溴氰菊酯染毒大鼠的脑组织中GCS亚单位和Nrf2表达的时间进程

目的研究溴氰菊酯(DM)对大鼠大脑皮层和海马组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GCS)轻亚单位(GCSl)和重亚单位(GCSh)mRNA表达,以及GCSh和转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)基因蛋白表达时间进程的影响。方法DM染毒组(DM12·50mg/kg bw)和溶剂对照组大鼠染毒1次,分别于大鼠染毒后不同时间点处死大鼠,分离皮层和海马。用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法测定mRNA表达的相对量。联合用免疫组织化学方法和图像分析系统检测海马和大脑皮层中GCS重亚单位蛋白(GCS-HS)和Nrf2蛋白的水平。结果(1)DM染毒后第5h和第48h大鼠大脑皮层中GCSh mRNA相对水平分别降低至对照组的83·9%、86·0%(P<0·05),第5h、24h和48h Nrf2mRNA分别增高至0h对照组的146·4%、145·2%和147·9%(P<0·05)。(2)DM染毒后第5h和24h海马中GCSh mRNA相对水平分别增高至0h对照组的118·4%、118·4%(P<0·05),第5h海马中GCSl mRNA比0h对照组、24h和48h组均高,增高至对照组的121·4%(P<0·05)。DM染毒后各时间点海马Nrf2mRNA水平未见明显的变化(P>0·05)。(3)DM染毒后海马不同分区(CA1、CA2、CA3和齿状回)和大脑皮层中的GCS催化亚单位(GCS-HS)和转录因子Nrf2蛋白水平均未见明显改变。结论本实验条件下DM染毒后,大鼠海马GCSh和GCSl mRNA基因表达出现上调,而脑皮层GCSh基因表达出现下调,Nrf2mRNA水平表达出现上调,但海马和皮层组织中的GCS-HS和Nrf2蛋白水平未见显著变化。     

P13K／Akt—Nrf2信号通路调节大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达的研究

目的观察香烟烟雾提取物（CSE）通过磷酯酰肌醇-3-激酶（PBK）／Akt—Nrf2（Nuclearfactor—E2relatedfactor）信号通路对大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）的影响。方法用浓度为10％的CSE对体外原代培养的大鼠气道上皮细胞进行不同时间处理及使用P13K特异抑制剂LY294002进行干预。观察CSE在不同的时间及使用LY294002干预后对Nrt2的核转位及γ-GCS的影响,用细胞免疫化学、流式术、免疫荧光及Westernblot方法检测Nrf2、p-Akt及γ-GCS的表达水平;用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测γ-GCSmRNA的表达水平;检测还原型谷胱甘肽（GSH）的含量及γ-GCS的活性。结果暴露CSE后1h,GSH含量明显低于对照组,在暴露CSE后3h和6h,GSH含量明显增高。Nrf2蛋白质在对照组主要表达在胞浆,其蛋白质表达增强,而在CSE1h、CSE3h和CSE6h组主要在胞核中表达,其蛋白质表达增强。p-Akt蛋白质在暴露CSE后1h增强,3h最强,6h减弱。p-Akt阳性细胞百分比变化趋势与其蛋白质变化趋势相同。γ—GCSmRNA和蛋白质在CSE1h、CSE3h、CSE6h组表达逐渐增强。γ—GCS活性在CSE1h、CSE3h、CSE6h组逐渐增强。预先使用LY292002,p-Akt阳性细胞百分比及蛋白质表达明显弱于CSE3h组,Nrf2胞浆蛋白质表达增强,胞核表达减弱,吖-GCSmRNA、蛋白质和活性及GSH含量均明显低于CSE3h组。相关性分析显示Nri2与γ-GCS、γ-GCS活性呈正相关（r=0．81,0．77,P〈0．05）,p-AM与γ-GCS、γ-GCS活性、GSH及Nrf2呈正相关（r=0．373,0．44,0．63,0．56,P〈0．05）。结论P13K／Akt信号通路可能参与Nrf2核转位及其对抗氧化基因γ-GCS的调控。     

