74例金黄色葡萄球菌杀白细胞素基因检测

杀白细胞素（panton-valentine leukocidin,PVL）是金黄色葡萄球菌的一种重要致病因子,可以引起毛细血管扩张、趋化效应、多形核白细胞渗出、核破裂、皮肤坏死等[1]。本文采用PCR法对临床分离的金黄色葡萄球菌杀白细胞素基因进行检测,旨在探讨PVL的表达与临床感染的相关性。     

金葡菌对高糖状态下THP-1人单核细胞表达iNOS和IL-1β的影响

目的:探讨高糖状态下金葡菌对THP-1人单核细胞表达iNOS和IL-1β的影响.方法:体外培养THP-1细胞,采用2×2析因分析实验设计,以高糖、细菌2个因素,每个因素2个水平交叉分为对照组、高糖组、细菌组和高糖细菌组.各组提取细胞总RNA,应用半定量逆转录聚合酶链反应(SQ-RT-PCR)法,检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素(IL)-1β的表达情况.结果:高糖和细菌及两者交互效应均影响THP-1人单核细胞表达iNOS和 IL-1β.高糖组与对照组比较细胞表达iNOS和 IL-1β均减弱(P < 0.01);高糖细菌组表达iNOS和 IL-1β均显著低于细菌组(P < 0.01).细菌组与对照组比较iNOS和 IL-1β表达均增加;高糖细菌组与高糖组比较IL-1β表达增加,iNOS表达变化不显著.结论:高糖状态下,单核细胞受到细菌感染时表达iNOS和IL-1β功能减弱,提示糖尿病患者抗感染能力降低与高血糖有关.     

金黄色葡萄球菌Panton-Valentine杀白细胞素的研究进展

由金黄色葡萄球菌产生的Panton-Valetine杀白细胞素可导致白细胞凋亡和坏死,已成为该细菌的一个致病因素.临床发现由PVL阳性金黄色葡萄球菌所致的感染病情复杂,死亡增多.针对目前PVL的分子生物学特点、作用机制、靶细胞、临床分布及意义的研究进展进行了综述.     

脑安胶囊对急性脑梗死患者血清IL-1β、IL-6和NF-_κB的影响

目的观察脑安胶囊治疗对急性脑梗死患者血清白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、核因子κB（NF-κB）的影响。方法 72例ACI患者随机分为对照组和治疗组,每组36例,在给予常规治疗同时,治疗组加用脑安胶囊,2次/d,每次2粒,疗程为2周,比较在治疗前后患者血清中炎性因子的变化。结果治疗后两组患者对比指标比较差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论脑安胶囊能能显著降低炎性因子水平,对脑梗死的预后有较好的促进作用。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及其Panton-Valentine杀白细胞素基因的检测

目的:了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对抗菌药物的耐药性及其Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因的检出情况。方法:收集2007年1月～2008年6月分离自河北医科大学第一医院临床患者的MRSA45株,采用Kerby-Bauer纸片扩散法测定细菌对17种抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链反应(PCR)技术检测PVL基因。结果:MRSA对青霉素G、红霉素、克林霉素、环丙沙星、四环素的耐药率均在70%以上,有12株MRSA检出PVL基因,检出率为26.7%。结论:MRSA呈多重耐药,PVL基因是MRSA的重要致病因子。     

姜黄素通过阻断NF-κB减少IL-1β诱导的内皮脂酶表达

目的观察姜黄素对培养的人血管内皮细胞内皮脂酶表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法不同浓度的姜黄素处理HUVEC-12细胞。RT-PCR检测内皮酯酶(endo-thelial lipase,EL)mRNA的表达;Western blot检测核因子-κB抑制因子-α(inhibitor of nuclear factor-κB-α,IκB-α)蛋白的表达;间接免疫荧光检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白的活化。结果IL-1β处理HUVEC-12细胞可以明显上调EL mRNA的表达,同时降低胞质蛋白IκB-α的表达水平,激活核转录因子NF-κB,增加胞核蛋白NF-κB的水平。姜黄素预处理HUVEC-12细胞可以抑制IL-1β对EL的上调作用,同时逆转IL-1β诱导的IκB-α蛋白降解和NF-κB活化。结论姜黄素可以通过阻断NF-κB活化减少IL-1β诱导的人血管内皮细胞EL的表达。     

