循环肿瘤细胞联合血清胃泌素释放前肽及神经元特异性烯醇化酶水平对SCLC化疗疗效的评估意义

目的:探讨外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)数量联合胃泌素释放前肽(gastrin releasing peptide,pro-GRP)及神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)对小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者化疗疗效的评估意义.方法:收集2015年10月1日至2016年12月30日长海医院呼吸与危重症科收治的40例SCLC患者作为观察对象,分别于第1、3周期化疗前抽取患者外周血,检测其CTC、pro-GRP及NSE水平,分析CTC数目及其联合pro-GRP、NSE水平与化疗疗效的关系;第1、3周期化疗前行胸部CT,对比CTC、pro-GRP及NSE联合判断化疗疗效与实体瘤疗效评价标准(response evaluation criteria in solid tumors,RECIST)标准判断化疗疗效的差异性;分析CTC数与患者临床特征的关系.结果:40例SCLC患者中初次、二次检测到CTC的阳性率为82.5％、87.5％.化疗后外周血CTC数下降越多,疗效越好.根据RECIST标准,肿瘤进展组与肿瘤控制组CTC的变化差异有统计学意义(P＜0.05).CTC数目评价标准下,肿瘤控制与否与患者的年龄、性别、吸烟与否、初诊时肿瘤大小、肿瘤分期无明显关联(P＞0.05).CTC数目评价化疗疗效与RECIST两者存在一致性.联合检测CTC、pro-GRP及NSE,三者量值评价化疗疗效与RECIST疗效评价结果同样一致(P＞0.05),且三者联合检测可提高疗效判断的灵敏性.结论:CTC数目与化疗疗效呈负相关,联合检测CTC、pro-GRP及NSE评估SCLC患者化疗疗效灵敏性更高.     

外周血循环肿瘤细胞在卵巢癌化疗中的临床应用

目的 探讨卵巢癌患者外周血中循环肿瘤细胞（CTC）变化情况与化疗疗效的关系。方法 选择2013年2月至2015年4月间在我院接受化疗的卵巢癌患者28例,分别抽取其化疗前后外周静脉血4 ml,采用免疫磁珠微粒阴性富集技术和免疫荧光原位杂交技术（imFISH）检测CTC数目,以CTC≥2个/3.2 ml定义为阳性。采用RECIST 1.0版标准评价化疗疗效,观察化疗前后CTC变化与疗效的关系。结果 化疗前外周血CTC阳性率为60.71％（17／28）,其与肿瘤分期（P=0.019）及CA125水平（P=0.022）有关;化疗后CTC阳性率为25％（7／28）。根据化疗前后CTC的变化,将患者分为阳性 阳性、阳性 阴性、 阴性 阳性、阴性 阴性4组,4组有效率分别为80.0％（4／5）、83.3％（10／12）、0（0／2）和88. 9％（8／9）,差异有统计学意义（P=0.045）。结论 化疗前后CTC变化与疗效有一定关系,CTC可作为评估卵巢癌化疗疗效的参考指标。     

循环肿瘤细胞及磷酸酶张力蛋白同源物基因检测在Ⅲ期结直肠癌中的临床意义

目的 探讨术后Ⅲ期结直肠癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTC)、磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)基因水平与临床特征的关系及对预后的影响.方法 应用CanPatrolTM CTC二代技术联合RNA多重原位杂交分析技术,检测77例结直肠癌患者外周血中CTC及PTEN表达情况,并对CTC进行分型.结果 低分化结直肠癌患者CTC阳性率明显高于中分化患者,且随着T分期升高CTC阳性率升高,差异均有统计学意义(P﹤0.01).不同T分期、分化程度的结直肠癌患者上皮型CTC比例比较及不同T分期、N分期的结直肠癌患者混合型CTC比例比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05).CTC与PTEN基因表达水平呈负相关(P﹤0.01).CTC阴性患者无进展生存时间(PFS)及生存时间(OS)均长于阳性组,亚型中,间质型CTC阴性患者PFS及OS均长于阳性组,PTEN基因中表达患者PFS及OS均长于低表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论 CTC及PTEN基因的检测对于结直肠癌患者病情判断、预后评估、预测术后进展等有一定的临床意义.     

