ABC-ELISA检测喜马拉雅旱獭鼠疫FI抗体的研究

用ABC-ELISA和常规ELISA检测了19份血凝阳性喜马拉雅旱獭(Marmota himalayana)血清和48份血凝阴性喜马拉雅旱獭血清及247份近年采自疫区的该旱獭血清,比较了两法的敏感性与特异性。两法的阳性、阴性符合率均为100％,但检测阳性血清的OD均值ABC-ELISA法明显地比常规ELISA法高(P<0.01)。ABC-ELISA与常规ELISA法对疫区血清标本的阳性检出率分别为9.7％与8.1%,后者出现1.6％的漏检率,滴度也显著低于前者(P<0.01)。表明ABC-ELISA用于检测旱獭鼠疫FI抗体可明显提高ELISA法的敏感性,且能保持良好的特异性。     

单克隆抗体夹心ABC-ELISA检测包虫病人循环抗原

应用生物素标记单克隆抗体进行夹心ABC-ELISA检测包虫病人血清循环抗原(HcAg),共检测包虫病人血清103份,62价呈阳性(60.19％);检测囊虫病人血清22份,其它寄生虫病血清54份,正常人血清101份,均未出现假阳性反应。常规ELISA血清抗体阴性的10例包虫病人HcAg 5例呈阳性。HcAg的检测对血清抗体阴性的包虫病人具有辅助诊断意义。     

ABC-ELISA技术临床诊断包虫病的研究

应用ABC-ELISA法和常规ELISA法对41例手术证实包虫病人血清及34例健康人血清检测结果表明:ABC-ELISA法是更为敏感和特异的包虫病诊断方法。该法在待测血清作1:3200稀释时无假阳性反应,阳性检出率为90.24％,而常规ELISA法假阳性率为26.5％,阳性率仅为63.47％,两法具有显著性差异(P<0.05)。此外,通过人源与羊源包虫液抗原检出结果的比较,讨论了ABC-ELISA法诊断包虫病选用异源抗原的意义。     

HRP-SPA圆斑ELISA法诊断囊虫病的研究

本文应用圆斑ELISA法检测血清中抗囊尾蚴抗原的抗体以诊断囊虫病。在血清稀释度为1:200时,79例囊虫病患者中有73例(92.4％)呈阳性反应,50例健康献血员及28例其它疾病患者的血清均呈阴性结果。10例包虫病患者中有6例呈交叉反应阳性。此外,对同一批血清用常规ELISA法的敏感性高,特异性强,较     

包虫病人循环抗原的检测及应用价值的探讨

利用亲和层析纯化的抗包虫免疫球蛋白以双抗体ELISA法检测包虫抗原,对经亲和层析纯化的包虫抗原的检出下限可达40ng/ml。以1:2健康人混合血清稀释抗原时,检出下限为2.5μg/ml。用此法检测79例包虫病人的循环抗原,阳性率为40.51％。其中肝包虫病人阳性率为38.98％,肺包虫病人为33.33％。血清抗体阳性的包虫病人循环抗原检出率为33.33％,抗体阴性者中为43.75％。在抗体阴性的肺包虫病人中循环抗原的阳性率可达50％。循环抗原的测定在血清抗体阴性包虫病人的免疫学诊断中具有辅助意义。     

细粒棘球蚴原头节18 kU纯化抗原ELISA的建立及其对两型包虫病鉴别诊断的意义

目的用细粒棘球蚴原头节18ku纯化抗原建立ELISA诊断方法,用于两型包虫病的鉴别诊断.方法用18ku纯化抗原ELISA方法对44例泡型包虫病(AE)、70例囊型包虫病(CE)、29例囊虫病和30例健康人血清中特异性抗体进行检测,同时用羊包囊液抗原(Bu)常规ELISA法检测上述血清做比较.结果18ku纯化抗原检测不同血清的阳性率为AE90.91%、CE11.43%、囊虫病和健康人血清均为阴性;Bu抗原分别为AE97.73%、CE88.57%、囊虫病51.72%和健康人10.0%.18ku-ELISA对AE血清诊断敏感性为90.91%、特异性93.80%、阳性预示值为83.33%、阴性预示值96.80%.结论两型包虫病患者体内18ku抗体水平存在明显差异,纯化抗原18ku-ELISA可用于两型包虫病的鉴别诊断,较免疫印渍法简便快速.     

