电针上调脊髓损伤后大鼠c-fos mRNA及其蛋白的表达

目的:探讨电针对大鼠脊髓损伤后c-fos mRNA及蛋白表达的影响.方法:将SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,采用改良Allen氏重物坠落法制成脊髓损伤模型.分别在1、2、3、5和7d处死动物,使用实时荧光定量PCR技术检测c-fos mRNA表达;使用免疫组织化学显色结合图像定量分析方法检测c-fos蛋白表达.结果:实时荧光定量PCR结果显示,模型组c-fos mRNA表达呈现升高趋势,电针能够促进这种趋势,在术后1d和3d与模型组比较,差异具有统计学意义.免疫组织化学结合图像分析结果显示,模型组c-fos蛋白表达升高趋势较为明显,电针促进这种趋势,且在术后2d与模型组比较,差异具有统计学意义.结论:电针能够促进脊髓损伤后大鼠脊髓损伤部cfos mRNA及蛋白的表达.     

穹窿海马伞切割大鼠海马内Brn-4 mRNA 的表达变化

目的探讨切割穹窿海马伞大鼠海马与正常海马内Brn-4 mRNA表达的差异。方法42只SD大鼠随机分成正常对照组和切割海马伞后1、3、7、14、21及28d组。取各组大鼠的海马组织,提取总RNA,采用半定量RT-PCR法分析穹窿海马伞切割后海马内Brn-4 mRNA表达水平的变化。结果海马内Brn-4 mRNA的表达量在切割后第3d开始升高,14d达到最高水平,随后下降,28d左右恢复至正常水平。结论切割穹窿海马伞后海马内Brn-4 mRNA表达明显上调,可能与促进神经干细胞更多地向神经元和AChE阳性神经元分化有关。     

三叶因子1在实验性胃溃疡自愈期大鼠下颌下腺的表达及意义

目的 探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间下颌下腺三叶因子1(TFF1)的表达变化.方法 采用免疫组织化学和RT-PCR法,分别从蛋白水平及基因水平检测42只溃疡组、21只盐水组和6只正常组大鼠下颌下腺TFF1的表达.结果 免疫组织化学SP法显示,正常大鼠下颌下腺颗粒曲管的多颗粒细胞呈TFF1免疫反应阳性,各级导管管腔内也有TFF1阳性物质,纹状管管腔游离面可见线条状TFF1阳性物.溃疡组下颌下腺TFF1肽积分吸光度值明显增加,高于相应的盐水对照组和正常组(P<0.05或P<0.01),其中1d、2d、4d、6d TFF1肽积分吸光度值逐渐增加,6d最高,10d、14d、23d也显著高于盐水对照组.RT-PCR结果 显示,下颌下腺有TFF1 mRNA转录,且溃疡组TFF1/GAPDH mRNA吸光度比值在溃疡2～23d均高于盐水对照组和正常组(P<0.01或P<0.05).结论 下颌下腺TFF1肽在大鼠实验性胃溃疡形成和愈合过程中高表达,主要通过导管系统排泄,参与实验性胃溃疡的愈合.     

视神经横断后生长抑制因子Nogo及其受体NgR mRNA表达的变化及意义

观察大鼠视神经横断后Nogo-A及其受体NgR mRNA表达的变化.将36只正常成年SD大鼠随机分为三组,视神经横断7d组、14d组和正常对照组,每组12只.分别提取视神经组织,使用实时荧光定量聚合酶链式反应法定量分析Nogo-A及NgR mRNA表达量的变化.实验结果显示,在大鼠的视神经组织中存在Nogo-A及其受体...     

