Ⅱ型碳酸酐酶阻断剂抑制MGC体外骨吸收研究

本文通过分离培养骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养，观察碳酸酐酶阻断剂乙酰唑胺（ａｃｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅ）对骨吸收的影响。结果显示乙酰唑胺抑制多核巨细胞的骨吸收。浓度为１０－６Ｍ时骨吸收陷窝数和骨吸收面积均显著减少（Ｐ＜０．００１）。浓度为１０－８Ｍ时，只对骨吸收面积有显著抑制作用（Ｐ３天＜０．０５，Ｐ９天＜０．００１）。随时间延长，骨吸收陷窝及骨吸收面积呈显著增加（Ｐ＜０．００１）。结果表明乙酰唑胺对多核巨细胞骨吸收有抑制作用，说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收机制方面的相似性。     

阿伦膦酸钠对破骨细胞展平的影响

目的 :以破骨细胞展平面积为功能活性指标 ,探讨不同浓度阿伦膦酸钠对破骨细胞功能的影响。方法 :含破骨细胞的骨髓细胞取自出生 2 4h内的新生大鼠 ,以 1× 10 5/ml的浓度种植于 4个 3 5mm培养碟中 ,其中 1个为对照组 ,3个为含有 10 -11M、10 -10 M、10 -9M 3个浓度阿伦膦酸钠的实验组。每组随机选取 6个破骨细胞为观察对象 ,定时观察拍照 ,并将照片扫描输入计算机计算破骨细胞展平面积。结果 :10 -11M阿伦膦酸钠对破骨细胞展平面积无明显影响 (P>0 .0 5 )。 10 -10 M、10 -9M阿伦膦酸钠降低破骨细胞展平面积 (P <0 .0 1)。 10 -9M比 10 -10 M阿伦膦酸钠降低破骨细胞展平面积的程度大 (P <0 .0 1)。结论 :破骨细胞展平面积是与骨吸收功能密切相关的形态指标。展平面积的测量方法简便、迅速。 10 -10 M以上浓度的阿伦膦酸钠能抑制破骨细胞的功能活性 ,随阿伦膦酸钠浓度增加抑制作用增强     

淫羊藿苷对破骨细胞活性的影响

目的:观察淫羊藿苷对破骨细胞骨吸收及凋亡的影响,探讨淫羊藿苷的抗骨质疏松作用机制。方法:体外分离、培养兔破骨细胞,与玻片及骨磨片共同培养,用10-7、10-6、5×10-6、10-5mol/L浓度的淫羊藿苷刺激破骨细胞,倒置相差显微镜下观察活体细胞、HE染色、TRAP染色及骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色,鉴定破骨细胞,并进行骨吸收陷窝计数和面积测量,吖啶橙染色观察凋亡破骨细胞所占的比例。结果:与空白对照组比较,10-6、5×10-6、10-5mol/L浓度的淫羊藿苷组破骨细胞凋亡率均明显增高,骨吸收陷窝数目、面积明显减少,随浓度增加抑制作用增强,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:淫羊藿苷可诱导破骨细胞凋亡,抑制骨吸收,并随浓度增加抑制作用增强。     

两种不同降钙素对体外培养破骨细胞影响的实验研究

目的 观察不同浓度鳗鱼降钙素与鲑鱼降钙素对体外分离培养的破骨细胞数量和活力的影响.方法 从新生幼兔四肢长骨中机械分离出破骨细胞,分别接种于盖玻片及骨薄片上,加入两种不同种类的降钙素,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察盖玻片上破骨细胞的数量和形态,JD801图像分析软件分析骨片上骨吸收陷窝的面积.结果 两种降钙素的各个浓度组(分别是10-12 mol/L、10-10 mol/L、10-8 mol/L)均对贴壁生长的破骨细胞数量有明显抑制作用,并呈剂量相关性.骨吸收陷窝面积分析结果显示,两类降钙素均对破骨细胞吸收功能有明显抑制作用,呈剂量相关性.无论是盖玻片培养还是骨薄片培养,益钙宁和密盖息各相同浓度组间两两对照比较差异均无显著性 (P>0.05).结论 两种不同种类降钙素对体外培养的破骨细胞数量和骨吸收活性的抑制能力相仿.     