PI3K/Akt-Nrf2信号通路调节大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达的研究

目的 观察香烟烟雾提取物(CSE)通过磷酯酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt-Nrf2(Nuclear factor-E2 related factor)信号通路对大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的影响.方法 用浓度为10%的CSE对体外原代培养的大鼠气道上皮细胞进行不同时间处理及使用PI3K 特异抑制剂LY294002进行干预.观察CSE在不同的时间及使用LY294002干预后对Nrf2的核转位及γ-GCS的影响,用细胞免疫化学、流式术、免疫荧光及Western blot方法检测Nrf2、p-Akt及γ-GCS 的表达水平;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测γ-GCS mRNA的表达水平;检测还原型谷胱甘肽(GSH)的含量及γ-GCS的活性.结果 暴露CSE后1h,GSH含量明显低于对照组,在暴露CSE后3 h和6 h,GSH含量明显增高.Nrf2蛋白质在对照组主要表达在胞浆,其蛋白质表达增强,而在CSE1h、CSE3h和CSE6h组主要在胞核中表达,其蛋白质表达增强.p-Akt蛋白质在暴露CSE后1h增强,3 h最强,6 h减弱.p-Akt阳性细胞百分比变化趋势与其蛋白质变化趋势相同.γ-GCSmRNA 和蛋白质在CSE1h、CSE3h、CSE6h组表达逐渐增强.γ-GCS活性在CSE1h、CSE3h、CSE6h组逐渐增强.预先使用LY292002,p-Akt阳性细胞百分比及蛋白质表达明显弱于CSE3h组,Nrf2胞浆蛋白质表达增强,胞核表达减弱,γ-GCS mRNA、蛋白质和活性及GSH含量均明显低于CSE3h组.相关性分析显示Nrf2与γ-GCS、γ-GCS活性呈正相关(r=0.81,0.77,P<0.05),p-Akt与γ-GCS、γ-GCS活性、GSH及Nrf2呈正相关(r=0.373,0.44,0.63,0.56,P<0.05).结论 PI3K/Akt信号通路可能参与Nrt2核转位及其对抗氧化基因γ-GCS的调控.     

亚慢性砷暴露对大鼠脑组织氧化应激和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达影响

目的观察亚慢性砷暴露对大鼠脑组织抗氧化能力影响及γ-GCS表达变化,探讨砷暴露致神经损害机制。方法采用40只清洁级SD大鼠(体重:100 g±20 g),随机分为4组,即对照组(蒸馏水)、低剂量组(2.4 mg/L NaAsO_2溶液)、中剂量组(12 mg/L NaAsO_2溶液)和高剂量组(60 mg/L NaAsO_2溶液),每组10只,雌雄各半。以自由饮水方式染砷100 d。采用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定脑砷含量;比色法测定脑组织总抗氧化能力;微量测试法测定脑海马组织GSH浓度;实时荧光定量(qRT-PCR)测定海马γ-GCS mRNA;免疫组化法测定γ-GCS蛋白的表达。结果染砷组与对照组比较:染砷组体重差异无统计学意义(P0.05)、脑组织砷含量增高、总抗氧化能力下降、海马组织谷胱甘肽浓度降低,差异均有统计学意义(P0.05);染砷组大鼠海马区γ-GCS mRNA表达下调、γ-GCS蛋白表达下降,差异均有统计学意义(P0.05)。结论亚慢性砷暴露可导致脑组织氧化损伤,诱发氧化应激及γ-GCS表达降低,从而使脑组织中GSH水平下降。     

