重组人骨形成蛋白用于狗直接盖髓的实验研究

目的：观察重组人骨形成蛋白-2（recombinant human bone morphogenetic protein-2，rhBMP-2）对修复性牙本质形成的诱导作用。方法：用rhBMP-2与痉基磷灰石（HA）复合，用于狗恒牙人为穿髓后直接盖髓，并与氢氧化钙直接盖髓对照，通过组织病理观察修复性牙本质的形成。结果：rhBMP-2-HA盖髓术后3周，穿髓孔下方可见形成的修复性牙本质团块，团块周围有类造牙本质细胞；术后6周，穿髓孔下方可见完整的修复性牙本质桥；术后12周，修复性牙本质桥增厚而且致密，牙本质桥近髓可见排列规则的成牙本质细胞。氢氧化钙盖髓对照组，术后3周，穿髓孔下方可见钙质团块形成，有炎症细胞浸润；术后6周，可见有修复性牙本质形成，但不连续；术后12周，修复性牙本质形成但较rhBMP-2-HA盖髓后形成的修复性牙本质桥薄而且疏松。结论：rhBMP-2-HA可以直接诱导牙髓细胞分化为成牙本质细胞，形成修复性牙本质。     

骨形态发生蛋白3基因转染成纤维细胞诱导成骨的实验研究

目的 通过基因转染方法，使成纤维细胞NIH－3T3细胞具有合成及分泌骨形态发生蛋白（BMP）、体内诱导新骨生成的能力。方法 定向克隆法将BMP3基因构建于PcDNA3表达载体，脂质体介导法转染NIH－3T3细胞，G418筛选获得稳定转化体，Northern印迹法检测转染细胞有无BMP3基因表达，免疫组织化学检测转染细胞内的BMP3蛋白合成，钙钴法染色不同时相的转染细胞碱性磷酸酶并作图像分析。将转染细胞注入裸鼠肌袋，观察注射后第4周诱导新骨生成情况。结果 转染细胞体外培养6周Northern印迹法检测到有明显的BMP3基因表达，免疫组织化学染色见转染细胞培养筛选5－8周后细胞浆内有染成黄色的BMP3蛋白质颗粒出现，图像分析蛋白质生成在转染后第6周达高峰。钙钴法碱性磷酸酶染色及图像分析示转染细胞内碱性磷酸酶明显高于同期对照组，两组间有显著性差异（P＜0．01）。被转染NIH－3T3细胞裸鼠肌袋诱导成骨实验见注射后4周注射部位有大量软骨细胞出现，并伴有骨小梁生成。结论 通过基因转染方法可以使NIH－3T3细胞具有合成及分泌内源性BMP的能力，合成及分泌的BMP具有良好的生物活性，肌袋实验具有诱导成骨作用。但是，由于基因治疗的某些不可控性因素，其安全性仍有待于进一步研究。     

人骨形态形成蛋白的纯化及其诱导成骨的研究

本实验采用差示沉积、超滤及羟基磷灰石柱层析法,提取和纯化了人骨基质内骨形态形成蛋白,得到纯化的人骨形态形成蛋白,分子量为17000U(约17000道尔顿).以C_3H小鼠147只为实验动物,纯化的骨形态形成蛋白的诱导成骨率为100％。     

天然型网孔羟基磷灰石复合骨形成蛋白盖髓治疗的对照研究

目的　探讨一种新型的盖髓剂 ,以达到活髓保存治疗的理想效果。方法　应用天然型网孔羟基磷灰石复合骨形成蛋白对 10 0例 ,10 4颗牙进行盖髓治疗 ,随访 1年。根据X线片和临床症状 ,评价其疗效 ,并与氢氧化钙组对照。结果　天然型网状羟基磷灰石复合骨形成蛋白用于前牙直接盖髓、前牙间接盖髓、后牙直接盖髓、后牙间接盖髓治愈率分别为 88.89 %(8/ 9)、10 0 .0 0 %(7/ 7)、90 .91%(2 0 / 2 2 )、98.18%(5 4/ 5 5 )。临床疗效明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　天然型网孔羟基磷灰石复合骨形成蛋白是活髓保存治疗中理想的盖髓剂。     

骨形态发生蛋白的提取,纯化及诱导成骨的实验报告

目的 提取，纯化牛骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）并验证其异位诱导成骨的活性。方法采用生物化学方法提取并纯化出ＢＭＰ，植入家兔肌肉和豚鼠颅骨进行动物实验研究，结果植入ＢＭＰ组１４ｄ即有成纤维细胞转化为软骨细胞；第２１，２８天形成软骨和骨组织，成年豚鼠颅骨缺损修复过程中，植入ＢＭＰ后第２８天即有骨痂生成，８４ｄ时颅骨缺损修复完整，结论ＢＭＰ有明显的异位诱导骨形成作用。     

骨形成蛋白诱导成骨性分化的实验研究

通过动物实验和细胞培养，观察到骨形成蛋白在体现人诱导异位成骨，在体外诱导人胚骨间质细胞、动脉瘤样骨囊是质主其转化成软骨分化的效应，本实验为解释临床上动脉瘤样骨囊蹲点 骨肉瘤的伴发提供了一定的实验依据。     

