单向肠灌流法研究芍药苷和刺芒柄花苷的肠吸收特性

目的:采用在体单向肠灌流法研究芍药苷和刺芒柄花苷在大鼠不同肠段的吸收特性,探索复方给药对单一活性成分吸收的影响.方法:采用高效液相色谱法进行含量测定和方法学验证.色谱柱:Shim Pack ODS C18 ( 250 mm × 4.6 mm,5 μm );流动相:测定芍药苷时为甲醇-乙腈-1.0 mL·L-1磷酸水溶液...     

五味子有效成分的大鼠在体单向灌流肠吸收

考察五味子提取物中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素3种主要有效成分在大鼠的肠吸收性质。本文以酚红为标示物,运用在体单向肠灌流模型并采用HPLC法测定五味子提取物中3种主要有效成分在大鼠十二指肠、空肠、回肠及结肠灌流的浓度变化。结果发现,五味子提取物中3种有效成分的每种成分在不同浓度的吸收速率常数(Ka)和有效渗透系数(Peff)均有显著性差异(P<0.05)。随着浓度的增加,其Ka、Peff值均先升高而后下降,存在高浓度饱和现象,提示其在机体内的转运可能存在主动转运或促进扩散;3种有效成分在各肠段均有较好吸收,其中十二指肠吸收最好,空肠与回肠的吸收相近无显著差异(P>0.05);3种有效成分之间在不同肠段的吸收均存在显著性差异(P<0.05),十二指肠中五味子甲素吸收最好,其他肠段的Ka、Peff大小顺序依次是五味子甲素>五味子乙素>五味子醇甲,且两两之间都存在显著性差异(P<0.05)。     

长春西汀的大鼠在体肠吸收研究

采用单向灌流技术考察长春西汀的大鼠在体肠吸收性质.结果表明,灌流速度对药物吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(Papp)有极显著影响(P＜0.01);药物浓度对Ka和Papp无显著影响(P＞0.05);药物在全肠道吸收较好,吸收窗主要在小肠,且小肠内无明显的特定吸收部位;羟丙基-β-环糊精在1%～4%范围内对药物的肠吸收无显著影响.     

Determination of site of absorption of propranolol in rat gut using in situ single-pass intestinal perfusion

Previously, permeability and site of intestinal absorption of propranolol have been reported using the Ussing chamber. In the present study, the utility of Single-Pass Intestinal Perfusion to study permeability and site of intestinal absorption of propranolol was evaluated in rats. Drug permeability in different regions of rat intestine viz. duodenum, jejunum, ileum and colon was measured. Propranolol (30 μg/ml) solution was perfused in situ in each intestinal segment of rats. Effective permeability (Peff) of propranolol in each segment was calculated and site of absorption was determined. The Peff of propranolol in rat duodenum, jejunum, ileum and colon was calculated to be 0.3316×10(-4) cm/s, 0.4035×10(-4)cm/s, 0.5092×10(-4) cm/s and 0.7167×10(-4) cm/s, respectively. The above results suggest that permeability of propranolol was highest through colon compared to other intestinal sites, which is in close agreement to that reported previously. In conclusion, in situ single pass intestinal perfusion can be used effectively to study intestinal permeability as well as site of intestinal absorption of compounds in rats.     

阿苯达唑自微乳大鼠在体肠吸收研究

目的研究阿苯达唑自微乳在小肠各部位的吸收情况。方法采用大鼠在体肠单向灌流实验,RP-HPLC法测定药物浓度,根据药物进出小肠各段中的质量减少量来求算出药物的吸收速率。结果在十二指肠、空肠、回肠中的吸收速率常数依次是1.78×10-2,2.15×10-2和1.25×10-2·min-1。结论阿苯达唑自微乳在整个小肠段都有吸收,且小肠中段吸收较好。     

对大鼠在体肠单向灌流技术中重量法的评价

目的:评价重量法在大鼠在体肠单向灌流技术中的应用.方法:以长春西汀为模型药物,采用大鼠在体肠单向灌流技术,对重量法和酚红法计算的净水流量值(NWF)、药物吸收速率常数(Ka)和药物表观吸收系数(Papp)进行比较,并对重量法中收集液在密度修正前后的NWF和Papp值进行比较.结果:重量法计算所得的NWF值显著高于酚红法(P＜0.05),前者计算所得的Ka和Papp值略高于后者(P＞0.05);重量法能显著减少实验误差;对收集液密度进行修正可以进一步提高实验数据的准确性.结论:重量法可以作为大鼠单向灌流在体肠吸收实验中校正灌流液体积的有效方法,它避免了加入"标示物"给实验带来的一系列问题.     

