细胞焦亡在眼科相关疾病的研究进展

细胞焦亡是一种新的程序性细胞死亡方式,又称为细胞炎性坏死。炎性小体复合物在细胞内激活后,活化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase),再通过Caspase介导Gasdermin家族蛋白D(GSDMD)的激活,使细胞膜完整性受到破坏,形成焦亡小体,最终诱发细胞焦亡。目前,很多研究认为细胞焦亡广泛参与了肿瘤、心血管以及自身免疫性疾病等的发生、发展过程,并且随着对细胞焦亡更深入的研究发现其也参与了多种眼科疾病的病变过程。本文就细胞焦亡的主要机制及其在糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、白内障等相关眼科学疾病中的最新研究进行综述。     

少腹逐瘀汤对输卵管炎性不孕大鼠NLRP3炎症小体的作用研究

目的 研究少腹逐瘀汤对输卵管炎性不孕大鼠Nod样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体的作用。方法 采用金黄色葡萄球菌法构建大鼠输卵管炎性不孕模型,造模成功雌性大鼠随机分为3组：模型组、少腹逐瘀汤（以生药计5g·kg^-1,临床等效剂量）组、盐酸左氧氟沙星（阳性药,80mg·kg^-1）组,另取10只大鼠作为对照组。各组于成模后第8天开始ig给药,每天1次,连续30d,对照组和模型组ig等量0.9%氯化钠注射液。各组雌鼠与成熟雄鼠按2∶1合笼,观察受孕率;HE染色观察各组大鼠输卵管病理变化;Western blotting法检测输卵管组织中NLRP3蛋白表达;实时荧光定量PCR（qRTPCR）法检测输卵管组织中NLRP3和白细胞介素-1β（IL-1β）mRNA水平。原代培养大鼠输卵管上皮细胞,10nmol·L^-1脂多糖（LPS）刺激24h制备炎症模型,造模同时给予10mg·L^-1盐酸左氧氟沙星、10mg·L^-1少腹逐瘀汤处理,Western blotting法检测细胞NLRP3蛋白表达;qRT-PCR法检测细胞中NLRP3、IL-1β、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA水平。结果 对照组的受孕率为60%,模型组的受孕率为40%,盐酸左氧氟沙星组和少腹逐瘀汤组的受孕率均为80%。对照组大鼠输卵管结构清晰,黏膜皱褶丰富,黏膜上皮细胞排列整齐,管腔通畅;模型组大鼠的输卵管结构分界欠清,黏膜皱褶消失,黏膜上皮细胞排列紊乱,管腔狭窄,出现梗阻和大量炎性细胞浸润等情况;盐酸左氧氟沙星组与少腹逐瘀汤组大鼠输卵管结构有改善,管壁组织结构尚清晰,黏膜上皮细胞排列欠规整,管腔通畅,仅少量炎性细胞浸润。与对照组比较,模型组大鼠输卵管组织的NLRP3蛋白和NLRP3、IL-1βmRNA水平显著上调（P＜0.001）;与模型组比较,少腹逐瘀汤组输卵管组织的NLRP3蛋白和NLRP3、IL-1βmRNA水平显著下降（P＜0.05、0.001）。与对照组比较,模型组输卵管上皮细胞NLRP3蛋白和NLRP3、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平显著上调（P＜0.05、0.01、0.001）;与模型组比较,少腹逐瘀汤组NLRP3蛋白和NLRP3、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平显著下降（P＜0.05、0.01）。结论 少腹逐瘀汤治疗输卵管炎性不孕症的作用机制可能与调节NLRP3介导的炎症反应有关。     

