维生素C对脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导的单个核细胞HLA-Ⅰ表达抑制作用的影响

目的探讨不同剂量维生素 C(vitamin C,VC)对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)诱导的体外培养人外周血单个核细胞(human peripheral blood mononuclear cells,HPBMC)HLA-Ⅰ表达抑制作用的影响。方法采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)、免疫细胞化学和蛋白印迹(Western blotting)方法研究了不同剂量(25μmol/L 和100μmol/L)VC 预处理对 DON 诱导的 HPBMCHLA-Ⅰ表达抑制作用的影响。结果 FCM 定量检测结果表明,DON 处理组 HPBMC HLA-Ⅰ的表达与正常对照组相比明显降低(FI 值0.88±0.02比1.00±0.03,P<0.05)。25μmol/L 和100μmol/LVC 预处理+DON 组 HPBMC HLA-Ⅰ表达的 FI 值分别为1.15±0.06和1.10±0.02,均明显高于DON 处理组(0.88±0.02,P<0.05)。同时,25μmol/L 和100μmol/L VC 单独处理组 HPBMC HLA-Ⅰ的表达量也均明显高于对照组(FI 值1.28±0.03和1.25±0.05比1.00±0.03),表明 VC 可在一定程度上促进体外培养的 HPBMC HLA-Ⅰ表达(P<0.05)。免疫细胞化学结果表明,与 DON 处理组相比,两种不同剂量 VC 预处理+DON 组 HLA-Ⅰ表达阳性的细胞百分率比 DON 处理组明显增高(70.10%±6.90%和64.50%±5.50%比42.20%±4.30%,P<0.05)。蛋白印迹同样证实了以上结果。结论 VC 可一定程度的拮抗 DON 对体外培养的 HPBMC HLA-Ⅰ表达的抑制作用。     

胡桃醌对宫颈鳞癌Caski细胞增殖及凋亡作用的研究

目的探讨胡桃醌对宫颈鳞癌Caski细胞增殖及其促凋亡作用的影响,并对其促凋亡的机制进行初步探究。方法选取处于对数生长期的Caski细胞将其分为空白对照组和不同剂量(20、40、60、80和100 mol/L)胡桃醌组,共6组。采用MTT法观察胡桃醌对Caski细胞的抑制作用,并计算出半数抑制浓度(IC50=42.4μmol/L),依据IC50确定胡桃醌的有效浓度;电镜观察40μmol/L胡桃醌对Caski细胞凋亡的形态学特征,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达。结果 MTT试验显示,与对照组比较,除20μmol/L的胡桃醌外,其他各浓度组差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);电镜下可见凋亡细胞及凋亡小体,Western blot检测显示与正常对照组相比,40μmol/L胡桃醌Bcl-2表达明显降低而Bax表达明显增加(P0.05)。结论胡桃醌可以抑制Caski的增殖,并诱导细胞凋亡。     

β-榄香烯对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用及对Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨β-榄香烯对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用及对Bax和Bcl-2蛋白表达的影响,以进一步了解其作用机制。方法用含有10%小牛血清的RPMI1640培养基在37℃下,体积分数5%的二氧化碳培养箱中培养人胃癌SGC-7901细胞,以三氧化二砷为阳性对照药物,采用MTT法对比β-榄香烯与三氧化二砷在不同浓度下对细胞增殖的影响,用Western blot法检测Bax和Bcl-2蛋白的表达情况。结果β-榄香烯和三氧化二砷在浓度为20、40以及80μmol/L时,对人胃癌SGC-7901细胞增殖有显著的抑制作用(P<0.05);而β-榄香烯在浓度为40、80μmol/L时,对人胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用较三氧化二砷更加明显(P<0.05)。随着β-榄香烯的浓度逐渐升高,人胃癌SGC-7901中促进细胞凋亡的Bax蛋白的表达上调,而抑制细胞凋亡的Bcl-2蛋白的表达下调。结论β-榄香烯能够有效抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,并且能够通过调控Bax和Bcl-2蛋白表达,从而达到诱导肿瘤细胞凋亡的目的。     