健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CA Ⅱ、CK、MMP- 9mRNA表达的影响

目的 通过观察补肾健脾中药健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达的影响,进一步揭示健骨颗粒有效防治绝经后骨质疏松症的作用机制。方法 用M-CSF和RANKL诱导破骨前体细胞RAW264.7分化为成熟破骨细胞,alamar Blue法检测破骨细胞血清干预的最佳浓度,于破骨细胞培养第7天开始干预,分别用25%浓度的健骨颗粒含药血清和25%浓度的生理盐水血清干预,培养48小时后抽提总RNA,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR)、实时荧光定量SYBR GREEN法检测CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达,并取骨片行甲苯胺蓝染色,计算分析骨陷窝数和骨吸收面积,同时运用氧化显色法检测破骨细胞培养液中TRAP含量,ELISA法检测骨磨片培养液中CTX含量。结果 健骨颗粒含药血清组破骨细胞CA Ⅱ、 CK、MMP-9mRNA表达水平明显低于生理盐水血清组（P <0. 05),含药血清组骨磨片的骨陷窝数和骨吸收面积以及TRAP和 CTx含量均低于生理盐水血清组（P<0.05)。结论 健骨颗粒能有效抑制破骨细胞CAII、CK、MMP-9mRNA表达,降低破骨细胞功能活性,抑制破骨细胞对骨基质的分解,从而抑制骨吸收。     

阿司匹林对大鼠破骨细胞分化成熟和骨吸收活性的影响

目的 研究不同浓度阿司匹林对体外培养大鼠破骨细胞(Osteoclast,OC)分化成熟及骨吸收活性的影响.方法 建立由核激活因子受体配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor,M-CSF)共同作用的大鼠破骨细胞骨髓诱导体系,将雌激素(10-6 mmol/L)和不同浓度的阿司匹林(0.25 mmol/L、0.5 mmol/L、1.0 mmol/L、1.5 mmol/L)分别作用于破骨细胞.诱导培养后分别对破骨细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶(The tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色,观察细胞形态,并计数破骨样细胞数量;将各组破骨细胞接种于骨磨片上,建立破骨细胞-骨磨片活性分析模型,于不同时间点对骨磨片进行光镜和扫描电镜观察,分析计算骨吸收陷窝面积.结果 与正常对照组相比,雌激素组破骨细胞数量和骨吸收陷窝面积低于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着阿司匹林浓度的增加,阿司匹林组TRAP阳性多核破骨细胞数量、骨吸收陷窝面积逐渐减少直至消失,差异有统计学意义(P＜0.05).与雌激素组相比,低浓度阿司匹林组(0.25mmol/L)没有明显差异;但中、高浓度阿司匹林实验组(0.5mmol/L、1.0mmol/L、1.5mmol/L)破骨细胞数量和骨吸收陷窝面积减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 阿司匹林对破骨细胞的分化成熟及骨吸收功能有抑制作用,且呈剂量依赖性,从而具有抗骨质疏松的作用.     

17β-雌二醇对体外培养破骨细胞凋亡及其骨吸收调节作用

目的 观察17β-雌二醇对体外培养破骨细胞凋亡率的影响及其与骨吸收功能的关系。方法 在培养液中加入17β-雌二醇，透射电镜（transmission electron microscopy，TEM）观察破骨细胞内超微结构的改变，流式细胞仪（flow cytometry，FCM）观察不同浓度的17β-雌二醇在不同时间段对破骨细胞凋亡率的影响，同时用扫描电镜（scanning electron microscopy，SEM）观察破骨细胞在骨片上形成骨吸收陷窝数目及面积的变化。结果 17β-雌二醇可增加破骨细胞的凋亡率，这种作用具有剂量、时间依赖效应，同时，破骨细胞在骨片上形成的骨吸收陷窝的数目和面积减少。结论 17β-雌二醇可促进破骨细胞凋亡，从而抑制破骨细胞的骨吸收功能。     