在体单向肠灌流模型研究小檗碱及其在复方配伍环境中的大鼠肠吸收特性

本实验主要考察药物浓度、肠段、pH、P-糖蛋白 (P-glycoprotein, P-gp) 及Na⁺依赖型葡萄糖转运体 (Na⁺-dependent glucose transporter, SGLT1) 对小檗碱肠吸收的影响, 并探索复方配伍环境中小檗碱的肠吸收情况。实验以酚红为标示物, 采用大鼠在体单向肠灌流模型, 运用高效液相色谱法考察小檗碱单体 (36.70、46.17和92.33 μg·mL⁻¹)、黄连解毒汤模拟体系 (主要指标成分单体混合物: 小檗碱 + 黄芩苷 + 栀子苷, 其中小檗碱浓度为92.33 μg·mL⁻¹) 及黄连解毒汤全方 (小檗碱浓度为92.33 μg·mL⁻¹) 中小檗碱在大鼠各肠段的吸收变化情况。结果表明: 小檗碱在一定浓度范围内 (20～100 μg·mL⁻¹), 部分大鼠小肠吸收速率参数 (K_a) 无显著性差异, 提示药物的吸收机制可能为被动扩散, 其转运过程可能受SGLT1和P-gp的影响; 单体混合物和全方中小檗碱在各肠段的K_a和有效渗透系数 (P_eff) 值均有显著性增加 (P < 0.05)。说明小檗碱在整个肠段均有吸收, 具有广泛的吸收窗, 其中结肠段吸收较好; 配伍对小檗碱的大鼠肠吸收特性有一定影响, 较单体而言, 单体混合物和全方灌流时小檗碱在小肠中吸收更好。     

Absorption and cleavage of enalapril,a carboxyl ester prodrug,in the rat intestine: in vitro,in situ intestinal perfusion and portal vein cannulation models

In recent years prodrug strategy has been used extensively to improve the pharmacokinetic properties of compounds exhibiting poor bioavailability. Mechanistic understanding of the absorption and the role of intestine and liver in the activation of oral prodrugs is crucial. Enalapril, a carboxyl ester prodrug, is reported to be metabolized by human carboxylesterase‐1 (CES1) but not by carboxylesterase‐2 (CES2) to its active metabolite enalaprilat. Further, it has been reported that the small intestines of both rat and human contain mainly CES2. The objective of this work was to understand whether enalapril remains unchanged as it is absorbed through the intestine into the portal circulation. This was evaluated using different intestinal preparations, an in situ intestinal perfusion experiment and a portal vein cannulated rat model. No turnover of enalapril was seen with commercial rat intestinal S9 and microsomes, but reasonable turnover was observed with freshly prepared rat intestinal and mucosal homogenate and S9. In the intestinal perfusion study, both enalapril and enalaprilat were observed in the mesenteric plasma with the data suggesting 32% hydrolysis of enalapril in the intestine. In the portal vein cannulated rat, about 51% of enalapril absorbed into intestine was converted to enalaprilat. Overall, it was demonstrated that even though enalapril has been shown to be a specific substrate for CES1, it is converted to enalaprilat to a significant extent in the intestine. Such experimental techniques can be applied by other scientific groups who are working on prodrugs to determine the region and extent of activation. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.     

Exploring the compatibility mechanism of ShengDiHuang Decoction based on the in situ single-pass intestinal perfusion model

Affecting the absorption of active ingredients in the intestine serves as one of the important compatibility mechanisms of traditional Chinese medicine. The aim of this study was to investigate the compatibility mechanism of ShengDiHuang Decoction (SDHD) by using the single-pass intestinal perfusion in situ model. The major effective ingredients, catalpol, aucubin, acteoside, rehmannioside D, rehmannioside A, rhein, aloe emodin, emodin, chrysophanol, and physcion, were determined by HPLC. By analysing the effects of different concentrations, different pH, intestinal segments, protein inhibitors, and tight junction regulators on SDHD absorption, it was found that catalpol, aucubin, rehmannioside D, rehmannioside A, acteoside, rhein, and chrysophanol may undergo active transport, while aloe-emodin and emodin may undergo passive transport. Catalpol, aucubin, and rehmannioside D may be substrates of BCRP and MRP2, while rehmannioside A and rhein may be substrates of BCRP, and acteoside and chrysophanol may be substrates of P-gp, BCRP and MRP2. By comparing the P_app values of the major effective ingredients between single herb and herb-pairs, the compatibility of rehmannia and rheum could significantly promote the absorption of components in rehmannia. It is verified that rheum has a synergistic effect on the absorption of rehmannia in SDHD.     

