槐果碱体外抗柯萨奇病毒B3m的作用

目的以HeLa细胞为模型,观察从苦参中提取的槐果碱在体外抗柯萨奇病毒B3m(CVB3m)的作用。方法①用微量细胞培养法观察槐果碱对HeLa细胞的毒性。②用细胞病变效应(CPE)抑制法观察槐果碱体外抗CVB3m作用。③用MTT法和结晶紫染色法观察槐果碱对CVB3m感染的HeLa细胞的保护作用:在96孔板上种植HeLa细胞并予CVB3m吸附1h,加入不同浓度的槐果碱,并设立病毒、细胞、槐果碱对照,培养15h后以MTT法和结晶紫染色法测定比较各组细胞能量代谢率和细胞存活数。结果①槐果碱稀释到<391μg/mL,对HeLa细胞无毒性;≥783μg/mL引起HeLa细胞CPE。②槐果碱6.25~50μg/mL有直接抗病毒作用,减轻CPE;>100μg/mL反而会加重、加快CPE。③槐果碱1.56~25μg/mL对感染CVB3m的HeLa细胞有保护作用,用MTT法和结晶紫染色法测得细胞能量合成代谢、细胞存活数较病毒对照组增加(P<0.05);槐果碱在50、100μg/mL时反而加重病毒对细胞的抑制,使细胞存活数、细胞代谢率较病毒对照组下降(P<0.05)。结论一定浓度的槐果碱在体外有抗CVB3m作用,对感染CVB3m的HeLa细胞有保护作用。     

槐果碱体外抗柯萨奇病毒B3m的作用

目的 以HeLa细胞为模型,观察从苦参中提取的槐果碱在体外抗柯萨奇病毒B3m(CVB3m)的作用.方法 ①用微量细胞培养法观察槐果碱对HeLa细胞的毒性.②用细胞病变效应(CPE)抑制法观察槐果碱体外抗CVB3m作用.③用MTT法和结晶紫染色法观察槐果碱对CVB3m感染的HeLa细胞的保护作用:在96孔板上种植HeLa细胞并予CVB3m吸附1 h,加入不同浓度的槐果碱,并设立病毒、细胞、槐果碱对照,培养15 h后以MTT法和结晶紫染色法测定比较各组细胞能量代谢率和细胞存活数.结果 ①槐果碱稀释到＜391 μg/mL,对HeLa细胞无毒性;≥783 μg/mL引起HeLa细胞CPE.②槐果碱6.25 ～ 50 μg/mL有直接抗病毒作用,减轻CPE;＞100 μg/mL反而会加重、加快CPE.③槐果碱1.56 ～ 25 μg/mL对感染CVB3m的HeLa细胞有保护作用,用MTT法和结晶紫染色法测得细胞能量合成代谢、细胞存活数较病毒对照组增加(P＜0.05);槐果碱在50、100 μg/mL时反而加重病毒对细胞的抑制,使细胞存活数、细胞代谢率较病毒对照组下降(P＜0.05).结论 一定浓度的槐果碱在体外有抗CVB3m作用,对感染CVB3m的HeLa细胞有保护作用.     

苦参总碱对小鼠脾细胞产生干扰素的影响

作者为了解苦参是否通过诱生干扰素而参与抗病毒作用，用微量细胞病变抑制法对苦参总碱在体外诱生小鼠产生干扰素的作用进行了研究。结果表明苦参浓度在５０￣２００μ／ｍｌ能明显诱导脾细胞产生干扰素，且能明显对抗氢化考的抑制而促进干扰素产生增加，其作用与药物浓度呈正相关，所以苦参可能通过诱导干扰素产生而发挥其抗病毒作用。     

硝酸甘油和硝酸异山梨酯抗柯萨奇病毒的体外实验研究

目的研究硝酸甘油(GTN)和硝酸异山梨酯(ISDN)对柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的体外抑制作用。方法用Hela细胞扩增并收获柯萨奇B组3型病毒(CVB3)后,测定CVB3的半数组织培养感染剂量(TCID50)和空斑形成单位(PFU),应用MTT法测定实验所用药物的细胞毒性,用细胞病变效应(CPE)抑制实验和空斑减少实验,观察和分析研究GTN、ISDN对CVB3的抑制作用。结果GTN、ISDN可以明显抑制病毒的细胞病变效应以及空斑形成(P<0.05)。结论GTN、ISDN等临床常用于抗心绞痛的硝酸酯类药物具有明确的抗CVB3感染Hela细胞的作用。     