茶多酚对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制作用

目的:探讨茶多酚(teapolyphenols,TP)对氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein,ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcell,HUVEC)凋亡的抑制作用及其机制。方法:实验分为四组:TP(25μg/ml)组、ox-LDL(200μg/ml)+TP(25μg/ml)组、ox-LDL(200μg/ml)组、对照组(等体积溶剂)。采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活性、吖啶橙荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,Westernblotting分析Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白的表达。结果:ox-LDL可明显抑制HUVEC细胞增殖,TP与ox-LDL共同加入后,细胞增殖率明显上升,与ox-LDL组相比差异显著(P<0.05)。ox-LDL可诱导细胞发生凋亡,而TP能减弱其作用。Westernblotting结果:ox-LDL下调HUVEC细胞Bcl-2表达、上调Bax和caspase-3表达,TP与ox-LDL共同加入后,Bcl-2表达升高,Bax和caspase-3表达下降。结论:茶多酚对ox-LDL诱导的HUVEC凋亡具有抑制作用,且与上调Bcl-2蛋白和下调Bax和caspase-3蛋白表达有关。     

石蒜碱诱导结肠癌HT-29 细胞凋亡机制研究

目的 探讨石蒜碱诱导结肠癌HT-29 细胞凋亡及机制。方法 不同浓度的石蒜碱处理体外结肠癌HT-29 细胞,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪和Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡;Real time PCR实验检测Caspase-3、Bcl-2和Bax的mRNA水平;Western blot方法检测Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的水平。结果 48h时石蒜碱对HT-29 细胞IC50为8.878μmol/L;与对照组比较,1.25μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L石蒜碱能诱导细胞凋亡(P<0.05),上调Caspase-3、Bax的mRNA和Caspase-3、Bax蛋白水平,下调Bcl-2的mRNA和Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 石蒜碱能通过调节Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达水平,抑制结肠癌HT-29 细胞生长,诱导细胞凋亡,具有明显的体内抗肿瘤作用。     

β-胡萝卜素和VC对K562细胞c-myc基因表达的影响

目的研究β-胡萝卜素和维生素C对白血病细胞中c-myc癌基因表达的影响.方法体外培养白血病细父胞株K562,分别添加不同浓度的β-胡萝卜素和VC,培养24h、48h、72h后,利用台盼蓝拒染法检测两种微营养素对细胞增殖的抑制作用;同时取作用24h的细胞利用Northern印迹杂交检测细胞中c-myc基因的表达.结果VC(5、10、100μmol/L)对K562细胞增殖具有显著的抑制作用(P＜0.05),而且低浓度的VC(5μmol/L)对K562细胞的抑制作用出现较早.β-胡萝卜素3个剂量组(10、50、100μmol/L)均可抑制K562细胞增殖,具有显著性差异(P＜0.05).VC(5μmol/L)和β-胡萝卜素(50μmol/L)均能诱导K562细胞凋亡.VC(5μmol/L)对K562细胞内c-myc的表达没有明显作用(P＞0.05).β-胡萝卜素(50μmol/L)对K562细胞内c-myc的表达有显著促进作用(P＜0.05).结论VC抑制K562细胞增殖的效应与c-myc的表达无关.β-胡萝卜素可能通过上调c-myc基因的表达,进一步诱导白血病细胞凋亡,从而抑制白血病细胞增殖.     

氟对人成骨样细胞株凋亡的影响

目的研究氟化钠(NaF)对人成骨样细胞株凋亡的影响及其机制。方法四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测定细胞的增殖能力,萤光染剂(Hoechst 33342)染色,DNA梯形(DNA Ladder)琼脂糖电泳,流式细胞仪分析检测细胞凋亡,RT-PCR半定量分析抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax mRNA表达,显色法检测凋亡相关激酶半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的活性。结果NaF(4,6,8×10-3mol/L)可以剂量依赖性地抑制细胞增殖(P<0.01),Hoechst33342染色、琼脂糖电泳和流式细胞仪均可检测到氟对成骨细胞凋亡的诱导作用。RT-PCR结果显示:NaF可以剂量依赖性地抑制Bcl-2 mRNA表达(P<0.01),提高Bax mRNA表达(P<0.01),并显著增强Caspase-3的活性(P<0.01)。结论NaF可以显著的抑制人成骨样细胞株增殖和诱导其凋亡,并可能是通过抑制Bcl-2表达,促进Bax表达和提高Caspase-3活性来诱导人成骨样细胞株凋亡。     

