CEM／ADM多耐药细胞株的P170－糖蛋白的表达

本文利用免疫荧光法对肿瘤细胞ＣＥＭ，ＣＥＭ／ＡＤＭＰ１７０－糖蛋白进行了检测，结果显示：敏感细胞全部为阴性，而耐药细胞株Ｐ１７０－糖蛋白呈过度表达，其过度表达细胞数随肿瘤细胞对抗癌药物耐受性增强而增加，其中ＣＥＭ／ＡＤＭ多耐药细胞株的Ｐ１７０－糖蛋白过度表达细胞为９２％。     

SMMC—7721细胞诱导耐药培养中P—糖蛋白变化

目的 研究ＳＭＭＣ－７７２１细胞诱导耐药培养中Ｐ－糖蛋白变化。方法 用ＭＴＴ法检测常用化疗药物对ＳＭＭＣ－７７２１和ＳＭＭＣ－７７２１／ＡＤＭ细胞的毒性;用流式细胞仪检测ＳＭＭＣ－７７２１／ＡＤＭ细胞Ｐ－糖蛋白表达及细胞内柔红霉素的浓度。结果 随着培养液中阿霉素浓度的递增,ＳＭＭＣ－７７２１／ＡＤＭ细胞内柔红霉素的积聚减少,Ｐ－糖蛋白表达有逐步增加的趋势。结论 Ｐ－糖蛋白的过度表达可能是形成ＳＭＭＣ－７７２１细胞多药耐药的重要原因。     

P-170在亲本S-180和抗药S-180-R瘤细胞中的表达

①目的探讨ＭＤＲ基因产物Ｐ－糖蛋白（Ｐ－１７０）在亲本Ｓ－１８０及抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞中的表达。②方法用ＡＢＣ免疫组化方法，按日本ＤＡＫＯ公司免疫药盒程序进行，单抗为Ｃ２１９，ＬｉｎＫｉｎｇｒｅａｇｅｎｔ１∶４００，Ｓｔｒｅｐｔａｉｖｉｄｉｎｒｅａｇｅｎｔ１∶４００，ＤＡＢ染色，苏木精复染。③结果Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞中，有明显的Ｐ－１７０表达，亲本Ｓ－１８０细胞则无此表达。抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞比抗阿霉素Ｐ３８８／ＡＤＲ细胞有更多的Ｐ－１７０表达。④结论ＭＤＲ基因产物Ｐ－１７０的过表达是抗阿霉素细胞系Ｓ－１８０－Ｒ的抗药标志之一。     

恶性肿瘤外周血细胞P-糖蛋白表达与肿瘤多药耐药相关性研究

多药耐药基因过度表达是恶性肿瘤化疗失败的主要原因。目前,对恶性肿瘤药物敏感性的检测仍依靠病理标本,非手术病例或长期化疗病人肿瘤细胞的耐药情况得不到明确诊断。本研究通过检测肿瘤患者外周血单个粒细胞（ＰＢＭＣ）、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋细胞与肿瘤组织Ｐ－糖蛋白在化疗中的动态变化,试图寻找诊断肿瘤多药耐药的新途径。本文对２３例患者采用免疫组化（ＩＣ）检测ＰＢＭＣ、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋及肿瘤组织的Ｐ－糖蛋白,２８例用流式细胞术（ＦＣＭ）测定ＰＢＭＣ、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋细胞Ｐ－糖蛋白,用免疫组化测定相应的肿瘤细胞…     

单克隆抗体和超抗原的融合蛋白对人大肠癌细胞的抑制作用

观察抗人大肠癌的单克隆抗体和超抗原ＳＥＡ的融合蛋白Ｃ２１５Ｆａｂ－ＳＥＡ与Ｃ２４２Ｆａｂ－ＳＥＡ,对表达相应抗原的人大肠癌细胞株的体外抑制作用。方法：用健康人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）作为效应细胞,ＭＴＴ法测定融合蛋白对人大肠癌细胞系的体外抑制率,采用荧光抗体流式细胞术测定肿瘤细胞ＨＬＡ－Ｉ和ＨＬＡ－ＤＲ抗原分子的表达。结果：在ＰＢＭＣ介导下,Ｃ２１５ＦａＢ－ｓｅａ和ＨＬＡ－Ⅰ,ＨＬＡ－ＤＲ分子     

