Bcl-2反义核酸增强青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡

目的:研究bcl-2反义核酸增强青蒿琥酯对人慢性粒细胞白血病K562细胞株诱导凋亡效应. 方法:合成bcl-2反义核酸(ASON)导入K562细胞,应用Western blot法检测bcl-2蛋白的表达,TUNEL技术、流式细胞仪法(FCM法)检测细胞凋亡. 结果:bcl-2反义核酸(ASON)能明显抑制bcl-2蛋白的表达. 青蒿琥酯在1～7 mg/L浓度范围内能分别明显抑制K562细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性, 7 mg/L青蒿琥酯作用72 h的K562细胞株A值最低. 原位细胞凋亡检测可见细胞变小,核固缩为一个或多个染色质团块,与未经ASON转染的K562细胞株相比,经bcl-2 ASON转染的K562细胞株对青蒿琥酯的诱导凋亡作用更加明显;FCM法出现低于G1期DNA含量的亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡主要发生在G1/S期,与未经ASON转染的K562细胞株相比,经bcl-2 ASON转染的K562细胞凋亡率显著增加. 结论:青蒿琥酯在体外一定浓度范围内可诱导K562细胞株凋亡,bcl-2反义核酸可增强青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡的作用.     

分化抑制因子Id4对K562细胞株凋亡的影响

目的探讨Id4基因的反义核酸对人红白血病K562细胞凋亡的影响。方法采用脂质体介导的反义寡核苷酸转染DNA重组技术,将人反义Id4基因插入到真核表达载体pXJ41-neo上,重组质粒和空载体分别转染K562细胞,加入凋亡诱导剂三尖杉酯碱(HT)后采用流式细胞术、TUNEL和免疫印迹(Western blot)技术检测细胞的凋亡率以及相关蛋白Bcl-xl、c-Myc、p27的表达变化。结果获得了pAId4(反义基因重组质粒)和pK562(对照)克隆细胞株;加入诱导剂HT后,反义寡核苷酸组的凋亡率明显增高到43.5%;检测K562细胞凋亡过程中,Bcl-xl蛋白在pAId4细胞株中表达减低。结论反义Id4基因的转入对K562细胞起到诱导凋亡作用,并推测Id4在K562细胞中可能通过影响Bcl-xl的表达量,进一步诱导细胞凋亡。     

核酸内切酶抑制剂对三尖杉酯碱诱导HL60细胞凋亡的影响

目的探讨核酸内切酶在三尖杉酯碱诱导ＨＬ６０细胞凋亡中的作用。方法以流式细胞仪和ＤＮＡ凝胶电泳检测ＨＬ６０细胞在核酸内切酶抑制剂及三尖杉酯碱作用下,细胞凋亡的发生。结果核酸内切酶抑制剂抑制了细胞凋亡。结论三尖杉酯碱诱导ＨＬ６０细胞凋亡需要核酸内切酶参与。     

c—myc反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响

目的 研究c-myc反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响。方法 用针对c-myc mRNA 5'端非翻译区的一个18bp的反义寡核苷酸与HL60细胞、分离的急性粒细胞白血病病人白细胞共培养10h,用凋亡细胞计数、DNA凝胶电泳、ELISA、流式细胞仪等方法测白血病细胞的调亡。结果 c-myc反义寡核苷酸能够诱导HL60细胞凋亡,且此作用随着作用浓度的提高而增加;此反义核酸只诱导白血病患者的白血病细胞凋亡,对正常白细胞的凋亡无影响。结论 c-myc反义核酸可以通过诱导白血病细胞凋亡来治疗急性粒细胞白血症,且该作用的特异性好。     

HHT联合低剂量Ara-c与RNA诱导K562细胞凋亡的研究

目的:探讨高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)联合小剂量阿糖胞苷(arabinsylcytosine,Ara-c)与RNA协同作用对K562细胞凋亡的影响。方法:应用四唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖率,倒置显微镜下观察细胞形态学变化、测定细胞蛋白质的含量及碱性磷酸酶(AKP)活性,观察提取的扬子鳄RNA与高三尖杉酯碱联合小剂量阿糖胞苷对K562细胞凋亡的影响。结果:①高三尖杉酯碱联合小剂量阿糖胞苷可协同诱导K562细胞凋亡。②RNA能增强高三尖杉酯碱联合小剂量阿糖胞苷对K562细胞增殖的抑制作用。结论:高三尖杉酯碱联合小剂量阿糖胞苷能有效诱导白血病细胞系K562细胞凋亡,RNA能增强高三尖杉酯碱联合小剂量阿糖胞苷的作用。     