大鼠小肠原位灌流与Caco-2细胞法研究柠檬苦素吸收机制

柠檬苦素广泛存在于柑橘类水果中, 具有抗菌、抗病毒、镇痛、抗炎和抗癌等活性, 但其口服生物利用度较低。本文意在研究柠檬苦素在肠道内的吸收机制, 为其今后的研究奠定基础。实验通过大鼠原位肠灌流和体外Caco-2细胞法进行。大鼠原位肠灌流结果显示, 柠檬苦素可能通过肠道促进扩散机制吸收, 吸收差且在全肠段都有吸收, 没有部位选择性。Caco-2细胞实验结果显示, 维拉帕米和酮康唑能显著提高柠檬苦素的吸收, 而丙磺舒的影响不明显。柠檬苦素吸收较低和生物利用度较差, 可能是P-gp外排以及CYP3A4代谢共同参与的结果。柠檬苦素的肠吸收机制研究将为其剂型设计和临床应用提供重要的参考。     

反相高效液相色谱法同时测定大鼠单向肠灌流液中补骨脂素和异补骨脂素

目的建立同时测定大鼠在体单向肠灌流液中补骨脂素和异补骨脂素的RP-HPLC方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为ShimadzuC18（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-水（55∶45）,柱温：30℃,流速：1.0mL·min^-1,检测波长：245nm。结果补骨脂素、异补骨脂素分别在0.8236～32.94μg·mL^-1、1.140～45.60μg·mL^-1与峰面积呈良好线性关系,相关系数r均为0.9999。其平均回收率分别为98.98%、99.59%,RSD均〈3%。结论该法操作简便、结果准确、灵敏度高,可同时测定大鼠单向肠灌流液中补骨脂素和异补骨脂素。     

在体单向肠灌流模型研究维胺酯的大鼠肠吸收特性

目的研究维胺酯在大鼠小肠的吸收动力学特性。方法采用在体单向灌流模型,对维胺酯进行了大鼠小肠吸收动力学实验,以紫外可见分光光度法和高效液相色谱法分别测定循环液中酚红和维胺酯的含量,计算吸收性能参数。结果不同剂量维胺酯在小肠的吸收速率常数Ka差异无统计学意义(P>0.05),胆管结扎与不结扎对吸收速率无明显影响;维胺酯在小肠各部位吸收速率常数Ka按十二指肠、空肠、回肠、结肠顺序依次下降。结论维胺酯在大鼠各肠段均有吸收,在肠道的吸收呈现一级吸收动力学,吸收机制为被动扩散。     

基于原位单向肠灌流模型研究没食子酸的肠吸收特性

目的考察没食子酸的肠道吸收特性,为提高鞣质类成分生物利用度提供理论依据。方法采用大鼠在体肠单向灌流模型、建立HPLC测定没食子酸的方法,并计算没食子酸在各肠段的吸收速率常数(Ka)及有效表观渗透率系数(Peff);分别研究吸收部位、药物浓度、时间、pH值、P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白-2(MRP2)抑制剂对没食子酸吸收的影响。结果没食子酸在不同肠段的Ka顺序为空肠>十二指肠>回肠≈结肠;随着药物浓度的升高,没食子酸的吸收差异无显著性;酸性环境(pH 5.5)有利于没食子酸的吸收;加入P-gp和MRP2抑制剂后,没食子酸的吸收与不加P-gp和MRP2抑制剂比较差异有显著性(P<0.05)。结论没食子酸在大鼠肠道内有较好的吸收,在空肠中吸收最好。初步判断其吸收机制为被动扩散。没食子酸的吸收受P-gp和MRP2的外排影响,可能为P-gp和MRP2底物。     

白芷中2种有效成分在大鼠小肠的吸收特性*

目的:研究白芷中欧前胡素(IM)和异欧前胡素(IO)2种有效成分在大鼠小肠内的吸收特性。方法:采用大鼠在体单向灌流法,研究IM和IO在小肠不同部位、不同浓度及不同pH条件下的吸收情况,并用HPLC法同时测定IM和IO在灌流液中浓度的变化。结果:IM和IO在大鼠体内的最佳吸收部位都是结肠;在1.0~100.0μg.mL-1浓度范围内,随着浓度增大,它们的吸收速率常数(Ka)和有效渗透系数(Peff)总体上逐渐减小,药物的吸收百分率相应降低;在酸性条件下,IM和IO的吸收受到pH的影响。结论:IM和IO在大鼠肠道内吸收良好,其吸收机制可能包括被动扩散与主动转运。     

