环氧酶-2及其特异性抑制剂研究进展

长久以来,非甾体类抗炎药(nonsteroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)如阿斯匹林等,广泛应用于抗炎、解热、镇痛、抗血栓、抗风湿等。但因其所共有的胃肠道和肾脏毒性而大大限制了其应用,尤其是针对于诸如风湿性关节炎之类需长期服药的病人更是如此。NSAIDs的这些副作用可能与其非特异性地抑制胃肠道、肾脏组织的环氧酶(cycloxygenase,COX),阻断前列腺素的生物合成有关。近年来,进一步的研究发现环氧酶有两种亚型:一种是结构性的COX-1,另一种是诱导性的COX-2。COX-1酶存在于正常组织,在保护胃肠粘膜细胞、维护血小板及肾脏正常功能方面有着重要的生理性作用;而COX-2酶则主要存在于炎症组织,参与炎症反应。COX-2特异性抑制剂可以阻断炎症部位前列腺素的产生而不影响胃肠与肾脏等正常组织中“有益”的前列腺素(如PGI_2、PGE_2)的产生,具有广阔的开发应用前景。     

环氧化酶对大鼠胃黏膜细胞系的保护作用

应用MTT法、DNA条带分析及流式细胞仪分析法比较环氧化酶(cyclooxygenase)(COX-1和COX-2)非选择性抑制剂消炎痛和COX-2选择性抑制剂NS-398对大鼠胃黏膜上皮细胞株(RGM-1)的作用,并用Northern blot印迹法分析脂多糖(LPS)作用于RGM-1后,COX-1和COX-2的不同变化。结果发现消炎痛在一定的浓度范围内可诱导RGM-1细胞的凋亡、抑制其增殖,并有明显的量效关系,而NS-398对RGM-1则无明显作用。若预先用LPS作用于细胞后,消炎痛对细胞的作用明显减轻,而NS-398的作用无明显变化。Northern blot分析表明,LPS作用于细胞后,RGM-1细胞COX-2mRNA的水平明显增加。放射免疫分析(RIA)证实LPS的作用可提高细胞PG的水平。提示,COX-1和COX-2在维持胃黏膜细胞的完整性中可能起不同的作用。     

选择性COX-2抑制剂与骨肉瘤放疗

环氧化酶-2(COX-2)与骨肉瘤的发生、发展和预后有很重要的关系.体外研究及动物试验证实环氧化酶-2(COX-2)抑制剂具有良好的抗骨肉瘤作用.近年来相关研究提示选择性COX-2抑制剂具有骨肉瘤细胞放疗增敏作用,为骨肉瘤放疗可能性提供积极的参考价值.     

环氧化酶-2及其研究进展

环氧化酶有两种同工酶,环氧化酶-2(COX-2)是受细胞内外相应刺激如细胞多糖、细胞因子作用合成的诱导型酶。COX-2在基因结构、表达调控、编码蛋白、定位分布上均与COX-1不完全相同。COX-2是炎症过程中一个重要的诱导酶,在肿瘤的形成与发展过程中也有一定作用。     

帕瑞昔布可缓解梗阻大鼠肾的纤维化

环氧合酶(cyclooxygenase,COX)是前列腺素合成中的关键性限速酶,有COX-1和COX-2两种亚型。COX-1在正常组织中表达,参与生理过程;COX-2的表达与某些疾病有关[1]。近10年来,已研制出不少选择性COX-2抑制剂,其中帕瑞昔布(Parecoxib)是较新出现的高选择性COX-2抑制剂[2]。本研究观察了大鼠单侧输尿管梗阻术(unilateral ureteral obstruc-tion,UUO)后肾组织及肾功能的损伤和肾组织中COX-2的表达,以探讨COX-2在肾小管间质纤维化中的作用和选择性COX-2抑制剂帕瑞昔布对梗阻性肾损伤的保护作用。1材料与方法1.1试剂:帕瑞昔布(辉瑞公司…     