循环肿瘤细胞检测在预测非小细胞肺癌化疗疗效中的应用

目的 探讨循环肿瘤细胞检测在预测非小细胞肺癌化疗疗效中的应用.方法 选择非小细胞肺癌患者(肺Ca组)共25例,另选择慢性阻塞性疾病患者(COPD组)25例作为对比研究.入院后及化疗2个周期后分别采集所有参与研究的人员静脉血7.5 ml,利用密度梯度离心法富积循环肿瘤细胞,分析其与临床特征及化疗疗效的关系.结果 肺Ca组循环肿瘤细胞阳性率达72.00％,而COPD组阳性率为0,差异具有统计学意义(P<0.05).循环肿瘤细胞阳性表达与NSCLC病理类型、患者性别、年龄、吸烟情况等均无明显关系(P>0.05),仅与癌症分期相关(P<0.05).2个周期的化疗结束,发现对循环肿瘤细胞数目的评价与实体肿瘤疗效标准评价大致吻合,差异不具备统计学意义(P>0.05).相关分析发现这两种评价方法 呈负相关关系(γ=-0.465 P=0.021).结论 循环肿瘤细胞的存在与非小细胞肺癌的临床分期及化疗疗效有密切关系,可以用来预测非小细胞肺癌的转归.     

紫杉醇脂质体联合卡培他滨方案治疗局部进展期胃癌的疗效及循环肿瘤细胞对疗效的预测价值

目的 探讨紫杉醇脂质体联合卡培他滨方案治疗局部进展期胃癌的疗效及循环肿瘤细胞(CTC)对化疗疗效的预测价值.方法 80例进展期胃癌患者均采用紫杉醇脂质体联合卡培他滨方案化疗,分析临床疗效及不良反应发生情况.依据CTC检测结果将患者分为阳性组和阴性组,分析化疗前后两组患者血清肿瘤标志物水平及无进展生存时间(PFS)、总生存时间(OS).结果 80例胃癌患者均获得疗效评价,总有效率为53.75％,疾病控制率为86.25％.总体不良反应方面,白细胞减少发生率为30.00％,1～2级占25.00％,3～4级占5.00％;血小板降低发生率为27.50％,1～2级占20.00％,3～4级占7.50％.化疗前及化疗后,阳性组患者癌胚抗原(CEA)、肿瘤相关物质(TAM)水平均高于阴性组(P﹤0.05),且两组患者化疗后CEA、TAM水平均较化疗前下降(P﹤0.05).CTC阳性组患者中位PFS、中位OS均短于阴性组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论 紫杉醇脂质体联合卡培他滨方案治疗局部进展期胃癌具有较好的疗效和安全性,CTC能够评估化疗疗效及患者预后.     

表皮生长因子受体表达与卵巢癌血管生成及化疗耐药的关系

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)表达与卵巢癌血管生成及化疗耐药的关系.方法 采用免疫组化PV-6000二步法,检测102例卵巢肿痛组织中EGFR、肺耐药蛋白(LRP)的表达和微血管密度(MVD),研究其与化疗耐药及预后的相关性.结果 EGFR、LRP在恶性和交界性肿瘤中的阳性率及MVD计数均显著高于正常卵巢和良性肿瘤(P<0.01),恶性肿瘤组织中微血管丰富.EGFR在Ⅲ～Ⅳ期、低分化和有腹水的卵巢癌中的阳性率高于Ⅰ～Ⅱ期、高中分化和无腹水者(均P<0.05),MVD计数与患者组织学分级、腹水及残留灶大小有关(P<0.05),LRP表达与肿瘤临床病理参数无关(P0.05).EGFR和LRP阳性卵巢癌患者的化疗有效率分别为57.1%和53.7%,低于EGFR和LRP阴性者(85.0%和90.9%,P<0.05).随访资料完整的64例患者的3年生存率为53.0%.EGFR阳性、LRP阳性、低分化、有腹水和近期化疗疗效不敏感的患者术后生存时间短(P<0.01).多因素分析显示,LRP表达和近期化疗疗效是影响患者术后生存时间的独立相关因素(P<0.05).EGFR表达与MVD计数(r=0.548,P<0.01)、EGFR与LRP表达(P=0.020)之间存在相关性.结论 EGFR参与了卵巢癌的血管生成和化疗耐药的产生;EGFR与LRP阳性预示患者化疗敏感性低,有助于监测卵巢癌化疗耐药的产生;LRP表达和近期化疗疗效可作为卵巢癌患者的独立预后因素.     