DON对体外培养胃癌细胞SGC-7901、BGC-823凋亡的影响

目的探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对胃癌细胞SGC-7901、BGC-823凋亡的影响及其可能机制。方法体外培养的胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823细胞经100、500、1000μg/LDON处理72h,以流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况及其量效关系,流式细胞术、免疫细胞化学和Westernblot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果FCM定量检测结果表明,DON各处理组细胞凋亡率均高于对照组,且均随DON浓度升高凋亡率相应增加,具有明显量效关系(SGC-7901:r=0.660,P<0.05,n=4;BGC-823:r=0.750,P<0.01,n=4)。FCM、免疫细胞化学和Westernblot结果显示,DON处理后SGC-7901、BGC-823细胞Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下降。结论DON可剂量依赖地诱导体外培养的胃癌细胞SGC-7901、BGC-823凋亡,其机制可能与上调Bax蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达有关。     

亚砷酸钠对人正常肝细胞凋亡及Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响

目的探讨亚砷酸钠对人正常肝(L-02)细胞凋亡及Bax、Bcl-2 m RNA和蛋白表达的影响。方法将L-02肝细胞分别暴露于含0(对照)、50、100、150μmol/L亚砷酸钠的培养基中暴露24 h。采用MTT法检测L-02肝细胞的存活率,采用流式细胞术检测L-02肝细胞凋亡率,采用RT-PCR的方法检测Bax、Bcl-2 m RNA相对表达情况,采用Westernblotting方法检测L-02肝细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞的存活率均较低,凋亡率均较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,L-02细胞的存活率呈下降趋势,而凋亡率上升趋势。与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞中Bcl-2、Bax m RNA和蛋白的表达水平均较高,100μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值也较高,而150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值及50、150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2蛋白/Bax蛋白值均较低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论亚砷酸钠可抑制L-02肝细胞的生长,诱导细胞凋亡的发生;其机制可能与Bcl-2家族的激活有关。     

迷迭香酸拮抗H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡及作用机制

目的研究迷迭香酸(Rosmarinic acid,RA)对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞株ECV304凋亡的抑制作用及其机制。方法以H2O2诱导ECV304细胞凋亡为模型,用MTT比色法检测RA对细胞活性的影响;流式细胞仪检测法和Tunel法检测RA对细胞凋亡率的影响;用Western-blotting检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达情况和第24hcaspase-3活性。结果用0.5mmol/LH2O2孵育细胞24h细胞凋亡明显。不同浓度的RA(1、3、10μmol/L)预处理细胞后,呈浓度依赖性的增加内皮细胞活性,降低细胞凋亡率,并且Bcl-2蛋白表达呈浓度依赖性的上调,而Bax蛋白的表达和caspase-3蛋白活性呈浓度依赖性下降。结论迷迭香酸可以拮抗H2O2诱导的内皮细胞凋亡,其抑制内皮细胞凋亡与激活Bcl-2活性有关。     

Effects of vitamin C on the inhibition of human leucocyte antigen class I (HLA-I) expression of human peripheral blood mononuclear cells induced by deoxynivalenol in vitro