宫颈癌COX-2、MMP-9和CD105表达与肿瘤血管生成及侵袭转移的关系

目的探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase,COX-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在宫颈癌局部肿瘤血管生成及肿瘤侵袭转移过程中的作用。方法采用免疫组化SP法检测32例正常宫颈上皮及68例宫颈癌中COX-2、MMP-9的表达。并用CD105标记新生血管内皮细胞,计算肿瘤内微血管密度(microvascular density,MVD)。结果COX-2、MMP-9在宫颈癌组织中的阳性表达率均显著高于正常宫颈上皮中的表达(P<0.01)。COX-2、MMP-9阳性组的MVD均显著高于COX-2、MMP-9阴性组(P<0.01),淋巴结转移组COX-2、MMP-9阳性率均高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论COX-2、MMP-9阳性表达可能在宫颈癌血管生成和侵袭转移中起重要作用,两者在宫颈癌血管生成中可能具有协同作用。检测宫颈癌中COX-2、MMP-9表达对进一步了解宫颈癌局部血管生成情况及判断预后有一定的应用价值。     

人颈动脉粥样硬化斑块环氧化物酶-2及Ⅰ型前列腺素合成酶的表达

目的探讨环氧化物酶-2(cyclooxygenase type 2,COX-2)及Ⅰ型前列腺素合成酶(membrane associated prostaglandin E-1,mPGES-1)在人颈动脉粥样硬化斑块中的表达变化及作用机制。方法收集24例人颈动脉粥样硬化斑块标本和10例肠系膜动脉标本做对照组,应用免疫组织化学及逆转录PCR方法测定COX-2及mPGES-1mRNA表达水平,Western印记方法检测COX-2及mPGES-1的蛋白表达水平。比较不同程度动脉粥样硬化组织间COX-2、mPGES-1 mRNA表达水平及蛋白表达水平。结果颈动脉粥样硬化斑块组的免疫组织化学染色检测COX-2和mPGES-1呈阳性表达,斑块组COX-2 mRNA和mPGES-1 mRNA表达与对照组相比上调,差异有统计学意义(P<0.05);COX-2及mPGES-1 mRNA上调水平相关(P<0.05);颈动脉粥样硬化斑块的COX-2蛋白表达上调水平与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);颈动脉粥样硬化斑块COX-2、mPGES-1 mRNA及蛋白表达水平与病理损害程度有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论COX-2及mPGES-1基因表达水平上调可能是进展性动脉粥样硬化损害的关键因素。     

环氧化酶-2在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)在鼻咽癌中的表达情况及其与淋巴结转移的关系和可能机制。方法 应用免疫组织化学方法(SABC法)，检测62例鼻咽癌病人(其中颈部淋巴结转移者18例)中COX-2、VEGF的表达和微血管密度(MVD)。结果 COX-2在鼻咽癌中有高度表达，其表达阳性率为77．42％，且与鼻咽癌中VEGF表达、微血管密度和颈淋巴结转移密切相关(P＜0．01)。结论 COX-2的高度表达在鼻咽癌的发生、发展及淋巴结转移中起重要作用，且这种作用可能通过上调VEGF的表达来实现的。     

环氧合酶2抑制剂的抗胰腺癌作用及相关机制

目的探讨环氧合酶2(COX-2)抑制剂对胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力和对COX-2、基质金属蛋白酶(MMP)-14蛋白表达的影响以及可能的抗胰腺癌机制。方法不同浓度的COX-2抑制剂塞来昔布(20、60、100μmol/L)处理胰腺癌细胞后,用MTT比色法检测细胞的增殖能力;用Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞的侵袭能力和迁移能力;ELISA检测MMP-14和COX-2的蛋白表达情况。结果 MTT增殖实验、Transwell侵袭实验、划痕实验分别提示,COX-2抑制剂作用后胰腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力均以浓度梯度形式下降(P0.05);ELISA结果显示,胰腺癌细胞中COX-2和MMP-14的蛋白表达水平相应降低(P0.05),两者表达具有显著正相关性(r=0.873,P0.05)。结论 COX-2抑制剂可能通过抑制COX-2表达下调MMP-14表达,进而以浓度梯度形式减弱胰腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力,起到抗胰腺癌作用。     