人大肠癌多药耐药细胞LoVo/5-FU的建立及其生物学特性的初步研究

目的建立人大肠癌ＬｏＶｏ细胞多药耐药细胞株ＬｏＶｏ／５－ＦＵ,并探讨其生物学特性及耐药机制。方法人大肠癌细 胞系 ＬｏＶｏ在体外经 ２．５μｇ／ｍｌ５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）作用,成功诱导 ＬｏＶｏ／５－ＦＵ耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它 们对５－ＦＵ、丝裂酶素（ＭＭＣ）、阿霉素（ＡＤＭ）、顺铂（ＤＤＰ）、氨甲喋呤（ＭＴＸ）和阿糖胞苷（ＡｒａＣ）等６种药物的敏感性。 用噻唑蓝（ＭＴＴ）法、光镜及扫描电镜观察两种细胞形态及结构并绘制出细胞体外生长曲线。免疫组化ＬＳＡＢ法检测细 胞中Ｐ２６－Ｂｃｌ－２的表达。应用原位ＤＮＡ末端转移酶标记法检测５－ＦＵ在两种细胞中诱导的细胞凋亡。结果ＬｏＶｏ／５－ＦＵ 细胞株对５－ＦＵ、ＭＭＣ和ＡＤＭ均有耐药性,且对５－ＦＵ的耐药程度较亲本细胞提高。与亲本细胞相比,耐药细胞株生长 慢,倍增期延长,汇合密度低,异型性明显。免疫组化ＬＳＡＢ法提示,ＬｏＶｏ／５－ＦＵ细胞的凋亡与Ｐ２６－Ｂｃｌ－２过度表达有 关。ＬｏＶｏ细胞原位ＤＮＡ末端转移酶标记阳性率高于ＬｏＶｏ／５－ＦＵ。结论ＬｏＶｏ／５－ＦＵ多药耐药细胞株耐药性稳定,在相 同条件下与敏感细胞株ＬｏＶｏ相比,细胞凋亡受到抑制,提示ＬｏＶｏ／     

反义核酸逆转人白血病多药耐药细胞株的耐药性

目的采用一段人工合成的互补于人ｍｄｒ１基因的反义硫代硫酸脱氧寡核苷酸（简称反义核酸）转染白血病多药耐药细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ，来逆转白血病细胞的多药耐药。方法ＭＴＴ法检测Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０，流式细胞仪分析细胞内的柔红霉素含量，免疫细胞化学染色方法确定Ｐ１７０的表达水平，ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ的相对水平（ｍｄｒ１／β２－ＭＧ）。结果浓度为２μｍｏｌ的反义核酸使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０从处理前的２５．７２μｇ／ｍｌ降至处理后的６．９７μｇ／ｍｌ，相对逆转效率为７３．０１％。反义核酸亦使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内的柔红霉素含量增加，Ｐ１７０表达阳性率从处理前的９８．６％±１．０％降至处理后的１８．３％±０．７％，ｍｄｒ１／β２－ＭＧ下降了０．５，ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ相对水平有所下降。结论反义核酸通过下调ｍｄｒ１基因，阻断Ｐ１７０的表达，从而降低Ｋ５６２／ＡＤＭ的耐药性。     