OBJECTIVE: To explore the putative effects of Vitamin C (Vit C) on inhibition of human leucocyte antigen class I (HLA-I) expression of human peripheral blood mononuclear cells (HPBMCs) induced by deoxynivalenol (DON) in vitro. METHODS: The effects of Vit C on the changes of HLA-I expression of HPBMCs induced by DON in vitro were evaluated with cell culture, flow cytometry (FCM), Western blotting and immunocytochemical methods. RESULTS: FCM analysis showed that HLA-I expression of HPBMCs in DON treated cells was significantly lower than that in controls (FI 0.88 +/- 0.02 vs 1.00 +/- 0.03, P < 0.05). As compared with DON group, the HLA-I expressions of HPBMCs in the two Vit C (25 micromol/L and 100 micromol/L) pretreatment groups were all significantly increased (1.15 +/- 0.06 and 1.10 +/- 0.02 vs 0.88 +/- 0.02, P < 0.05). Exposure to different dosage of Vit C alone could dramatically increase the expression of HLA-I of HPBMCs in vitro as compared with that in the normal control (FI for 25 micromol/L and 100 micromol/L Vit C treatment group was 1.28 +/- 0.03 and 1.25 +/- 0.05 respectively, P < 0.05). Immunocytochemical results showed that the percentages of HLA-I positive expression of HPBMCs in Vit C pretreatment groups at different dosages were significantly higher than those in DON group (70.10 +/- 6.90)%, (64.50 +/- 5.50)% vs (42.20 +/- 4.30)%, P < 0.05. Western blotting confirmed the results of FCM and immunocytochemistry. CONCLUSIONS: Vitamin C pretreatment at different dosages could reverse at some extent the inhibitive effects of DON on HLA-I expression of HPBMCs.     

Resveratrol potentiates genistein's antiadipogenic and proapoptotic effects in 3T3-L1 adipocytes

Genistein (G) and resveratrol (R) individually inhibit adipogenesis in 3T3-L1 adipocytes and induce apoptosis in cancer cells. We investigated whether the combination of G and R resulted in enhanced effects on adipogenesis, lipolysis, and apoptosis in 3T3-L1 cells. Preadipocytes and mature adipocytes were treated with G and R individually at 50 and 100 micromol/L (G100; R100) and in combination. Both in preadipocytes and mature adipocytes, G and R individually decreased cell viability dose-dependently, but G100 + R100 further decreased viability by 59 +/- 0.97% (P < 0.001) and 69.7 +/- 1.2% (P < 0.001) after 48 h compared with G100 and R100, respectively. G100 + R100 induced apoptosis 242 +/- 8.7% (P < 0.001) more than the control after 48 h, whereas G100 and R100 individually increased apoptosis only 46 +/- 9.2 and 46 +/- 7.9%, respectively. G and R did not modulate mitogen-activated protein kinase expression by themselves, but G100 + R100 increased Jun-N-terminal kinase phosphorylation by 38.8 +/- 4.4% (P < 0.001) and decreased extracellular signal-regulating kinase phosphorylation by 48 +/- 3.4% (P < 0.001). Individually, G and R at 25 micromol/L (G25; R25) decreased lipid accumulation by 30 +/- 1.7% and 20.07 +/- 4.27%, respectively (P < 0.001). However, G25 + R25 decreased lipid accumulation by 77.9 +/- 3.4% (P < 0.001). Lipolysis assay revealed that neither G25 nor R25 induced lipolysis, whereas G25 + R25 significantly increased lipolysis by 25.5 +/- 4.6%. The adipocyte-specific proteins PPARgamma and CCAAT/enhancer binding protein-alpha were downregulated after treatment with G + R, but no effect was observed with individual compounds. These results indicate that G and R in combination produce enhanced effects on inhibiting adipogenesis, inducing apoptosis, and promoting lipolysis in 3T3-L1 adipocytes. Thus, the combination of G and R is more potent in exerting antiobesity effects than the individual compounds.     