苦参总碱片治疗慢性乙型肝炎疗效分析

目的 :验证苦参总碱片治疗慢性乙型肝炎的疗效。方法 :苦参总碱片治疗慢性乙型肝炎 5 0例 ,每日 3次 ,每次 2 0 0mg ;并设对照组 5 0例 ,给予西药护肝药物。疗程均为 3个月。结果 :两组治疗后 ,ALT、AST、SB均显著下降 ,两法均有较好的降酶退黄作用 ,但治疗组显著优于对照组 (P <0 .0 1) ;治疗组的ATL、AST、SB复常率和HBeAg、HBV DNA阴转率均非常显著高于对照组 (P 均 <0 .0 1)。结论 :苦参总碱片在转氮酶和血清总胆红素复常方面有显著疗效 ,并能抑制HBV的复制 ,是治疗慢性乙型肝炎的较理想的药物     

芪芍五味子复方制剂抗CVB3病毒抑制心肌细胞凋亡机制的研究

目的 研究中药芪芍五味子复方制剂抗柯萨奇B3病毒(CVB3)效果及抑制病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡的机制.方法 采用细胞培养法观察细胞病变效应(CPE)与广谱抗病毒药物病毒唑对照,进行复方制剂体外抗病毒实验;BALB/c小鼠接种CVB3建立病毒性心肌炎动物模型,随机分为正常对照组、病毒对照组、复方制剂治疗组和维生素C与病毒唑联用组,观察各组心肌病理变化,Real-time定量PCR检测小鼠心肌CVB3RNA水平,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡和坏死率.结果 复方制剂体外最大无毒浓度为19.53g/L,预防给药、同时给药和治疗给药3种方式细胞培养所需有效药物浓度均低于病毒唑;与同期病毒对照组小鼠比较,复方制剂治疗组小鼠心肌炎症性病理变化明显减轻,CVB3RNA拷贝数降低(P<0.05),心肌细胞凋亡和坏死率显著降低(P<0.05).结论 芪芍五味子复方制剂可有效抗病毒,抑制病毒诱导心肌细胞凋亡,对CVB3感染小鼠心肌有良好的保护作用.     

苦豆碱抗细菌感染作用机理的研究

本文通过体内外实验研究了苦豆碱抗细菌感染作用的机理。体外抑菌试验证明苦豆碱具有杀死或抑制侵袭性大肠杆菌(EIEC)生长的作用。体内试验,通过腹腔注射活的 EIEC 给小鼠,结果证明苦豆碱能提高小鼠注射 EIEC 后48h内的生存率、能增强小鼠从脾脏清除细菌的能力、能增加抗菌抗体的效价和提高红细胞免疫功能。因此,作者认为苦豆碱抗细菌感染作用的机理,除苦豆碱的直接杀菌或抑菌作用外,还可通过提高机体的免疫功能来实现。     

苦豆碱对肾癌A498细胞的体外杀伤作用研究

目的 体外实验研究苦豆碱对肾癌A498细胞的杀伤作用。方法 将不同浓度的苦豆碱(0mmol/L、0.2mmol/L、0.4mmol/L)作用于肾癌A498细胞48h,通过CCK8检测各组细胞存活率,通过倒置显微镜观察各组细胞形态学变化,通过流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,通过Western blot法检测各组细胞Bax和cleaved caspase-3蛋白表达量的变化。结果 CCK8检测结果显示,苦豆碱0.2mmol/L对肾癌A498细胞增殖表现出抑制作用,苦豆碱0.4mmol/L对A498细胞增殖抑制作用更加明显。倒置显微镜观察结果显示,苦豆碱0.2mmol/L可诱导肾癌A498细胞凋亡,漂浮细胞数量增加;苦豆碱0.4mmol/L组细胞凋亡更加显著,漂浮细胞数量大大增加。流式细胞术检测结果显示,苦豆碱0.2mmol/L和0.4mmol/L使肾癌A498细胞凋亡率明显增加,且呈剂量效应。Western blot法检测结果显示,苦豆碱0.2mmol/L和0.4mmol/L可使肾癌A498细胞Bax和cleaved caspase-3蛋白表达量明显增加,呈剂量效应。结论 苦豆碱可有效抑A498细胞增殖并促进其凋亡,将来有望成为新的抗肾癌药物。     