拟除虫菊酯对大鼠脑组织中白介素-1β的影响

目的 探讨细胞因子与拟除虫菊酯中枢神经系统损害机制的关系。方法 用逆转录－聚合酶链式反应（RTPCR)和免疫组织化学方法观察了拟除虫菊酯对大鼠脑组织中白细胞介素1beta(IL－1β)表达的影响。结果 大鼠经氯菊酯一次大剂量和多次小剂量处理后，其皮层和海马的IL－1βmRNA水平有明显的升高，分别是对照组的2．1，1．9和1．9，1．9倍；而一次大剂量氯菊酯处理后其蛋白水平的表达在海马尤其是CA3区显著升高，达到对照的1．5倍，皮层则无明显变化，小剂量反复给药后皮层和海马的蛋白表达均明显上升。溴氰菊酯处理后IL－1β的mRNA也有升高趋势，而蛋白水平没有明显的改善。结论 拟除虫菊酯对IL－1β快速诱导可能是脑组织对损伤的一种保护反应。     

不同碘摄入水平对仔代大鼠脑组织抗氧化能力及相关基因表达的影响

目的通过研究不同碘摄入量的仔代大鼠脑组织抗氧化酶活力及其相关基因表达、过氧化产物含量,探讨碘对大鼠脑组织抗氧化能力的影响.方法将断乳后1个月的Wistar大鼠随机分为4组(即低碘组,适碘组,10倍碘组,50倍碘组),每组20只,分别饮用含不同碘浓度的水,每组每日总碘摄入量分别为＜1、6.15、61.5和307.5μg/d.饲养3个月后随机交配,仔鼠饲养28 d后,断头取其脑组织,称重,进行抗氧化酶活力及过氧化产物浓度测定,以RT-PCR方法检测抗氧化酶基因表达水平.结果与适碘组相比,大鼠脑内丙二醛(MDA)含量仅在低碘组明显升高(P＜0.01),超氧化物歧化酶(SOD)活力在低碘组升高(P＜0.05),在50倍碘组明显降低(P＜0.01);SOD/MDA在低碘组和50倍碘组均明显降低(P＜0.05,P＜0.01);谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力在低碘组、10倍碘组和50倍碘组降低(P＜0.05,P＜0.01),GSH-Px/MDA也明显降低(P＜0.01).与适碘组相比,在10倍碘组和50倍碘组SODmRNA表达降低,各组GSH-Px mRNA表达无明显变化.结论碘缺乏和碘过量都可对仔代大鼠脑组织抗氧化能力有影响,造成脑组织自由基损伤,且低碘组比高碘组损伤明显;SOD和GSH-Px活力受转录、翻译、翻译后修饰等多水平调控.     

2,4-D丁酯亚慢性染毒对雄性大鼠脑组织中谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影响

目的探讨2,4-D丁酯（butyl 2,4-dichlorophenoxyacetate,2,4-D b.e.）亚慢性染毒对雄性大鼠脑组织中氨基酸类神经递质谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）含量的影响。方法将40只健康30 d龄SPF级雄性Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照（玉米油:蒸馏水体积比为1:1）组和低(1/100 LD₅₀,6 mg/kg)、中(3/100 LD₅₀,18 mg/kg)和高剂量(6/100 LD₅₀,36 mg/kg)2,4-D丁酯染毒组,每组10只。经口灌胃染毒,每周连续染毒5 d,实验周期为90 d。染毒结束后,高效液相色谱法检测大鼠大脑皮层、海马、小脑中GABA、Glu的含量。结果随着2,4-D丁酯染毒剂量的升高,大鼠大脑皮层、海马、小脑中的Glu含量和Glu/GABA值均呈升高趋势;大脑皮层和海马中的GABA含量呈下降趋势,小脑中GABA含量呈先上升后下降的趋势。结论 2,4-D丁酯亚慢性染毒可破坏小鼠脑组织中Glu和GABA水平之间的动态平衡。     