共育体系中成骨细胞和破骨细胞生物学特性观察

目的建立成骨细胞和破骨细胞的体外共育体系,观察在此体系中成骨细胞和破骨细胞生物学特性的变化,探讨成骨细胞和破骨细胞间的相互作用。方法取髂骨松质骨,Ⅱ型胶原酶消化,分次获得成骨细胞和破骨细胞。建立培养上清相通但二者互不接触的成骨细胞-破骨细胞共育模型。以细胞增殖(MTT法)、碱性磷酸酶(ALP)活性代表成骨细胞的成骨活性,以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性、骨吸收陷窝面积代表破骨细胞的破骨能力,检测共育对成骨细胞和破骨细胞生物学特性的影响。结果成骨细胞呈饱满的梭形,ALP染色阳性;破骨细胞呈多核,TRAP染色阳性,可以吸收骨质形成骨陷窝。当成骨细胞与破骨细胞共育后,其MTT法OD值(0.60±0.08)较单独培养时(0.36±0.03)明显提高(P=0.000);其ALP活性(23.37±2.48)u/mg较单独培养时(18.33±0.34)u/mg明显提高(P=0.000)。破骨细胞与成骨细胞共育后,形成骨吸收陷窝的平均面积犤(6.55±0.34)×10-2犦μm2较单独培养时犤(5.15±0.17)×10-2犦μm2明显增大(P=0.000)。结论共育体系中成骨细胞和破骨细胞的功能相互促进,为骨组织代谢的体外研究提供了可靠的模型。     

Effect of estrogen on MMPs mRNA expression of osteoclasts

目的本实验通过体外分离培养兔破骨细胞，观察不同浓度雌激素对兔破骨细胞基质金属蛋白酶MMPmRNA表达的影响。方法体外分离培养出生24h内的新西兰兔破骨细胞，用含有不同浓度17β-雌二醇（0、10^-5～10^-13mol·L^-1）的M199培养液分别作用于破骨细胞，观察不同浓度雌激素及相同浓度雌激素不同时间对破骨细胞活性的影响，采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法观察兔破骨细胞MMP-9 mRNA、MMP-8 mRNA表达状况。结果不同浓度17β-雌二醇对破骨细胞的活性有不同程度的抑制，同时对MMP-9 mRNA的表达有明显抑制作用，以10^-5、10^-6、10^-7mol·L^-1（P〈0．05）最为显著。所有破骨细胞均未表达MMP-8mRNA。结论不同浓度的雌激素呈时间和剂量依赖性地抑制破骨细胞的活性，对兔破骨细胞基质金属蛋白酶表达的调控作用随其浓度变化而不同。     

巴戟天含药血清对成骨-破骨细胞共育体系CAII、NFAT2mRNA表达的影响

目的 探讨不同浓度巴戟天含药血清对体外培养成骨-破骨细胞共育体系中碳酸酐酶II(CAII)、活化T细胞核因子(NFAT2)mRNA表达的影响。方法 取24h内新生SD乳鼠头盖骨分离培养成骨细胞,取5周龄SD大鼠四肢长骨骨髓基质细胞,加入集落细胞刺激因子(M-CSF)和细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导培养破骨细胞。采用ALP染色鉴定成骨细胞,TRAP染色、骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色、电镜等扫描鉴定破骨细胞,体外建立成骨-破骨细胞共育体系,设置高、中、低3种浓度巴戟天含药血清组和对照组,干预3d后提取各组总RNA,应用Real Time PCR(RT-PCR)方法测定各组CAII、NFAT2mRNA表达并进行统计学分析。结果 不同浓度巴戟天含药大鼠血清对成骨-破骨细胞共育体系CAII、NFAT2mRNA的表达均有抑制作用,且其抑制作用表现出一定的浓度依赖性;各组间差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 巴戟天含药血清可抑制成骨-破骨细胞共育体系CAII、NFAT2mRNA表达,从而达到降低破骨细胞分化成熟及骨吸收活性。     

福莫特罗和ICI118551对大鼠成熟破骨细胞骨吸收功能的影响

目的研究选择性β2肾上腺素能激动剂福莫特罗(Formoterol)和阻滞剂ICI118551对体外培养大鼠成熟破骨细胞(osteoclast,OC)功能的影响,探讨β2肾上腺素能受体信号对骨代谢的影响。方法取清洁级出生24h内的SD乳大鼠,长骨干骨髓腔内壁机械分离成熟OC后分别加入不同浓度(10-5mol/L～10-9mol/L)的Formoterol和ICI118551,以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞形态,甲苯胺蓝染色计数骨片上的骨吸收陷窝数目,Image-ProPlus6.0图像软件分析骨片上骨吸收陷窝面积。结果破骨细胞与骨片共培养6天,不同浓度的Formoterol与对照组相比均可增加骨片上OC的骨吸收陷窝数目和面积;随着ICI118551浓度的提高骨片上骨吸收陷窝的数目和面积逐渐减少。结论β2肾上腺素能受体激动剂可促进体外培养OC的骨吸收功能,阻滞剂对OC的骨吸收功能有抑制作用,且呈剂量依赖性。     