循环血肿瘤细胞在预测转移性乳腺癌化疗疗效中的应用

目的:探讨循环血肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)数目对转移性乳腺癌化疗疗效的评价作用.方法:分离循环血单核细胞,应用免疫磁珠富集-免疫荧光细胞化学(IME-FICC)方法,检测30例转移性乳腺癌患者化疗1周期前后和10例乳腺良性疾病患者循环血肿瘤细胞数目.结果:30例转移性乳腺癌患者化疗前循环血中有21例检测到CK8/18+细胞,阳性率为70.0%,10例乳腺良性疾病患者循环血中均未检测到CK8/18+细胞,该方法的特异性为100.0%,χ2=12.06,P<0.05.30例转移性乳腺癌患者化疗1周期后循环血肿瘤细胞数目上升13例(43.3%),不变8例(26.7%),下降9例(30.0%);影像学评价疗效,进展15例(50.0%),无变化8例(26.7%),缓解7例(23.3%),两组间差异无统计学意义(t=0.67,P0.05).结论:应用IME-FICC方法,依据循环血肿瘤细胞数目可以判定转移性乳腺癌化疗疗效,较目前常规的基于影像学结果判定疗效早3～4周.     

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌新辅助化疗疗效评估中的价值

目的探讨乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞(CTC)变化情况与乳腺癌新辅助化疗(NAC)疗效的关系。方法根据纳入、排除标准,选取第三军医大学大坪医院野战外科研究所乳腺甲状腺外科2014年12月至2016年6月收治的女性乳腺浸润性癌患者共94例进行前瞻性研究。抽取患者NAC前后健侧上肢静脉血5 ml,利用膜滤过法(ISET)检测外周血CTC。首次化疗前及2~4个周期治疗后常规行影像学检查,以实体瘤疗效评价标准(RECIST)评价疗效,无效则改行手术治疗,有效则完成6个周期化疗后行手术治疗。以病理学Miller-Payne标准作为评估疗效的金标准,根据NAC后CTC数目变化情况,将CTC降低定义为有效,CTC不变或者升高定义为无效。采用χ~2检验比较乳腺癌患者临床病理特征与CTC检出情况的关系。采用Mc Nemar检验比较NAC前后CTC阳性率的差异。治疗前后CTC数目为非正态分布,采用M(P_(25)~P_(75))表示,并用Wilcoxon符号秩和检验比较NAC前后CTC数目的差异。CTC检测与病理学金标准评估疗效的一致性分析采用Kappa检验,并采用Mc Nemar检验、敏感度和特异度评价CTC检测。结果 NAC前外周血CTC阳性率为62.8%(59/94)。与HER-2阴性及Ki67低表达患者相比,HER-2阳性[80.0%(36/45)比46.9%(23/45),χ~2=10.971,P0.001]及Ki67高表达患者[77.4%(41/53)比44.0%(18/41),χ~2=11.072,P0.001]中CTC阳性率更高。NAC后CTC阳性率[23.4%(22/94)比62.8%(59/94),χ~2=35.100,P0.001]及检出数目[0(0~0)个比3(0~6)个,Z=-6.120,P0.001]均较治疗前显著降低。CTC检测评估NAC疗效的敏感度为76.5%(39/51),特异度为69.8%(30/43);与金标准进行一致性分析,2种评价方法中等相符(Kappa=0.463,P0.001)。结论乳腺癌患者NAC后CTC的变化情况与NAC疗效有一定关系。CTC检测有望成为一种新型评估NAC疗效的方法。     