乙苯对大鼠脑组织氧化损伤和超微结构及凋亡相关基因表达的影响

目的 观察亚慢性接触乙苯对大鼠脑组织氧化损伤、超微结构及凋亡相关基因表达的影响.方法 SD大鼠40只,随机分为4组,每组20只.暴露于0.0、433.5、4335.0和6500.0mg/m3的乙苯,6h/次,5次/周,共13周,建立大鼠乙苯亚慢性染毒模型,检测脑组织乙酰胆碱酯酶(AChE)活力、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量,电子显微镜观察脑组织超微结构,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测脑组织B细胞淋巴瘤-2相关联X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、细胞色素C(Cyt C)、细胞凋亡蛋白酶(Caspase-3)、半胱天冬酶-9(Caspase-9)等基因的表达.结果 4335.0和6500.0 mg/m3剂量组大鼠脑组织内MDA含量[(2.03±0.56)、(4.17±1.31)nmol/mg pro]明显高于对照组[(1.08±0.26)nmol/mg pro],差异有统计学意义(P<0.05),各剂量组大鼠脑组织AChE活力[(0.321±0.066)、(0.276±0.031)、(0.202±0.041)U/mg]和GSH含量[(35.19±15.08)、(33.42±15.32)、(27.99±7.53)mg/g pro]均明显低于对照组[AchE活力(0.583±0.125)U/mg,GSH含量(76.38±18.41)mg/g pro],差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05).6500.0mg/m3乙苯处理组大鼠脑组织电镜下观察可见核仁呈半月形,胞质线粒体减少,受损的神经纤维内含高电子密度的髓磷体结构,为膜性结构脂质过氧化损伤所形成.4335.0和6500.0 mg/m3剂量组Bax基因表达水平明显高于对照组和433.5 mg/m3剂量组;与对照组相比,各剂量组Cyt C、caspase-9、caspase-3基因表达水平皆明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);各剂量组Bcl-2的基因表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 乙苯可诱导大鼠脑组织氧化损伤,发生凋亡,其机制可能乙苯可导致Bax、Cyt C、caspase-9、caspase-3基因的上调和抑制Bcl-2的表达有关.     

锌对缺血再灌注大鼠肝脏金属硫蛋白-1基因表达的影响

目的　研究锌对肝脏缺血再灌注损伤 (HIRI)保护作用的分子机制。方法　采用RT- PCR技术 ,检测分析金属硫蛋白 - 1 (MT- 1 )基因在 HIRI大鼠肝组织中的表达和锌对其表达的调节。结果　各组大鼠肝组织均有MT- 1基因表达 ;缺血 30 min、再灌 90 min大鼠肝组织中 MT- 1m RNA较对照组显著降低 (P<0 .0 1 ) ;灌胃补锌后 ,HIRI大鼠肝 MT- 1 m RNA转录水平较对照组明显增高 (P<0 .0 1 ) ,单纯补锌亦可上调其组织中 MT- 1基因表达 (P<0 .0 1 )。结论　在锌对HIRI产生保护作用的分子机制中 ,调节其肝组织中 MT- 1转录水平的表达可能是一条重要途径。     

溴氰菊酯对大鼠脑组织自由基生成和转录因子Nrf2表达的影响

目的 研究溴氰菊酯(DM)诱导大鼠脑组织中自由基生成和对转录因子Nrf2的影响.方法 (1)8只大鼠随机分成4组,即橄榄油对照组、DM染毒组、叔丁基对苯二酚(tBHQ)组和tBHQ+DM组.在预先喂饲雄性大鼠tBHQ 3 d后,用12.50mg/kg DM染毒大鼠5 d,用电子自旋共振(ESR)直接法测定海马组织中的自由基.(2)18只雄性大鼠分为3组,分别给予橄榄油及3.13、12.50 mg/kg DM连续染毒5 d,用Western blot方法测定大脑皮层和海马细胞质或细胞核中Nrf2蛋白水平.结果 (1)DM染毒组大鼠与tBHQ+DM组大鼠海马中自由基水平增高,分别是对照组的2.45倍和2.97倍,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)低、高剂量DM染毒大鼠大脑皮层的细胞质中Nrf2蛋白表达水平增高,分别是对照组的1.68倍和1.34倍;细胞核中的Nrf2蛋白表达呈剂量-效应关系性增高,分别是对照组的1.51倍和2.29倍,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).(3)低、高剂量DM染毒大鼠海马组织的细胞质Nrf2蛋白表达呈剂量-效应关系性增高,分别是对照组韵2.26倍和3.58倍;细胞核中的Nrf2蛋白表达也增高,分别是对照组的2.42倍和2.45倍,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DM染毒能诱导大鼠海马组织中自由基生成,DM能诱导大脑皮层和海马组织中的Nrf2蛋白表达.     