P-170蛋白过度表达与髓细胞性白血病预后的关系

为探讨髓细胞性白血病（ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ）患者Ｐ－１７０ 蛋白过度表达与预后的关系,用免疫组化ＬＳＡＢ法（ｌａｂｅｌｌｅｄ ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ ｂｉｏｔｉｎ ａｓｓａｙ）检测６６ 例急性髓细胞性白血病（ａｃｕｔｅ ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ,ＡＭＬ）及２０ 例慢性髓细胞性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ, ＣＭＬ）患者外周血单个核细胞的Ｐ－１７０ 蛋白表达。结果表明,初治组ＡＭＬ患者Ｐ－１７０ 表达率为２６．５％ （９／３４）;难治／复发组为６８．４％ （１３／１９）,比初治组明显增高（Ｐ＜ ０．００５）;完全缓解组为２３．１％ （３／１３）,与初治组差异无显著性。诱导化疗Ｐ－１７０＋ 者完全缓解（ＣＲ）率为２２．２％ （７／９）,Ｐ－１７０－ 者为８０％ （２０／２５）,二者差异有显著性（Ｐ＝ ０．００３６）。ＣＭＬ慢性或加速期８ 例患者无１ 例Ｐ－１７０ 表达,急变期患者Ｐ－１７０ 表达率为５０％ （６／１２）,二者差异有显著性（Ｐ＝ ０．０４２）。提示Ｐ－１７０ 蛋白过度表达是髓细胞性白血病化疗耐药和不良预后的标志     

耐三尖杉酯碱白血病细胞株HL-60/H的建立及其耐药性和抗凋亡作用的检测

为了建立性能稳定的白血病耐药细胞株用于肿瘤细胞耐药性和促凋亡作用的研究, 通过逐渐增高三尖杉酯碱（Ｈ） 的剂量, 用极限稀释法克隆筛选出耐三尖杉酯碱（Ｈ） 的白血病细胞株ＨＬ－６０／Ｈ, 并用ＦＣＭ、透射电镜、ＤＮＡＬａｄｄｅｒ法、ＳＡＢＣ法对其进行耐药性和抗凋亡作用的检测。结果显示, ＨＬ－６０／Ｈ是亲代细胞ＨＬ－６０ 耐受Ｈ 的８９．２ 倍,ＨＬ－６０／Ｈ 在无药培养基中传代１６代, ＩＣ５０ 没有明显的降低。ＨＬ－６０／Ｈ细胞同时对多种药物产生耐受。Ｐ－１７０ 和ＢＣＬ－２在ＨＬ－６０／Ｈ 细胞的表达明显增多。药物不易在细胞内聚集,Ｈ不易诱导其发生凋亡。分析结果认为ＨＬ－６０／Ｈ是性能稳定的耐药细胞株,对耐药机制的研究和寻找逆转耐药的方法提供有利条件;多药耐药蛋白Ｐ－１７０ 介导的药物不易在细胞内聚集可能是ＨＬ－６０／Ｈ细胞产生耐药的重要机制; ＢＣＬ－２ 的高表达使ＨＬ－６０／Ｈ 细胞不易发生凋亡     

重组人促红细胞生成素cDNA在CHO-dhfr-细胞中的高效表达

目的：使重组人促红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）在ＣＨＯ细胞中获得高效表达。方法：利用基因重组构建了两个人促红细胞生成素ｃＤＮＡ重组表达质粒ｐＥＤ－ＥＰＯ和ｐＥＦ－ＥＰＯ，分别用ＤＥＡＥ－ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，作瞬时高表达，选ｐＥＦ－ＥＰＯ用磷酸钙共沉淀法转染ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞，加入氨甲喋呤（ＭＴＸ）扩增、选择，作稳定性高表达。结果：ｐＥＤ－ＥＰＯ和ｐＥＦ－ＥＰＯ转染ＣＯＳ７细胞后７２ｈ表达量分别为１７．８和２１．０ｎｇ／ｍｌ，ｐＥＦ－ＥＰＯ转染ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞，随着ＭＴＸ浓度的增加，ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＋的克隆数减少，而混合克隆的ＥＰＯ表达量逐渐升高。筛选了一株稳定性高表达ｒｈＥＰＯ的细胞株，其３ｄ表达量为１６μｇ／ｍｌ。结论：ｒｈＥＰＯ在ＣＨＯ细胞中获得了高表达     