基于NLRP3炎症小体的抑瘤汤联合紫杉醇对上皮性卵巢癌的作用研究

目的 研究抑瘤汤对上皮性卵巢癌中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎症小体的作用。方法 通过免疫组化法比较人体的良性肿物和卵巢癌组织中NLRP3和白细胞介素（IL）-1β的表达水平;体外培养人上皮性卵巢癌细胞系A2780,分成对照组、化疗（给予DMSO溶解的紫杉醇100nmol·L^-1）组、化疗＋抑瘤汤（1、10、100mg·L^-1）组,对照组加入等量DMSO,干预12、24、48、72h后,CCK-8法检测细胞存活率,选取合适的抑瘤汤浓度及干预时间进行后续实验;Western blotting法检测NLRP3的蛋白表达;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和IL-1β的mRNA水平;ELISA法检测细胞上清液中NLRP3、Caspase-1、ASC和IL-1β蛋白水平。结果 与卵巢良性肿物组相比,卵巢癌患者的卵巢组织中NLRP3及IL-1β蛋白表达显著上调（P＜0.05）;干预24、48、72h后,与对照组相比,化疗组的细胞存活率显著降低（P＜0.05、0.001）;与化疗组相比,化疗＋100mg·L^-1抑瘤汤组的细胞存活率显著降低（P＜0.01、0.001）,选取100mg·L^-1抑瘤汤干预48h进行后续研究。与对照组相比,化疗组的细胞中NLRP3蛋白表达水平降低,但无统计学意义;与对照组及化疗组相比,化疗＋抑瘤汤组的细胞中NLRP3蛋白表达水平显著降低（P＜0.05、0.001）。与对照组相比,化疗组和化疗＋抑瘤汤组的NLRP3 mRNA和上清中蛋白水平显著降低（P＜0.05、0.001）;与化疗组相比,化疗＋抑瘤汤组的NLRP3mRNA和上清中蛋白水平显著降低（P＜0.05）。与对照组相比,化疗组的Caspase-1、ASC、IL-1β的mRNA水平降低,但无统计学意义;化疗＋抑瘤汤组的Caspase-1、ASC、IL-1β mRNA水平显著降低（P＜0.05）。与对照组相比,化疗组和化疗＋抑瘤汤组细胞上清中的Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白水平显著降低（P＜0.01、0.001）;与化疗组相比,化疗＋抑瘤汤组的Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白进一步降低,其中Caspase-1、ASC差异显著（P＜0.05、0.001）。结论 NLRP3炎症小体在卵巢癌中高表达,抑瘤汤可抑制卵巢癌细胞NLRP3炎症小体的表达。     

基于脂多糖介导的炎症疾病caspase-11靶点药物的研究进展

目的 对近年来脂多糖介导的炎症疾病含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶11(cysteinyl as-partate specific proteinase-11,caspase-11)靶点药物进行综述.方法 利用PubMed、中国知网等检索平台,检索脂多糖介导的不同炎症疾病中caspase-11靶向药物并进行了归纳汇总.结...     

丹酚酸B保护大鼠缺血心肌与炎症小体NLRP3表达的相关性研究

目的探讨丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)所致心肌缺血损伤的保护作用及炎症小体NLRP3(NLR family,pyrin domain containing 3)相关蛋白的表达对心肌缺血的影响。方法♂SD大鼠随机分为对照组、模型组和Sal B低、中、高剂量组。Sal B各剂量组腹腔注射给予Sal B 5、10、15 mg·kg~(-1),模型组和对照组腹腔注射等体积生理盐水,各组连续给药7 d;从d 5开始,皮下多点注射ISO(30 mg·kg~(-1)),连续2 d造模。末次造模24 h后观察Sal B对大鼠心电图、血清中心肌酶、氧化指标和炎症因子含量、心肌组织中炎症小体NLRP3相关蛋白表达及形态学的影响。结果 Sal B可以明显减轻心肌组织坏死和炎细胞浸润,明显降低心电图中T波值(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,Sal B各剂量组的肌酸激酶(creatine kinase,CK)值、谷草转氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,GOT)值和白细胞介素1-β(interleukin 1-β,IL-1β)值,Sal B中、高剂量组的丙二醛(malonaldehyde,MDA)值及中剂量组的乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)值均明显降低(P<0.05,P<0.01);血清Sal B中、高剂量组的总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)值明显升高(P<0.05,P<0.01);Sal B给药组的心脏组织中NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific protease-1,caspase-1)和IL-1β蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 Sal B具有抗ISO所致大鼠心肌缺血作用,该作用机制可能与调控炎症小体NLRP3相关蛋白表达,抑制炎症因子的生成有关。     