局麻和全麻对患者血清皮质醇、IL-1β和IL-10水平的影响

目的探讨了局麻和全身麻醉对手术病人血清皮质醇、IL-1β和IL-10水平影响的临床分析。方法根据不同的麻醉方法对子宫癌病人分为硬膜外麻醉组（A组）和静吸复合全麻组（B组）,每组30例。在麻醉诱导前、手术切皮和手术开始后1 h抽取静脉血3 ml,分别测定血清皮质醇、IL-1β和IL-10浓度。结果A组血清Cortisol、IL-1β和IL-10含量在切皮和术中1 h与术前比较有显著差别（P〈0.05）。B组血清Cortisol、IL-1β和IL-10含量差异无显著性（P〉0.05）。在切皮和术中1小时,B组Cortisol、IL-1β和IL-10含量比A组含量降低（P〈0.05）。结论静吸复合麻醉能明显降低皮质醇、IL-1β和IL-10浓度。     

胶原关节炎大鼠滑膜组织核转录因子κB与白细胞介素1β和基质金属蛋白酶9相关性分析

目的 探讨白细胞介素1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、核因子κB(NF-κB)与类风湿关节炎发生发展的相关性.方法 构建Ⅱ型胶原诱导的胶原关节炎大鼠模型,分不同时点处死动物,检测滑膜细胞中IL-1β,NF-κB和MMP-9的表达,分析大鼠关节炎评分与滑膜细胞NF-κB、IL-1β、MMP-9的表达的相关性.结果 实验组造模前关节体积为(2.18±0.16)ml,造模后2、4、6周分别为(4.68±0.49)、(5.62±0.59)、(5.44±0.66)ml,与造模前比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);对照组造模前和造模后2、4、6周关节体积分别为(2.15±0.26)、(2.38±0.32)、(2.19±0.31)、(2.18±0.26)ml.造模后2、4、6周实验组大鼠关节体积与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).实验组大鼠造模后2、4、6周关节指数分别为(8.00±0.32)、(9.80±0.66)、(9.40±0.51),与对照组(均为0)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).大鼠关节指数与NF-κBp65呈显著正相关(r=0.593,P＜0.05);MMP-9与NF-κBp65呈显著负相关(r=-0.506,P＜0.05).结论 实验组大鼠滑膜组织中NF-κB与IL-1β表达水平显著高于正常对照滑膜组织,且与关节炎的评分有一定相关性;提示NF-κB在类风湿关节炎发病机制中起关键的调控作用.

Abstract：

Objective To investigate the corelation among interleukins-1β (IL-1β), matrix metalloproteinase 9 ( MMP-9), nuclear factor kappa B (NF-κB) and arthritis index (AI) in the development of arthritis, and to understand the pathology of synoviocyte. Methods Thirty-six female Wistar rats were randomly divided into two groups,namely the model controlled group and the normal controlled group; three subgroups were randomly divided into model group and controlled group. The model group rats were immunized with emuusified bovine type Ⅱ collagen in complete Freund'adjuvant by introdemal injection to induce collagen induced arthritis (CIA) on day1, day14 and day 28, while the controlled group were injected with saline at the same time. The model and the controlrats were killed at different times. We detected the expression and activation levels of IL-1β, MMP-9 and NF-κB in synovial tissue by immunohistochemistry. Then we analyzed the corelation between AI and the expression of IL-1 β, MMP-9 and NF-κB in the synovium and IL-6 and TNF-α in the serum. Results The joint volume of model group was (2. 18 ± 0. 16), (4.68 ± 0.49 ), (5.62 ± 0. 59), (5.44 ± 0.66 ) respectively before, 2, 4 and 6 weeks after setting up models. There were statistically significant differences between before and after setting up models ( P ＜ 0. 01 ).The joint volume of control group was ( 2. 15 ± 0.26), (2.38 ± 0.32), (2. 19 ± 0. 31 ), ( 2.18 ± 0.26 ) respectively before, 2, 4 and 6 weeks after making model. Through measuring joints sizes after successfully modeling 2, 4 and 6 weeks, there were statistically significant differences between model and control group( P ＜0.01 ). MMP-9 showed significant negative correlation with NF-κB P 65 ( r = -0. 506, P ＜ 0.05 ). Conclusions The expression levels of IL-1 β and NF-κB are significantly higher in CIA synovial than those in control group and show a positive correlation with AI. NF-κB plays acritical role in the pathology of RA via regulating inflammation reaction, facililating the prolifteration of synoviocyte and participating the reestablishment of articulation.     