口虾蛄提取物对人鼻咽癌细胞P53、COX-2和VEGF表达的影响

目的: 研究口虾蛄提取物(EOS)对人低分化鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)中P53、环氧化酶2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及意义。方法: 不同浓度EOS(0 mg/L、125 mg/L、250 mg/L和500 mg/L)作用CNE-2Z细胞24 h后,Western blotting检测P53蛋白表达,免疫细胞化学法及RT-PCR法分别检测COX-2 、VEGF蛋白和mRNA的表达。结果: CNE-2Z细胞中P53蛋白、COX-2和VEGF蛋白和mRNA表达均随EOS作用浓度增高而逐渐降低,呈量效关系(P<0.01);且COX-2 和VEGF表达量呈正相关(P<0.05),COX-2 和P53表达量亦呈正相关(P<0.05)。结论: EOS可能通过抑制CNE-2Z细胞中P53蛋白的表达,干扰COX-2和VEGF的表达而发挥其抗肿瘤作用的。     

炎症诱导酶在结直肠癌中的表达及其临床病理意义

目的 检测环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和诱导型氮氧合酶(inducible nitric oxidesynthase,iNOS)在结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)中的表达,为研究炎症与CRC发生的关系提供理论依据.方法 应用流式细胞术和SP法免疫组化检测100例CRC及11例癌旁正常黏膜中COX-2和iNOS的表达,并结合临床病理因素进行分析.结果 免疫组化显示,COX-2在CRC中表达阳性率为76.00%,而正常黏膜中只有9.10%,差异有显著性(P<0.05).COX-2表达阳性率在CRC淋巴结转移组和无淋巴结转移组分别为87.50%(42/48)、65.38%(34/52),两组比较差异有显著性(P<0.05);FCM检测发现,高、中、低分化组平均FI值分别为2.47±1.41、2.70±1.08、3.01±1.26,各组COX-2的表达均高于正常黏膜组(1.00±0.28)(P<0.01);CRC淋巴结转移组(2.45±1.41)高于无淋巴结转移组(1.61±1.27)(P<0.05).CRC中iNOS表达阳性率(81.00%)高于正常黏膜(27.27%,P<0.05),有淋巴结转移组的阳性率(91.67%)高于无淋巴结转移组(71.15%,P<0.05).COX-2与iNOS表达呈正相关(P<0.05).结论 在CRC中COX-2和iNOS表达异常增高,在CRC中COX-2和iNOS的表达与淋巴结转移密切相关,可能在CRC的进展及转移中有重要作用.     

COX-2、VEGF在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和环氧化酶-2(COX-2)在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法应用免疫组化S-P法检测不同乳腺组织中VEGF和COX-2的表达情况。结果VEGF、COX-2在乳腺导管癌组织中的表达明显上调,与其在正常乳腺组织、纤维腺瘤组织中的表达相比差异显著(P<0.01)。VEGF、COX-2在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达率高于其在乳腺导管癌中的阳性表达率。两组中COX-2的表达有显著性差异(77.1%vs40%,P<0.05),VEGF的表达无显著性差异(80.0%vs70%,P>0.05)。VEGF在乳腺浸润性导管癌的阳性表达与其临床分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05,P<0.01),与肿瘤大小无关(P>0.05)。COX-2在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达与其临床分期、淋巴结转移及肿瘤大小均无关(P>0.05)。VEGF、COX-2在乳腺导管癌中的表达呈正相关(r=0.98,P<0.05)。结论VEGF、COX-2的高表达在乳腺癌的发生发展过程中起重要的作用,可作为重要的生物学标志。     