溴氰菊酯对大鼠脑组织线粒体膜通透性和细胞色素C表达的影响

目的研究溴氰菊酯(DM)对大鼠脑组织线粒体膜通透性及细胞色素C表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为实验组(4个不同染毒时间)和对照组,每组5只。实验组按12．5 mg/kg DM一次腹腔注射,5、24、48、72 h后处死；对照组一次腹腔注射5 mg/kg的色拉油,分别提取大鼠大脑皮层和海马的线粒体,测定线粒体膜通透性、细胞色素C氧化酶,并测定大鼠大脑皮层、海马CA1、CA2、CA3、CA4区细胞色素C的表达。结果实验组与对照组相比,5、24、48、72 h组的线粒体膜通透性增大；皮层和海马CA1区、CA2区5、24、48 h组(0．57±．04、0．67±0．09、0．58±0．04)、CA4区24 h组(0．81±0．18)细胞色素C表达增强,吸光度值的差异有统计学意义(P＜0．05或P＜0．01)；CA2区72 h组、CA3区及CA4区5、48、72 h组细胞色素C表达,吸光度值的差异则无统计学意义(P＞0．05)；细胞色素C氧化酶的活力则受到抑制,差异有统计学意义(P＜0．01)。结论DM能明显增加大鼠脑组织线粒体膜通透性,促使细胞色素C表达增强。     

甲基汞对大鼠胚胎细胞毒性和相关基因表达的影响

目的从细胞和基因水平揭示甲基汞的发育毒性作用机理。方法应用体外／体内大鼠模型、原位杂交等方法观察甲基汞（体外染毒剂量依次为０、０．０５、０．１０、０．２０、０．４０、０．８０和１．６０ｍｇ／Ｌ;体内染毒剂量依次为０、０．２、０．４、０．８、１．６和３．２ｍｇ／ｋｇ）对９．５天龄大鼠胚胎细胞行为和基因表达的影响。结果甲基汞能通过卵黄囊胎盘,但高浓度可抑制胎盘发育和血管分化;甲基汞对胚胎的发育毒性与其浓度间存在剂量反应关系,胚胎畸形的主要表现是神经管未闭和体位异常。甲基汞能激发胚胎细胞过度凋亡,明显抑制细胞ＤＮＡ和ＲＮＡ的合成,损害胚胎细胞超微结构。甲基汞能诱发热休克蛋白７０基因大量表达,抑制纤维连接蛋白基因和ｐ１６基因的表达;热休克蛋白７０基因、Ｃａ２＋、细胞凋亡与畸形的发生之间具有相关性。结论胚胎细胞行为和相关基因表达异常在甲基汞的发育毒性作用机理中起重要作用。     