骨形态形成蛋白-7在实验性肾间质纤维化大鼠模型中作用的研究

目的：观察单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型中骨形态形成蛋白-7(BMP-7)在肾小管间质中的表达部位、动态变化及其与肾间质纤维化的关系．方法：60只Wistar大鼠随机分为正常大鼠组、假手术组和单侧输尿管梗阻组．分别于术后1d、3d、7d、14d处死大鼠．采用RT-PCR检测BMP-7mRNA、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达水平．用免疫组化检测肾小管间质中BMP-7、TGF-β1蛋白的定位和表达及其与输尿管梗阻后肾间质损害的关系．结果：与时照组相比，BMP-7mRNA于术后第1天即出现表达下降并随梗阻时间延长递战，而TGF-β1mRNA则随着梗阻时间延长增加(P均＜0.05)．BMP-7蛋白在对照组中高度表达，髓质区表达明显高于皮质区，主要分布在肾小管及肾间质，肾小球内基本无表达．在梗阻组BMP-7蛋白表达呈进行性下降，而TGF-β1蛋白表达则逐渐增加(P均＜0.01)．结论：BMP-7蛋白于肾小管间质病变早期即出现表达下调，早于肾间质纤维化的出现，且随间质病变进展进行性下降．BMP-7表达下调可能参与介导肾小管间质损害的发生发展。     

重组人骨形成蛋白-2复合材料间接盖髓的组织学研究

目的通过动物实验观察重组人骨形成蛋白-2复合材料的盖髓效果。方法用重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)氧化锌复合材料(A组)、rhBMP-2(B组)、氢氧化钙(C组),将其分别衬洞于已备V类洞底的狗牙上,在规定的时间内给狗口服四环素,四环素的沉积物作为新形成修复性牙本质的标记物。在第95天拔除实验牙,制作横切磨片,在荧光显微镜下观察修复性牙本质形成情况。冠髓制作成常规切片,在光学显微镜下观察。结果三组材料盖髓后形成修复性牙本质的量A组明显高于B组和C组(P<0.05);在实验第60天时,形成修复性牙本质的总量A组为0.668mm,B组为0.487mm,C组为0.224mm。在第90天时,A组为0.834mm,B组为0.609mm,C组为0.255mm。结论rhBMP-2复合材料具有良好的可操作性,能有效地诱导修复性牙本质的形成,且对牙髓的刺激性小。     

异种骨基质明胶(BMG)诱导成骨活性的实验研究

本文按着 Urist 方法制备了人、兔、猪和羊四种骨基质明胶(BMG),分别将其植入25只成年 SD 大鼠的胸部和股部肌肉,在手术的第2、4、6和8周后,通过光学显微镜观察各种 BMG 在肌肉内的免疫排斥反应和诱导成骨活性。结果表明:异种 BMG 具有一定的诱导成骨能力。但在 BMG 周围亦出现程度不同的排斥反应。本文认为,进一步降低 BMG 的抗原性,提高其诱导成骨活性,对于异种 BMG的临床应用将具有重要意义。     

骨形态生成蛋白复合材料修复颅骨大面积缺损的实验研究

本文将猪骨形态生成蛋白（ｐＢＭＰ）与兔骨基质明胶（ｓＢＭＧ）及羟基磷灰石（ＨＡ）相结合,制成ＢＭＰ／ＢＭＧ和ＢＭＰ／ＨＡ复合材料,将其植入３２只家兔颅顶骨缺损处,植入后１、２、４、８周进行Ｘ线摄片和组织学检查。结果表明ＢＭＰ／ＢＭＧ的成骨能力大于ＢＭＰ／ＨＡ。认为ＢＭＧ来源丰富,制作简单,吸收快,比ＨＡ更适合作ＢＭＰ的载体。ＢＭＰ／ＢＭＧ是目前较理想的骨移植材料。     

重组人骨形态发生蛋白-2和Pluronic F-127修复兔全厚关节软骨缺损的实验研究

目的：研究重组人骨形态发生蛋白－2（rhBMP-2)/Pluronic复合物对兔全厚关节软骨缺损的修复作用。方法：选用健康成年新西兰大白兔27只。在每只兔双侧股骨的髌股关节面中心各造成一直径为3．5mm的软骨缺损，深度以穿透软骨至刚好出现渗出血为宜。随机将兔分为A、B、C三组。A组（18膝）；注入Pluronic凝胶，B组（18膝）：注入rhBMP-2/Pluronic复合物。C组（18膝）：空白对照组，不作任何处理，术后4、8、12周分批处死动物，取材，对修复组织进行大体，组织学和扫描电镜观察。结果：B组组织修复，质量好，4周缺损区完全填充，8周、12周与周围正常软骨组织的外观相近；光镜下见近乎正常关节软骨组织；扫描电镜下见形态成熟的透明软骨细胞和Ⅱ型胶原。A组和C组的修复质量差，4周缺损仍有浅表凹陷，8周、12周再生组织韧，缺乏弹性，表面粗糙，不规则；光镜下以纤维组织修复为主，扫描电镜下多为纤维软骨和纤维组织。Pluronic平均降解时间为6－8周，与正常软骨的再生速度基本一致。A组和C组的组织学评分在各个时期无显著性差异（P＞0．05）。而B组和C组在各个时期均存在显著性差异（P≤0．001）。结论：rhBMP-2能促进和改善关节软骨的修复。Pluronic可作为rhBMP-2安全有效的载体，二者复合体的应用为治疗大面积，不规则的关节软骨缺损提供了一种无创伤性的新方法。