纳米磁微粒化学发光法在检测SLE相关自身抗体中的应用价值

目的探讨纳米磁微粒化学发光法(NM-CLIA)在检测系统性红斑狼疮(SLE)相关自身抗体中的应用价值。方法采用NM-CLIA和线性免疫印迹法(LIA)检测108例SLE患者自身抗体,比较两种方法在检测自身抗体的一致性。采用Spearman相关性分析抗体NM-CLIA定量结果与SLE疾病活动性指数(SLEDAI)评分的相关性。结果 NM-CLIA和LIA在检测抗nRNP抗体、抗核糖体蛋白P0抗体、抗Ro-52抗体、抗Ro-60抗体和抗SSB抗体结果一致性较好(Kappa≥0.75),抗Sm抗体和抗双链DNA抗体结果一致性一般(0.40≤Kappa<0.75),抗核小体抗体和抗组蛋白抗体结果一致性较差(Kappa<0.40)。抗双链DNA抗体、抗核小体抗体、抗组蛋白抗体、抗Sm抗体与SLEDAI评分呈正相关(r=0.334、0.362、0.323、0.201,P<0.05)。结论 NM-CLIA可用于检测SLE相关自身抗体,定量结果能够反映SLE疾病活动度。     

蛋白芯片法检测抗可提取性核抗原抗体

目的利用蛋白芯片方法检测抗可提取性核抗原(ENA)抗体,并与免疫双扩散(ID)相比较,评价蛋白芯片方法的敏感度、特异度。方法分3组血清:①抗ENA抗体标准血清10份;②献血员血清200份及诊断明确患者血清445份;③实验室连续常规送检血清1580份。蛋白芯片法:采用华大基因研究中心研究的板式蛋白芯片,测定方法参照其说明书进行;ID:采用经典的梅花孔,所用抗原为人脾提取物。结果①蛋白芯片法测得10份抗ENA抗体标准血清结果全部准确。②献血员200份血清两种方法检测抗ENA抗体全部阴性;患者血清结果显示蛋白芯片法检测抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSA抗体和抗SSB抗体的敏感度(10.93%、19.73%、56.27%、30.13%)高于ID(5.33%、15.47%、42.40%、10.13%)(P<0.05),抗RNP抗体(κ=0.78)、抗Scl-70抗体(κ=0.83)及抗Jo-1抗体(κ=1.00)在两种方法均有很好一致性,κ>0.75(P<0.05)。③与ID同步盲法比较的1580份血清,抗RNP抗体(κ=0.83)、抗SCL-70抗体(κ=0.79)、抗Jo-1抗体(κ=0.92)三种抗体两种方法有很好的一致性κ>0.75;在抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体4种抗体蛋白芯片法敏感度(5.89%、8.40%、29.67%、14.21%)高于ID法(1.65%、6.83%、18.13%、4.95%)(P<0.05)。结论①蛋白芯片法较为敏感、特异,与ID一致性较好。②蛋白芯片法检测抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体敏感度高于ID法。     

应用蛋白质芯片技术检测血清自身抗体的初步探讨

目的研究应用蛋白质与抗原分子微阵列技术检测血清自身抗体。方法运用胶体金免疫金银染色法在氧化型琼脂糖凝胶膜结合戊二醛(GA)分子衍生的活性表面,制作蛋白质与抗原分子微阵列,建立检测血清自身抗体的方法。结果在未经选择的自身免疫病患者中[包括系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿关节炎(RA)和混合性结缔组织病(MCTD)],共检出有多种自身抗体阳性,其中抗ssDNA抗体、抗甲状腺球蛋白(TG)抗体、抗甲状腺过氧化切酶(TPO)抗体、子宫内膜抗体(EmAb)和类风湿因子(RF)等的检出频率较高;但心磷脂抗体(ACA)、抗肝细胞膜特异性脂蛋白(LSP)和抗精子抗体(AsAb)未检出1项阳性,经初步的方法学对比考证,与酶联免疫吸附试验(ELISA)测试结果有较好的重复性(结果一致性达90%)。结论本法敏感度高,结果直观且实验条件易于控制,为阵列芯片的可视化提供了一种很好的模式。     