苯并[a]芘对大鼠脑组织中神经细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因表达的影响

目的 观察苯并[a]芘(B[a]P)染毒大鼠神经细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达,以探讨B[a]P对大鼠神经毒性及其作用机制.方法 32只SD大鼠,按体重随机分为4组,每组8只,染毒组分为高、中、低3个剂量组(126.2、63.1、31.5 μg/kg的B[a]P溶液),并设溶剂对照组(50 μl/kg橄榄油),均采用侧脑室微量注射染毒处理,每周1次,连续3周;在染毒3周后采用原位末端缺口标记(TUNEL)法和免疫组织化学法分别对各组大鼠脑组织凋亡细胞的分布及Bcl-2、Bax免疫反应阳性细胞进行观察和检测.结果 TUNEL染色结果显示,在大鼠大脑皮质及海马区的细胞核中可以见到棕黄色的凋亡小体,而且随着染毒剂量的增高,出现凋亡小体的细胞数逐渐增多.与溶剂对照组相比,高剂量组大鼠大脑皮质及海马神经细胞凋亡指数(AI)均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).免疫组化染色结果显示,与溶剂对照组相比,中、高剂量染毒组大鼠大脑皮质及各剂量组海马区神经细胞的Bcl-2蛋白表达均明显下降,Bax蛋白表达均明显升高,各组大鼠皮质及海马神经细胞的Bcl-2/Bax比值均下降,差异均有统计学意义(P＜0.05或(P＜0.01).大鼠大脑皮质及海马区神经细胞AI与Bel-2呈负相关(r=-0.927,P＜0.01;r=-0.934,P＜0.01),AI与Bax呈正相关(r=0.858,P＜0.01;r=0.874,P＜0.01),AI与Bcl-2/Bax比值呈负相关(r=-0.939,P＜0.01;r=-0.942,P＜0.01).结论 B[a]P可引起大鼠大脑皮质及海马区神经元细胞的凋亡,且调控凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达,在B[a]P致神经细胞凋亡的过程中发挥了重要的作用.     

HIV相关神经认知障碍患者脑组织基因表达谱的变化及生物信息学分析

目的 分析人类免疫缺陷病毒相关神经认知障碍（human immunodeficiency virus-related neurocognitive disorder,HAND）患者脑组织基因表达芯片数据的生物学网络调控及关键蛋白,为后期HAND预防及治疗提供新的理论依据。方法 从基因芯片公共数据库（gene expression omnibus,GEO）中下载美国纽约HAND患者（14例）和非患者（7例）脑组织基因芯片数据,利用基因云,基因大数据分析（gene-cloud of biotechnology informs,GCBI）实验平台、GenClip 2.0和Sytoscape 3.5.1软件,筛选差异表达基因,探讨差异基因的蛋白交互作用网络和生物学通路,从转录组角度阐述HAND发展的分子机制。结果 与对照组相比,HAND组共有780个（1.43%）差异表达基因;主要涉及免疫应答、免疫调控、抗感染、抗病毒、细胞信号传导及突触传递等功能。LYN和RPS4Y1基因为蛋白-蛋白交互作用网络的核心节点;DNM1、FLT1、NOTCH3、LYN、ISG15和RPS4Y1为关键表达基因,其中,DNM1、FLT1和NOTCH3基因在HAND组低表达,而LYN、ISG15和RPS4Y1基因为高表达,差异均具有统计学意义（均有P<0.05）。结论 HAND组和对照组有780个差异表达基因,LYN和RPS4Y1基因为蛋白网络核心节点,在HAND组中高表达,其功能主要涉及免疫应答、免疫调控、抗感染、抗病毒等生物学功能。     

1,25-二羟基维生素D3对大鼠脾辅助性T细胞分化基因表达谱的影响

目的:研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠脾辅助性T细胞(Th细胞)分化基因表达谱的影响.方法:采用近交系大鼠,随机分成实验组和对照组.实验组以1,25(OH)2D3 1μg/(只·d)连续灌胃14 d;对照组以同等体积赋形剂代替,第15天腹腔注射致死剂量脂多糖(LPS) 10 mg/kg,6 h后处死,用功能分类Th1-Th2-Th3芯片检测脾Th细胞的基因表达谱.用Realtime-PCR法验证差异表达的相关基因的结果.结果:功能分类Th1-Th2-Th3芯片共有99条基因,实验组与对照组对比,共有35条基因差异表达,占芯片基因总数的35.35%,其中12条基因上调,23条下调.差异表达的基因主要是细胞因子(受体)和调控Th细胞分化的转录因子.结论:1,25(OH)2D3抑制大鼠脾Th1型免疫反应,使免疫反应向Th2方向偏移.1,25(OH)2D3主要通过调节细胞因子基因和Th细胞分化信号通路中转录因子基因表达.     