人大肠癌多药耐药细胞LoVo／5—FU的建立及其生物学特性的初步研究

目的 建立人大肠癌ＬｏＶｏ细胞多药耐药细胞株ＬｏＶｏ／５－ＦＵ,并探讨其生物学特性及耐药机制。方法 人大肠癌细胞系ＬｏＶｏ在体外经２．５ｕｇ／ｍｌ５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）作用,成功诱导ＬｏＶｏ／５－ＦＵ耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它们对５－ＦＵ、丝裂酶素（ＭＭＣ）、阿霉素（ＡＤＭ）、顺铂（ＤＤＰ）、氨甲喋呤（ＭＴＸ）和阿糖胞苷（ＡｒａＣ）等６种药物的敏感性。用噻唑蓝（ＭＴＴ）法、光镜及扫描电镜观察两种细胞形态及结构并绘制出细胞体外生长曲线。免疫组化ＬＳＡＢ法检测细胞中Ｐ２６－Ｂｃｌ－２的表达。应用原位ＤＮＡ末端转移酶标记法检测５－ＦＵ在两种细胞中诱导的细胞凋亡。结果 ＬｏＶｏ／５－ＦＵ细胞株对５－ＦＵ、ＭＭＣ和ＡＤＭ均有耐药性,且对５－ＦＵ的耐药程度较亲本细胞提高。与亲本细胞相比,耐药细胞株生长慢,倍增期延     

Ribozyme基因对人肿瘤细胞株MCF—7／Adr多药抗药性的靶向逆转

设计合成能切割人ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因并构建成真核细胞表达克隆（ｐＨβＡｐｒ－１ｎｅｗ／５ｍＲ３），以靶向切割耐药癌细胞株（ＭＣＦ－７／Ａｄｒ）的ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ，抑制Ｐ－糖蛋白的表达，逆转多药抗药性。方法将含Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因的真核细胞表达克隆转染ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞，采用斑点杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术测得Ｒｉｂｏｚｙｍｅ能在细胞中稳定表达，并使细胞中ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ降解８３．５％，Ｐ－糖蛋白表达明显下降（ＡＢＣ法）。结果Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因转染的ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞耐药性下降至敏感细胞的６倍，而无Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因转染的ＭＣＦ－７／Ａｄｒ耐药性是敏感细胞的１０００倍。结论这种基因调控技术介入可能将为肿瘤耐药的治疗开辟一个新领域。     

170例乳腺癌标本药物敏感性分析

检测１７０例原代乳腺癌细胞对常用化疗药物的体外敏感性。发现：①乳腺癌细胞对５－氟脲嘧啶（５－Ｆｕ），丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ），顺铂（ＤＤＰ）及泰素（ｔａｘｏｌ）的高度敏感率（ＨＳＲ）明显高于其它受试药物（Ｐ＜０．０５）；②药物敏感性与乳癌的病理分型和临床分期、以及雌激素受体（ＥＲ）和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达状况无明显关系（Ｐ＞０．０５）；③环孢素Ａ（ＣｓＡ）能提高部分耐药乳腺癌对阿霉素（ＡＤＭ）的敏感性     

抗细胞毒药物细胞株P＿170糖蛋白的检测

抗细胞毒药物细胞株Ｐ＿１７０糖蛋白的检测黄晓军，张海帆，王申五北京医科大学血液病研究所王松霞Ｔａｋａｓｈｉ，ＴＳｕｒｕｏ体外实验表明，肿瘤耐药机理之一是由于肿瘤细胞株膜表面存在一分子量为１７０ＫＤ的糖蛋白（Ｐ１７０糖蛋白）高表达，此糖蛋白能将多种无交...     