阿伦膦酸钠对骨髓生成破骨细胞及骨吸收作用的影响

[目的]研究阿伦膦酸钠对体外培养的小鼠骨髓生成破骨细胞及其骨吸收作用的影响。[方法]收集小鼠骨髓细胞于含有10^-8mol／L的1，25二羟基维生素D3[1，25-（OH）2D3]的α-MEM完全培养基中体外培养，设置不同浓度的阿伦膦酸钠给药，并于培养的第6、9、12d观察记录抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acidphosphatase，TRAP）阳性多核巨细胞[破骨样细胞（osteoclast-like cell，OLC）]生成数，反映破骨细胞生成情况。记数培养12d骨磨片上骨吸收陷窝数及吸收面积，反映骨吸收情况。[结果]随着阿伦膦酸钠浓度的增高，TRAP阳性的细胞数减少，骨吸收陷窝数及面积均减少。[结论]阿伦膦酸钠可抑制骨髓细胞体外培养中破骨样细胞的形成，体外可抑制破骨细胞骨吸收作用。     

17β-雌二醇对体外培养破骨细胞钙离子浓度的影响

目的 :研究 1 7β -雌二醇对体外培养破骨细胞细胞内钙离子浓度 ( [Ca2 + ] i)的影响 ,探讨雌激素对破骨细胞骨吸收功能的调节机制。方法 :体外培养Wistar大鼠破骨细胞 ,用Fluo 3AM钙离子荧光探针进行细胞内钙离子荧光标记 ,激光扫描共聚焦显微镜测定不同浓度 1 7β -雌二醇 ( 1 7βE2 )对破骨细胞钙离子浓度的影响及观察破骨细胞的形态变化与伸展面积。结果 :1 7βE2 可诱发破骨细胞钙离子浓度的升高 ,伴随细胞变小 ,伪足回缩 ,破骨细胞伸展面积从 ( 1 386± 4 3) μm2 /细胞核下降至 ( 40 6± 31 ) μm2 /细胞核。结论 :1 7βE2 可诱发破骨细胞 [Ca2 + ] i的升高 ,细胞变小 ,伪足回缩。 1 7βE2 可能是通过 [Ca2 + ] i途径抑制破骨细胞的骨吸收功能     

淫羊藿苷对小鼠骨髓源性破骨细胞诱导生成及骨吸收功能的影响

目的探讨淫羊藿苷对破骨细胞诱导产生及骨吸收功能的影响。方法用终浓度分别为25ng·mL^-1、30ng·mL^-1、10^-8mol·L^-1的M—CSF、RANKL、1，25（OH）2VitD3体外诱导培养小鼠骨髓源性破骨细胞，在此过程中加入终浓度分别为0、10^-7mol·L^-1、10^-6mol·L^-1、10^-5mol·L^-1的淫羊藿苷。倒置相差显微镜下观察活体细胞、HE染色、TRAP染色及降钙素受体染色鉴定破骨细胞，计数骨片上骨吸收陷窝数及面积，玻片上TRAP阳性多核细胞数。结果加药组随淫羊藿苷浓度的增加，骨片上形成的骨吸收陷窝数及面积，玻片上的TRAP阳性多核细胞数呈量的依赖性的减少，与非加药组比较，10^-5mol·L^-1、10^-5mol·L^-1浓度的淫羊藿苷组，差异有显著性（P〈0．05）。结论淫羊藿苷具有抑制破骨细胞诱导产生及骨吸收功能的作用，并随浓度增加抑制作用增强。     