NLRP3炎症小体在动脉粥样硬化相关细胞中作用的研究进展

炎症小体是一种调控IL-1β产生的大分子多蛋白复合体,在动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)病变发生发展中发挥重要作用。NLRP3炎症小体是目前研究最为深入和广泛的炎症小体类型。该文主要通过总结AS相关细胞(内皮细胞、巨噬细胞、血管平滑肌细胞)与NLRP3炎症小体之间的关系来探讨NLRP3炎症小体在AS病变发生发展中的作用。     

NLRP3炎性小体与抗肿瘤免疫作用研究进展

越来越多的研究表明, NOD样受体蛋白3 (NOD-like receptor protein 3, NLRP3)炎性小体已成为炎症反应和保护性免疫的调节因子,其组装和激活与抗肿瘤免疫的效果密切相关。由于细胞类型和所受刺激的不同, NLRP3炎性小体的激活可诱导免疫细胞处于极化、过度活跃状态或发生焦亡,释放白细胞介素(interleukin, IL)-1β和IL-18,导致级联免疫或炎症反应,其在肿瘤免疫中的作用受到了广泛关注。本综述汇总了NLRP3炎性小体通过诱导肿瘤细胞焦亡、树突状细胞(dendritic cells, DCs)发生焦亡或过度活跃状态,以及诱导巨噬细胞发生焦亡和极化,增强CD8⁺T细胞介导的抗肿瘤免疫作用的机制。NLRP3炎性小体的激活在肿瘤细胞和免疫细胞中的不同抗肿瘤免疫作用为未来研究提供了新方向,并且可能影响下一代免疫治疗的发展。     

扶正养肝合剂抑制NLRP3炎症小体活化缓解肝损伤作用

本研究采用痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes, P. acnes)和脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导小鼠急性肝损伤模型,研究扶正养肝合剂(Fuzheng Yanggan Fomula, FYF)缓解急性肝损伤的作用及机制。通过建立P. acnes/LPS小鼠急性肝损伤模型,考察FYF对小鼠血清中谷丙转氨酶(alanine transaminase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)和白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)含量,以及肝组织中丙二醛(malonaldehyde,MDA)、抗氧化能力指数(oxygen radical absorbance capacity, ORAC)和谷胱甘肽(glutathione, GSH)水平;应用免疫印迹法检测肝脏Nod样受体蛋白3 (Nod-like receptor protein 3, NLRP3)炎症小体相关通路中NLRP3蛋白、半胱天冬酶募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated...     

血清NLRP3炎性小体、IL-18、IL-1β水平与肝硬化、肝癌的相关性分析

目的 分析血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体、白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平与肝硬化、肝癌的相关性.方法 选取2017年2月—2020年2月我院肝胆外科收治的70例肝硬化患者(肝硬化组)和60例肝癌患者(肝癌组)及同期于本院体检的50例健康者(健康组),比较...     

NLRP3炎症小体在器官纤维化中的作用及研究进展

<正>纤维化(fibrosis)可发生于多种器官,主要由外界因素或内源性免疫因素刺激下引起的,表现为器官组织内纤维结缔组织增多,实质细胞减少,可破坏器官的结构和功能。感染、自身免疫反应、毒素、辐射和机械损伤等损伤组织后,组织会进行自我修复。如果修复异常,正常组织发生不可逆的纤维化改变,影响器官的结构和功能,使患者致残甚至死亡。     

NLRP3炎症小体与糖尿病性心肌病研究进展

糖尿病的重要心血管并发症之一是糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)。代谢紊乱、线粒体损伤、心肌细胞凋亡和自噬都被证实参与了DCM的发生、发展。近年来研究证实,核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体可能与DCM的发生、发展密切相关,是DCM治疗的潜在靶点。该文总结了NLRP3炎性小体与DCM的研究进展,为未来治疗DCM提供新的方向。     

炎症小体在纤维化疾病中作用的研究进展

炎症小体为多种蛋白质组成的复合体,其激活和随后的炎性细胞因子分泌对于先天免疫防御是必需的,并且在适应性免疫应答中也发挥重要作用。纤维化是慢性炎症发展的最后阶段,是细胞外基质过度沉积的结果,导致组织结构损伤和器官功能出现障碍。近年来,报道了许多炎症小体在纤维化疾病中的研究。该文对炎症小体在纤维化疾病中的作用进行综述,以促进炎症小体相关机制及药物的研究与开发。     