醋酸铅对PC12细胞核转录因子-кB转录活性的影响

目的探讨醋酸铅及NF-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)对核转录因子-kappaB(NF-κB)转录活性的影响。方法将大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)暴露于不同浓度的醋酸铅0、12.5、25、50、100、200、400、800和1600μmol/L,采用四唑盐比色实验(MTT)检测IC50值。用脂质体将pNF-κB-Luc报告基因质粒转染入PC12细胞,转染后的PC12细胞分别暴露于不同浓度的醋酸铅(100、200和400μmol/L)及不同浓度醋酸铅加PDTC100μmol/L,24小时后采用萤光素酶检测试剂盒检测萤光素酶活性。结果用不同浓度的醋酸铅处理细胞24小时,其生长增殖受到不同程度的抑制,且呈现出剂量-反应关系,其IC50值为(533.966±100.830)μmol/L。用不同浓度的醋酸铅处理转染后的PC12细胞24小时,结果显示:PDTC对照组萤光素酶活性较空白对照组降低(P<0.01);铅处理组萤光素酶活性较空白对照组高(P<0.01),且具有剂量依赖性;铅 PDTC联合作用组与PDTC对照组相比,PC12细胞内萤光素酶活性增高(P<0.01)。结论醋酸铅可诱导PC12细胞的NF-κB转录活性升高。     

镉对人胚肾细胞凋亡和血红素氧合酶-1表达的影响

目的探讨镉对人胚肾细胞(HEK239T)凋亡和血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响。方法 MTT法测定细胞增殖活性,流式细胞仪检测镉诱导人胚肾细胞凋亡,应用逆转录多聚酶链反应 (RT-PCR)及Western免疫印迹法检测镉对人胚肾细胞HO-1 mRNA及蛋白表达的影响。结果 5．0、 10．0、20．0、40．0μmol／L CdCl2诱导人胚肾细胞后,凋亡率分别为11．90％±0．28％、9．27％±1．73％、 9．79％±0．67％、8．97％±1．60％,均明显高于对照组(6．69％±0．46％),差异有统计学意义(P< 0．01)。10～40μmol／L CdCl2均可高度诱导人胚肾细胞HO-1表达,随着剂量增高缓慢上升并达到平台期,随时间的延长略有降低。结论镉可诱导人胚肾细胞凋亡,上调HO-1的表达。     

N-Acetylcysteine,vitamin C and vitamin E diminish homocysteine thiolactone-induced apoptosis in human promyeloid HL-60 cells

We showed previously that homocysteine thiolactone (HcyT) is a potent inducer of apoptosis in HL-60 cells. In the present study, the role of some radical scavengers (N-acetylcysteine, vitamin C, vitamin E and folate) on the reduction of HcyT-induced apoptosis was investigated. Preincubation of HcyT-treated HL-60 cells with vitamin C (Vit C; 100 micro mol/L) or vitamin E (Vit E; 100 micro mol/L) for 2 h significantly reduced the proportion of apoptotic cells with hypodiploid DNA contents or with membrane phosphatidylserine exposure, and attenuated the apoptotic DNA fragmentation. Preincubation of cells with N-acetylcysteine (NAC; 5 mmol/L) for 2 h significantly reduced HcyT-promoted apoptosis measured by membrane phosphatidylserine exposure only. The reduction of HcyT-induced apoptosis by NAC, Vit C or Vit E occurred simultaneously with a significant decrease in intracellular H(2)O(2) levels and reduced caspase-3 enzymatic activity. In contrast, folate had no H(2)O(2) scavenging capacity and did not suppress caspase-3 activity 6 h after HcyT treatment, although folate exhibited antioxidant behavior toward superoxide anions, hydroxyl radicals and peroxynitrite. Preincubation of cells with folate (10 micro mol/L) for 3 d did not affect the extent of HcyT-promoted apoptotic damage. Taken together, our findings suggest that antioxidant pretreatment with NAC, Vit C or Vit E exerts more beneficial effects than folate on reducing apoptotic cell damage induced by homocysteine thiolactone.     

