水通道蛋白-9和Caspase3在胎膜组织中的表达及与羊水过少的相关性研究

目的 探讨水通道蛋白-9(AQP-9)和凋亡蛋白Caspase3在羊水过少产妇和羊水量正常的产妇胎膜中的表达差异。方法 采用免疫组化方法(SP法)分别检测30例羊水过少和30例羊水量正常产妇胎膜组织中AQP-9和Caspase3的蛋白表达水平,并分析这两种蛋白的表达强度。结果 AQP-9和Caspase3蛋白在实验组与对照组产妇的胎膜中均有阳性表达。实验组胎膜中的AQP-9蛋白表达水平明显比对照组低,Caspase3的表达却明显比对照组高,而两者的表达差异均有统计学意义(P＜0.05);同时AQP-9与Caspase3在羊水过少组胎膜细胞中的表达却呈负相关(r=-0.72,P＜0.05)。结论 羊水过少组孕妇胎膜中AQP-9蛋白的低表达与Caspase3蛋白的高表达,提示AQP-9和Caspase3在产妇胎膜中的异常表达可能是羊水过少发生的原因之一。     

Caspase-3和Bcl-2蛋白在产时发热胎盘组织中的表达及其与新生儿脑病相关性

目的 研究产时发热患者胎盘组织中Caspase-3和Bcl-2的表达及其与新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的相关性,进一步探讨产时发热导致HIE的可能机制,为其防治提供新路径.方法 收集产时发热患者胎盘组织60例(HIE组30例,非HIE组30例)和正常孕妇组30例,采用免疫组织化学染色法检测胎盘绒毛滋养层Caspase-3和Bcl-2蛋白的表达,通过免疫组化积分判断其表达高低.结果 HIE组胎盘滋养层Caspase-3和Bcl-2表达的免疫组化积分分别为5.05±0.78、1.54±0.43,非HIE组分别为3.03±1.36、3.51±1.59,正常孕妇组分别为2.87±0.68、4.03±0.64.HIE组Caspase-3的表达明显高于非HIE组和正常组(JP＜0.05),而Bcl-2则明显低于非HIE组和正常组(P＜0.05).Caspase-3与Bcl-2在HIE组胎盘组织中的表达呈负相关(r=0.79,P＜0.05).结论 Caspase3在HIE组胎盘组织中的表达增高,Bcl-2的表达降低,两者在胎盘组织中的表达平衡失调可能是HIE发生的原因之一.     

脐血及胎盘中TXA2、PGI2、TXA2R 异常表达与羊水过少的相关性研究

目的 探讨血栓素A2(TXA2和前列环素(PGI2在羊水过少发病中的作用.方法 用放免法检测羊水过少和正常妊娠各30例产妇脐血中TXB2和6-keto-PGF1α浓度,计算TXB2/6-keto-PGF1α比值,并用免疫组化方法检测胎盘绒毛血管内皮细胞血栓素A2受体(TXA2R)蛋白含量.结果 研究组脐血TXB2浓度明显增高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);研究组6-keto-PGF1α浓度与对照组相比亦有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05);研究组TXB2/6-keto-PGF1α明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).羊水过少组胎盘绒毛血管内皮细胞中TXA2R阳性表达(22/30,73.3%)明显高于对照组(11/30,36.7%),两组相比差异有显著性(P<0.05).并且羊水过少组TXA2R阳性表达以强阳性为主.结论 脐血中TXA2浓度异常升高及TXA2/PGI2比例失衡与羊水过少发病有关.     

人胎盘滋养细胞凋亡与其调控蛋白Bcl-2及Bax的研究

目的 探讨人妊娠各期胎盘滋养细胞凋亡与其调控蛋白Bcl-2及Bax之间的关系.方法 采用TUNEL法检测人妊娠各期胎盘滋养细胞的凋亡情况,采用免疫组织化学方法检测人妊娠各期胎盘滋养细胞层Bcl-2,Bax的表达情况.结果 细胞凋亡在早、中、足月和过期妊娠4组胎盘滋养层中表达随孕期的增长逐渐增多,差异有显著性(P＜0.01).Bcl-2,Bax在4组胎盘滋养层的表达及Bax/Bcl-2值均随孕期的增长逐渐增强(P＜0.05).结论 在人的整个妊娠时期中,胎盘滋养细胞凋亡与Bax/Bcl-2的比值正相关.此外,Bcl-2和Bax虽单独具有调控细胞凋亡的功能,但其相互间的比例对细胞凋亡的影响更为重要.     

