腔镜取材及小组织病检的快速制片法

我院病理科为了方便临床和照顾患者，把一些冒镜、肠镜、膀俄镜、气管镜所取材料及声带、鼻息肉、宫颈息肉、宫内膜和一些皮肤病检等的小组织病检与大手术病检分开制做，使送检的小组织第二天就获病理诊断报告。但有一些急、特、难的患者需要当天或更早知道病理诊断结果，为了满足他们的需求，我们改进了制片方法，大大地缩短了时间，加快了制片的速度，现总结如下.1方法介绍1．1固定波配制的改进1．1.1第一种用95％酒精170ml、冰醋10ml、甲醛20ml，三者均匀混合在一起即可。1．1．2第二种无水乙醇6份、氯仿3份、冰醋酸1份，混匀在一起即可…     

如何选择合适的病理标本固定液容器

<正>活体组织病理诊断是外科疾病诊断的金标准~([1]),如果组织自溶、结构破坏、细胞变形就可能导致无法诊断~([2])。病理标本固定液一般为甲醛溶液,市售的甲醛溶液为含40%甲醛的溶液,其最佳固定效果为含4%甲醛的溶液,又叫做福尔马林溶液,因此在固定病理标本前应将其稀释10倍,即1份的市售甲醛溶液加9份的水。如果是一些怀疑恶性肿瘤或者恶性肿瘤需做免疫组织化学的,则应选择中性甲醛溶液固定,固定组     

组织切片中福尔马林色素处理方法比较

在病理、组织、生物学等学科中常用的组织固定剂为甲醛溶液。其优点是渗透力强,组织收缩少,可用于长期保存组织,且固定后组织细胞着色较好。但是,用甲醛溶液作固定剂时存在问题为:组织切片的制备和鉴别中,光镜下常可见若干类型色素,其中一类人为色素(artefact),主要为发生于组织固定时所形成的福尔马林色素,最常见于肝、脾、骨髓等的陈旧组织切片。这种色素的产生系由于甲醛溶液在酸性PH下与Hb及其产物相互作用,生成酸性甲醛羟基血红素,其不溶于乙醇,二甲苯中。光     

一些针灸穴位的组织学结构观察

1、耳垂:上、下拔牙麻醉点,2、人中,3、兑端,4、龈交。材料与方法 1、死后三小时的人尸,测定穴位后,切下组织块,投入10％甲醛固定四周。 2、由股动脉灌注10％甲醛,固定半年后的人尸,测定穴位后,切下组织块。 3、经甲醛灌注的人尸,再经乳胶(加颜色调匀)灌注的人尸。     

石蜡切片的标本固定与石蜡精练对制片的影响

含有组织块的蜡块 (简称蜡块 )是ＨＥ石蜡切片和用作免疫组化标记、原位分子杂交的原材料。蜡块的质量不仅影响日常病理检验诊断工作 ,而且关系到用于科研的第一手材料是否可靠。本文通过石蜡切片制片过程中标本加强固定以及将制作蜡块的石蜡进行精练 ,从而对提高蜡块的质量进行探讨。1　材料和方法1.1　材料　收集 1999～ 2 0 0 0年我院外检组织 ,所有标本均用我院配制的固定液固定。固定液配制方法 :福尔马林原液(4 0 %甲醛 ) 12 0ｍｌ,蒸馏水 880ｍｌ,磷酸二氢钠 (ＮａＨ2 ＰＯ4 ·Ｈ2 Ｏ) 4 ｇ ,磷酸氢二钠 (Ｎａ2 ＨＰＯ4 ) 13ｇ ,使 …     

固定剂对新鲜组织恒冷切片酶活性的影响

新鲜组织恒冷切片固定后再进行孵育,是防止酶扩散的重要方法之一。但固定剂对酶活性有抑制作用,而有关固定切片对酶活性的影响报道甚少。为孵育前切片固定时选择固定剂提供科学依据,我们进行了本实验。 实验用大鼠肝、肾组织恒冷切片(8μm),在4℃下分别用4％戊二醛、4％缓冲甲醛和4％多聚甲醛(均用pH7.4,0.2M磷酸缓冲液配制)固定液及纯丙酮,固定不同时间(3、10、20、30分钟),然后作酶反应。选用一般认     