褪黑素对溴氰菊酯致大鼠海马神经细胞Bcl-2和细胞色素C表达及细胞凋亡率的影响

目的 观察褪黑素(MT)对溴氰菊酯(DM)引起的大鼠大脑海马脑神经细胞凋亡率、Bcl-2蛋白表达水平及细胞色素C表达的影响.方法 40只Wistar雌性大鼠随机分为5组:橄榄油对照组(1 ml/kg橄榄油)、单纯DM组(12.5 mg/kg DM)、DM+MT25组(25.0 mg/kg MT+12.5mg/kg DM)、DM+MT50组(50 mg/kg MT+12.5 mg/kg DM)、DM+MT100组(100 mg/kg MT+12.5 mg/kg DM),每组8只,一次性给药24 h后,每组大鼠分别断头处死.应用流式细胞术测大鼠海马细胞凋亡率;应用免疫组化和计算机显微图像分析技术测大鼠海马神经细胞中Bcl-2蛋白表达水平和细胞色素C的表达.结果 DM+MT25、DM+MT50、DM+MT100各组Bcl-2蛋白表达水平分别为(45.26±3.84)、(39.40±4.04)、(34.40±4.52),明显低于对照组(59.33±4.03),但明显高于单纯DM组(20.73±3.34),差异均有统计学意义(P＜0.05);DM+MT25、DM+MT50、DM+MT100组的细胞色素C表达水平分别为(20.53±3.17)、(28.73±2.61)、(28.66±4.82),DM+MT50、DM+MT100组细胞色素C表达水平明显高于对照组,3个MT剂量组均明显低于对单纯DM组,且差异均有统计学意义(P＜0.05).3个MT剂量组神经细胞凋亡率分别为(15.00±1.77)%、(14.88±1.84)%、(11.75±1.93)%,明显低于单纯DM组(23.06±3.63)%,但高于对照组(5.69±1.37)%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MT能够抑制DM引起的大鼠海马神经细胞中Bcl-2蛋白水平的降低和细胞色素C的升高,抑制细胞凋亡率,MT可能通过改变蛋白的表达水平和抗凋亡能力发挥脑保护作用.     

NS-398对肝癌细胞系HepG2环氧合酶-2表达的影响

目的 研究环氧合酶-2(COX-2)抑制剂氮-2,环己氧-4,硝基苯-甲基磺胺(NS-398)对肝癌细胞株HepG2细胞体外抗肿瘤作用,探讨其抗癌作用的分子机理.方法 分别用100、200、300、400μmol/L NS-398处理HepG2细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定肿瘤细胞增殖抑制率,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期的改变及凋亡百分比的变化,用Westen blotting检测COX-2蛋白的表达,用放射免疫测定法检测NS-398对HepG2细胞前列腺素E2(PGE2)释放水平.结果 NS-398呈剂量依赖性的方式抑制HepG2细胞增殖,并诱导其凋亡,细胞周期分析表明,随着浓度增大,S期细胞明显减少,有G1期细胞累积现象,24 h时半数有效剂量(IC50)为300μmo/L.NS-398明显抑制COX-2的活性和表达.随着浓度的增加,其COX-2蛋白表达逐渐降低,100、200、300、400μmol/L NS-398组灰度值分别为1515.1±127.2、1023.5±108.4、691±94.3和493.6±86.6,与对照组1822±157.4相比差异有统计学意义(t值分别为3.736、1.623、1.810、2.587,P<0.01).NS-398可明显抑制HepG细胞PGE2释放水平,其吸光度值(A值)分别为0.70±0.02、0.48±0.02、0.29±0.01和0.18±0.01,与对照组比较0.03±0.01差异有统计学意义.结论 NS-398对肝癌细胞增殖有抑制作用并诱导其凋亡,可能与细胞G1期阻滞以及通过抑制COX-2活性,抑制COX-2下游产物PGE2表达有关.     

Diallyl disulfide (DADS) induces the antitumorigenic NSAID-activated gene (NAG-1) by a p53-dependent mechanism in human colorectal HCT 116 cells