亲和素-生物素化辣根过氧化物酶复合物法诊断泡球蚴病的研究

用沙鼠泡球蚴抗原对泡球蚴、非泡球蚴病患者和健康者进行亲和素-生物素化辣根过氧化物酶复合物的酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)。以样品孔血清(S)与参考阴性血清(N)的比值S/N≥2.2为阳性标准时,该法的敏感性和特异性均为98.1%。ABC-ELISA抗体几何平均滴度为ELISA的13.7倍。泡球蚴和棘球蚴病患者对该抗原反应阳性率各为98.1和67.1％,有显著性差异(P<0.01)。本试验的总孵育时间由2～4h减为55min。因此,ABC-ELISA更宜于检测微量抗体和低抗体水平患者。     

酶联免疫吸附试验诊断包虫病的研究

用酶联免疫吸附试验法检测35例包虫病人的血清抗体,抗原为人肺包虫囊液经活性碳处理的粗抗原,稀释浓度为50～100μg/ml,抗体稀释度为10~(-1)～10~(-5)。用替代试验与阻断试验证明该法具有特异性。包虫病人及正常人血清检测OD值分别为0.93±0.45和0.119±0.055,同样证明该法特异性较好;但与肺结核、肝炎、肝硬化等有交叉反应。35例术前ELISA呈阳性或阴性的病例与手术验证的符合率为94.2％,假阳性率为7.4％。本法与皮内试验、对流免疫电泳、补体结合试验进行小样本比较,显示本法敏感性高,特异性强。     

免疫-PCR检测肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体方法的建立

目的　建立高灵敏性和高特异性的免疫 -PCR方法检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清中抗核衣壳蛋白抗体。方法　用汉坦病毒 ( 76 - 118株 )重组核衣壳蛋白为抗原包被聚苯乙烯微滴度板 ,与经ELISA法和临床均已确诊为HFRS患者的血清进行抗原抗体特异性反应 ,以链霉亲和素为桥梁将生物素标记的抗体与生物素标记的DNA指示分子相连 ,PCR扩增DNA指示分子 ,通过检测指示分子DNA来反映肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体的水平 ,并与传统的ELISA法进行比较。结果　免疫 -PCR检测肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体的敏感性是ELISA法的 2 5 0 0 0倍 ;30例HFRS阳性患者血清免疫 -PCR检测均为阳性 ,2 0例甲型肝炎阳性血清和 2 0例正常人血清免疫 -PCR检测均为阴性。结论　免疫 -PCR方法敏感性高 ,特异性强 ,有可能作为一种高敏感性的检测方法用于HFRS的临床辅助诊断     

细粒棘球蚴原头节18ku纯化抗原ELISA的建立及其对两型包虫病鉴别诊断的意义

目的 用细粒棘球蚴原头节18ku纯化抗原建立ELISA诊断方法,用于两型包虫病的鉴别诊断。方法 用18ku纯化抗原ELISA方法对44例泡型包虫病（AE）、70例囊型包虫病（CE）、29例囊虫病和30例健康人血清中特异性抗体进行检测,同时用羊包囊液抗原（Bu)常规ELISA法检测上述血清做比较。结果 18ku纯化抗原检测不同血清的阳性率为：AE90．91％、CE111．43％、囊虫病和健康人血清均为阴性;Bu抗原分别为：AE97．73％、CE88．57％、囊虫病51．72％和健康人10．0％。18ku-ELISA对AE血清诊断敏感性为90．91％、特异性93．80％、阳性预示值为83．33％、阴性预示值96．80％。结论 两型包虫病患者体内18ku抗体水平存在明显差异,纯化抗原18ku-ELISA可用于两型包虫病的鉴别诊断、较免疫印渍法简便快速。     

亲和素—生物素化辣根过氧化物酶复合物法诊断...

