大鼠胆管阻塞性肝纤维化模型肝组织明胶酶-2、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 mRNA表达的研究

局部基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)与基质金属蛋白酶(MMPs)的比例失调，是造成肝纤维化细胞外基质(ECM)沉积的主要原因。本实验以逆转录一聚合酶联反应(RT-PCR)观察了大鼠胆管阻塞性肝纤维化模型肝组织明胶酶-2(MMP-2)和TIMP-1 mRNA表达的变化，现报道如下。     

基质金属蛋白酶与肝脾纤维化

在肝睥纤维化进程中,细胞外基质的合成与降解失衡,大量细胞外基质在细胞间质沉积,与基质金属蛋白酶（MMPs）和基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）的调节平衡关系密切。就MMPs与TIMPs的特性、月千脾纤维化发病机制及MMPs和TIMPs与肝脾纤维化的关系作一综述。提示研究MMPs和TIMPs与肝脾纤维化的因果关系,有助于基因水平防治干预,以促进肝脾细胞的再生。肝脾组织纤维形成和纤维溶解依赖于MMPs和TIMPs的动态调节。     

轻度慢性乙型肝炎患者肝组织中MMP-2和TIMP-2的表达及其意义

目的 探讨轻度慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织中的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的表达及临床意义.方法 选取2006年12月至2011年12月温州医学院附属第二医院感染内科收治入院的慢性HBV感染者68例为研究对象,将其分为轻度慢性乙型肝炎(CHB)组(35例)和慢性HBV携带组(33例).采集患者血清,行HBV血清学标志物、HBVDNA、肝纤维化血清学指标检测及肝穿刺活检,光镜下观察肝组织.采用免疫组织化学染色法检测MMP-2和TIMP-2的表达,并进行阳性表达评分及肝组织纤维化分级.用SPSS 17.0软件进行统计学分析.结果 轻度CHB组和慢性HBV携带者组血清肝纤维化指标透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(PC Ⅲ)和Ⅳ型胶原(CⅣ)的差异无统计学意义(t=1.35,1.65,1.88和1.89,P＞0.05).轻度CHB组肝组织中MMP-2和TIMP-2评分分别为(4.42±1 37)和(3.89±1.12)分,慢性HBV携带组分别为(3.61 ±1.23)和(3.31±1.07)分,差异有统计学意义(t=2.56和2.18,P＜0.05).CHB组的MMP-2/TIMP-2比值为1.15±0.17,而慢性HBV携带组为1.08-±0.11,两组比较差异有统计学意义(t=2.04,P＜0.05).MMP-2和TIMP-2评分与纤维化分级的相关系数分别为0.372(P =0.002)和0.439(P =0.000).结论 轻度CHB患者的肝组织中MMP-2和TIMP-2表达增加,且与纤维化分级具有相关性,可用于评估患者肝纤维化的程度.     

基质金属蛋白酶在慢性硬膜下血肿发生和复发中的作用研究

目的 探讨基质金属蛋白酶在慢性硬膜下血肿发生和复发中的作用。方法 从标本库中取慢性硬膜下血肿手术患者的血清及血肿液标本,其中复发8例,未复发16例,分别对其进行ELISA及明胶酶谱法检测其基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性。结果 24例标本血肿液中MMP-2和MMP-9活性明显高于血清（P<0.05）,复发组血肿液中MMP-2和MMP-9活性明显高于未复发组（P<0.05）。结论 MMP-2和MMP-9参与慢性硬膜下血肿的发生和发展,同时也是术后复发的危险因素。     

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝细胞癌发生过程中的基质金属蛋白酶动态变化

目的 研究基质金属蛋白酶（MMPs)在肝细胞癌形成过程中的动态变化及作用。方法 采用二乙基亚硝胺（DENA）诱癌建立大鼠肝癌模型。应用明胶酶谱法测定诱癌过程中癌变发生的三个阶段6个时相肝组织中MMP-2和MMP-9的表达及活性。结果 肝癌发生过程中基质金属蛋白酶呈持续升高的趋势，至早期癌变期及肿瘤演进期（16-24周）MMP-2，MMP-9的表达呈一个较高的平台，且发现MMP-2的活性形式表达显著增加。结论 MMPs的表达不同与肝星状细胞的激活和肝细胞癌形成有关。而与肿瘤的结节数及大小无关。     