survivin mRNA表达水平与高三尖杉酯碱诱导恶性血液病细胞凋亡的相关性研究

目的：研究survivin mRNA在细胞株MUTZ-1、K562、Jurkat、RPMI、HL60的表达水平与高三尖杉酯碱（HHT）诱导的凋亡率的关系。方法：应用流式细胞仪技术，研究HHT诱导人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1、人急性红白血病细胞株K562、人淋巴瘤细胞株Jurkat和人骨髓瘤细胞株RPMI，以及人急性粒细胞白血病细胞株HL60细胞凋亡。用半定量逆转录酶-多聚酶链式反应，检测上述细胞株及HHT作用MUTZ-1细胞后凋亡蛋白抑制因子survivin、XIAP的表达。结呆：细胞株MUTZ-1、K562、Jurkat、RPMI、HL60均表迭survivin、XIAP mRNA，HHT能诱导各细胞株凋亡，HHT诱导的凋亡率与细胞株survivin mRNA表达呈负相关。结论：survivin在细胞中的表达水平可能直接影响细胞对化疗药物的敏感性，可作为预测细胞耐药的指标之一，同时也可能将成为肿瘤治疗的新靶向。     

Survivin反义核酸对拓扑替康诱导SKOV3细胞凋亡的影响

目的 :探讨Survivin反义核酸对拓扑替康 (TPT)诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡的影响。方法 :在光镜下观察Survivin反义核酸与TPT联合应用后SKOV3凋亡的形态学改变 ,通过DNA电泳检测SKOV3细胞凋亡的情况 ;应用MTT法检测SKOV3细胞对TPT的敏感性。结果 :Survivin反义核酸可明显促进TPT诱导的SKOV3凋亡 ,呈现出特征性的DNA梯状带 ;TPT对SKOV3、SKOV3/neo、SKOV3/SVVas细胞的IC50 值分别为 (1 6 0 .0 0± 6 .36 ) μg/L、(1 5 8.0 0±6 .32 ) μg/L、(4 2 .0 0± 2 .31 ) μg/L ,其差异具有统计学意义 (P <0 .0 1 )。 结论 :Survivin反义核酸可明显促进TPT诱导的卵巢癌细胞SKOV3凋亡 ,提高卵巢癌细胞对TPT的敏感性     

人类端粒酶基因反义核酸对恶性肿瘤细胞端粒酶抑制的实验研究

目的 :研究人类端粒酶 (hTR)基因的反义核酸对K5 62细胞、Hep 2细胞端粒酶活性和K5 62细胞凋亡的影响。方法 :采用TRAP法检测K5 62细胞、Hep 2细胞在反义核酸处理前后端粒酶活性的变化以及采用TUNEL法观察反义核酸处理前后K5 62细胞凋亡的变化。结果 :hTR基因反义核酸能有效抑制K5 62细胞和Hep 2细胞的端粒酶活性 ,并且诱导K5 62细胞发生凋亡。结论 :hTR基因反义核酸能显著抑制肿瘤细胞的端粒酶活性 ,为恶性肿瘤治疗提供了一条新的有效的途径     

脐血CD3AK细胞诱导肿瘤细胞凋亡的研究

目的 :探讨脐血CD3AK细胞诱导K5 6 2、HL 6 0细胞凋亡的作用。方法 :用细胞形态学观察、DNA琼脂糖电泳、原位末端标记法检测K5 6 2、HL 6 0细胞。结果 :K5 6 2细胞自然凋亡率 (3.5 0± 0 .97) % ,脐血CD3AK诱导的K5 6 2细胞凋亡率 (2 7.40± 4.6 4) % ;HL 6 0细胞自然凋亡率 (4.10± 1.10 ) % ,脐血CD3AK诱导的HL 6 0细胞凋亡率(2 1.10± 3 .82 ) % ,均有显著性差异。结论 :脐血CD3AK细胞能诱导K5 6 2、HL 6 0细胞凋亡 ,而且诱导K5 6 2凋亡的能力更强。     

化疗药物诱导肝癌细胞凋亡过程中端粒酶、端粒酶逆转录酶活性的变化

目的:探讨hTERT和端粒酶在化疗药物诱导凋亡过程中的作用及其意义。方法选择IC50剂量的三尖杉酯碱、长春新碱和足叶已甙处理肝癌细胞,采用TRAP法检测药物处理前后肝癌细胞端粒酶活性;应用流式细胞学检测细胞周期和细胞凋亡率;并利用Western Blotting检测药物作用后hTERT蛋白水平变化。结果三尖杉酯碱、长春新碱作用于肝癌细胞,明显降低hTERT蛋白表达水平,下调胞内端粒酶活性,并诱导细胞凋亡及周期阻滞;足叶已甙对肝癌细胞端粒酶活性及hTERT蛋白水平无明显抑制作用;化疗前后胞内hTERT水平和细胞凋亡率的变化呈明显负相关。结论化疗药物可能通过降低hTERT蛋白水平而下调了端粒酶活性,并诱导凋亡;hTERT蛋白水平可作为化疗敏感性指标。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。