The Avidin-Biotin-Peroxidase Complex enzyme-linked immunosorbent assay (ABC-ELISA) with antigen from gerbils infected with alveolar hydatid (GAH) was performed on the sera of 54 patients with multilocular echinococcosis, 107 patients with other diseases and 102 healthy adults. All the sera were diluted 1:200 and an S/N value greater than 2.2 was taken as positive. Both the sensitivity and specificity were 98.1%. The S/N value (mean +/- SD) of sera of the patients with multilocular echinococcosis, other parasitic diseases, tuberculosis, other diseases and healthy adults were: 5.9 +/- 3.0, 1.1 +/- 0.4, 1.4 +/- 0.8, 1.1 +/- 0.5 and 1.0 +/- 0.4. The geometric mean titre (GMT) of antibody measured by ABC-ELISA was 13.7 times that of ELISA. The quantity of serum used in ELISA was 8 times that of ABC-ELISA. ABC-ELISA might be particularly helpful to identify cases with low immune responsiveness. In the detection of alveolar hydatidosis and cystic disease with GAH antigens, the positivity was 98.1 and 67.1% with 87 and 25.6% having S/N greater than 5, respectively. It is suggested that in the diagnosis of hydatid diseases by ABC-ELISA, homologous antigen should be used. The temperature and the incubation time needed for the present assay are practical, for the total time requires only 55 minutes.     

Application of biotin-avidin system, determination of circulating immune complexes, and evaluation of antibody response in different hydatidosis patients

The avidin-biotin-peroxidase complex enzyme-linked immunosorbent assay (ABC-ELISA) and standard ELISA were used for the detection of Echinococcus granulosus antibody in sera of 101 patients operated on for hydatid disease, 40 patients with miscellaneous nonhydatid diseases, and 61 normal subjects. Sensitivity and specificity of the two procedures were comparable and the geometric mean antibody titer detected with ABC-ELISA was higher than with standard ELISA. The ABC-ELISA is a sensitive, specific, simple, and convenient method for diagnosing hydatidosis.     

不同源包虫囊液作为人体包虫病诊断性抗原的免疫化学分析

本文采用免疫印迹、免疫电泳(IEP)及ABC-ELISA等免疫化学方法系统地比较分析了羊、牛、人源细粒棘球蚴囊液(EgCF)作为人体囊型包虫病诊断性抗原的差别,发现三者蛋白组分及免疫原性蛋白大同小异;IEP中三源EgCF形成迁移距离不同但能识别同一抗体的沉淀弧,由此推知三源EgCF中寄生虫抗原决定簇相同而其载体蛋白有别;ABC-ELISA结果表明三源EgCF对30例包虫病人反应无显著差別。     

生物素-抗生物素在人和实验动物血吸虫病诊断中的应用研究

应用新的生物放大系统BAS作ABC-ELISA,与常规ELISA比较检测可提高试验的敏感性。采用可溶性虫卵抗原对粪孵毛蚴在5只以下30克粪的68例进行检测,ABC法的检出率可由ELISA的95.6％提高到100％;用成虫抗原时,ABC法的阳性消光值和阴性消光值之比(P/N)为常规ELISA的1.42倍。ABC法用于检测实验家兔血吸虫病可显著提高敏感性(P<0.01),提示BAS系统在人及动物特异性抗体的检测中都是有用的增敏试剂。     

ABC-ELISA检测B型肉毒毒素抗体的研究

本文建立了ABC-ELISA检测B型肉毒毒素抗体的方法。该方法用亲和素-生物素标记的过氧化物酶复合物(ABC)为结合物,简易快速,敏感特异,灵敏度较常规SPA-ELISA高约100倍。文中对最高抗原包被量,包被板保存效果,ABC的制备条件以及缩短试验流程时间等因素进行了一定的探索,为该方法进一步用于抗B型肉毒毒素单克隆抗体的筛选奠定了良好的基础。     

包虫病人血清特异性抗包虫IgG和IgM的检测及其临床意义探讨

本文报告应用IFAT法检测包虫病人血清中特异性包虫IgG和IgM的初步结果。44例正常人血清特异性IgG和IgM的假阳性率均为0％,83例包虫病患者血清特异性IgG和IgM的阳性检出率分别为96.36％和19.28％,二者有极显著性差异(P<0.01)。提示现症包虫病患者血清中的特异性抗包虫抗体主要为IgG。在16例特异性IgM阳性病人中,有9例存在包虫囊破裂,7例为肺包虫或肝肺混合包虫病患者,表明特异性IgM在包虫囊破裂时升高,肺包虫病人比肝包虫病人检出率高。提示包虫病人血清中的特异性IgM抗体水平与包虫囊的生活状态有关。