后肾间充质细胞移植治疗大鼠慢性阿霉素肾病

目的 探讨大鼠胚胎后肾间充质细胞（MMC）尾静脉移植对慢性阿霉素（ADR）肾病大鼠的治疗作用。 方法 90只雌性SD大鼠被随机分为阿霉素肾病组（n=40,间隔3周2次尾静脉注射阿霉素0.25 mg/100 g）、MMC移植组（n=40,于第2次阿霉素注射后8周,尾静脉注射5×106～7×106 MMC）、对照组（n=10）。于细胞移植后第8周杀鼠,留取肾组织行病理学分析;免疫组织化学检测肾组织Ⅳ型胶原、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达;Western印迹及RT-PCR分别对MMP-2、MMP-9的蛋白及基因表达进行半定量检测。 结果 MMC移植组和阿霉素肾病组肾小管损伤指数及肾小球硬化面积差异无统计学意义（P > 0.05）。与阿霉素肾病组比较,细胞移植组肾组织Ⅳ型胶原沉积减少,MMP-2蛋白及基因表达下调,MMP-9蛋白及基因表达升高,差异均有统计学意义（均P < 0.05）。 结论 MMC移植对阿霉素大鼠肾组织纤维化有潜在的治疗作用,MMP降解途径的激活可能在其中发挥了作用。     

肝脏肿瘤中基质溶解素的表达

基质溶解素（ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ）是金属蛋白酶具有代表性的主要成员之一，在多种肿瘤中已经证明恶性肿瘤细胞通过金属蛋白酶降解细胞外基质以突破组织屏障而发生转移，为探讨其在肝脏肿瘤转移中所起的作用，我们应用原位分子杂交技术分别检测了原发性肝癌、继发性肝...     

神经慢性卡压后基质金属蛋白酶及其组织抑制物在神经中的表达

目的 观察大鼠坐骨神经慢性卡压后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂( TIMP-1)在神经中的表达.方法 将90只雄性SD大鼠随机分为对照组和卡压组.根据Mackinnon法建立神经慢性卡压模型,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术检测神经干内MMP-9和TIMP-1的表达.结果 神经慢性卡压2周时神经纤维脱髓鞘;4周时结缔组织增生;12周后神经内纤维分隔进行性增多,神经纤维化.早期,MMP-9和TIMP-1表达增加,MMP-9mRNA在2周达峰值0.0485,TIMP-1 10周达峰值0.1592,MMP-9/TIMP-1明显升高;后期,MMP-9显著降低,TIMP-1继续升高,MMP-9/TIMP-1显著降低.结论 周围神经慢性卡压后神经纤维化,其机制可能与神经中MMP-9/TIMP-1比值早期增高、晚期降低有关.     

基质金属蛋白酶-9 与小体积移植肝早期损伤的相关性研究

目的 观察不同体积肝移植术后早期移植肝内基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及活化特点,探讨MMP-2和MMP-9在小体积移植肝早期损伤中的作用机制. 方法 随机将108只SD大鼠分成3组,每组36只.分别为:全肝(100%肝体积)移植组、半肝(50%肝体积)移植组和小体积肝(25%肝体积)移植组.分别检测移植肝再灌注后0.5、6、12、24、48、72 h的肝功能及移植肝组织中丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)浓度,观察移植肝组织病理学特征,并运用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时定量聚合酶链反应(PCR)、明胶酶谱和免疫组织化学方法检查移植肝中MMP-2和MMP-9的表达情况. 结果 与全肝和半肝移植组比较,小体积肝移植组再灌注后6～24 h MMP-9表达明显升高;而且MMP-9活化和表达增高伴随着移植肝功能损害和严重的缺血再灌注损伤.MMP-9早期表达都集中在移植肝门静脉周围,与门静脉高灌注密切相关. 结论 MMP-9表达升高是小体积移植肝早期重要的致损伤因素;肝移植术后门静脉高灌注可能是触发MMP-9活化和表达的重要原因.     

猪胆汁性肝纤维化的形成机制研究

目的：研究猪胆汁性肝纤维化时尿激酶型纤维蛋白酶原激活物（uPA）和基质金属蛋白酶－2（MMP－2）的表达，分析其在肝纤维化形成初始阶段的作用。方法：20只普通猪行胆总管结扎制作胆汁性肝纤维化模型，术前和术3后取其肝组织作样本自身对照，用原位杂交法研究uPA和MMP－2和mRNA表达改变。结果：术后4周肝细胞呈灶状坏死，胆管扩张，淤胆，部分胆管充满脓性胆汁；正常纤维塌陷，纤维组织增生，连接成片，胆管周围纤维增多，原位杂交显示肝星状细胞（HSC）细胞增多，增生，向肝细胞坏死区聚，uPA和MMP－2表达胞浆呈强阳性。经图像分析术前和术后两者平均吸光度差异有非常显著性（P＜0．01），结论：MMP－2和uPA在肝纤维化的早期参与ECM的重塑和肝小叶的改建。     