大鼠坐骨神经切断后IGF-Ⅰ、BDNF和TrkB在背根节表达的实验研究

目的：观察大鼠坐骨神经切断后IGF-Ⅰ、BDNF及TrkB在背根节（DRG）表达变化规律，探讨三者在神经保护和再生中的作用机制。方法：健康成年雄性Wister大鼠随机分为对照组和实验组，实验组切断右侧大腿坐骨神经后存活3～28d，荧光定量RT-PCR方法检测L4-6背根节（DRG）中IGF-Ⅰ、BDNF和TrkB基因mRNA的表达。结果：坐骨神经损伤后3d，L4-6 DRGIGF-Ⅰ、BDNF和TrkB基因mRNA表达均有不同程度的升高，到7-14d达高峰，后逐渐下降到正常水平。结论：坐骨神经损伤后，IGF-Ⅰ、BDNF和TrkB基因mRNA表达同步变化提示它们在外周神经损伤后神经保护及再生中可能存在相互作用。     

慢性缺氧致大鼠右心室心肌细胞调亡及其机制研究

目的:通过建立大鼠慢性缺氧心肌肥大模型,探讨慢性缺氧致大鼠心肌细胞凋亡的发生规律及其机制.方法:将大鼠随机分为慢性缺氧组和正常对照组,每组30只,慢性缺氧组置于氧浓度为(10.0±0.5)%的大型玻璃舱中,分别持续缺氧14、21、28 d,分别于第14、21、28 d处死大鼠,取心脏称重,留右心室,进行形态学观察,分析心肌细胞凋亡形态及计量,检测肌球蛋白β重链(B-MHC)、原癌基因B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、Bad等mRNA及Bcl-2、Bad蛋白的表达水平.结果:(1)慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室/(左心室+室间隔)[RV/(LV+s)]、右心室/体重(RV/BW)比值及右心室β-MHC mRNA和蛋白表达均明显高于正常对照组(均P<0.01),并且随时间延长而增高(均P<0.01).(2)慢性缺氧心肌细胞凋亡指数14、21、28 d组大鼠均明显高于正常对照组(均P<0.01),且随着时间的延长而增加(均P<0.01).(3)慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室bcl-2 mRNA表达和Bcl-2蛋白表达均明显低于正常对照组(均P<0.05),缺氧28 d组bcl-2 mRNA表达和Bcl-2蛋白表达较缺氧14 d组显著降低(均P<0.05).慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室bad mRNA表达和Bad蛋白表达与正常对照组比较无明显改变(均P>0.05).(4)慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室bcl-2/bad比值均明显低于正常对照组(均P<0.05),缺氧28 d组bcl-2/bad比值较缺氧14 d组显著降低(P<0.05).结论:慢性缺氧可以诱导大鼠右心室心肌细胞凋亡和心肌肥大,且大鼠右心室心肌细胞凋亡和心肌肥大程度随着缺氧时间的延长而增加.慢性缺氧通过抑制大鼠右心室心肌细胞抗凋亡基因bcl-2表达,使bcl-2/bad比值下调,打破原有的平衡,导致心肌细胞凋亡.     

BYHWD对脊髓损伤大鼠脊髓组织Bcl-2和Bax表达的影响

目的:观察补阳还五汤(buyanghuanwu decoction,BYHWD)对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型大鼠脊髓神经细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及其mRNA表达的影响,初步探讨BYHWD抑制脊髓神经细胞凋亡的作用机制。方法:Wistar大鼠40只,随机分为四组:正常对照组、SCI模型组、BYHWD组和甲基强的松龙(MP)注射组,每组10只大鼠;后三组动物先建立SCI损伤模型,然后分别给予BYHWD组和MP组BYHWD和MP治疗。四组动物分别于术后1、7、14、21 d和28 d对大鼠后肢神经功能的恢复情况进行BBB(Basso-Beattie-Bresnahan)功能评分。第28 d处死各组大鼠,采用Real-time PCR法检测脊髓组织Bcl-2和Bax mRNA的表达情况,Western Blot法检测脊髓组织Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果:大鼠麻醉清醒后,SCI组大鼠损伤平面以下完全瘫痪。BBB评分结果显示:术后第7 d~28 d,与正常对照组相比,SCI组BBB评分明显降低(P0.05);与SCI组相比,BYHWD处理组和MP处理组大鼠BBB评分明显增高(P0.05),但BYHWD处理组和MP处理组大鼠相比,BBB评分无明显差异(P0.05)。Real-time PCR和Western Blot结果显示:与正常对照组相比,SCI组Bax蛋白及mRNA的表达明显升高(P0.05),而Bcl-2蛋白及mRNA的表达则明显有所降低(P0.05)。与SCI组相比,BYHWD处理组和MP处理组大鼠脊髓组织Bax蛋白及mRNA表达明显降低(P0.05),而Bcl-2蛋白及mRNA表达则明显有所升高(P0.05)。但BYHWD处理组和MP处理组大鼠脊髓组织Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达之间无明显差异(P0.05)。结论:BYHWD可以改善SCI大鼠后肢的运动功能,通过下调Bax的表达,上调Bcl-2的表达,从而抑制SCI大鼠脊髓神经细胞的凋亡,发挥其保护作用。     

