HCV RNA定量检测试剂的临床应用

目的:探讨HCV RNA定量检测试剂的临床应用效果。方法:通过和市场上广泛使用的柱提取试剂比实验,对一种丙型肝炎病毒磁珠法核酸提取荧光定量PCR检测试剂的临床使用进行评估。结果:①浓度在5.00E+03～5.00E+06 IU/mL的样本,两种试剂的定量结果与理论靶值均具有很好的对应性,具有较好的重复性和精密度;对于1.00E+03IU/mL以下的样本,磁珠法的定量结果重复性好,定量准确;而柱提取法大部分均未能检出。②对于2种方法检测的339例临床样本,中高病毒载量组柱提取法检测>5.00E+02IU/mL有147例,两种试剂定量结果基本一致,相关性r为0.9413。3 339例临床血清样本中5例样本磁珠法检测为阳性,而柱提取法检测为阴性,P<0.01,二者有显著性差异。这5例样本,丙肝肝炎抗体检测均为阳性。结论:①对于中高病毒载量的样本,两种试剂均具有良好的检测效果;②磁珠法对比柱提取法在低病毒载量区域,灵敏度更高,同时操作相对简单,不易出现污染与脱靶,具有较高的临床应用价值。     

两种HCV RNA荧光定量试剂盒检测丙型肝炎病毒的比较分析

目的 比较分析两种丙型肝炎病毒（HCV）核酸定量检测试剂盒的临床性能.方法 随机抽取63例临床血清样本进行平行检测,分别采用HCV磁珠法试剂和对照试剂检测血清中RNA水平.结果 对照试剂检测63例临床样本中有22例阳性,41例阴性;磁珠法试剂检测63例样本中有27例阳性,36例阴性,两种试剂的阳性样本具较好的一致性（P=0.000）,磁珠法试剂与对照试剂的定量检测结果具有线性相关性（r=0.935,P＜0.05）.结论 两种试剂都可以应用于HCV临床检测,磁珠法试剂具有更高的灵敏度,是一种比较理想的HCV RNA定量检测试剂.     

血清中不同基因型丙型肝炎病毒RNA含量的测定

目的了解血清中不同基因型丙型肝炎病毒HCVRNA的含量。方法用实时荧光定量RTPCR和逆转录型特异性引物PCR同时检测21例费城酒精依赖丙肝患者的血清HCVRNA拷贝数并分析HCV基因型。结果21份血清标本中,有17份为HCVRNA阳性。这些阳性血清的HCVRNA含量波动范围在104.60～106.20拷贝/ml。检测到1a和1b两种HCV基因型,其中1a型7例,RNA平均滴度为105.28±0.75拷贝/ml,1b型(9例)RNA平均滴度为105.28±0.28拷贝/ml。结论定性和定量检测结果有极佳的一致性,酒精依赖丙肝基因型1a和1b血清中HCV含量无显著性差异。     

HCV RNA和抗-HCV联合检测的诊断意义

目的通过丙型肝炎病毒(HCV)与抗-HCV检测结果的比较,探讨两项检测对丙型肝炎诊断的价值。方法采用真空抽滤柱提取法提取HCVRNA,用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测HCVRNA的含量,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测丙型肝炎抗体(抗-HCV)。结果 92份临床血清标本中87份抗-HCV阳性,阳性率为95%,有66份HCVRNA阳性,阳性率为72%,结果显示HCVRNA检出率显著低于抗-HCV(P<0.01)。抗-HCV光密度值(D值)高低与HCVRNA检出率有一定关系,高D值的标本HCVRNA检出率相对较高。结论抗-HCV阳性患者并不是都有病毒复制,HCVRNA才是病毒复制的直接指标。抗-HCVD值与HCVRNA检测结果有一定的关系。     