一种有效的肿瘤耐药逆转剂─汉防己甲素逆转白血病耐药的实验研究

用ＭＴＴ法检测ＤＮＲ及ＨＨＴ对白血病细胞的毒性作用，并观察中药汉防己甲素（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，ＴＴＤ）对两种化疗药物细胞毒性的影响。结果ＴＴＤ可明显提高ＤＮＲ及ＨＨＴ对耐药细胞（Ｋ５６２／Ａ０２，Ｋ５６２／ＨＨＴ）的毒性作用，ＩＣ５０值分别下降１５．８及１９．１倍（Ｐ＜０．０５）；而ＴＴＤ对Ｋ５６２／Ｓ敏感细胞无明显影响（Ｐ＞０．０５）。同时进行了异搏定的对照实验。推测ＴＴＤ可能是通过抑制耐药肿瘤细胞膜上Ｐ－１７０糖蛋白的功能而起作用的。     

卵巢癌细胞株耐药谱的体外实验研究

用卵巢癌细胞系Ａ２７８０在体外分别与化疗药物长春新碱（ＶＣＲ）、顺铂（ＤＤＰ）和阿霉素（ＡＤＭ）作用，获得Ａ２７８０／ＶＣＲ，Ａ２７８０／ＤＤＰ和Ａ２７８０／ＡＤＭ３个耐药细胞亚株，通过体外细胞毒性实验（ＭＴＴ法），观察Ａ２７８０与药物作用后的耐受情况及耐药细胞株对１０种化疗药物的敏感性。结果：三株细胞对ＶＣＲ、ＤＤＰ和ＡＤＭ均有耐药，对１０种作用机制不同的化疗药的耐药指数相差很大。提示：三株卵巢     

急性白血病患者P—糖蛋白和CD34的表达及其临床意义

用免疫细胞化学ＡＢＣ法检测３０例急性白血病患者骨髓单个细胞Ｐ－糖蛋白（Ｐ－１７０）和ＣＤ３４的表达。结果示：Ｐ－１７０或ＣＤ３４表达在急性非淋巴细胞白血病组和急性淋巴细胞白血病组之间的差异不明显（Ｐ〉０．０５）;Ｐ－１７０或ＣＤ３４阳性表达组临床疗效差。与阴性表达组相比差异明显（Ｐ〈０．０５）。提示,同时检测两 中提高对急性白血病的疗效判断。     

胃癌耐药细胞株耐药谱的体外实验

观察胃癌细胞与抗肿瘤药作用后对不同药物耐的耐受情况，方法：胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１在体外分别与长春新碱（ＶＣＲ），５氟尿嘧啶（５－Ｆｕ），阿霉素（ＡＤＭ）及氨甲喋呤（ＭＴＸ）作用，获得ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ，ＳＧＣ７９０１／ＡＤＭ，ＳＧＣ７９０１／５－Ｆｕ及ＳＧＣ７９０１／ＭＴＸ４个耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它们对ＶＣＲ，ＡＤＭ，５－Ｆｕ，ＭＴＸ，顺铂（ＣＤＤＰ）以及丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）的敏     

170例乳腺癌标本药物敏感性分析

检测了１７０例原代乳腺癌细胞常用化疗药物的体外敏感性，发现：（１）乳腺癌细胞对５－氟脲嘧啶（５－Ｆｕ）、丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）、顺铂（ＤＤＰ）及泰素（ｔａｘｏｌ）的高度敏感率（ＨＳＲ）明显高于其它受试药物；（２）药物敏感性与乳癌的病理分型和临床分期、以及雌激素受体（ＥＲ）和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达状况无明显关系；（３）环孢素Ａ（ＣｓＡ）能提高部分耐药乳腺癌对阿霉素（ＡＤＭ）的敏感性。     

P—170糖蛋白,GST—π,TOPOⅡ及PCNA在非小细胞肺癌中的 …

目的 探讨耐药因子：Ｐ－１７０糖蛋白、谷胱甘肽硫传移酶－π、拓扑异构酶Ⅱ以及增殖细胞核抗原在非小细胞癌中的表达及意义。方法 １９９０年１月￣１９９６年１２月取７６例术前未经中，术后经病理证实的ＮＳＣＬＣ患者的病理组织蜡块，用常规免疫组化ＳＰ法，检测Ｐ－１７０糖蛋白、ＧＳＴ－π、ＴＯＰＯⅡＰＣＮＡ的表达。结果 Ｐ－１７０糖蛋白的阳性率、ＧＳＴ－π高表达率、ＴＯＰＯＲ的阴性率ＰＣＮＡ的高表达率分别为５