Studies on the relationship between leukemic fibroblast colony forming cell and hemopoietic cells

Summary 36 patients with leukemia, including AML, CML and ALL were studied. Fibroblast colony forming cells (CFU-F) in patients with different types of leukemia were less than in normal adults (P<0.05-0.001). There was no correlation observed between CFU-F and CFU-Mix/L-CFU in normal adults and leukemic patients (P>0.05). It was found that CFU-F is a single clone not, originating from hemopoietic cells. After fetal muscular conditioned media were added, we observed that myelogenous leukemic cells showed the ability to adhere to the bottom of the dish, indicating the existence of quantitative and qualitative defects of CFU-F in leukemia. The mechanism and clinical significance of this phenomenon are discussed.     

白血病患者成纤维细胞集落与造血细胞关系的进一步探讨

本文探讨了白血病患者成纤维细胞集落(CFU-F)与白血病祖细胞(L-CFU);正常人CFU-F与多向造血祖细胞(CFU-Mix)之间的关系,认为两者之间无线性相关(P>0.05),表明CFU-F是独立于造血干细胞的细胞群。粒系白血病CFU-F的产率较淋巴系白血病为高(P<0.05),慢性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病L-CFU均较正常人CFU-Mix为高(P<0.05～0.01)。在白血病时CFU-F存在着质和量的缺陷,加用肌条件培养液后,粒系白血病细胞有贴壁倾向,讨论了有关机制和临床意义。     

Acute leukemia in adults: assessment of remission induction with combination chemotherapy by clinical and cell-culture criteria.

Remission induction was assessed by clinical and cell-culture criteria for 65 patients with acute myelogenous leukemia (AML), 11 patients with chronic myelogenous leukemia (CML) in blast crisis and 19 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL). Cyclophosphamide, cytosine arabinoside and vincristine (CAV) therapy resulted in complete remission in 23 of 50 previously untreated patients with AML and in 3 of the 11 patients with CML. Fourteen patients with ALL responded to vincristine-prednisone induction therapy and two to induction therapy with CAV. The median duration of survival of the responding patients was 2.2 years, compared with 4 months for the patients who did not respond to treatment. Granulopoietic colony formation, assessed by assay of colony-forming units dependent on colony-stimulating activity in culture (CFU-C), was abnormal in 37 of 42 bone marrow aspirates from patients with AML before treatement. CFU-C concentration increased when leukocyte-conditioned medium (LCM) was added to the cultures; 13 cultures had normal or elevated CFU-C concentration with LCM. Marrow cells of patients with ALL or CML in blast crisis demonstrated a similar pattern. Serial studies of marrow CFU-C concentration of 31 patients with AML demonstrated a change to a normal pattern with successful remission induction. Results of this study suggest that administration of purified LCM to leukemic patients might increase granulocyte production from potential but unstimulated granulopoietic precursors. This therapy would lessen the probability of death from infection during remission induction.     

增殖细胞核抗原、ras癌基因产物P21与白血病的相关性

目的探讨急性白血病及骨髓增生异常综合征（MDS）患者增殖细胞核抗原（PCNA）、ras-P21表达的相关性及其临床意义。方法采用单克隆抗体免疫细胞化学染色技术（SP法）检测33例急性髓细胞白血病（AML）、18例急性淋巴细胞白血病（ALL）、25例MDS及10例正常人的增殖细胞核抗原（PCNA）及ras-P21的表达，分析其相关性。结果AML、ALL及MDS PCNA的阳性率分别为62％，56％和53％，三者阳性率差别无统计学意义（P〉0．05）。AML与ALL、AML与MDS的PCNA表达强度（阳性细胞％）差别无统计学意义（X^2值分别为2．027和0．5217）。2例半年内转化成AML的MDS患者为PCNA高表达。17例ras-P21阳性者均有PCNA表达。结论ras-P21和PCNA共同表达的白血病细胞增殖活性及恶性增殖的潜能更高，ras-P21和PCNA综合检测对于白血病细胞增殖活性和预后分析可能具有参考价值。     