循环肿瘤细胞与卵巢癌患者临床特征之间的关系

目的:探讨卵巢癌患者检测循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTCs）的意义,及其检测结果与临床特征之间的关系。方法:选取30例卵巢癌患者、15例卵巢良性疾病患者和健康受试者,用免疫磁珠阴性富集联合荧光原位杂交的方法(imFISH)检测循环肿瘤细胞并计数,分析其与年龄、TNM分期、腹水、肿瘤标志物、肿瘤疗效评价之间的关系。结果:卵巢癌患者CTCs数目高于卵巢良性疾病及健康受试者(P<0.05)。外周血CTCs检出的阳性率与肿瘤大小、分化程度、临床T分期、临床M分期之间差异有统计学意义(P<0.05),与年龄、病理类型、肿瘤位置、性质、总分期、腹水、N分期之间差异无统计学意义(P>0.05)。CTCs阳性率与肿瘤标志物HE4表达水平之间具有相关性。分期越高,CTCs的数值变化范围越大,检出阳性率越高。CTCs与肿瘤疗效评价之间具有相关性。结论:卵巢癌患者外周血中CTCs阳性率与临床特征相关,CTCs检测可以做为临床诊断的辅助方法和检测指标,进一步指导分期、治疗和评估预后。     

NSCLC外周血循环肿瘤细胞水平检测及其与TNM分期、预后的关系

目的:分析非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）外周血循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTC）表达特点及其与国际抗癌联盟肿瘤通用分期（tumor node metastasis,TNM）及预后的关系。方法:采集我院胸外科收治的NSCLC患者82例,选取肺良性疾病30例作为良性组及30名正常志愿者作为对照组,入院后均完成外周血CTC检测,比较NSCLC外周血CTC与良性组、对照组之间的差异;比较不同病理类型、TNM分期、不同预后NSCLC患者CTC阳性率,筛选NSCLC预后影响因素。结果:NSCLC组CTC阳性率高于良性组与对照组（P＜0.05）,良性组、对照组组间对比差异无统计学意义（P＞0.05）;不同病理类型NSCLC患者CTC阳性率比较差异无统计学意义（P＞0.05）;不同TNM分期NSCLC患者CTC阳性率比较差异有统计学意义（P＜0.05）,各分期CTC阳性率比较:Ⅲa期＞Ⅱ期＞Ⅰ期;CTC阴性NSCLC患者随访中位无 病生存时间（disease free survival,DFS）长于阳性组,复发、转移率低于阳性组（P＜0.05）;有吸烟史、CTC阳性、高TNM分期、伴淋巴结转移的NSCLC患者中位DFS低于无吸烟史、CTC阴性、低TNM分期、无淋巴结转移的NSCLC患者（P＜0.05）;Cox回归分析显示:TNM分期、CTC、淋巴结转移均为影响NSCLC患者中位DFS的相关因素（P＜0.05）。结论:NSCLC外周血CTC阳性率较高,且与TNM分期、淋巴结转移共同影响患者预后。     

乳腺癌新辅助化疗中循环肿瘤细胞的动态变化及疗效观察

  目的  通过检测新辅助化疗乳腺癌患者化疗前及化疗后各周期外周血中循环肿瘤细胞的变化,比较TC及TEC两种不同新辅助化疗方案的疗效。  方法  选取2010年1月~2012年12月间本院收治的96例局部晚期乳腺癌患者,随机分为两组,分别给予TC（多西他赛+环磷酰胺）和TEC（多西他赛+表柔比星+环磷酰胺）两种方案4个周期。分别抽取新辅助化疗前、新辅助化疗1、2、3、4个疗程后48h患者外周血5 mL,并采用流式细胞术测量外周血中循环肿瘤细胞含量,比较两种新辅助化疗方案疗效。  结果  两组患者新辅助化疗前年龄、绝经状态、ER、PR、C-erbB-2、肿物大小、临床分期等一般资料无统计学差异;两组患者新辅助化疗前外周血中循环肿瘤细胞值无明显差异;新辅助化疗前,两组患者外周血中循环肿瘤细胞含量与肿物体积有关系,肿物>5 cm者循环肿瘤细胞含量明显高于肿物≤5 cm者（P均 < 0.05）;两种新辅助化疗方案化疗后,两组患者外周血中循环肿瘤细胞值随化疗周期进行而持续降低（P均 < 0.05）,同时,使用TEC方案患者外周血中循环肿瘤细胞值明显低于使用TC方案患者（P均 < 0.05）。  结论  使用TC和TEC方案新辅助化疗可使局部晚期乳腺癌患者病灶缩小,外周血中循环肿瘤细胞值降低。同时,监测外周血中循环肿瘤细胞值变化,可评价新辅助化疗方案疗效。      