苦豆子总碱抗辐射效应观察

苦豆于总碱药理研究证人＊妊L具有增强机体免疫功能及抗炎等作川U"',三州【学院附属第一医院药剂科用其制成各种车I型后供临床应用,妇产科将苦豆于制剂m作常规7h炎药品,IDfo床疗效较好,目前还用于于宫颈癌合并感染放疗病人,们该药有无抗辐射作用尚未见报道、我们m小鼠复制急性放射病模型,观察了苦o子总碱的抗抽时效应,为临床应用该药提供厂理论依据。l材料、方法和结果回．1材料动物：昆明种小鼠,雄性,18一旦g,K生部兰州生物制品所提供。药品：苦豆子总碱注射液,批c％0m1,切工州医学院附属第一医院药剂科提供;PI－M,批号s…     

苦参总碱抗柯萨奇B病毒作用机理的研究

在证实苦参具有抗柯萨奇Ｂ病毒（ＣＶＢ）作用的实验基础上，作者以纯化ＣＶＢ３作为病毒蛋白质对照，通过空斑测定及病毒蛋白质Ｌ－３５Ｓ－甲硫氨酸标记等方法，了解到纯化苦参总碱抗ＣＶＢ的作用机理是不影响病毒吸附、穿入，但它能进入细胞内影响病毒的生物合成，主要表现为抑制病毒蛋白质的合成。     

Simultaneous Determination of Multiple Bioactive Constituents in Total Alkaloid of Sophora alopecuroides by HPLC-DAD

Objective To develop a qualitative and quantitative simultaneous determination of multiple bioactive constituents in total alkaloid in Sophora alopecuroides (TASA). Methods In the experiment, a new and simple HPLC-DAD method for the simultaneous determination of multiple constituents in TASA was developed. The separation was performed on a Kromasil C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5.0 μm) eluted with 0.02 mol/L potassium dihydrogen phosphate (adjusted pH 4.3 using 1% glacial acetic acid) and acetonitrile (75 : 25) at a flow-rate of 0.7 mL/min. The detection wavelength was set at 210 nm. Results Five constituents (sophoridine, matrine, oxymatrine, aloperine, and lehmannine) were simultaneously analyzed in this study. Four of them were identified and determinated by the developed method. The calibration curves exhibited linear regressions (r2 > 0.9995). The injection precision, the intra-day precision, and the analysis repeatability were validated with the RSD values less than 5.0%. The mean recoveries of the four constituents were ranged from 98.62% to 100.20%, and the RSD values were all less than 3.37%. Conclusion This method is convenient, fast, accurate, and is applicable to analyze the multi-constituents in TASA.     

新疆苦豆子中黄酮类化学成分的研究

目的研究新疆苦豆子中黄酮类化学成分。方法采用大孔吸附树脂、聚酰胺柱层析法、SephadexLH-20柱色谱法及重结晶等方法对苦豆子中黄酮类化学成分进行研究,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构。结果从新疆苦豆子中分离得到3种化合物,化学结构用一维和二维核磁共振技术分别鉴定为3′,4′-二羟基异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅰ)、7,3′-二羟基二氢黄酮-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅱ)、芦丁(Ⅲ)。结论化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ为首次从新疆苦豆子中分离得到。     

Protective effect of total alkaloids of Sophora alopecuroides on dextran sulfate sodium-induced chronic colitis

Objective  

To investigate the effect of total alkaloids of Sophora alopecuroides (TASA) on dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis in mice.     

新疆苦豆子药材质量控制研究

目的通过测定水分、总灰分、酸不溶性灰分、生物碱薄层鉴别及含量测定来研究苦豆子药材的质量控制。方法用碘化铋钾试液显色的薄层反应法鉴别生物碱,按《中国药典》规定方法检测苦豆子的水分、总灰分、酸不溶性灰分,采用高效液相色谱(HPLC)法测定氧化苦参碱、氧化槐果碱的含量。结果建立了生物碱薄层鉴别方法及氧化苦参碱、氧化槐果碱高效液相色谱(HPLC)测定方法;确定了水分、总灰分、酸不溶性灰分的含量限度,根据测定结果苦豆子药材水分在5%～7%之间为适宜,总灰分在2.0%～3.5%,酸不溶性灰分在0.2%～0.3%之间为适宜。结论测定苦豆子药材的水分、总灰分、酸不溶性灰分、生物碱的薄层鉴别及含量测定,为了建立苦豆子药材质量控制提供了奠定基础。     