Ets-1在肾脏纤维化中的双向作用及其机制

慢性肾脏病进展到终末期的共同病理特征即是肾脏的纤维化,其本质是细胞外基质（ECM）的异常沉积。以往的研究认为,ECM的过度沉积与基质金属蛋白酶（MMPs）及其组织抑制因子（TIMPs）等异常,     

血吸虫肝纤维化中基质金属蛋白酶及抑制剂的表达

目的观察基质金属蛋白酶(MMP)-13,基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-3及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在晚期日本血吸虫病家兔肝脏和正常家兔肝脏中的表达。方法应用免疫组织化学和半定量Western免疫印迹方法检测了血吸虫病肝纤维化模型家兔42只及正常家兔8只中的MMP-13、TIMP-3、α-SMA的表达。结果正常对照组的MMP-13、TIMP-3、α-SMA的表达分别是(3.20±0.45)、(0.76±0.32)、(0.92±0.28)%;血吸虫病纤维化肝脏中的MMP-13、TIMP-3、α-SMA的表达分别是(10.56±3.62)、(6.50±2.56)、(5.78±2.98)%,较正常对照组明显增加(P<0.01),主要表达于成纤维细胞,肌成纤维细胞中,以纤维间隔及汇管区最明显,且三者来源定位基本一致。结论在血吸虫病肝纤维化中,成纤维细胞及肌成纤维细胞是MMP-13、TIMP- 3、α-SMA表达的主要细胞,TIMP-3的表达增高在肝纤维化的发生、发展中具有重要作用。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制剂与慢性创面的形成

基质金属蛋白酶家族（matrix-metalloproteinases，MMPs）是一类活性依赖于金属锌离子的蛋白酶。它以酶原形式被分泌，经激活后参与胶原等细胞外基质的降解。MMPs现有二十余种不同的蛋白酶。根据它们的结构和降解底物分为胶原酶、明胶酶、基质水解酶、膜型基质金属蛋白酶和其他基质金属蛋白酶五大类。MMPs的表达受生长因子等许多因素的调控。     

金属蛋白酶抑制基因RECK和基质金属蛋白酶2、9在膀胱癌组织中的表达及意义

我们采用RT—PCR方法检测金属蛋白酶抑制基因RECK及基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）基因在43例膀胱癌（TCC）组织标本中的表达，探讨以上基因与TCC侵袭、转移等生物学行为的关系。现报告如下。     

基质金属蛋白酶-2在猪胆汁性肝纤维化活性及表达的改变

目的　研究猪胆汁性肝纤维化时基质金属蛋白酶-2（MMP-2）表达及活性改变,分析其在肝纤维化初始阶段的作用。方法　普通猪10头行胆总管结扎术(BDL)前和术后取其肝组织作样本自身对照,用原位杂交法研究MMP-2的mRNA表达改变;用酶图法研究MMP-2活性改变。结果　术后4周原位杂交显示肝星状细胞(HSC)细胞增多、增生、向肝细胞坏死区聚集、胞浆呈强阳性。术前组和术后组平均吸光度分别为0.0246±0.0090和0.0671±0.0091。酶图法表明MMP-2酶原表达是正常的1.68倍（51±6/86±11）,活性升高至2.29倍（21±4/48±3）,差异均有非常显著性（P＜0.01）。结论　猪胆汁性肝纤维化时HSC增生,其胞浆中MMP-2mRNA表达增多,酶活性增强,MMP-2在肝维化的早期参与ECM的重塑和肝小叶的改建。     

慢性肾衰竭患者血清MMP-9和TIMP-1表达及意义

目的检测慢性肾衰竭（CRF）患者血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达状况，拟在探讨其与肾脏纤维化的关系。方法采用ELISA法测定60例CRF患者（氮质血症期15例，肾衰竭期24例，尿毒症终末期21例）和20例正常对照组血清MMP-9、TIMP-1水平，同时收集患者临床资料，分析血清MMP-9、TIMP-1水平和MMP-9／TIMP-1比值与肾功能损害等临床指标之间的相关性。结果CRF患者各期血清MMP-9、TIMP-1水平明显升高，MMP-9／TIMP-1比值显著降低，随着肾小球滤过率（GFR）下降，MMP-9、TIMP-1呈降低趋势，而MMP-9／TIMP-1比值却逐渐上升。血清TIMP-1水平和MMP-9／TIMP-1比值与血肌酐、GFR及血红蛋白呈高度相关性。结论血清MMP-9、TIMP-1参与了CRF的进展，血清TIMP-1水平或MMP-9／TIMP-1比值能较好地反映肾脏纤维化的程度。     