Sertoli细胞FasL 和TGF-β mRNA表达在感染时的免疫调节作用

目的 研究大鼠Sertoli细胞在睾丸局部感染时的免疫调节作用。方法 以解脲脲原体（UU）和致病性大肠杆菌，直接注入大鼠膀胱模拟上行性感染的途径，分别在感染后1、2、3wk处死大鼠，从大鼠睾丸组织中分离获得高纯度的Sertoli细胞。然后抽提总RNA，用RT－PCR法比较正常组与UU感染组、致病性大肠杆菌感染组之间FasL mRNA和TGF－β mRNA表达的差异性。结果 与正常组相比较在UU感染后，1－3wk FasL mRNA的表达均升高；TGF－β mRNA的表达在1、2wk时升高，3wk时下降；而致病性大肠杆菌感染后，FasL mRNA和TGF－β mRNA的表达在1－3wk时均升高。结论 大鼠Sertoli细胞在抗感染免疫中，可通过FasL mRNA和TGF－β mRNA表达的变化，调节睾丸局部的免疫功能及有助于睾丸免疫豁免的维持。     

外源性hCG对肾组织EGF的影响

目的:探讨外源性绒毛膜促性腺激素(hCG)对肾组 织表皮生长因子(EGF)的影响.方法:300-350克雄性SD 大鼠20只,分为对照组和实验组,每组10只.实验组肌肉注射hCG 200 IU/d,对照组肌肉注射等量生理盐水,连续注射7 d.用免疫组化分析两组大鼠肾脏EGF表达,用荧光定量PCR法检测肾脏组织EGF mRNA相对表达量.结果:免疫组化结果显示hCG干预后,实验组肾脏EGF的阳性率明显高于对照组(P<0. 01).然而荧光定量PCR结果显示EGF mRNA表达量在实验组与对照组间无统计学差异(P>0. 05).结论:外源性hCG在一定剂量范围内促进肾脏EGF的成熟而非合成.     

凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax在糖尿病大鼠下颌下腺内的表达

目的:观察糖尿病大鼠下颌下腺内凋亡相关蛋白Bcl-2和Pax表达变化.方法:SD雄性大鼠用链脲佐菌素复制糖尿病动物模型,H-E染色观察下颌下腺形态学变化,免疫组织化学SABC技术检测Bcl-2及Bax蛋白表达变化.结果:糖尿病组大鼠下颌下腺组织萎缩,间质纤维增生.与对照组比较,糖尿病组大鼠下颌下腺导管上皮细胞Bcl-2表达下降,Bax表达显著增加.结论:Bcl-2及Bax表达在糖尿病病理变化过程中出现了一定的变化规律.     