Garlic is appealing as an anti-carcinogenic agent due to its ability to induce apoptosis in vitro and inhibit the formation and growth of tumors in animals in vivo. Diallyl disulfide (DADS) is a constituent of garlic that suppresses neoplastic cell growth and induces apoptosis. We examined the effects of DADS on various cancer cell lines to better understand its effect on apoptosis and apoptosis-related genes. The nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID)-activated gene (NAG-1) has proapoptotic and antitumorigenic activities and is upregulated by anticancer agents such as NSAIDs. In this study, human colorectal HCT-116 (wild-type p53), HCT-15 (p53 mutant) and human prostate PC-3 (p53 mutant) cells were exposed to DADS. DADS inhibited cell proliferation in all cell lines albeit to a lesser extent in HCT-15 and PC-3 cells at 11.5 and 23 micromol/L. In HCT-116 cells, DADS induced p53 and NAG-1 in a dose-dependent manner and the induction of p53 preceded that of NAG-1. In HCT-116 cells, NAG-1 protein expression was increased 2.4-fold +/- 0.6 at 4.6 micromol/L and 6.1-fold +/- 1.7 at 23 micromol/L DADS, whereas p53 was induced 1.5-fold +/- 0.1 and 2.3-fold +/- 0.4. DADS did not induce NAG-1 or p53 in p53 mutant cell lines; however, NAG-1 expression was induced by sulindac sulfide. HCT-116 cells treated with 4.6 and 23 micromol/L DADS resulted in a 1.9- and 2.9-fold increase in apoptosis, respectively. In contrast, 23 micromol/L DADS induced apoptosis only 1.8-fold in HCT-15 cells and not at all in PC-3 cells. Thus, DADS-induced apoptosis and NAG-1 protein expression appear to occur via p53.     

二硫化碳对大鼠支持细胞凋亡及FasL表达的影响

目的探讨二硫化碳对离体培养支持细胞凋亡及FasL基因表达的影响。方法以0、0．36、0．72、1．44μmol/ml浓度的二硫化碳作用于离体培养的大鼠支持细胞24 h后,应用噻唑蓝(MTT)法检测支持细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测凋亡相关基因FasL的表达。结果二硫化碳处理后的支持细胞存活率随作用浓度的增加而下降,当≥1．44μmol/ml浓度时,细胞存活率(73．34%±1．39%)明显下降,与溶剂对照组(99．98%±5．48%)比较,差异有统计学意义(P＜0．05)。随二硫化碳浓度升高,细胞凋亡率增加,当浓度≥1．44μmol/ml时,支持细胞凋亡率(7．93%±0．43%)明显升高,与溶剂对照组(3．63%±0．53%)比较,差异有统计学意义(P＜0．05)。随二硫化碳浓度增加,凋亡相关基因FasL表达量亦明显增加。结论二硫化碳对离体培养支持细胞具有细胞毒性作用,可导致细胞凋亡率升高,凋亡相关基因FasL高表达。     

叶酸、维生素B6、B12对脑缺血大鼠学习记忆的影响

目的研究叶酸、维生素B6（VB6）和B12（VB12）对局灶性脑缺血大鼠血浆同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）水平和学习记忆能力的影响。方法sD大鼠按体重随机分为假手术组（Sham OP）、大脑中动脉闭塞模型组（MCAO）、大脑中动脉闭塞＋叶酸组（MCAO＋FA）和MCAO＋复合维生素（叶酸、VB6和VB12）组（MCAO＋CV）,补充前、后和缺血后分别检测大鼠血浆Hcy浓度,缺血后进行神经功能评分,测定学习记忆能力。结果大鼠脑缺血后血浆Hcy浓度MCAO＋FA组（6．92±1．04）μmol／L和MCAO＋CV组（5．49±1．00）μmol／L低于Sham OP组（9．33±1．11）μmol／L和MCAO组（10．90±2．03）μmol／L（P〈0．05）,且MCAO＋CV组低于MCAO＋FA组（P〈0．05）;神经功能缺失评分MCAO＋FA组（1．75±0．46）和MCAO＋CV组（1．38±0．52）以及Y型迷宫中受电击次数MCAO＋FA组（123．50±39．77）和MCAO＋CV组（86．25±21．39）低于MCAO组神经功能缺失评分（2．62±0．52）和电击次数（173．25±46．32）（P〈0．05）,而记忆正确次数MCAO＋CV组（3．75±0．42）高于MCAO组（2．12±0．45）（P〈0．05）。结论叶酸能降低脑缺血大鼠血浆Hcy浓度,增强脑缺血大鼠学习记忆能力,改善神经功能,且联合补充VB6和VB12优于单独补充叶酸。