二甲双胍增强LPS激活的腹腔巨噬细胞在ATP刺激下的炎症小体活化

目的以脂多糖(LPS)激活的腹腔巨噬细胞为炎症细胞模型,探讨糖尿病常用药物二甲双胍对胞外ATP诱导炎症小体活化并释放白细胞介素-1β(IL~(-1)β)的影响。方法C57BL/6小鼠腹腔注射30 g·L~(-1)巯基乙酸盐(thioglycollate,TG)诱导腹腔巨噬细胞大量产生;利用LPS+ATP处理激活炎症小体,采用碘化丙锭(PI)染色法检测二甲双胍对LPS+ATP诱导的腹腔巨噬细胞焦亡的影响,免疫印迹法检测该细胞胞内及上清中IL~(-1)β和caspase-1的表达水平;免疫荧光技术检测巨噬细胞P_2X_7嘌呤能ATP受体7(P_2X_7R)的亚细胞分布及荧光强度。结果单独二甲双胍不会导致LPS激活细胞发生焦亡,但二甲双胍呈剂量依赖性促进LPS+ATP诱导的细胞焦亡;免疫印迹法显示,在蛋白水平上,单独LPS(或LPS+二甲双胍)刺激不能诱导细胞释放成熟IL~(-1)β(17 ku)到细胞外;当加入ATP刺激后,成熟IL~(-1)β和活化caspase-1(10 ku)释放到胞外;而二甲双胍可以剂量依赖性地促进LPS激活、ATP刺激下腹腔巨噬细胞释放成熟IL~(-1)β和活化caspase-1的水平。结论二甲双胍增强LPS激活的腹腔巨噬细胞在ATP刺激下的炎症小体活化,提高caspase-1活化和成熟IL~(-1)β释放,促进炎症反应。     

肠道疾病中胆汁酸及其受体对NLRP3炎症小体调控作用的研究进展

胆汁酸作为一种重要的内源性信号分子,参与机体代谢、免疫和炎症等多种生理病理过程,对维持肠道的正常生理功能具有重要作用。核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体是一种模式识别受体,可通过识别病原体相关分子模式或危险相关分子模式,感知外源性微生物或来自损伤、死亡细胞的内源性危险信号,从而调节肠道免疫进程。研究表明,胆汁酸与NLRP3炎症小体之间存在多种调控模式,共同参与肠道稳态维持和疾病调节。基于国内外现有相关研究综述了肠道疾病中胆汁酸及其受体对NLRP3炎症小体调控作用的研究进展。     

NLRP3炎症小体与心房颤动的研究进展

心房颤动（AF）是临床最常见的快速性心律失常,其发生机制尚未完全阐明,而炎症反应增强常与AF的发生发展相关。核苷酸结合寡聚化结构域受体蛋白3（NLRP3）作为近年研究最为广泛最具特征性的炎症小体,参与诸多非感染性炎性反应。有证据显示其与心房重构、心肌纤维化密切相关,以此入手可为阐明AF的上游机制提供新的理论基础和研究靶点。本文简述了NLRP3的特性及信号传导途径,从基础和临床研究两方面总结了NLRP3与AF的相关性,并对未来NLRP3拮抗剂的应用作出了展望。     

NLRP3炎症小体激活及调节机制的研究进展

炎症小体是一种由Nod样受体(NLR)家族成员与PYHIN (pyrin and HIN domain)家族成员组成的胞浆多蛋白复合物,能被多种病原相关分子模式或损伤相关分子模式激活。炎症小体的功能是激活半胱天冬酶1(Caspase-1),进而引起促炎细胞因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18的成熟和分泌,并诱导细胞焦亡。NLR家族蛋白3(NLRP3)炎症小体是由NLRP3、接头蛋白ASC和效应蛋白Caspase-1组成的大分子多蛋白复合体。与其他炎症小体不同,NLRP3炎症小体可以被多种刺激物活化,包括微生物组分和内源性分子。NLRP3炎症小体在免疫系统和人类疾病中的重要性显而易见,但其激活及调节的机制仍不清楚。在此,主要对NLRP3炎症小体活化和调节的机制进行综述。