肾脏组织中TGF-β1和CTGF对NF-κB基因调控的影响

目的 研究阿霉素肾病大鼠模型中核因子-κB(NF-κB)、转化生长因子β1(TGF-β 1)和结缔组织生长因子(CTGF)的浓度与病理变化的意义,探讨其参与肾病综合征的发病机制.方法 36只大鼠随机分成两组:对照组、模型组,每组各18只.模型组采用尾静脉注射阿霉素方法建立阿霉素肾病模型.检测各组大鼠24 h尿蛋白定量及血清肾功能指标,研究各组大鼠肾组织病理学改变,采用免疫学方法(ELISA)检测NF-κB、TGF-β1及CTGF浓度的变化.结果 ①模型组于第2、4、6周尿蛋白定量均高于同期对照组,差异有统计学意义(P＜ 0.01).第2、4、6周时模型组血尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)、胆固醇(TC)水平均高于同期对照组(P＜0.01).②肾组织病理学提示随时间延长,肾病病理进展.③模型组第2、4、6周NF-κB、TGF-β1和CTGF浓度结果均高于同期对照组(P＜0.01).结论 NF-κB、TGF-β1和CTGF浓度增高是肾小球硬化发生发展的重要因素,三者共同促进细胞外基质(ECM)的积聚,造成肾小球硬化.阻断NF-κB、TGF-β1和CTGF可能成为延缓肾小球硬化的治疗手段.     

葫芦素B对IL-1β诱导的软骨细胞损伤及 胞外基质代谢紊乱的影响

目的 明确葫芦素B对白细胞介素（IL）-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响。方法 用 不同浓度（0.5、1、5、10、20 µmol/L）的葫芦素B处理小鼠软骨细胞,随后用IL-1β（10 µg/L）处理。采用CCK-8法检测 细胞活性,试剂盒检测乳酸脱氢酶（LDH）及Caspase-3的活性,确定葫芦素B最佳处理浓度。采用流式细胞术检测细 胞凋亡情况;qRT-PCR检测细胞胞外基质代谢相关的Ⅱ型胶原（CollagenⅡ）及蛋白多糖aggrecan、基质金属蛋白酶 （MMP）-3及MMP-13的mRNA水平;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测MMP-3、MMP-13、前列腺素E2（PGE2）的水 平,同时检测一氧化氮（NO）的产生;采用Western blot分析葫芦素B对IL-1β介导的软骨细胞中核因子（NF）-κB信号 通路活化的影响。结果 葫芦素B剂量依赖性地减弱IL-1β对软骨细胞存活的抑制效应（P＜0.05）,同时抑制IL-1β 诱导的LDH释放、细胞凋亡及Caspase-3活性（P＜0.05）,10 µmol/L是其最佳实验剂量。与IL-1β处理组相比,葫芦 素B处理可减缓IL-1β对CollagenⅡ、aggrecan的mRNA表达抑制效应（P＜0.05）。此外,葫芦素B还可抑制IL-1β诱 导的MMP-3及MMP-13的mRNA表达及释放（P＜0.05）,降低炎性介质NO、PGE2的产生（P＜0.05）。同时,IL-1β可 明显上调软骨细胞中p-IκB、p-p65 NF-κB的表达,而葫芦素B则可抑制上述分子的表达（P＜0.05）。结论 葫芦素 B可能通过阻断NF-κB信号通路的激活抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤及代谢紊乱,提示其具有潜在的抗骨关节炎 的功效。     