药物肠道吸收研究方法概述

口服药物肠道吸收的研究方法主要包括体外法、体内法和在体法，对这3种研究方法进行简要介绍。鉴于在体肠灌流法操作简便、技术成熟、可控性强，同时又保证了神经内分泌调节与淋巴液血液供应的完整性等特点，更能反映药物吸收的真实情况，因此重点介绍了在体肠灌流法，并对在体肠灌流法中使用的循环灌流法和单向灌流法常用的几种灌流液体积校正方法等进行综述，为研究口服药物肠道吸收试验设计提供借鉴和参考。为保证试验的可操作性和实验结果的准确性，认为应根据所研究药品的性质、实验要求、试验条件等多方面因素综合考虑，选择适宜的试验方法，进而为药物剂型的开发和临床合理用药提供依据。     

在体单向灌流法研究加巴喷丁的大鼠肠吸收

采用在体单向灌流法考察加巴喷丁的大鼠肠吸收特性.结果表明,加巴喷丁在小肠各段(十二指肠段、空肠段和回肠段)和结肠均有吸收.低、中浓度(1和10 mmol/L)时药物在小肠各段的吸收速率常数(Ka)和有效渗透系数(Peff)显著大于结肠段(P＜0.05),高浓度(50 mmol/L)时十二指肠段的吸收显著大于结肠段(P＜0.05).加巴喷丁浓度对其在小肠各段的吸收有显著影响,低浓度组小肠各段药物的Ka和Peff显著大于高浓度组(P＜0.05),而药物浓度对结肠段的吸收无显著影响.     

在体肠灌流模型研究灵仙新苷的大鼠肠吸收特性

目的:研究灵仙新苷在大鼠肠段的吸收特征。方法:以酚红为标示物,采用在体单向肠灌流模型,LC-MS/MS测定灵仙新苷在体肠灌流的浓度变化,研究灵仙新苷的吸收部位和吸收动力学特征。结果:灵仙新苷在大鼠小肠各肠段的吸收速率常数(Ka)、有效渗透系数(Peff)是十二指肠>空肠≈回肠,且十二指肠的Ka和Peff值与其他肠段存在显著性差异(P<0.05);灌流液中同一肠段不同浓度灵仙新苷的Ka和Peff均无统计学显著差异;盐酸维拉帕米和环孢素A均显著性降低对灵仙新苷的吸收(P<0.05)。结论:灵仙新苷在小肠有不同程度的吸收,其中在十二指肠吸收最好,药物浓度对灵仙新苷的Peff和Ka值无影响,其吸收机制为被动扩散,灵仙新苷可能不是P-糖蛋白底物。     

复方丹参滴丸对阿司匹林大鼠在体肠吸收的影响研究

目的 建立阿司匹林的HPLC分析方法,研究复方丹参滴丸对阿司匹林大鼠肠吸收的影响。方法 采用大鼠在体肠单向灌流吸收实验模型,应用重量法校正灌流液体积,HPLC测定灌流液中阿司匹林浓度,计算阿司匹林肠吸收参数。结果 阿司匹林组、阿司匹林与复方丹参滴丸联合灌流组、复方丹参滴丸诱导组阿司匹林吸收速率常数(Ka)分别为1.05×10^-2,1.44×10^-2,2.29×10^-2 min^-1,吸收渗透系数(Papp)分别为0.219×10^-3,0.304×10^-3,0.504×10^-3 cm·min^-1。结论 复方丹参滴丸对阿司匹林大鼠肠吸收有明显影响,能促进阿司匹林的肠吸收。     

微乳液递送吴茱萸碱的体外释放行为及在体吸收研究

目的考察微乳液递送吴茱萸碱(evodiamine loaded microemulsion,EDM)体外释放特征及大鼠的在体吸收情况。方法制备EDM,用透析法研究其在p H 1.2盐酸溶液和p H6.8磷酸缓冲溶液中的体外释放特征,计算其累积释放率。再用大鼠在体单向肠循环法研究其在十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收情况,以及在胃的吸收情况,计算其在各部位的吸收速率常数(absorption rate constant,K_a)与有效渗透率(effective permeability,P_eff)。本实验用HPLC法测定吴茱萸碱(evodiamine,ED)的浓度。结果EDM和ED在p H 1.2盐酸溶液中的累积释放率分别为(64.76±0.73)%、(13.98±0.49)%,EDM的累积释放率为ED的4.63倍;在p H 6.8磷酸缓冲液中的累积释放率分别为(91.72±0.51)%、(18.34±0.20)%,EDM的累积释放率为ED的5.01倍。EDM在胃肠的K_a为ED的3倍以上,P_eff为ED的2倍以上。结论微乳液能使ED的体外释放以及大鼠胃肠吸收均得以改善。