     

氟西汀调节TLR4/NF-κB/NLRP3炎症体信号通路改善CUMS大鼠抑郁样行为

目的 基于Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症体信号通路探究氟西汀对慢性不可预知性轻度应激(CUMS)模型大鼠抑郁样行为的作用。方法 18只SD大鼠随机分为对照组、模型组和氟西汀组。模型组和氟西汀组大鼠随机给予不可预知性轻度刺激11周,制备抑郁症模型。氟西汀组于第7～11周灌胃氟西汀(10 mg·kg^-1·d^-1),其余组大鼠灌胃1 mL生理盐水。干预结束后进行行为学检测,酶联免疫吸附试验检测脑组织中白细胞介素(IL)-1β和IL-18的含量,免疫荧光染色观察海马CA3区和皮质区中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和胱天蛋白酶1(Caspase-1)的表达情况。Western blot测定脑组织TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1和活化的Caspase-1(cleaved Caspase-1)蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,氟西汀组大鼠在旷场的运动距离及站立次数显著增多,在高架十字迷宫的运动距离增加,且在闭臂的停留时间减少,大鼠脑组织中IL-1β...     

NLRP3炎症小体在热应激损伤中的作用研究

目的：探讨NLRP3炎症小体在热应激损伤中的作用机制,并梳理NLRP3炎症小体和热应激损伤的相关性。方法：首先,选择2019年5月1日-2021年11月1日在南通大学附属医院就诊的90例6个月-6岁FS患儿作为热性惊厥组（FS组）,将同一时间段的25例到我院正常体检的25例儿童作为正常对照组。抽取外周血2.5ml后在2500r/min的情况下离心15min,按照ELISA说明测定样品的浓度。构建FS的动物模型,选择20只SPF级2周龄的正常SD大鼠作为研究对象,通过热水浴诱导惊厥动物模型进行建模,取脑组织RIPA裂解液进行蛋白裂解,温度为4℃,12000g离心15min,取上清液借助BCA法进行定量分析。将大鼠分为FS组和FS+NLRP3炎症小体抑制剂组,分析NLRP3炎症小体在热应激损伤的保护作用及相关性。结果：研究结果表明,热性惊厥组细胞上清的IL-1β、ASC、NLRP3、Caspase-1mRNA明显升高,且在与正常对照组的数据对比中具有统计学差异（P <0.05）;复杂性热性惊厥患儿的IL-1β含量是最高的。在大鼠试验当中,经过PCR检测,FS组的ASC、NLRP3、C...     

白细胞介素1β与矽肺发展的关系

矽肺是由吸入二氧化硅引起的肺部弥漫性纤维化病变, 是发展中国家高发的职业疾病之一。迄今尚无明确的药物能够缓解或逆转矽肺所造成的肺部损伤。因此, 尽早预防、诊断和治疗肺部纤维化十分重要。研究表明, 慢性炎性环境对肺纤维化有一定的促进作用, 白细胞介素1β(interleukin -1β, IL-1β)是一种在免疫应答中促进微环境炎性的细胞因子, 在炎症反应中具有重要作用。因此IL-1β的释放在矽肺发病进程中具有重要意义, 笔者旨对矽肺发展病程、IL-1β产生的信号通路及两者的关系进行系统阐述。     

NLRP3炎性体与代谢综合征的关系

随着对炎症和代谢综合征研究的进展,人们发现二者间的联系越来越紧密。慢性炎症在代谢综合征的发生发展过程中起到重要作用,而且许多炎症因子都参与代谢疾病的发展。其中,促炎因子白细胞介素1β(IL-1β)可在各种代谢性疾病中诱导产生炎症反应。NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性体是一种可以激活白细胞介素1β家族细胞因子的蛋白复合体。研究表明在高血压、动脉粥样硬化、肥胖和2型糖尿病等疾病中,NOD样受体蛋白3炎性体均被激活。本文主要总结这些研究并讨论它们的影响以便更好地了解NOD样受体蛋白3炎性体与代谢综合征的关系。