丙型肝炎病毒RNA与血清标志物的关系

目的 :探讨血清HCVRNA含量与丙氨酸氨基转氨酶 (ALT)、HCV抗体的关系。方法 :采用荧光定量 聚合酶链反应 (FQ PCR)检测 75例HCV抗体复检阳性无偿献血者、9例丙型肝炎患者的HCVRNA含量 ,并与HCV抗体、ALT的检测结果比较。结果 :75例献血者中 ,HCV抗体 (+ )、ALT(-)组HCVRNA阳性率高于HCV抗体 (+ )、ALT(-)组。在 9例丙型肝炎患者中 ,ALT与HCVRNA含量呈正相关 ,且相关性显著 (r =0 72 ,P <0 0 5 )。结论 :在HCV感染的人群中 ,ALT的高低可间接反应HCV在体内的状态 ,这对安全输血和诊断有重要意义     

白色念珠菌总RNA的提取方法

目的：探讨提取白色念珠菌总RNA的方法。方法：白色念珠菌标准菌株经SDA培养基培养后,采用改良的异硫氰酸胍一步法提取总RNA。以此为基础,进行反转录PCR反应。结果：得到的RNA经过紫外分光光度计检测浓度达到0.7g •L^-1以上;琼脂糖凝胶电泳证实为完整、均一的总RNA;将此法提取的RNA反转录成cDNA后经过PCR扩增,可获得清晰的目的条带。结论：该方法简便、快速,提取的总RNA可以用于进一步基因克隆、表达。     

两种核酸提取方法对HCV-RNA检验结果的影响

目的:讨论固相吸附法和氯仿-异丙醇核酸提取方法对丙型肝炎病毒-RNA检验结果的影响。方法:选取106例丙型肝炎患者,随机分为实验组和对照组两组,采集所有患者血液,分离血清。实验组的53例患者,采用固相吸附法提取血清中的核酸。对照组的53例患者,采用氯仿-异丙醇法提取血清中的核酸。提取后的核酸,应用荧光定量PCR技术检测丙型肝炎病毒-RNA的含量,比较两种提取方法对丙型肝炎病毒-RNA检验结果的灵敏度、抗干扰能力和阳性率。结果:经研究比较发现:1对照组血清采用氯仿-异丙醇法提取核酸,稀释1×104倍后,荧光定量PCR可以检测,继续稀释则无法检测。实验组按照固相吸附法提取核酸,稀释1×105倍后,荧光定量PCR可以检测,继续稀释则低于检测限。2对照组核酸荧光定量PCR检测后,阳性35例,阳性率66.04%。实验组检测后阳性44例,阳性率83.02%。两组结果比较P<0.05,有显著性差异。3当血红蛋白浓度为5g/L时,两组抗干扰能力差别不大,P>0.05。当血红蛋白浓度为50g/L时,两组结果比较P<0.05。结论:与氯仿-异丙醇核酸提取方法相比,固相吸附法提取的丙型肝炎病毒-RNA灵敏度、阳性率更高,抗溶血干扰能力更好,具有一定优势。     

荧光定量PCR检测肝病患者血清HBV-DNA的对比研究

[目的]探讨荧光定量PCR检测HBV-DNA的应用价值.[方法]采用荧光定量PCR检测309例不同肝病患者血清HBV-DNA含量,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定乙肝病毒血清免疫标志物HBeAg.[结果]肝硬变、肝癌患者血清HBV-DNA含量低于慢性乙型肝炎患者(x2=10.8,P＜0.01).309例肝病患者的HBV-DNA的阳性率为73.8%(228/309),其中HBeAg阳性组的DNA阳性率为87.7%(136/155),HBeAg阴性组的DNA阳性率为59.7%(92/154),两组的差异具统计学意义(x2=31.3,P＜0.0001).236例慢性乙型肝炎中HBeAg阳性患者血清HBV-DNA含量与HBeAg阴性患者的差异具统计学意义(t=-2.45,P＜0.05).[结论]荧光定量PCR是直接检测HBV-DNA水平,能够更精确直观的反映人体体内病毒复制情况及所带病毒量.     