宁夏产苦豆子不同器官HPLC指纹图谱的分析研究

目的用HPLC指纹图谱的方式研究苦豆子不同器官中各生物碱的变化。方法采用HPLC检测方法,色谱柱Waters X-Brige C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为乙腈-0.05 mol/L的磷酸二氢钾溶液（2.0ml/L三乙胺）,进行梯度洗脱;检测波长为205 nm,进样量10μl,流速1.0 ml/min。结果 10批不同器官的苦豆子样品得到7个共有峰,通过与对照品比较,2、3、5、6、7号峰确定为野靛碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱。结论该指纹图谱的分析体现了不同器官的苦豆子样品所含各成分及各成分的含量变化较大。     

中药苦豆子体外抗幽门螺杆菌的实验研究

目的观察苦豆子对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的体外抑菌作用。方法采用煎煮法与超声波浸提法获取苦豆子不同提取物;纸片扩散法粗测抑菌浓度,琼脂稀释法测定两种提取物的最小抑菌浓度(MIC)。结果苦豆子水煎剂对H.pylori的MIC为100mg/ml,苦豆子乙醇提取物对H.pylori的MIC为25mg/ml。结论两种苦豆子提取物均有较好的体外抗H.pylori作用,苦豆子乙醇提取物对H.pylori的抑菌效果优于水煎剂。     

用指纹图谱检测宁夏苦豆子各器官不同物候期的成分

目的用指纹图谱的方式研究宁夏苦豆子各同器官不同物候期化学成分的动态变化规律。方法采用HPLC/UV检测方法,色谱柱C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为0.05 mol·L^-1的磷酸二氢钾溶液（用三乙胺调节pH至7.0）-乙腈,梯度洗脱;进样量10μl,检测波长为205 nm,流速1.0 mL·min^-1。结果不同物候期的10批苦豆子叶、茎、根和籽分别得到16、10、13和7个共有峰,通过与对照品比较槐定碱、野靛碱、氧化槐果碱、苦参碱、氧化苦参碱在4个器官中均含有,槐果碱和莱曼碱存在于苦豆子叶和根中,槐胺碱仅存在于苦豆子叶中,籽中未检测到苦豆碱。结论通过指纹图谱的分析体现了不同物候期苦豆子叶、茎所含化学成分及各成分的含量随采收时间的不同变化较大,而苦豆子根、籽变化不明显。     

宁夏道地药材苦豆子醇提取物体外抑菌作用研究

目的：观察宁夏苦豆子65%乙醇提取物对细菌和真菌的体外抑菌作用。方法：将苦豆子药用65%乙醇浸泡24 h后,回流两次所得提取物,用试管二倍稀释法联合琼脂平板法,进行体外抑菌试验的研究。结果：苦豆子65%乙醇提取物对三种常见致病菌及一种深部真菌抑菌作用显著,其最小抑菌浓度（MIC）均为35.1 mg/mL。结论：苦豆子中草药用65%乙醇提取物对四种受试菌的抑菌作用显著。     

不同物候期苦豆籽中8种生物碱含量的变化分析

目的 考察不同物候期苦豆籽中8种生物碱的含量变化,以确定苦豆子系列生物碱产业化生产中原药材的合理采收和有效利用苦豆子资源.方法 采用高效液相色谱（HPLC）检测方法,色谱柱Waters X-Brige C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.05 mol·L-1的磷酸二氢钾溶液（2.0 mL·L-1三乙胺）,进行梯度洗脱;检测波长205 nm和311 nm,检测器为二极管阵列检测器（DAD）,柱温25 ℃,进样量10 μl,流速1.0 mL·min-1.结果 苦豆籽中不同生物碱的量随物候期呈现不同规律的变化,其中氧化苦参碱,氧化槐果碱和野靛碱的含量从8～10月份递增,槐定碱、苦参碱和槐果碱的含量随物候期的变化不大,且苦豆籽中氧化苦参碱和氧化槐果碱为主要的生物碱.结论 可根据苦豆籽中各生物碱量随物候期的变化规律及各生物碱的含量为工业化生产不同生物碱而确定苦豆籽的合理利用.     

苦豆子种子中生物碱的分离及lehmannine的结构确定

目的：研究苦豆子种子中生物碱的分离及槐果碱转移氢化制备苦参碱的研究。方法：利用离子交换,萃取和柱层,并结合转移氢化增大不同生物碱理化性质差异进行分离。结果：从苦豆子种子中分得5种生物碱,其结构经元素分析,IR,MS,1HNMR和13CNMR光谱鉴定为氧化苦参碱,氧化槐定碱,苦参碱,槐定碱和lehannine,结论：首次从苦豆子种子中分和lehmannine。