Telomerase activity in myelodysplastic syndrome

为了研究骨髓增生异常综合征的骨髓单个核细胞中端粒酶的表达特点 ,并与正常骨髓、急性白血病进行比较。方法　我们用PCR ELISA法对 2 0例正常骨髓、2 1例骨髓增生异常综合征 3 2例急性白血病骨髓单个核细胞的端粒酶活性进行半定量检测。结果　发现正常骨髓细胞端粒酶表达范围 0～ 0 3 0U ,平均 0 1 1± 0 0 8U ,其中仅有 3例阳性。急性白血病骨髓细胞端粒酶表达范围 0～ 0 96U ,平均 0 42± 0 2 6U ,阳性率 78 1 % ,与正常骨髓相比 ,有显著性差异 (P <0 0 1 )。MDS端粒酶表达范围 0～ 0 97U ,平均为 0 2 7± 0 1 9U ,阳性率为 66 7%。与正常相比 ,端粒酶表达均值之间的差别有显著性 (P <0 0 5)。其中高风险组端粒酶表达较高 (P <0 0 5)。IPPS评分等级为INT 1 ,2与HIGH组的MDS骨髓细胞端粒酶活性水平之间差异有显著性 (P <0 0 5)。端粒酶活性与染色体异常程度无明显关系。结论　结果提示正常骨髓细胞具有临界水平的端粒酶活性 ,急性白血病端粒酶活性显著升高 ,而MDS则介于正常与急性白血病之间。其中高风险组、IPPS评分预后差的MDS端粒酶活性较高     

PTEN?VEGF?FLT1基因在髓系白血病中的表达及其相关性研究

目的:探讨肿瘤抑制基因PTEN及血管内皮生长因子(VEGF)及其受体FLT1(VEGFR1)在白血病中的表达及其相关性。方法:应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测50例初治急性髓系白血病(AML),10例缓解期AML,10例慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)、10例CML急变期(CML-BC)患者和10例正常人骨髓单个核细胞(MMNCs)中PTEN、VEGF、FLT1 mRNA的表达。结果:初治AML患者PTEN mRNA表达水平明显低于缓解组AML和正常对照组,CML-BC患者PTEN mRNA表达水平低于CML-CP患者,在AML初治白血病中PTEN mRNA与VEGF和FLT1 mRNA表达负相关,PTEN低表达、VEGF和FLT1高表达与AML缓解率及髓外浸润相关。结论:髓系白血病患者中低表达PTEN基因,高表达VEGF及FLT1基因,并与白血病预后不良及髓外浸润密切相关,三者相互作用共同参与了白血病的发病。     

白血病患者外周血Flt3基因表达

目的 检测白血病患者外周血Flt3在不同类型白血病中的表达及分布情况．阐明Flt3的表达与疾病发生和发展的关系,与骨髓标本Flt3的表达作对照,确定检测外周血Flt3对白血病基因诊治的临床意义。方法 采用RT—PCR方法分析34例白血病患者外周血及部分骨髓标本Flt3的表达。结果 19例急性髓系白血病患者中16例阳性（84．2％）,其中6例强阳性,1例化疗后完全缓解的M3患者Flt3表达阳性;6例急性淋巴细胞白血病中3例阳性（50％）;5例慢性淋巴细胞白血病中2例（1例慢性期,1例急变期）阳性;2例骨髓异常综合征中1例阳性;2例急性混合细胞白血病均阳性。7例骨髓与外周血配对标本中阳性率差别无统计学意义。10例正常人表达均阴性。结论 外周血可以替代骨髓作为检测Flt3表达;急非淋患者Flt3表达强弱与外周血白细胞数相关（P〈0．05）;Flt3表达可作为白血病基因诊断及微小残留病灶的检测标志。     