检测丙型肝炎患者治疗前后血清HCV RNA含量和ALT水平的应用价值

目的探讨丙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)含量和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平与干扰素治疗效果的关系。方法应用荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)测定HCV RNA的含量,速率法测定血清ALT水平,测定了16例丙型肝炎患者α-干扰素治疗前和治疗三个月、治疗六个月的HCV RNA含量和ALT水平。结果16例丙型肝炎患者经治疗三个月和六个月HCVRNA含量和ALT水平均显著下降(P<0.05)。经六个月治疗有11例患者(68.8%)HCVRNA含量很低或为零,ALT正常,视为干扰素完全反应者;另外5例为部分及无效反应者。结论FQ—PCR定量准确,用其测定血清HCVRNA含量合并血清ALT水平一起作为丙型肝炎疗效观察指标,对临床制定合理的治疗方案有重要意义。     

血清丙肝病毒RNA二种提取方法的比较

２４例抗－ＨＣＶ阳性的血清标本，同时以硫氰胍半字符热酚变性方法和蛋白酶ＫＩ肖化法裂解提取丙肝病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＲＮＡ），并应用反转录半字符多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和套式多聚酶链反应（Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ。结果表明，硫氰胍半字符热酚法明显优于蛋白酶Ｋ消化法。前者处理标本的阳性检出率为５８．３％，后者处理标本的阳性检出率为３３．３％（Ｐ＜０．０５）；前者操作步骤简便，在试剂的保存等方面优于后者，故前者更适于临床ＨＣＶＲＮＡ的检测     

不同孕龄母-胎血清白喉破伤风抗体对照研究

目的 揭示不同孕龄胎儿血清抗体与母体血清抗体的关系,掌握不同孕龄胎儿白喉、破伤风免疫力(抗体)的自然消长规律,为白喉和破伤风疫苗的预防接种提供理论依据.方法 ①采集不同孕龄引产、早产、正常产孕妇的母-胎血清,根据不同孕龄分为5组.详细调查血清采集对象的既往史、疫苗接种史;②将采集的母-胎血进行血清分离、编号、冷冻、保存;③进行母-胎血清抗体测定.结果 在检测的5个不同孕龄组中,胎儿白喉和破伤风抗体与母体白喉和破伤风抗体有明显的相关性;各组母胎间、母体间、胎儿间白喉、破伤风抗体阳性率和母体抗体几何平均倒数浓度差异均无统计学意义(P>0.05).结论 进一步加强孕妇免疫状况的监测,实施孕前期人群的相应疫苗强化干预.     

不同方法治疗精液白细胞增多症的比较研究

研究不同方法对精液白细胞增多症的治疗作用，观察其疗效以及近期复情况。方法１２２例精液白细胞增多症患者随机分为４组进行治疗，包括对照组（１），罗红霉素组（２），频繁射精组（３），罗红霉素和频繁射精组（４），瑞姬染色法观察其治疗效果。     

血清HCV RNA与抗—HCV关系研究

目的 研究血清ＨＣＶ ＲＮＡ与抗－ＨＣＶ之间的关系。方法 对５０例抗－ＨＣＶ阳性的丙型肝炎病人，用酶标仪测血清抗－ＨＣＶ ＯＤ值，同时用逆转录－套式－聚合酶链反应检测血清ＨＣＶ ＲＮＡ。结果 ５０例抗－ＨＣＶ阳性丙型肝炎（ＨＣ）患者中３０例ＨＣＶ ＲＮＡ阳性，即６０％的ＨＣ病人存在病毒血症；在不同的抗－ＨＣＶ ＯＤ值范围内ＨＣＶ ＲＮ检出率不等，ＨＣＶ ＲＮＡ检出率随抗－ＨＣＶ ＯＤ值增高而增加（     

两种测定糖化血清蛋白方法的比较

目的 :评价葡萄糖苯脎分光光度法 (简称GPS法 )测定糖化血清蛋白的准确性和特异性。方法 :用GPS法和常用的四氮唑蓝比色法 (简称NBT法 )同时测定临床评价血清中的糖化血清蛋白 ,比较 2种测定方法的重复性、线性、抗干扰能力和临床样本符合情况。结果 :GPS法和NBT法的线性回归系数分别为 0 .96 9和0 .977。 2种方法不同含量样本的批内变异系数均 <5 %。黄疸、脂血及溶血对 2种方法的干扰差异无显著性(P >0 .0 5 ) ,高糖血清 (血糖 >6 .5mmol/L)对GPS法有 5 %～ 10 %的正干扰 ,对NBT法的干扰不明显。 2种方法检测临床样本的相关系数为 0 .895 (P <0 .0 5 )。结论 :GPS法具有良好的线性和重复性 ,同时与NBT法有良好的相关性。     