非小细胞肺癌患者外周血肿瘤细胞检测及临床意义

目的：检测非小细胞肺癌患者外周血瘤细胞（CTC），探讨其在治疗中的临床意义。方法：选2015年1月至6月非小细胞肺癌患者48例，同期体检健康人48例作为对照组，检测两组外周血中CTC，分析相关指标差异。结果：观察组CTC阳性24例（50．0％），对照组为0，差异显著（P＜0．05）；CTC阳性不受年龄、性别、吸烟与否、组织学类型及肿瘤病灶的分化程度的影响；化疗后观察组CTC阳性率显著降低（P＜0．05），与疗效存在负相关性。结论：检测外周血CTC有助于预测非小细胞肺癌患者的病情、预后及疗效评价。     

外周血循环肿瘤细胞在不同阶段和不同类型肺癌中的价值研究

目的 探讨外周血循环肿瘤细胞(CTC)在不同阶段、不同类型肺癌中的价值.方法 选取148例肺癌患者为肺癌组,79例肺部良性疾病患者为肺部良性疾病组,15例健康者为健康对照组.采用免疫磁珠阴性富集法捕获外周血中CTC;采用流式细胞仪检测免疫荧光染色后的CTC,并分析其与肺癌患者临床特征的关系.结果 肺部良性疾病组与健康对照组的CTC检出率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);肺癌组的CTC检出率明显高于肺部良性疾病组和健康对照组(P﹤0.01).临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、M分期为M1期的肺癌患者的CTC检出率分别高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、M分期为M0期的患者(P﹤0.05),而不同性别、年龄、组织学类型、T分期和N分期的肺癌患者的CTC检出率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05).结论 大部分肺癌中均存在CTC,其检出率与肺癌患者的临床分期及远处转移情况有关,早期检测CTC有利于肺癌患者的病情评估.     

环氧化酶-2在上皮性卵巢癌中的表达及其意义

目的:探讨上皮性卵巢癌组织中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因表达及其临床意义。方法:用逆转录-聚合酶链法(RT-PCR)检测32例上皮性卵巢癌、10例良性卵巢肿瘤和10例正常卵巢组织中COX-2 mRNA的表达,分析其与临床病理参数、化疗耐药之间的关系,同时对预后进行多因素的Cox生存分析。结果:COX-2 mRNA在上皮性卵巢癌中的表达(68.8%)显著高于良性卵巢肿瘤(0%)及正常卵巢组织(0%)(P<0.05),COX-2 mRNA的表达与淋巴结转移、术后残留灶直径有关(P<0.05),与临床分期、组织学分级、有无腹水均无关(P>0.05)。COX-2 mRNA在耐药组和非耐药组中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。多因素生存分析显示淋巴结转移、术后残留灶直径和COX-2表达是影响患者预后的独立危险因素。结论:COX-2基因在上皮性卵巢癌的发生、发展、转移和化疗耐药中发挥重要作用,COX-2的表达是影响患者预后的独立危险因素。     