Multiplex Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction for Simultaneous Screening of 29 Chromosomal Translocation in Hematologic Malignancies

Cytogenetic evaluation has been proved to be one of the most important factors to predict prognosis and de-lineate patients with some specific subtypes to be treated accordingly. Classical cytogenetic analysis is very time-consuming and often limited by the insufficient metaphases yielded from bone marrow samples. For this reason, much efforts had been taken to design RT-PCR to detect chromosomal translocation in hematologic ma-lignancies, of which multiplex reverse transcrip-tion-polymerase…     

自体树突状细胞用于慢性粒细胞白血病骨髓净化的初步研究

目的 考察慢性粒细胞白血病（CML）树突状细胞（DC）刺激自体骨髓T细胞,清除白血病细胞的作用。方法 采用3例CML病人（2例慢性期和1例急变期）外周血,分离单个核细胞（PBMNC）,经塑料贴壁后在含自体血浆、重组人白介素4（rhIL－4)、重组人粒－单集落刺激因子（rhGM－CSF）和重组人肿瘤坏死因子（rhTNFα）的RPMI－1640培养液。37℃CO2孵箱培养10天,或用免疫磁珠从PBMNC分离DC,在含自体血浆、rhGMCSF和rhTNFα的RPMI1640培养液培养3天,收获的细胞即DC加到含rhIL－2的Dexter骨髓长期培养体系,置37℃,5％CO2孵箱培养7天,观察前后骨髓细胞的免疫表型和P210阳性细胞比例。结果 从CML病人外周血获得的DC大多数表达P210。在含rhIL－2的Dexter体系加入DC能进一步增加体系中的T细胞数。在2例慢性期病人体系中的P210。在含rhIL－2的Dexter体系加入DC能进一步增加体系中的T细胞数。在2例慢性期病人体系中的P210阳性细胞减少,但在急性期病例,体系中P210细胞明显增加。结论 CML病人的DC表达P210,能刺激自体骨髓中T细胞增生,在慢性期病人,这些自体DC活化的骨髓T细胞有清除白血病细胞的作用。     

恶性血液病降钙素基因高度甲基化的研究

目的 探讨降钙素（CT）基因高度甲基化在恶性血液病中的临床意义。方法 采用限制性内切酶（HPaⅡ）消化DNA和聚合酶链反应技术检测73例恶性血液病、6例正常人以及24例非恶性血液病的CT基因的基化程度。结果 12/14例（85.7%)急性淋巴细胞白血病、9/15例（60%）急性非淋巴细胞白血病、8/10例（80%）慢性粒细胞白血病、5/15（33.3%)淋巴瘤、2例（2/5）骨髓增生异常综合征、1例（1/2）恶性组织细胞病、1例（1/3）慢性淋巴细胞白轿病和1例（1/9）多发性骨髓瘤的病人出现CT基因高度甲基化阳性,而6例正常人和24例非恶性血液病无一例阳性。结论 CT基因高度甲基化可作为恶性血液病恶性克隆增殖的分子基因标志,从而为恶性血液病的诊断、微小残留病的监测及疾病的发展预测提供了一种有用手段。     

慢性粒细胞白血病粒细胞表面阴离子位点研究

观察慢性粒细胞性白血病（ＣＭＬ）患者外周血粒细胞的超微结构及阴离子位点，对后者用图象分析仪作了定量检测。镜下可见早幼粒细胞及各阶段粒细胞，细胞核分化程度不一，细胞间可见胞膜融合现象，幼稚细胞的表面阴离子位点明显增多，且分布不匀。提示细胞表面的阴离子位点与ＣＭＬ细胞的异常分化有关。     