不同产地金莲花总黄酮含量的比较研究

目的:检测三种不同产地金莲花(河北围场金莲花、大兴安岭金莲花、内蒙古金莲花)中总黄酮的含量。方法:煎煮法对三种不同产地金莲花中的总黄酮进行粗提取,利用聚酰胺色谱柱法纯化总黄酮初提取物,高效液相色谱法测定总黄酮中主要成分荭草苷的含量并进行对比。结果:三种产地金莲花总黄酮含量分别为51.41%、51.24%、51.34%,荭草苷含量分别为31.64%3、1.45%、31.58%。结论:三种不同产地金莲花中总黄酮的含量无明显差别。     

COMPARATIVE STUDY ON TOTAL FLAVONOIDS CONTENT IN TROLLFLOWER FROM DIFFERENT HABITATS

目的:检测三种不同产地金莲花(河北围场金莲花、大兴安岭金莲花、内蒙古金莲花)中总黄酮的含量.方法:煎煮法对三种不同产地金莲花中的总黄酮进行粗提取,利用聚酰胺色谱柱法纯化总黄酮初提取物,高效液相色谱法测定总黄酮中主要成分荭草苷的含量并进行对比.结果:三种产地金莲花总黄酮含量分别为51.41％、51.24％、51.34％,荭草苷含量分别为31.64％、31.45％、31.58％.结论:三种不同产地金莲花中总黄酮的含量无明显差别.     

不同手术入路治疗胸椎结核的对比研究

目的:回顾比较两种手术入路治疗胸椎结核的临床疗效.方法:收集手术治疗的胸椎结核115例,其中经肋横突切除行病灶清除植骨术73例(A组),经胸腔一期病灶清除植骨融合钛板或钉棒系统内固定42例(B组).对两组的手术时间、出血量、复发率、植骨融合、脊髓神经恢复、畸形矫正情况和治愈率等方面进行回顾性分析.结果:随访1.5～3a(平均2a),A组与B组相比,手术时间、出血量、复发率、植骨融合、畸形矫正情况和治愈率等方面存在明显差异.70例有脊髓神经损害的病人,术后均获得明显改善.结论:经胸腔一期病灶清除植骨融合钛板内固定与经肋横突切除病灶清除植骨术相比,术野宽敞,利于操作,易于结扎止血,彻底清除病灶,解除脊髓压迫,可较好矫正脊柱后凸畸形,重建脊柱的稳定性,利于结核病灶的稳定与修复,减少结核复发.但开胸一期病灶清除植骨融合钛板内固定术治疗胸椎结核范围有限,而且内固定材料较贵,增加了病人的经济负担.肋横突切除病灶清除植骨术适用于全胸椎结核的治疗.     

原代培养大鼠肝细胞分离方法的比较研究

目的 探讨体外原代培养大鼠肝细胞的分离方法。方法 以Ｗｉｓｔａｒ大鼠做为肝细胞供体,分别采用直接分离法与胶原酶消化法分离获取肝细胞并原代培养;以台盼蓝染色法测细胞存活率,在位相关倒置显微镜下观察细胞形态变化,ＭＴＴ法测培养细胞活性,并检测不同时期培养上清液中白蛋白的含量。结果 直接分离法获取的肝细胞活性及功能欠佳,而胶原酶消化法所获取的肝细胞形态完整,贴壁良好、活性高、功能强。结论 经胶原酶消化分     

经血液与经皮肤测胆红素浓度两种方法的比较

用经皮肤测胆红素仪(TcBM)测新生儿黄疸读数的同时抽血检测血清胆红素浓度,发现两者之间存在直线相关,其变异系数接近,表明TcBM可用作新生儿黄疸的筛选工具;若将黄疸按病因及光疗与否分组,建立各组的TcBM读数与血清胆红素浓度间的回归线,则TcBM可用来监测黄疸的变化。