不同氧环境中破骨细胞的发育分化和功能变化研究

目的 本实验拟观察不同氧浓度下破骨细胞诱导过程中的分化发育,寻找破骨细胞体外培养的适宜氧浓度,为骨转换平衡的修复提供依据.方法 取野生型C57B/L小鼠(2个月龄左右,雄性)骨髓进行破骨细胞的诱导培养.用RANKL(10ng/ml)和M-CSF(10ng/ml)联合的诱导方案,将小鼠骨髓中单核-巨噬细胞系体外诱导为破骨细胞样细胞.将原代破骨细胞置于20%O2、7%O2、2%O2下诱导培养,MOCP5不同氧浓度下普通培养.用MTT法检测MOCP5的增殖变化,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞形成的变化,并进行TRAP阳性细胞计数,用象牙骨片骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色检测破骨细胞骨吸收活性的变化.结果 骨髓中单核-巨噬细胞体外经RANKL和M-CSF联合诱导可分化为多核的破骨细胞样细胞,在诱导第3天细胞开始融合,第5天TRAP染色强阳性,第8天可见象牙骨片上形成圆形、椭圆形、腊肠形等多种形态的骨吸收陷窝.MTT检测显示MOCP5在20%O2培养时一直处于增殖状态,7%O2条件下由增殖期进入平台期,2%O2时增殖缓慢且没有规律.20%O2、7%O2、2%O2培养下形成的TRAP阳性破骨细胞数分别为22±5.97、34±2.97、7±1.39(P<0.05),原代诱导的破骨细胞在20%O2、7%O2、2%O2形成的骨吸收陷窝面积(μm2)分别为3892.28±1642.78、5356.7±1655.6、2573±994.48(P<0.05).结论 体外RANKL和M-CSF联合可将骨髓单核-巨噬细胞诱导成多核的破骨细胞样细胞作为破骨细胞的研究模型.常氧条件下破骨细胞的TRAP阳性细胞数和骨吸收活性均低于7%O2.7%O2培养下的破骨细胞更接近于体内生理状态的破骨细胞.     

辛伐他汀对甲状旁腺素相关肽(PTHrP)诱导小鼠头盖骨骨吸收的影响

[目的]探讨辛伐他汀对体内破骨细胞功能及对局部骨吸收的影响。[方法]采用甲状旁腺素相关肽(parathyroid hormone related peptide,PTHrP)诱导的小鼠头盖骨骨吸收的动物模型体系,分别采用皮下注射辛伐他汀(0、5、10、20 mg.kg-1.d-1)的方法,检测头盖骨X线片的骨吸收面积,组织学用抗酒石炭酸染色(TRAP),检测单位面积破骨细胞的数量。[结果]辛伐他汀在皮下注射(10、20 mg.kg-1.d-1)均可抑制头盖骨的骨吸收和破骨细胞的形成,皮下注射(0、5 mg.kg-1.d-1)则无明显的抑制作用。[结论]辛伐他汀对小鼠局部骨吸收有着明显的抑制作用,对局部骨吸收的治疗有着重要的意义。     

盐酸二甲双胍抑制破骨细胞分化的研究

目的探讨盐酸二甲双胍对破骨细胞分化抑制作用的研究。方法核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导小鼠骨髓巨噬细胞分化成破骨细胞,在诱导过程中加入不同浓度的盐酸二甲双胍。培养7 d后固定,抗酒石酸酸性磷酸酶染色,计数破骨细胞的数量,骨吸收培养板观察骨陷窝面积,Western blot检测盐酸二甲双胍对ERK磷酸化的影响。结果盐酸二甲双胍能抑制RANKL诱导的破骨细胞的形成,并且能减少骨陷窝面积,以及抑制ERK磷酸化。结论盐酸二甲双胍可抑制破骨细胞分化及功能,其机制可能与抑制ERK磷酸化有关。     