Cyr61基因与慢性粒细胞白血病的相关性研究

目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中富半胱氨酸61基因（Cyr61）的表达水平及其临床意义。方法应用半定量RT PCR和免疫组化技术分别检测38例CML患者和10例正常对照者（正常对照组）骨髓单个核细胞中Cyr61mRNA和蛋白水平的表达情况,CML患者中慢性期20例（慢性期组）,加速期11例（加速期组）,急变期7例（急变期组）。结果38例CML患者中,慢性期组、加速期组、急变期组Cyr61mRNA的表达明显高于正常对照组(P＜0.05)。Cyr61基因在加速期及急变期的表达高于慢性期(P<0．05),Cyr61基因在加速期和急变期的表达虽升高,但两者差异无统计学意义(P>0．05)。Cyr61蛋白在CML中的表达明显高于正常对照组,CML加速期和急变期中Cyr61蛋白的表达高于慢性期（P均<0．05）。结论Cyr61基因参与了CML的发生、发展过程,且与CML的急变有关,可作为预示CML急变的实验依据。     

砷剂在血液系统肿瘤中的应用及安全管理

三氧化二砷（ATO）能够通过多种途径发挥抗肿瘤效应.自从ATO用于急性早幼粒细胞白血病（APL）的治疗并取得显著疗效以来,其在多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征、慢性粒细胞白血病的研究性治疗中也获得了良好的效果,提示ATO在血液系统肿瘤中具有潜在的临床应用前景.与此同时,由ATO引发的APL分化综合征、心律失常等不良反应也应引起注意.     

人白血病细胞周期分布的流式细胞术分析

应用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)测定不同类型白血病和骨髓增生异常症(MDS)患者骨髓及外周血细胞周期分布。并对其增殖特性和生物学意义进行讨论和分析。结果提示,白血病骨髓细胞的增殖活性明显低于正常水平,并显示增殖状态的异质性。骨髓增生异常症患者骨髓细胞周期分布与临床分型和预后有关。     

甲磺酸伊马替尼治疗3例Ph阳性慢性髓性白血病达细胞遗传学缓解后的疾病转化

目的:观察Ph阳性慢性髓性白血病(Philadelphia chromosome-positive chronic myelogenous leukemia, Ph CML)患者在甲磺酸伊马替尼治疗达细胞遗传学缓解后的疾病进展. 方法:对3例伊马替尼单药治疗有效的Ph CML患者,包括第1次慢性期(例1)、第2次慢性期(例2)和加速期(例3)各1例,在治疗前及持续治疗后定期监测其血液学和细胞遗传学(G显带方法)变化. 结果:例1、例2和例3分别在伊马替尼治疗4个月、3个月和6个月时获得完全细胞遗传学缓解(complete cytogenetic remission, CCyR),但在随后的12个月、6个月和0个月(即服药的第16个月、9个月和6个月)时,分别发生了急性淋巴细胞白血病、急性髓性白血病和皮肤软组织髓外急变,同期骨髓染色体检查显示:例1和例3未检出Ph 细胞,呈完全正常核型,例2 Ph 细胞仅占20%. 结论:伊马替尼治疗Ph CML获得CCyR后,患者仍可发生Ph阴性(Philadelphia chromosome-negative, Ph-)或Ph-为主的急性白血病或髓外急变.     

Study of heat shock protein HSP90α, HSP70, HSP27 mRNA expression in human acute leukemia cells

Summary The expression of three heat shock proteins (HSPs)-HSP90α, HSP70, HSP27 in cells obtained from 22 patients with leukemia, K562 erythroleukemia cell line, and normal blood cells was observed by means of RNA dot blot analysis. The results showed that the expression of the HSP27 gene was enhanced in 4 cases of acute lymphoid leukemia (ALL), 7 cases of acute nonlymphoid leukemia (ANLL) and 2 cases of myelodysplastic syndrome. (MDS) as compared with that of the normal blood Cells, yet there was no significant difference in the HSP27 expression between the ALL and ANLL cells. The expression of HSP70 in all the 5 ALL and ANLL patients was much lower than that of the normal subjects, except 1 case of ALL and 1 case of MDS, in which the expression was obviously enhanced. All the cases including 11 ANLL, 5 ALL and 1 MDS had higher HSP90α expression than the normal subjects. The enhanced expression pf HSP90α in leukemia cells may be associated with the active and indefinite proliferation of leukemia cells. Our results also suggest that the high expression of the HSP27 gene may not be confined to a specific type of acute leukemia.     