MacELISA、RPHI和IFAT应用于EHF早期诊断的比较研究

<正> 流行性出血热(EHF)的早期实验诊断,最理想的方法是从患者标本中直接测特异性抗原或IgM类特异抗体。由于抗原检测需在发病的最初几日之内,且持续存在时间较短,标本难以取得,故测IgM类特异抗体是目前采用较多的方法。本文采用MacELISA(测IgM抗体)和RPHI(测总抗体)对山西省EHF疫区的确诊病例、疑似病例、非出血热病例及正常献血员血清标本进行EHF抗体测定和IFAT(分别检测IgG和IgM特异抗体)进行并了比较,现将结果报告如下: 材料和方法一、血清标本:1985～1988年山西省EHF疫区确诊病例(具有临床症状,IFAT测定双份血清IgG抗体4倍以上增高或单份血清IgG抗体效价≥1:1280者)血清标本76份和临床疑似病例(具有     

MBS和戊二醛连接hPTH载体特异抗体及载体抗体的比较研究*

目的:比较间-马来酰亚胺苯甲酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯(MBS)和戊二醛连接人甲状旁腺激素(hPTH)载体后抗体的产生效果。方法:MBS法和戊二醛一步法分别将hPTH(1-84)与载体牛血清白蛋白(BSA)连接后作为免疫原免疫家兔;间接ELISA法比较两组兔中特异性hPTH(1-84)抗体和BSA抗体的产生,并使用免疫吸收和亲和层析吸附清除BSA抗体,对清除情况进行比较。结果:MBS组抗hPTH(1-84)抗体效价总体上高于戊二醛组,抗载体BSA抗体效价低于戊二醛组;MBS组在同一时间hPTH(1-84)抗体效价高于BSA抗体,戊二醛组获取的抗血清中BSA抗体效价则明显高于hPTH(1-84)抗体。MBS组经亲和层析吸附BSA抗体被清除完全,戊二醛组经免疫吸收和亲和层析吸附仍有残留BSA抗体。结论:采用MBS法连接半抗原载体制备hPTH(1-84)抗体,降低了载体抗体的影响,提高了hPTH(1-84)抗体的特异性,可应用于hPTH药理作用和代谢途径等研究工作中。     

检测抗核抗体谱在系统性红斑狼疮诊治中的意义

目的探讨抗核抗体谱(ANAs)检测在系统性红斑狼疮(SLE)诊治中的应用价值。方法对102例SLE(SLE组)、32例其他风湿性疾病(疾病对照组)及30名健康体检者(正常对照组),分别采用间接免疫荧光法、免疫印记法测定血清中抗核抗体(ANA)和ANAs中15种抗体的水平。结果 SLE组ANA和ANAs中抗nRNP/Sm抗体、抗Sm抗体、抗双链DNA抗体、抗核小体抗体、抗组蛋白抗体及抗核糖体P蛋白抗体阳性率与疾病对照组和正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。SLE组2项及以上抗体阳性者占93.1%。ANA、抗Sm抗体、抗双链DNA抗体及抗核小体抗体同时阳性且资料完整的20例SLE住院患者治疗后上述抗体均有不同程度的转阴和(或)滴度下降。结论联合检测动态观察ANAs对SLE的诊断及治疗具有重要意义。     

免疫性抗体对女性不孕不育检测的影响

目的对免疫性抗体在女性不孕不育检测中的临床价值进行评价与探讨,以供临床参考。方法以2013年2月至2015年2月来我院进行治疗的66例女性不孕不育患者及能够生育的正常女性50例作为研究对象,分成实验组和对照组。通过ELISA(酶联免疫吸附测定)对两组研究对象的抗精子抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(EmAb)、抗心磷脂抗体(ACAb)、抗卵巢抗体(AOAb)、抗透明带抗体(ZPAb)、抗滋养层抗体(TAAb)、抗绒毛膜促性腺激素抗体(AhAb)等免疫生殖抗体进行测定,对比分析检测结果。结果实验组患者的抗精子抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(EmAb)、抗心磷脂抗体(ACAb)、抗卵巢抗体(AOAb)、抗透明带抗体(ZPAb)、抗滋养层抗体(TAAb)、抗绒毛膜促性腺激素抗体(AhAb)阳性率显著对照组,P<0.05,差异有统计学意义。结论免疫性抗体检测在女性不孕不育临床诊断中具有重要意义,需在临床中加大对其检测的应用,以提高诊断效果,为治疗女性不孕不育提供临床指导。     