10%甲醛溶液固定组织作糖原PAS反应

制作糖原ＰＡＳ反应的组织块固定常规用 95%乙醇、Ｇｅｎｄｅｒ液、Ｃａｒｎｏｙ氏液等,这些固定液能较好地保存糖原。但高浓度的乙醇对含脂肪较少的组织收缩性太大,Ｇｅｎｄｅｒ氏液、Ｃａｒｎｏｙ氏液各需用几种试剂配制,且必须临时配制,组织在其中固定时间不超过 6小时,操作过程略显烦琐、时间不好安排。而10 %甲醛溶液是最常用的组织固定试剂,笔者试用10 %甲醛溶液固定的组织块作糖原ＰＡＳ反应,效果较好。现介绍如下：方法：取厚 2～ 3ｍｍ、大小不超过 5ｍｍ的新鲜组织块入 10 %甲醛溶液中室温固定 12～ 16小时,然后依次换入 …     

薄层扫描法测定豨莶通栓丸中麝香酮的含量

<正> 麝香酮(Muscone)是麝香(Moschus)主要有效成分之一,在药理上具有兴奋作用,其含量为0.5～3.28％,我们对豨莶通栓丸中麝香酮提取分离后,利用薄层扫描法定量,方法简单、迅速、准确,图谱清晰,是控制含麝香药物质量的可行方法。 1 材料与试药 ①材料 豨莶通栓丸由抚松制药厂提供。处方中麝香含量为0.236％。②试药 麝香酮标准品(dl-3-甲基十五环酮,卫生部生物制品检定所)浓度2.0mg/ml无水乙醇溶液,2,4一二硝基苯肼试液(临时配制),基余试剂均为分析纯。 2 样品溶液及标准溶液的配制 ①样品溶液的配制 准确称取豨莶通栓丸25g 3份,分别置于索氏提     

活检小组织石蜡包埋的快速制片及染色方法

1　材料1.1　组织块大小 :直径小于 1cm组织。1.2　组织块脱水剂及医用固体石蜡。1.3　苏木素一伊红染色液及染色架 (半年内配制 )。1.4　医用纱布、固体石蜡、10 %甲醛液。2　方法与步骤2 .1　固体　将小标本用 2 5 cm× 2 5 cm医用纱布包裹 ,浸入10 %甲醛溶液中 2 0 m in。2 .2　脱水方法和时限　将组织块浸入 85 %乙醇 3 min,室温。然后分别放入 95 %乙醇 ,95 %乙醇 ;无水乙醇 ,无水乙醇 ;各 2 0 min,再分别放入二甲苯 ,二甲苯 ,各 5 min。温度控制在 80℃。注意 :更换每步骤前 ,必须控干液体 ;脱水时间及温度要严格控制 ;液体浓度…     

A-O组合染色法显示神经尼氏小体、髓鞘和红细胞成分的应用

在实验动物和人体的神经组织染色中 ,神经尼氏小体和髓鞘染色应用较广。为了能够在组织中同时显示这些成分 ,我们选用天青 A和橘黄 G进行组合染色 (简称 A- O组合染色 ) ,染色效果满意 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　材料及试剂　狗神经脊髓组织 5 0例由本校实验动物中心提供 ,经 15 %中性甲醛固定液 [1 ] 及时固定 ,常规组织脱水、透明、浸蜡、包埋和切片。天青 A乙醇原液 :天青 A (上海试剂三厂 ) 0 .5 g,2 0 %乙醇 10 0 m l;天青 A乙醇应用液 ,天青A乙醇原液 10 ml,2 0 %乙醇 90 m l,使用临时配制。橘黄 G染色液 :橘黄 G(上海试剂…     