重组人肿瘤坏死因子对白血病细胞生长抑制的研究

应用ＭＴＴ比色法研究了重组人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦα）对白血病细胞株ＨＬ６０和Ｋ５６２生长的抑制作用。实验结果表明，ｒｈＴＮＦα对白血病细胞生长的抑制作用有时相和剂量依赖关系。ｒｈＴＮＦα与ＨＬ６０和Ｋ５６２细胞分别培养１２ｈ，抑制率仅有６．２％和４．３％。当作用时间延长到２４ｈ时，抑制度分别达到５５．４％和４７．１％。ｒｈＴＮＦα的用量由０．０４μｇ／２×１０５细胞增加到５μｇ／２×１０５细胞时，对ＨＬ６０和Ｋ５６２细胞的生长抑制率也分别由１６．８％和６．４％增长到７７．１％和５９．３％。上述两种依赖关系的实验数据经单因素方差处理，有显著性差异。ｒｈＴＮＰα同抗肿瘤药Ｖｐ１６合用对白血病细胞生长的抑制有叠加作用。ｒｈＴＮＦα加入急性粒细胞白血病患者骨髓细胞培养体系后，对白血病细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｌ）的生长有一定抑制作用。当ｒｈＴＮＦα为１μｇ／５×１０５白血病细胞时，对ＣＦＵ－Ｌ的抑制率可达４３．４％。     

成人白血病特殊免疫标志细胞增殖特性的分析

本文用流式细胞仪,以细胞膜分化抗原和DNA含量双参数测定法,探讨了57例各型白血病患者骨髓和11例正常骨髓单个核细胞分化抗原阳性表达细胞的增殖特性。结果表明:不同型白血病细胞不仅有相应的分化抗原表达,而在不同病期相应的抗原呈彼消此长现象。HLA-DR~+细胞％、HI_(115)~+细胞％在初发、复发病人较高,在慢性期、缓解期病人较低。膜抗原和DNA双参数分析表明,白血病骨髓增殖期细胞中大部分为与各型白血病细胞相应的免疫标志细胞,根据白血病细胞这种增殖特性的变化,可预测疾病变化进程。     

地西他滨联合预激方案治疗中高危骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病20例分析

目的：探究地西他滨联合预激方案治疗中高危骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病的临床价值。方法方便选取并分析2012年8月―2015年8月该院收治的用地西他滨联合预激方案治疗的20例中高危MDS和AML患者,观察其临床疗效及安全性。结果8例患者为CR,6例PR,在此其中2例经两个疗程治疗后完全缓解,6例NR。总有效率70%,l疗程完全缓解率40%。Ⅳ度骨髓抑制100%,缓解患者化疗后血小板恢复正常时间17~23 d,白细胞恢复正常时间较血小板晚,平均25 d左右。结论对于急性髓系白血病/骨髓增生异常综合症患者,使用地西他宾治疗可以取得满意效果。风险可控,老年人也能耐受,但有不良预后的染色体或突变基因的患者效果不佳。     

慢性粒细胞性白血病bcr/abl融合基因的表达

目的：研究慢性粒细胞性白血病患者bcr／abl融合基因阳性率及其临床意义。方法：取慢性粒细胞性白血病(CML)患者骨髓或外周血，提取单核细胞的总RNA，用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)，观察其ber／abl基因的表达。结果：9例CML患者中，8例ber／abl基因阳性，占88.9％。结论：bcr／abl基因检测可以用来辅助CML的临床诊断。