抗瓜氨酸化蛋白/肽抗体及类风湿因子在类风湿关节炎早期诊断中的应用

目的:探讨两种抗瓜氨酸化蛋白/肽抗体(ACPA)即第三代抗环瓜氨酸肽(CCP3)抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体及类风湿因子(RF)在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值。方法:检测30例早期RA患者(RA组)、32例骨性关节炎(OA)和强直性脊柱炎(AS)患者(OA和AS组)及30例健康体检者(对照组)血清抗MCV抗体、抗CCP3抗体及RF水平。分析3种抗体、疾病活动评分(DAS28)、红细胞沉降率(血沉,ESR)及C反应蛋白(CRP)在RA患者治疗后水平的变化。结果:RA组3种抗体的阳性率均高于对照组及OA和AS组(P<0.01)。抗MCV抗体、抗CCP3抗体及RF对RA诊断的敏感性分别为76.67%、66.67%、63.33%,特异性分别为96.77%、95.16%、83.87%。RF与抗MCV抗体、抗MCV抗体与抗CCP3抗体联合检测对RA诊断的敏感性为83.33%、80.00%。RA患者DAS28、ESR、CRP、抗MCV抗体及RF水平较治疗前降低(P<0.05或P<0.01)。结论:抗MCV抗体对RA早期诊断价值较高。抗体联合检测提高了诊断的敏感性。抗MCV抗体及RF对判断RA疾病活动性有重要意义。3种抗体均具有鉴别RA与OA、AS的价值。     

RF与抗CCP抗体、关节液抗体与关节MRI联合检查在RA诊断中的意义

目的评估类风湿因子(RF)与抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体、关节液中葡萄糖6-磷酸异构酶(GPI)/抗CCP/抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体与关节核磁共振成像(MRI)联合检查在类风湿关节炎(RA)诊断中的意义。方法分析218例RA患者与192例对照组血清抗体RF、抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸多肽抗体(ACPA)、抗葡萄糖6-磷酸异构酶(GPI)及隐形类风湿因子(HRF-IgG)检出情况;以及60例RF和抗CCP抗体阴性RA患者与58例对照组进行其他血清抗体、关节液抗体、关节MRI检出情况比较。综合分析探讨提高RA诊断敏感性及特异性的方法。结果 RA中RF与抗CCP抗体阳性率分别为72.5%、76.6%,RF或抗CCP抗体联合检测敏感性达86.2%,RF和抗CCP抗体均阳性时特异性达96.9%;在RF和抗CCP抗体阴性的RA患者中,其他抗体的检出率很低,关节液抗体仍有36.7%的检出率,关节MRI检查敏感性、特异性分别为86.7%、81.0%。关节液抗体或关节MRI阳性的敏感性、关节液抗体和关节MRI均阳性的特异性分别为95.0%、98.3%。结论 RF与抗CCP抗体联合检测对诊断RA意义较大,血清阴性RA患者行关节MRI检查有重要指导意义,关节液抗体及关节MRI联合检查可显著提高血清阴性RA诊断的敏感性及特异性。     

精神分裂症与自身抗体

目的 为探讨精神分裂症与自身抗体的关系。方法 测定了精神分裂症100例61名正常人的血清抗甲状腺球蛋白抗体(TGA)、抗甲状腺微粒体抗体(TMA)、抗心磷脂抗体(ACA),抗脑抗体(ABAb)和抗胰岛素抗体。结果 精神分裂症患者血清中各自身抗体阳性率均偏高;总阳性率为66％,有多种自身抗体者占46％,均明显高于正常人。结论 精神分裂症患者存在着自身免疫倾向;自身抗体在精神分裂症的发病机制中,可能是重要的致病因素。     