甲醛快速灭菌方法的改进

凡能耐高压的器械全部高压灭菌,但不能耐高压的器械、材料或为紧急备用情况下,我们采用的灭菌方法是甲醛箱薰蒸法和甲醛混合溶液浸泡法。自1996年至1998年经临床使用观察,灭菌效果可靠、省时、省力、价格便宜,是目前我院手术室的快速灭菌方法,现将具体配制方法介绍如下。1　甲醛薰蒸法以往是将甲醛溶液中加入少量高锰酸钾薰蒸,时间不得少于4～6ｈ。自1996年我们做了改进,只单用40%甲醛溶液薰蒸,30ｍｉｎ取样培养,灭菌效果100%。具体做法是:薰箱靠近低层的器械是急诊需要用的,如:骨钻、双极电凝、电刀、开颅钻、各种导线等不能用溶液浸泡的器…     

吡喹酮治疗猫华枝睾吸虫病的实验研究

为探索吡喹酮对华枝睾吸虫病的治疗效果,我们于1979年5～6月对自然感染华枝睾吸虫的病猫,用吡喹酮进行口服给药治疗,初步实验结果显示吡喹酮对猫华枝睾吸虫有肯定杀虫效果。现将研究方法及结果报告如下: 研究方法实验动物为自然感染华枝睾吸虫的家猫(均经粪检虫卵证实)体重1.40～3.15公斤。药物来源及配制: 用药为吡喹酮,由中国医学科学院寄生虫病研究所提供(1978);参照该所治疗日本血吸虫的药物配制方法,将吡喹酮混悬于0.1％十二烷基磺酸钠和1％西黄耆胶中,每毫升混悬液含吡喹酮40毫克。实验分组:     

三种固定剂对氯化金染色大鼠运动终板效果的比较

目的 对比分析25%甲酸、25%乙酸和4%甲醛3种固定剂对氯化金染色运动终板的效果。方法 选用30只SD大鼠,体重180～220 g,雌雄不拘。进行10次实验,每次实验随机选取3只,取右侧肱二头肌,分别置于25%甲酸、25%乙酸和4%甲醛溶液中固定后,行氯化金镀金法,光学显微镜下观察运动终板的形态结构和背景颜色。结果 3种固定剂固定的运动终板边缘整齐,中央颜色浅于周围,部分运动终板中央呈空泡状。甲酸固定的肌纤维排列有序,横纹清晰,呈紫红色;乙酸固定的肌纤维排列有序,无清晰的横纹,呈紫蓝色,但染色较浅,与运动终板形成的反差较小;甲醛固定的肌纤维排列杂乱,无横纹,呈紫红色、粉红色、紫黑色和蓝色等多种颜色。结论 甲酸固定的运动终板氯化金染色效果优于乙酸和甲醛,甲酸固定的肌组织需要的还原时间少于乙酸和甲醛。因此,进行运动终板染色选择固定剂时,25%甲酸在3种固定试剂中可作为最佳选择。     

不同固定剂对免疫组织化学染色效果的影响

目的:比较不同固定剂对免疫组织化学染色的影响。方法:取大鼠胃窦组织,分别采用4 %多聚甲醛、10%甲醛和Bouin液固定,用免疫组织化学方法结合图像分析技术检测大鼠胃窦黏膜内生长抑素(SS)和胃泌素(Gas)的表达。结果:用Bouin液固定的组织经免疫组织化学染色显示的阳性细胞数比用其他2种固定剂所显示的阳性细胞数多(P<0 .0 5 ) ,而3种固定剂显示的SS和Gas的阳性细胞平均灰度值差别无显著性(P>0 .0 5 )。结论:Bouin液比4%多聚甲醛、10 %甲醛能较好保存大鼠胃窦黏膜内SS和Gas的抗原性。     

糖原固定的改良法

糖原固定剂有几种。一般采用Carhoy氏液进行固定,也有采取无水酒精固定。根据我们实验证明此两种固定剂固定的组织有一定的缺点,如糖原颗粒分布出现极化现象,影响切片的观察;同时经过这种固定剂固定的组织不易切片。根据以上存在的问题,我们在实验中进行了探索,对固定液进行了改良。方法: 1、取2毫米大小的组织块放入95％酒精30毫升,在4℃冰箱中放一小时。 2、然后在上液中加入3毫升甲醛,1.5毫升冰醋酸再固定一小时。 3、无水酒精①、②两次共30—40分钟脱水。     