基质金属蛋白酶-9及组织抑制剂-1与肾间质纤维化

肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis，RIF）几乎是所有肾脏疾病发展的最终结果，其形成涉及到细胞、细胞因子和细胞外基质（ECM）等多种因素、多个环节相互作用和相互调节的复杂过程，最终结局是大量ECM的过度积聚。近年来对肾间质纤维化研究转向ECM的降解方面，其中基质金属蛋白酶（matrix metallopmteinases，MMPs）是最重要的一种，它是一组结构及功能同源的Zn^2＋依赖型肽链内切酶的总称，现已发现的MMPs有20多种，可分为几大类。基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of matrix metalloproteinases，TIMPs）是其内源性的一组特异性抑制因子肾小管间质纤维化主要是Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型间质胶原及Ⅳ型膜胶原、糖蛋白和蛋白多糖的堆积,MMPs／TIMPs平衡失调肾间质纤维化发病的关键，而MMP-9及TIMP-1为最重要的一对。     

腹主动脉瘤与基质金属蛋白酶

基质金属蛋白酶在腹主动脉瘤的发生发展中起重要作用,它与组织金属蛋白酶（MMP）抑制物共同调节基质代谢,减少MMP或抑制其活性可能是腹主动脉瘤（Alodominal Aortic Aneurysms,AAA),很有希望的临床治疗方向。     

肝移植术后慢性排斥反应的临床与病理分析

目的 探讨原位肝移植术后慢性排斥反应的病理组织学特点、临床表现以及诊治经验.方法 回顾性分析2004年1月至2006年12月收治的516例原位肝移植患者的临床病理资料;对肝移植术后发生慢性排斥反应患者的病理组织学改变、临床表现、诊治方案加以分析.结果 516例肝移植患者中,发生慢性排斥反应12例(2.3%,12/516),其中早期慢性排斥反应7例,晚期慢性排斥反应5例.其主要组织学特征是移植肝组织内的胆管严重减少或缺失和累及中等动脉的闭塞性动脉炎;其中早期慢性排斥反应可表现为小叶间胆管的细胞变性和其数量进行性减少以及形成小叶中央坏死性炎症.12例慢性排斥反应患者中,7例早期慢性排斥反应患者经激素冲击治疗和调整免疫抑制药物后病情得到控制(包括2例接受抗CD3抗体治疗,2例接受抗胸腺细胞球蛋白治疗)且近期疗效满意;5例晚期慢性排斥反应患者肝功能迁延不愈最终至肝功能衰竭而行再次肝移植,其中2例伴术后严重腹腔内感染而死亡,1例死于术后多脏器功能衰竭,另外2例再移植病例获临床治愈.本组慢性排斥反应发生的时间为术后4～26个月;与慢性排斥相关的病死率为25.0%(3/12).结论 肝移植术后发生慢性排斥反应的患者缺乏典型的症状和体征,其病理改变可以有重叠和复合存在;移植肝连续穿刺活检和再次移植术后病理仍是目前诊断慢性排斥反应的"金标准".如能及时发现早期慢性排斥反应并积极进行合理的治疗,病情则具有潜在的可逆性;晚期阶段慢性排斥反应所致的移植肝功能衰竭需要再次肝移植治疗.     

MMP-9、TIMP-1蛋白在门静脉高压脾脏中的表达及临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-9 （MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）在门静脉高压脾脏中表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学及免疫印记方法检测门静脉高压脾脏及正常脾脏中MMP-9、TIMP-1的表达情况.分析其与脾脏纤维化程度及与临床资料的关系.结果 门静脉高压脾脏中MMP-9的表达明显低于正常组（P〈0.05）;而TIMP-1蛋白则明显增高（P〈0.05）.（2）MMP-9和TIMP-1表达均与Child-Pugh分级相关.（3）门静脉高压脾脏中MMP-9与脾脏纤维化程度呈显著负相关（r=-0.594,P=0.000）;TIMP-1表达与脾脏纤维化程度呈显著正相关（r=0.630,P=0.000）.结论 MMP-9与TIMP-1在门静脉高压脾脏纤维化过程中具有重要作用.