丙型肝炎感染者血清自身抗体检测及临床意义分析

目的：探讨慢性丙型肝炎(HCV)感染者血清中自身抗体的检出率,为监测HCV的病情提供方法。方法采用间接免疫荧光法对84例慢性HCV感染者和80例健康体检者的血清抗核抗体(ANA)、抗线粒体抗体(AMA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗肝肾微粒体抗体(LKM)等进行检测,并根据荧光反应模式判定结果。结果慢性HCV感染者84例中有33例出现自身抗体,检出率为39.29％（其中ANA的检出率为33.33%）,高于健康对照组检出率2.5％(P<0.01)。结论 HCV感染可触发机体自身免疫反应,自身抗体阳性,须引起临床上高度重视,并进行自身抗体的监测以及滴度的监测,结合病情选择合适的治疗方案。     

用免疫沉淀及病毒中和试验检测对甲型肝炎灭活疫苗抗体应答与Ig被动免疫之间的差异

作者用四种方法检测了甲型肝炎病毒(HAV)灭活疫苗诱导的保护性抗体水平和免疫球蛋白(Ig)被动免疫获得的抗体水平,     

The Clinical Values of ACPA and RF for Early Diagnosis of Rheumatoid Arthritis

目的:探讨两种抗瓜氨酸化蛋白/肽抗体(ACPA)即第三代抗环瓜氨酸肽(CCP3)抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体及类风湿因子(RF)在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值.方法:检测30例早期RA患者(RA组)、32例骨性关节炎(OA)和强直性脊柱炎(AS)患者(OA和AS组)及30例健康体检者(对照组)血清抗MCV抗体、抗CCP3抗体及RF水平.分析3种抗体、疾病活动评分(DAS28)、红细胞沉降率(血沉,ESR)及C反应蛋白(CRP)在RA患者治疗后水平的变化.结果:RA组3种抗体的阳性率均高于对照组及OA和AS组(P＜0.01).抗MCV抗体、抗CCP3抗体及RF对RA诊断的敏感性分别为76.67％、66.67％、63.33％,特异性分别为96.77％、95.16％、83.87％.RF与抗MCV抗体、抗MCV抗体与抗CCP3抗体联合检测对RA诊断的敏感性为83.33％、80.00％.RA患者DAS28、ESR、CRP、抗MCV抗体及RF水平较治疗前降低(P＜ 0.05或P＜0.01).结论:抗MCV抗体对RA早期诊断价值较高.抗体联合检测提高了诊断的敏感性.抗MCV抗体及RF对判断RA疾病活动性有重要意义.3种抗体均具有鉴别RA与OA、AS的价值.     

免疫印迹和放射免疫沉淀法检测胰岛自身抗体的比较

目的 探讨免疫印迹法(IB)和放射免疫沉淀法(RIP)在胰岛自身抗体检测中的差异.方法 IB和RIP分别测定本院55例和外院218例1型糖尿病(T1DM)患者的谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)和胰岛素自身抗体(IAA)水平;再从218例外院患者中随机抽取24例,用IB和RIP分别检测血清中GADA和IA-2A,评价两种方法的敏感性.结果 IB和RIP检测IA-2A阳性率无明显差异(P>0.05),而GADA、IAA总阳性率的差异均有统计学意义(P<0.05).两种方法联合检测GADA和IA-2A的抗体总阳性率为91.7%,高于单一方法的检测结果.结论 IB检测GADA和IAA的敏感性明显低于RIP,且两种方法联合检测的抗体检出率明显高于单一方法.     

乙型肝炎抗原放射免疫测定的进一步研究及其应用

一、材料和方法 1.抗体纯化及碘化方法纯化抗体由北京生研所赠给,抗体碘化标记方法基本同参考资料,I~(131)标记抗体由天津市卫生防疫站和中国科学院原子能所供给。电泳自显影条件也同参考资料,除缓冲液测定时应用Tris缓冲液外,试验应用三种:即Tris、Tris和等量蒸馏水、巴比妥盐酸。 2.对照方法 (一) 普通电泳和琼脂扩散法同参考资料。 (二) 反向间接血疑法:用人O型红血球,戍二醛固定,再鞣酸化,使用纯化的HBAg抗体带到     

