S期细胞所占比例明显高于正常对照组细胞，P〈0．05。在200nmol／L浓度下，ASODN组Skp2mRNA和蛋白表达水平均低于正常对照组和Skp2无义寡核苷酸（Skp2 nonsense oligodeoxynucleotide，Skp2NSODN）组，P〈0．05；而p27mRNA表达未发生变化，但其蛋白水平明显高于正常对照组和NSODN组，P〈0．05。结论：Skp2ASODN能抑制SGC-7901细胞生长和增殖，这种抑制作用主要是通过干预泛素-蛋白酶体途径影响细胞周期而实现的。