刺五加苷B对IL-1β诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的 探究刺五加苷B（acanthopanax B,ACA-B）对IL-1β诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法 取SD大鼠软骨细胞随机分成5组,分别为对照组（PBS）、模型组（IL-1β）、ACA-B低剂量组（IL-1β+1×10^-8 mol·L^-1 ACA-B）、ACA-B中剂量组（IL-1β+1×10^-7 mol·L^-1 ACA-B）、ACA-B高剂量组（IL-1β+1×10^-6 mol·L^-1 ACA-B）;CCK8法检测不同浓度的ACA-B对软骨细胞增殖的影响,以及对IL-1β处理的软骨细胞活性的影响;采用Hoechst 33342染色观察软骨细胞核凋亡情况;采用qRT-PCR法检测凋亡相关基因的mRNA表达水平;采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白的表达情况。结果 当ACA-B浓度为1×10^-6 mol·L^-1或1×10^-7 mol·L^-1时,能够显著促进软骨细胞增殖。与模型组相比,ACA-B各组细胞活力明显增加;Hoechst 33342染色结果显示,ACA-B能够明显改善IL-1β诱导的软骨细胞核碎裂,萎缩现象,抑制细胞凋亡;与模型组比较,ACA-B加药组细胞中Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的mRNA及蛋白水平显著降低,Bcl-2的mRNA及蛋白水平显著升高。结论 刺五加苷B能够有效抑制IL-1β诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡。     

大鼠脑出血后IL-1β表达及其与凝血酶的关系

目的 观察大鼠实验性脑出血(ICH)后不同时间点血肿周围组织白细胞介素1β(IL-1β)炎性细胞表达及其与凝血酶的关系.方法 免疫组化法观察ICH后不同时间点血肿周围IL-1β的表达情况及凝血酶对其表达的影响.结果 在造模后1 h,ICH组和凝血酶组血肿周围即可见IL-1β炎性细胞表达,6 h达高峰,以后逐渐下降,48 h无阳性细胞表达.在相应时间点,水蛭素组血肿周围IL-1β的表达水平均明显低于脑出血组(P＜0.01),且细胞着色浅.假手术组仅有少量阳性细胞表达.结论 IL-1β参与ICH后脑损伤,凝血酶可能通过促进IL-1β的表达而产生ICH后脑损伤作用.     

IL-1β对神经元样PC12细胞IL-1RⅠ蛋白表达的影响

目的:探讨IL-1β对神经元样PC12细胞IL-1RⅠ蛋白表达的影响。方法:将PC12细胞传代后以一定的密度种植于培养皿后,NGF诱导其分化成神经元样细胞后,随机分为空白对照组(A组)I、L-1β1ng/mL刺激组(B组)I、L-1β5ng/mL刺激组(C组)、IL-1β10ng/mL刺激组(D组)。24h后分别以MTT法测定各组细胞存活率,Western Blotting方法检测神经元样PC12细胞内IL-1RⅠ蛋白表达。结果:MTT法显示,与A组相比,不同剂量组的IL-1β均可导致神经元样PC12细胞存活率的下降(P<0.01);WesternBlotting方法显示,与A组相比,不同剂量组的IL-1β刺激均可引起神经元样PC12的IL-1RⅠ蛋白表达上调(P<0.05)。结论:IL-1β可引起神经元样PC12细胞的IL-1RⅠ蛋白高表达,这可能与其所致神经元样PC12细胞细胞存活率的下降相关。     

乌司他丁对大鼠创伤性脑水肿后 NF-κB 及 IL-1β 表达的影响

目的通过观察大鼠创伤性脑水肿后脑组织中核转录子-κB （NF—κB）及白介素-1β（IL-1β）的变化,探讨乌司他丁（UTI）在大鼠创伤性脑水肿过程中对脑组织的保护作用及其机制。方法将30只健康成年SD大鼠随机分为正常对照组、创伤性脑水肿组及UTI干预组,每组10只。并于伤后8、24、72采用免疫组化法及血清ELISA法检测脑组织NF—κB和IL-1β的水平。结果创伤性脑水肿组和UTI组脑水肿部位NF—κB的活性和IL-1β的水平均较对照组明显升高（P〈0．01）,且于24h达到最高值,于72h时有所下降;UTI组各时间点与创伤性脑水肿组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论乌司他丁对大鼠创伤性脑水肿引起的脑损伤具有明显的脑保护作用,通过抑制NF-κB和IL-1β信号传导通路是乌司他丁脑保护作用的重要机制之一。     