卵巢癌组织中组织因子途径抑制物2的表达及其临床意义

目的探讨TFPI-2mRNA在卵巢癌组织中的表达以及与卵巢癌临床病理特征的关系。方法以β-actin基因为参照,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测40例卵巢癌患者的肿瘤中心处癌组织、肿瘤边缘癌组织及癌旁正常卵巢组织中TFPI-2的表达。应用条带密度分析软件TotalLabv2.01,定量分析RT-PCR产物电泳带密度。结果正常腺体组织中TFPI-2mRNA的表达水平为0.44±0.10,明显高于肿瘤中心处癌组织(P<0.05);中心处癌组织中TFPI-2mRNA的表达水平为0.60±0.11,明显高于肿瘤边缘处癌组织(P<0.05)。TFPI-2mRNA表达与淋巴转移有关(t=2.71,P<0.05),而与患者年龄、癌肿的大小、临床病理分期和病理类型无关(P>0.05)。结论正常卵巢组织中TFPI-2mRNA的表达水平明显高于卵巢癌组织,且肿瘤边缘处癌组织表达最低,其表达下降与卵巢癌的发生、发展及淋巴转移有关。     

Clinical significance of circulating tumor cells in breast cancer patients

Circulating tumor cells (CTCs) are defined as tumor cells circulating in the peripheral blood of patients, shed from either the primary tumors or its metastases. Many techniques have been developed in the recent years to identify CTCs in breast cancer patients, and trials have proved the prognostic significance of CTCs. In this study, we validated the CTC detection method of combining cell filtration and laser scanning cytometry (LSC), which was highly reproducible with increased sensitivity and accuracy. In 134 non-metastatic breast cancer patients analyzed, HER2 was found to be the only primary tumor characteristics that correlated with the presence of CTCs. 85 patients with definitive stage information were selected for association study between the disease stages and CTC numbers. The detection rate and the number of CTCs were correlated with the disease stages. Moreover, assessment of CTCs in 92 metastatic breast cancer patients was found to be able to predict the efficacy of chemotherapy. Increase in CTC numbers was an independent prognostic factor for treatment outcomes. Our results suggested that CTC assessment could be an indication of the disease progression and analysis of the properties of CTCs is likely to provide new insights into the biology of breast cancer and contribute to defining novel treatments and better prediction of clinical outcomes.     

Enumeration and molecular characterization of circulating tumor cell using an in vivo capture system in squamous cell carcinoma of head and neck

Objective:Detection rate and isolation yield of circulating tumor cell (CTC) are low in squamous cell carcinoma of head and neck (SCCHN) with in vitro approaches due to limited sample volumes.In this study,we applied the CellCollector to capture CTC in vivo from peripheral blood.Methods:In total,the study included 22 cases with 37 times of detection.All of the patients were newly diagnosed with locally advanced or metastatic SCCHN,including laryngocarcinoma (40.9％,9/22) and hypopharyngeal carcinoma (59.1％,13/22).All patients received CTC analysis before treatment.Three patients received induction chemotherapy.Sixteen patients received surgical therapy,of which 13 patients received postoperative detection.Two patients received both induction chemotherapy and surgery treatment.Patients underwent two successive CellCollector applications 24 h before and 7 d after surgical therapy.Nine healthy volunteers were enrolled as the control group.Epidermal growth factor receptor variant type Ⅲ (EGFRⅧ) expression was analyzed with fluorescent dye labeled antibody.Results:With CellCollector isolation,72.7％ (16/22) of the patients were positive for ≥1 CTC (CTC;range,1-17 cells) before treatments and 46.7％ (7/15) of patients were CTC positive for ≥1 CTC (CTC;range,1-29 cells) after surgical therapy.Moreover,the detection rate of CellCollector (82.4％,14/17;CTC count range,0-17) in advanced SCCHN (stage Ⅲ-Ⅳ) was much higher than that in early stages (stage Ⅰ-Ⅱ,40.0％,2/5;CTC count range,0-2) (P＜0.05).EGFRⅧ expression of CTC was also analyzed with fluorescence staining.One CTCEGFRⅧ-positive patient was detected from six CTC-positive patients,and the positive expression of EGFRⅧ was also found in the tumor tissue of this patient.Conclusions:In vivo detection of CTCs had high sensitivity in SCCHN,which might improve CTC application in clinic.