环氧化酶-2、c-erbB-2和Ki67在结直肠癌中表达及其临床意义

目的：探讨环氧化酶-2(COX-2)、c-erbB-2、Ki67在结直肠癌中的表达,相互关系及其临床意义。方法：采用免疫组化S-P法检测结直肠癌中三者的表达。结果：结直肠癌组中,(1)COX-2、c-erbB-2蛋白阳性表达与淋巴结转移及Duckes分期有关;(2)COX-2、c-erbB-2、Ki67蛋白表达水平,两两间皆呈正相关;(3)三者联合分析显示：COX-2( )c-erbB-2( )组的Ki67平均标记指数显著高于单独COX-2或c-erbB-2阳性,或共同阴性组Ki67的表达。结论：COX-2、c-erbB-2及Ki67在结直肠癌发生发展中起着重要作用,三者联合检测有助于结直肠癌的细胞增殖活性,恶性程度的判断。     

急性重症胰腺炎大鼠P38丝裂原活化蛋白激酶通路对海马神经元环氧化酶-2和前列腺素E2表达的调控

目的:研究在急性重症胰腺炎(SAP)大鼠模型中,P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)通路对于海马CA1区神经元环氧化酶-2(COX-2)和前列腺素E2(PGE2)表达的影响。方法:随机将SD大鼠分为SAP模型组、SB203580抑制剂组和对照组。采用Nissl染色、免疫组织化学显色、免疫印迹,观察每组大鼠海马CA1区p-P38、COX-2以及PGE2的表达变化和SB203580对上述指标变化的影响。结果:SAP模型组海马CA1区p-P38、COX-2、PGE2阳性神经元的数量较对照组显著增加;SB203580抑制剂组与SAP模型组比较,海马CA1区p-P38、COX-2、PGE2阳性神经元的数量明显减少。结论:P38MAPK通路对SAP大鼠模型海马COX-2和PGE2表达可能有重要调控作用,SB203580对SAP大鼠海马神经元具有保护作用。     

环氧合酶-2在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的研究环氧合酶-2(COX-2)在子痫前期患者胎盘组织中的表达,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法采用免疫组化SP法检测50例子痫前期患者(轻度30例,重度20例)胎盘组织中COX-2的表达,20例正常孕妇为对照组。应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测30例子痫前期患者及12例正常孕妇的胎盘组织中COX-2mRNA的表达。结果(1)COX-2主要表达于胎盘血管内皮细胞。子痫前期患者COX-2蛋白的表达均明显增高,且随病情严重程度的增加而升高。子痫前期组COX-2蛋白的阳性表达率为63.1%、显著高于对照组(COX-2阳性表达率为23%)(P<0.01)。(2)子痫前期组COX-2mRNA表达水平为0.61±0.25,对照组为0.66±0.71,两组比较,差异无显著性(t=-0.93,P>0.05)。结论COX-2参与了子痫前期胎盘螺旋小动脉动脉粥样硬化。     

环氧合酶-2在酒精性肝病中表达增强

目的探讨环氧合酶2(COX-2)在酒精性肝病(ALD)发病机制中的作用。方法用酒精灌胃建立大鼠酒精性肝病模型,分别于4、8、12和16周取肝组织,用生化比色法检测肝匀浆6-酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)、甘油三酯(TG)、氧自由基(ORF)、抗超氧阴离子(ASOA)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量;用HE、苏丹Ⅳ和天狼猩红染色观察肝组织病理形态;RT-PCR法观察肝组织COX-2 mRNA表达。结果4、8、12和16周的大鼠肝组织COX-2 mRNA相对表达量分别为正常对照组的1.29、1.70、1.92、3.38倍,除4周外P<0.01;COX-2蛋白表达逐渐增强;肝组织COX-2 mRNA相对表达量与肝匀浆OFR、MDA、TG、和TXB2呈正相关(P<0.01);与ASOA、SOD、6-K-PGF1α呈负相关(P<0.01)。结论COX-2与酒精所致大鼠肝脏病变密切相关,是ALD发病过程中重要因素之一。结论COX-2与氧化应激密切相关,二者在ALD发病中发挥重要作用。     