人体对流感活和灭活疫苗的抗体及细胞毒性T淋巴细胞应答

本文比较了 HI、单向辐射状溶血(SRH)和蚀斑中和(PN)试验对血凝素(HA)抗原的抗体应答结果。分析了这些方法测定的抗体应答与 HLA 限制的病毒特异性细胞毒性 T淋巴细胞(CTL)测定结果的相互关系。同时检测了对病毒核蛋白和内膜蛋白抗原的抗体应答。     

抗SmD1抗体在诊断系统性红斑狼疮中的意义

目的探讨血清抗SmD1抗体检测对诊断系统性红斑狼疮(SLE)的意义。方法分别检测95例SLE组患者、106例病例对照组患者及72例健康组血清中的自身抗体,其中抗核抗体(ANA)和抗SmD1抗体的检测用ELISA法,抗Sm抗体、抗双链DNA(dsDNA)抗体、抗核小体抗体(ANuA)的检测用免疫印迹法。结果 SLE组患者血清中抗SmD1抗体阳性率为75.8%,抗Sm抗体的阳性率为28.4%,两者阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。结论抗SmD1抗体的特异性较高,敏感度也高于抗Sm抗体,可以作为诊断SLE的一项参考指标,特异性抗体的联合检测可以提高SLE诊断的敏感度。     

血清新蝶呤与ALT检测在无偿献血者筛查中的意义比较

目的探讨新蝶呤(Np)与ALT在无偿献血者筛查中的意义。方法随机抽取3800名无偿献血者标本同时测定血清Np浓度和血液筛查标志物(HBsAg、抗-HIV、抗-HCV、梅毒抗体和ALT),血清Np浓度、HBsAg、抗-HIV、抗-HCV和梅毒抗体检测均采用ELISA方法,ALT检测采用速率法,对Np和(或)ALT阳性的标本进行复检巨细胞病毒抗体(CMV-IgM)、EB病毒抗体和结核抗体。结果剔除4项传染性指标(HBsAg、抗-HIV、抗-HCV和梅毒抗体)阳性的标本,并剔除Np和ALT交叉阳性标本后,对Np和ALT的阳性率进行比较,两组阳性率比较P<0.05;对于Np和(或)ALT阳性标本分别检测巨细胞病毒抗体(CMV-IgM)、EB病毒抗体和结核抗体,两组3项检测阳性率比较P<0.05。结论新蝶呤比ALT具有更高的特异性和较低的阳性率,对于其他未知病原体的筛查具有较高的价值;新嘌呤作为传染性标志物比ALT更特异,可作为献血者筛查的附加指标。     

抗体联合检测在类风湿关节炎早期诊断中的临床意义

目的 探讨抗角蛋白抗体(AKA)、类风湿因子(RF)和抗环瓜氨酸肽抗体(抗-CCP抗体)联合检测在类风湿关节炎(RA)早期诊断中的临床意义.方法 对RA患者68例,非RA其他风湿病患者90例同时检测AKA,RF和抗CCP抗体,AKA用间接免疫荧光法进行检测,RF和抗-CCP抗体用酶联免疫吸附法定量检测.结果 RA组中3种抗体的阳性率显著高于非RA组(P＜0.01);抗CCP抗体对RA诊断的敏感性(69.1%)明显高于AKA(33.8%,P＜0.01),与RF比较,差异无显著性(80.9%,P＞0.05);抗CCP抗体和AKA特异性(94.4%,93.3%)较高,与RF比较,差异有显著性(74.4%,P＜0.01);抗CCP抗体和RF联合检测敏感性达89.7%.结论 RF敏感性较高,特异性较差;抗CCP抗体对RA有适度的敏感性和很高的特异性,对诊断RA具有良好的应用价值;抗CCP抗体和RF联合检测具有更高的敏感性.     

原核细胞表达抗CD_3工程抗体

用RT—PCR方法 ,从分泌抗人CD3抗体的杂交瘤细胞中扩增抗体的重链和轻链可变区基因 ,并运用重叠延伸拼接法 (SOE)将其连接成单链抗体 (ScFv)基因 ,并克隆于带有Tac启动子的原核表达载体中 ,用斑点杂交方法筛选出阳性克隆。重组子在E .coilB1 2 1 (DE3)中获得高效表达且具有活性的单链抗体。