5-HT_1受体亚型mRNAs在坐骨神经分支选择损伤模型大鼠脊髓背角的表达变化

为探讨脊髓内5-HT1受体亚型在神经病理性痛信息传递和调控中的作用,本研究利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术观察了坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型大鼠脊髓背角内5-HT1A、5-HT1B、5-HT1D、5-HT1E和5-HT1F受体亚型mR-NAs表达变化。结果表明:损伤侧脊髓背角内5-HT1A受体亚型mRNA的表达水平在术后3d明显增高,7d达到高峰,随后开始下降,术后28d与正常对照相比仍有显著变化;5-HT1B受体亚型mRNA的表达水平也于术后3d开始显著增高,此后持续升高,至21d达到高峰,28d时有轻微下调,但高于对照水平;未观察到损伤侧脊髓背角内5-HT1D受体亚型mRNA表达水平的显著变化。5-HT1F受体亚型mRNA的表达水平于术后4d显著增高,此后一直维持该表达水平至28d。上述受体亚型在非损伤侧脊髓背角内的表达水平均无变化。在脊髓背角内未检测到5-HT1E受体亚型mRNA的表达。上述5-HT1受体亚型mRNA在SNI模型脊髓背角内具有不同的表达变化特点,提示不同的5-HT1各受体亚型在神经病理性痛信息的传递和调节中可能发挥着不同的作用。     

5-HT_(1A)受体亚型mRNA在坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠脊髓和背根节中的表达变化(英文)

坐骨神经分支选择性损伤 (SNI)模型是一种新型神经病理痛模型。本实验用 SD雄性大鼠 ,分支结扎并切断左侧坐骨神经干的胫神经和腓总神经 ,保留腓肠神经分支 ,右侧仅暴露坐骨神经。术后 1、2、3、4、7、14、2 1和 2 8d,用 RT-PCR的方法对 5 -HT1 A受体 m RNA在腰髓的背角和背根神经节 (DRG)的表达水平进行检测。结果显示 ,5 -HT1 A受体 m RNA在损伤侧腰髓背角内的表达水平于 1d后开始升高 ,7d时达高峰 ,随后逐渐下降 ,但仍高于正常水平。其表达水平在对侧脊髓背角内没有明显变化。在损伤侧 DRG内 ,5 -HT1 A受体 m RNA的表达水平于 1d后开始增高 ,4d时达高峰 ,随后开始下降 ,但仍维持较高的表达水平 ;而损伤对侧 DRG内的 5 -HT1 A受体 m RNA的表达没有变化。上述结果提示 5 -HT1 A受体亚型可能在脊髓及外周伤害性信息的传递和调节中发挥着重要作用 ,本研究的结果为进一步了解 5 -HT1 A受体在神经病理性痛中的作用机制提供了依据。     

水通道蛋白1在生后小鼠精囊腺与前列腺发育过程中的表达与分布

目的 探讨水通道蛋白1(AQP1)在雄性小鼠出生后不同发育阶段精囊腺和前列腺的表达与分布.方法 应用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学染色方法,检测出生后15d、35d、70d 小鼠精囊腺、前列腺AQP1 mRNA、蛋白表达水平及细胞定位.结果 RT-PCR与免疫印迹结果均显示,出生后70d小鼠精囊腺、前列腺AQP1 mRNA及蛋白表达量较出生后15d显著增强(P<0.05);免疫组织化学染色显示,AQP1蛋白仅表达于出生后15d、35d小鼠精囊腺平滑肌细胞、前列腺腺泡上皮细胞基膜及间质细胞,而此时期精囊腺上皮细胞AQP1蛋白表达呈阴性;出生后70d,AQP1蛋白强烈表达于精囊腺和前列腺上皮细胞.结论 AQP1 mRNA及蛋白在雄性小鼠精囊腺、前列腺的表达与分布随年龄增长而改变,此变化可能与雄性附属性腺发育相关.     