抑瘤素M对人胃癌细胞迁移及COX-2表达的影响

研究抑瘤素M(oncostatin M,OSM)对人胃癌细胞株MKN-28体外侵袭能力和环氧合酶-2(COX-2)表达的影响,探讨其在胃癌浸润转移中的作用及可能机制。运用Transwell小室法检测OSM对胃癌细胞迁移的影响;将靶向COX-2基因的小分子干扰RNA(siRNA)瞬时转染胃癌细胞,采用蛋白印迹法(western blot)和MTT法分析转染后胃癌细胞COX-2蛋白表达情况和细胞生长情况;荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和western blot分别检测25 ng/ml的OSM对胃癌细胞COX-2 mRNA和蛋白表达的影响。研究发现,25 ng/ml OSM能促进胃癌细胞的迁移(P0.05)。用针对COX-2的siRNA转染胃癌细胞后,COX-2蛋白表达降低,细胞生长变慢。经25 ng/ml OSM作用的胃癌细胞COX-2 mRNA及蛋白的表达升高(P0.05)。结果提示,一定剂量的OSM可能通过诱导COX-2的表达,促进胃癌细胞侵袭和转移。     

大肠癌环氧化酶-2调控的研究进展

环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)是环氧化酶的同工酶之一(哺乳动物的COX至少有COX-1和COX-2 两种同工酶)。[STBX]COX-1[STBZ]为结构型基因,在正常组织和细胞内表达,参与维持其正常的生理功能。[STBX]COX-2[STBZ]为诱导型基因,静息时不表达,当细胞受到各种诱导因子刺激时表达上调,迅速合成,参与肿瘤的发生及发展。COX-2与恶性肿瘤的关系首先在大肠癌中证实,其促癌作用包括抑制肿瘤细胞凋亡、增加细胞黏附和肿瘤侵袭、促进血管生长等^[1],80%-90%的大肠癌有环氧化酶-2的过度表达^[2,3]。本综述回顾了大肠癌环氧化酶-2表达调控的相关研究进展。     

肾细胞癌中IGF-IR和COX-2的表达及相关性以及与细胞增殖关系的研究

目的:探讨胰岛素样生长因子-1受体(IGF-IR)基因表达与环氧化酶2(COX-2)表达的关系,以及两者与肾细胞癌增殖能力的关系.方法:采用免疫组化法检测64例肾细胞癌中IGF-IR、COX-2和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:IGF-IR和COX-2的表达阳性检测率分别为60.9%和51.6%.IGF-IR和COX-2的阳性表达与肾细胞癌肿瘤大小、临床分期相关,与组织学分类无关,IGF-IR表达与病理分级相关,COX-2与病理分级无关.IGF-IR表达与COX-2及PCNA表达呈正相关,COX-2与PCNA表达无相关性.结论:IGF-IR和COX-2基因在肾细胞癌的发生、发展中可能起着协同的作用.它们的检测可能对肾细胞癌恶性程度的判定、预后和进一步治疗提供有用的依据.     

环氧化酶2在铝负荷致大鼠海马神经元损伤中的作用

目的:研究环氧化酶2(COX-2)在铝盐致大鼠海马神经元损伤中的作用。方法:原代海马神经元培养7 d,予以铝盐负荷(终浓度200 μmol·L^-1)建立大鼠海马神经元损伤模型,以COX-2特异性干扰腺病毒(MOI=100)转染神经元,Western blotting检测COX-2蛋白表达水平,酶化学法检测海马神经元超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率及MTT值,倒置荧光显微镜观察海马神经元病理形态变化。结果:COX-2特异性干扰腺病毒转染的神经元COX-2蛋白表达下降,SOD活性、MDA含量、LDH漏出率、MTT值以及大鼠海马神经元的形态和结构未见明显异常变化,但其明显提高了铝盐负荷基础上的海马神经元存活率和SOD活性,显著降低了LDH漏出率和MDA含量,并改善了铝盐负荷后神经元的病理学形态。结论:海马神经元COX-2表达的适度沉默,不会影响海马神经元的形态和功能,但对于铝负荷导致的神经元损伤有保护作用。