猪囊尾蚴石灰小体两种染色方法的比较

石灰小体是绦虫纲虫体内的重要组织成分,猪囊尾蚴体内也很多见,可视为一个诊断猪囊虫病的指标。作者在酸卡红及硝酸银染色的基础上对试荊浓度和染色时间加以改良,并作了对比,现报告如下。 1 材料和方法取刚刚屠宰、自然感染猪囊尾蚴病的猪肌肉内的囊尾蚴,用生理盐水反复冲洗后,放入40％胆汁生理盐水培养皿内,37℃温箱温育,待头节伸出后,再用水冲洗,用2张载玻片把囊尾蚴头节压扁,压片用5％的甲醛溶液固定20小时,待用。酸卡红染色法:取囊尾蚴头节,洗去固定液,用酒精梯度(30％、50％、60％、70％、80％)脱水各5分钟。酸卡红染色20～30小     

聚合甲醛的一种简易解聚法

本文介绍聚合甲醛的稀释加热解聚法。经过反复实验,解聚后的甲醛溶液含量与市售的甲醛含量基本一致,组织固定性能正常。本解聚法操作简单易行、安全,不需要特殊设备。本法可以节省原材料和经费。     

甲醛抑制剂在病理组织中的应用

目的 探讨甲醛抑制剂（亚硫酸氢钠）在病理科的应用效果。方法选取已用甲醛固定好的结肠、胃、肺、甲状腺、小肠组织各7份;3份分别以30％、15％、5％浓度的甲醛抑制剂喷洒为喷洒组;另3份的组织切片浸泡于3种不同浓度的抑制剂为浸泡组;剩余1份为对照组。喷洒组与浸泡组并分别于0．5、1、5、10、30、4h观察有无甲醛刺激性气味,4h后对照组一起进行常规制片和HE染色。结果未加抑制剂的对照组30min后仍有轻微甲醛刺激气味;5％抑制剂处理后,5min后几乎无甲醛刺激味;而喷洒组在10min后,抑制剂对甲醛挥发抑制作用减弱,可闻及轻微甲醛刺激气味;15％和30％抑制剂处理后,喷洒组1min几乎没有了甲醛刺激味,浸泡组0．5rain后基本无甲醛刺激气味。结论15％的甲醛抑制剂浸泡组织标本0．5min即可有效抑制甲醛挥发,并且不会对病理组织产生影响。     

非特异性酯酶染色实验条件探讨

目的：探讨非特异性酯酶染色的实验条件。方法：用10％甲醛生理盐水，40％甲醛和甲醛蒸气对非特异性酯酶染色固定条件进行了测定，同时用1／14mol／L、1／15mol／L、1／20mol／L的磷酸盐缓冲（pH7．4）配制的基质液分别在45、60、90分钟的染色条件进行了测定。结果：是选择甲醛固定5分钟染色结果最好。三种不同浓度的磷酸盐缓冲液和三个不同的孵育时间的染色结果经多因素方差分析，P〈0．05，结果有统计学意义。结论：最佳染色条件为甲醛蒸气固定5分钟，用1／15mol／LpH7．4磷酸盐缓冲液配制的基质液。染色孵育60分钟。本法帮助鉴别诊断急性单核细胞白血病和急性粒细胞白血病有较大的实用价值。     

三种固定液对眼球组织固定效果的比较研究

目的从甲醛-戊二醛混合液、Davidoson液和10％福尔马林三种固定液中优选一种,用于对眼球组织的固定。方法取SD大鼠和新西兰兔的双侧眼球,分别用三种固定液固定,然后做成5μm厚的切片并HE染色,观察各自的组织结构及染色效果。结果用甲醛一戊二醛混合液固定的眼球组织,大鼠眼球切片厚度5μm,而新西兰兔切片时厚度8μm,才能切出完整的切片;Davidoson液和10％福尔马林固定的眼球,切片厚度5μm即可。HE染色后,10％福尔马林固定的眼球组织结构不完整,而Davidoson液固定后的眼球,结构清晰、组织完整。结论Davidoson液对大鼠和新西兰兔的眼球固定效果均佳,甲醛-戊二醛混合液对大鼠眼球固定效果也较佳。