Ⅰ型神经纤维瘤病基因型小鼠的破骨细胞功能研究

目的 观察Ⅰ型神经纤维瘤病基因型小鼠的破骨细胞功能变化,探讨Ⅰ型神经纤维瘤病引起骨质疏松的发病机制.方法 选取神经纤维瘤病基因杂合型(Nfl+/-)和野生型(Nfl+/+)小鼠为研究对象,取胫骨干骺端行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,比较两组小鼠骨内破骨细胞含量.体外实验取两种基因型小鼠的骨髓单核细胞,观察在巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和细胞核因子KB受体活化因子配基(RANKL)诱导下的破骨细胞分化能力,测定两组破骨细胞形成、分化、贴附、迁移和骨吸收功能.结果 Nfl+/一小鼠骨内成熟破骨细胞数量比Nn+/+增多,细胞体积明显增大(TRAP阳性区面积占总面积的百分比分别为Nfl+/+,(0.8800±0.0014)%;Nfl+/-,(2.3300±0.0013)%,P<0.01),差异有统计学意义;体外培养的Nn+/-破骨细胞形成增多,(每1×105骨髓单核细胞形成的破骨细胞数分别为Nfl+/+,41.75±13.14:N仃+/-,61.17±18.17,P<0.01)差异有统计学意义;体外诱导培养的破骨细胞的黏附、迁移、骨吸收功能强(黏附细胞数量Nn+/+,53.00±11.08;Nil+/-,108.00±11.67,JP<0.01;迁移细胞数量Nn+/+,88.33±12.40;Nn+/-,239.83±67.77,P<0.01骨吸收面积百分比Nfl+/+.18.37%±0.0367;Nfl+/-,(40.4400±0.1052)%,P<0.01).两者差异有统计学意义.结论 破骨细胞增多,功能增强是Ⅰ型神经纤维瘤病引起骨质疏松的发病机制之一.     

槲皮苷抑制RANKL诱导的破骨细胞形成及骨吸收

[目的]探讨槲皮苷对核因子κB受体激动剂配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)诱导的破骨细胞形成及骨吸收功能的影响。[方法]通过CCK-8法观察不同浓度槲皮苷(0~800μmol/L)干预不同时间(48 h、96 h)对RAW 264.7细胞的生存影响,确定合适的体外用药浓度;利用体外RANKL诱导RAW 264.7细胞形成破骨细胞体系,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色计数评价槲皮苷(200、400μmol/L)对破骨细胞形成和生存的影响;通过骨片吸收实验对骨凹陷和骨吸收面积统计分析评价槲皮苷(200、400μmol/L)3 d内对成熟破骨细胞骨吸收功能的影响;釆用实时定量(Real-Time)PCR技术,检测槲皮苷(200、400μmol/L)对RANKL诱导的破骨细胞特异性基因NFATc1、TRAP和c-fos表达水平的影响。[结果]细胞生存实验发现槲皮苷干预96 h后,槲皮苷(0~800μmol/L)对RAW 264.7细胞4 d内生存未发现显著影响;通过TRAP染色发现200、400μmol/L槲皮苷能显著抑制体外RANKL诱导的破骨细胞形成;通过骨片吸收实验发现200、400μmol/L槲皮苷3d内能显著降低骨吸收面积,提示其抑制成熟破骨细胞骨吸收功能;同时,槲皮苷能呈剂量依赖性抑制RANKL诱导活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells,NFAT)c1、TRAP和c-fos基因表达。[结论]槲皮苷通过抑制NFATc1,TRAP和c-fos的表达,来抑制体外RANKL诱导的破骨细胞形成和骨吸收功能,是一种潜在治疗骨质疏松药物。     

阿司匹林通过抑制大鼠破骨细胞 RANK 表达抑制骨质吸收

目的：研究不同浓度阿司匹林对体外培养大鼠破骨细胞（Osteoclast, OC）RANK（receptor activator of nuclear factor-κB,核因子κB受体活化因子）表达的影响。方法采用RANKL和M-CSF诱导大鼠骨髓单核巨噬细胞破骨分化模型,给予不同浓度的阿司匹林（0.25 mmol/L、0.5 mmol/L、1.0 mmol/L、1.5 mmol/L）和雌激素（雌二醇10-6 mmol/L）处理,而后进行抗酒石酸酸性磷酸酶（ The tartrate-resistant acid phosphatase ,TRAP）染色观察细胞形态特征,扫描电镜观察骨磨片破骨细胞骨吸收陷窝,RT-PCR技术检测破骨细胞表面RANK基因的表达,ELISA法检测RANK蛋白的表达。结果阿司匹林和雌激素都可以使大鼠破骨细胞成熟分化程度和骨吸收活性降低,抑制破骨细胞RANK基因和蛋白的表达,且阿司匹林的抑制作用具有剂量依赖性。结论阿司匹林对大鼠破骨细胞RANK的表达有抑制作用且呈剂量依赖性,从而抑制破骨细胞的成熟分化及骨吸收功能。