运动神经诱向因子1及其受体在大鼠下颌下腺的表达

实验用运动神经诱向因子１的单克隆抗体及抗独特型单克隆抗体的免疫组织化学染色研究了运动神经诱向因子１及其受体在大鼠下颌下腺的表达。邻片免疫组织化学法显示：成年雄性大鼠下颌下腺的浆液性腺泡及各级导管上皮细胞增多呈运动神经诱向因子１及其受体的免疫的应阳性，副交感神经节细胞也呈运动神经诱向因子１及其受体免疫反应阳性，提示下颌下腺的以上结构均能自分泌运动神经诱向因子１。生后１日龄大鼠、仅见个别腺导管显示为极     

表皮生长因子对新生大鼠高氧损伤肺组织EGFR及EGF mRNA表达的影响

目的： 探讨外源性表皮生长因子（EGF）对新生大鼠高氧损伤肺组织EGFR及EGF mRNA表达的影响。方法： 取胎龄21 d剖宫产出生的新生Sprague dawley （SD）大鼠持续吸入95％的O2制作未成熟肺高氧损伤模型，随机分为高氧表皮生长因子（EGF）组和高氧生理盐水（NS）组，另设空气NS对照组；所有组按给药（或NS）时间分为3个亚组，即：a亚组(1-3 d)、b亚组(4-6 d)、c亚组(1-6 d)；各亚组均于生后3、7、14 d分批处死取肺组织。应用免疫组化观察各组肺组织EGF-R的表达，RT-PCR方法检测EGF-mRNA的表达。结果： EGF mRNA的表达随着日龄增加而递增，生后7、14 d高氧组EGF-R及EGF mRNA的表达高于空气对照组，14 d EGFa和c亚组EGF-R的表达均明显高于相应的高氧NS组(P＜0.05)，14 d时EGF组内源性EGF mRNA的表达较NS组明显增加(P＜0.01)。结论： 早期应用EGF可促进肺泡上皮细胞EGF-R的表达，改善高氧所致肺发育受阻，对未成熟肺高氧损伤有一定的保护作用。     

神经性痛和炎性痛大鼠伏核内CGRP mRNA表达的变化

为了研究神经性痛和炎性痛大鼠伏核内CGRP mRNA表达的变化,本研究分别制备神经性痛及炎性痛大鼠动物模型,并运用实时定量逆转录聚合酶链式反应(PCR)技术,观察大鼠伏核内CGRP mRNA含量的改变。实验中以β-actin为内参,记录大鼠伏核内CGRP mRNA表达产物的CT值,并计算每一样品对应其内参的相对含量,分析随时间变化致痛因素对大鼠伏核内CGRP mRNA表达产物含量的影响。结果显示:神经损伤组5、10、20、30d及炎症组3d,CGRP mRNA的表达比正常对照组明显增高(P<0.05);而在炎症组7d时,CGRP mRNA的表达与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。以上结果提示CGRP作为一种神经递质或调质参与痛觉的调制过程,其主要是在炎症早期发挥作用。     

LPS性肺损伤大鼠一氧化氮合酶表达和肺细胞凋亡变化

目的: 观察内毒素性肺损伤过程中肺细胞凋亡和一氧化氮合酶（NOS）mRNA表达的时程性变化及关系,探讨LPS性肺损伤（ALI）的发病机制。方法: 健康雄性SD大鼠48只,随机分成2组:①对照组：静注等量生理盐水；②模型组(LPS组)：静注LPS复制ALI模型,分别于给药1、3、6、9及12h后采集样品；逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定肺组织中NOSmRNA表达变化；电镜、流式细胞术检测肺细胞凋亡率；免疫组化法测定Bcl-2和Bax；光镜、电镜观察肺组织病理变化。结果: 与对照组比较，LPS组iNOSmRNA表达随时间延长而增强，给予LPS 3 h后有显著差异(P<0.05)，eNOSmRNA随时间延长而降低，给LPS 3 h时有显著差异(P<0.05)，nNOSmRNA在观察时间内没有变化；光镜和电镜下可见在观察时间内1 h起肺损伤随时间延长加重；流式细胞术显示LPS组凋亡细胞随时间延长增多，9 h达高峰，12 h有所降低；免疫组化结果显示，LPS组随时间延长Bcl-2减少，主要表现在肺上皮细胞，Bax增多；对照组无明显变化。结论: 不同一氧化氮合酶在ALI中表达强度不同；抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax是ALI时调节细胞凋亡的途径之一；一氧化氮合酶可能通过调节Bcl-2和Bax平衡而影响凋亡。