胶原诱导性关节炎大鼠在中药作用下对其关节炎指数、IL-1β、TNF-α、PGE2、 RANKL及OPG的影响探讨

目的 探讨胶原诱导性关节炎大鼠在中药作用下对其关节炎指数、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、前列腺素E2 (PGE2)、核因子-kB受体活化因子配体(RANKL)及护骨素(OPG)的影响.方法 取Wistar大鼠48只随机分为空白组、模型组、阳性组、A、B、C组.复制胶原诱导性关节炎大鼠模型,连续干预4周后,各组大鼠眼眶静脉取血,观察关节炎指数、IL-1β、TNF-α、PGE2、RANKL及OPG.结果 与空白组相比,其余各组大鼠关节炎指数均明显增加(P＜0.05).与模型组相比,阳性组、A、B、C组关节炎指数均明显降低(P＜0.05).与空白组相比,模型组血清IL-1β、TNF-α、PGE2、RANKL、OPG及RANKL/OPG水平均明显升高(P＜0.05).与模型组相比,阳性组、A、B、C组血清IL-1β、TNF-α、PGE2、RANKL、OPG及RANKL/OPG水平明显降低(P＜0.05),且A、B、C组大鼠血清IL-1β、TNF-α、PGE2水平抑制作用及对RANKL、OPG及RANKL/OPG的改善情况均优于阳性组(P＜0.05).组织病理学结果显示,A、B、C组可抑制CIA大鼠关节组织病理学改变.结论 自拟除痹汤可明显降低CIA模型大鼠的关节炎指数及关节组织病理学改变,下调IL-1β、TNF-α、PGE2水平,抑制RANKL、OPG,从而可以有效防治CIA.     

白藜芦醇对兔实验性骨关节炎白细胞介素-1β表达的影响

目的:研究白藜芦醇干预兔实验性骨关节炎模型动物后关节软骨、滑膜细胞白细胞介素-1β合成的变化,探讨其治疗骨关节炎的效果和作用机制。方法:36只新西兰大白兔,随机抽取6只,作为正常对照组(A组),其余30只参考文献方法,制备兔OA模型,术后4周,经X线和病理改变证实造模成功后,将造模动物随机分为:模型组(B组)、阳性药物对照组(C组)(双醋瑞因1 mg·kg-1·d-1)、受试药物高剂量组(D1组)(白藜芦醇120 mg·kg-1·d-1)、中剂量组(D2组)(白藜芦醇60 mg·kg-1·d-1)、低剂量组(D3组)(白藜芦醇30 mg·kg-1·d-1),每组6只。并按设定剂量每日灌胃给药,连续给药6周后,处死动物,切取股骨内髁软骨标本,脱水石蜡包埋后切片,用免疫组化法检测软骨细胞中IL-1β水平。结果:受试药物组(D1组、D2组、D3组)软骨细胞中IL-1β阳性细胞分别为(21.8±3.8)%,(26.1±13.3)%,(30.4±4.9)%,明显低于模型组(B组)(49.1±5.5)%和阳性药物对照组(C组)(36.0±4.0)%,(P<0.01)。结论:高、中剂量的白藜芦醇能抑制模型组动物软骨细胞合成IL-1β,其能力优于阳性对照药物。     

血清TNF-α、IL-1β、TGF-β1、E-选择素和L-选择素在肾综合征出血热发病机制中的作用

目的 研究血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、转化生长因子β1(TGF-β1)、E-选择素和L-选择素在肾综合征出血热(HFRS)发病机制中的作用.方法 41例HFRS患者(轻症组22例,重症组19例)接受了研究,按病期采血,分别用放射免疫法和ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、TGF-β1、E-选择素和L-选择素,并同期作肝、肾功能和血常规检查.结果 从发热期至多尿期,血清IL-1β、TNF-α、E-选择素、L-选择素均显著升高,与ALT、BUN的变化趋势相一致;与此相反,血清TGF-β1含量、TGF-β1/IL-1β和TGF-β1/TNF-α比值在病程前三期均见降低,与Plt的变化趋势相似.结论 HFRS急性期血清IL-1β、E-选择素、L-选择素升高和TGF-β1水平下降是造成失控性全身炎症反应和肝、肾功能损害的重要因素,在HFRS发病机制中起重要作用;合理的对症治疗和适量使用免疫调节剂可望改善本病的预后.