高碘对豚鼠脑和甲状腺细胞凋亡及调节基因表达的影响

目的 探讨高碘对脑和甲状腺细胞凋亡及ｂｃｌ－２、ｂｏｘ基因表达的影响。方法 分别以含碘量为５０μｇ／Ｌ（适碘组）和１００００μｇ／Ｌ（高碘组）的蒸馏水喂养两个实验组的豚鼠６个月,应用流式细胞术和免疫荧光技术检测豚鼠大脑皮质、海马和甲状腺细胞凋亡率,并对ｂｃｌ－２、ｂａｘ基因蛋白表达进行定量检测。结果 高碘组大脑皮质、海马和甲状腺细胞凋亡率明显高于适碘组;高碘组大脑皮质、海马和甲状腺组织ｂｃｌ－２蛋     

环氧化酶-2基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）在肝细胞癌发生发展中的作用及其意义.方法用免疫组织化学的方法检测41例肝细胞癌组织、16例乙型肝炎后肝硬化组织及5例正常肝脏组织中COX-2蛋白的表达情况,并分析COX-2蛋白表达与肝细胞癌临床生物学特征的关系.结果COX-2蛋白在肝细胞癌和肝硬化组织中的表达率分别为61.0%（25/41）和56.3%（9/16）,正常肝脏组织中无表达,与以上各病变组织COX-2蛋白表达差异有显著性（P＜0.05）;而在肝硬化组织与肝细胞癌组织COX-2蛋白表达差异无显著性（x^2=0.11,P＞0.05）.COX-2蛋白表达与肝细胞癌组织分化程度、癌肿转移状况有关（x^2=10.3,4.81,P＜0.05）.结论COX-2蛋白在肝硬化、肝细胞癌组织中表达上调,在肝细胞癌发生发展过程中可能起重要作用.     

二(噁)英对成骨肉瘤细胞的凋亡及胰岛素样生长因子结合蛋白6表达的影响

目的 探讨二(噁)英(TCDD)对调控成骨肉瘤细胞(SaOS-2)凋亡和胰岛素样生长因子结合蛋白6(insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6)基因表达的影响.方法 应用1×10-9、1×10-8、1×10-7 mol/L浓度的TCDD作用于SaOS-2细胞株,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测TCDD对SaOS-2细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测SaOS-2细胞株细胞凋亡率,采用对硝基酚磷酸盐法测定SaOS-2细胞内碱性磷酸酶(ALP)的活力,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析SaOS-2中IGFBP-6 mRNA的表达,采用Western印迹杂交鉴定SaOS-2中IGFBP-6蛋白的表达.结果 在1×10-9、1×10-8、1×10-7 mol/L TCDD浓度下SaOS-2的增殖指数分别为18.4±4.5、22.5±3.6、29.4±4.2,SaOS-2 ALP的活力分别为1.12±0.28、1.58±0.14、1.96±0.17 U/mg Pro,均高于对照组;且1×10-7、1×10-8 mol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);1×10-7 mol/LTCDD浓度组的细胞凋亡率明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).3个不同浓度组的mRNA表达和1×10-7 mol/L TCDD组蛋白的表达均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 低浓度的TCDD对SaOS-2的凋亡代谢具有拮抗作用.TCDD对SaOS-2内IGFBP-6基因表达的抑制效应,可能是TCDD参与骨肿瘤发生及生长的作用机制之一.