Bcl-2、Bax、Fas在妊娠其糖尿病胎盘绒毛细胞中表达及意义

目的 定量检测妊娠期糖尿病(GDM)、妊娠期糖耐量异常(GIGT)及正常孕妇胎盘绒毛细胞的凋亡基因Bcl-2、Bax、Fas在其中的表达情况,探讨其表达对GDM病理生理异常改变及妊娠结局的影响.方法 采用免疫组化法和图像分析技术测定GDM(A组)、GIGT(B组)和同期分娩的正常妊娠孕妇(C组)胎盘绒毛细胞中Bcl-2、Bax、Fas的表达.结果 (1)Bcl-2、Bax、Fas均表达于3组孕妇胎盘绒毛细胞.(2)Bcl-2在A、B组孕妇胎盘绒毛细胞中表达比正常组减少,有统计学意义, p<0.01;Bax、Fas在A、B组孕妇胎盘绒毛细胞中表达高于正常组,有统计学意义, p<0.01.(3)A、B组孕妇FGR、羊水过少发生率比正常妊娠组高, p<0.01;同时因胎儿窘迫、羊水过少剖宫产率升高, P<0.01,均有统计学意义.结论 Bcl-2、Bax、Fas在胎盘中异常表达导致胎盘细胞过度凋亡可能与GDM发病有关,从而导致不良妊娠结局.     

刚地弓形虫RH株对小鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响

目的 通过研究刚地弓形虫强毒株RH株对体外培养的孕期小鼠胎盘滋养层细胞凋亡的影响,初步探讨不同毒力虫株引起病理妊娠的机制.方法 将小鼠胎盘滋养层细胞分别接种于不同细胞培养瓶,对照组加入DMEM培养基孵育,实验组加入相同体积不同数量(2×106/ml、4×106/ml、8×106/ml)弓形虫速殖子培养2、4、8 h,Annexin-V-FITC/PI染色细胞后上流式细胞仪检测各个时间点细胞凋亡率变化;荧光显微镜观察细胞形态改变情况;Western blot分析凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达或活性.结果 流式细胞仪检测弓形虫感染后的滋养层细胞凋亡率较对照组有下降趋势(P<0 05),呈量效依赖性,弓形虫数量8×106/ml实验组8 h凋亡率最低,为(15.81±0.19)%;荧光显微镜观察到8 h不同数量实验组滋养细胞凋亡形态改变情况,各组均有典型的早期凋亡细胞:细胞膜着绿色,细胞核拒染.随着弓形虫感染数量增加,凋亡细胞数目有所减少.Western blot 检测刚地弓形虫RH株作用于滋养层细胞8 h后实验组的Bax、Bcl-2蛋白表达较对照组分别有明显的降低与升高(P<0.05).结论 刚地弓形虫RH株可抵抗体外培养的孕期小鼠滋养细胞正常凋亡,其机制可能与滋养细胞Bax表达下调和Bcl-2表达上调有关.     

胎儿生长受限胎盘滋养细胞凋亡相关因子P53、bcl-2、bax的表达

目的探讨胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)患者胎盘滋养细胞凋亡相关因子P53、bax、bcl-2的表达及意义。方法收集2014年3月～2017年6月大连市妇女儿童医疗中心剖宫产分娩患者的胎盘,其中正常妊娠晚期(对照组)、FGR(实验组)各50例。应用免疫组化S-P法检测两组胎盘滋养细胞凋亡相关因子P53、bcl-2、bax的表达。结果实验组bax蛋白表达明显高于对照组,差异有显著性(P0.05),实验组bcl-2蛋白表达低于对照组,差异有显著性(P0.05)。P53蛋白在正常妊娠晚期、FGR组均未见表达或仅有个别细胞表达,差异无显著性(P0.05)。结论 FGR患者胎盘滋养细胞凋亡是非P53依赖的凋亡,凋亡相关因子bax、bcl-2蛋白可能共同介导FGR胎盘滋养细胞的凋亡。     

Study on apoptosis and expression of modulin Bcl-2, Bax in villus syncytiotrophoblast cells in 30 patients with spontaneous abortion

目的 通过观察绒毛合体滋养细胞凋亡以及凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax在自然流产患者中的表达,探讨细胞凋亡在自然流产的发病机制.方法 采用原位末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学法对30例自然流产患者绒毛合体滋养细胞中调亡指数及凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax阳性表达率进行检测,并以30例人工终止早孕的健康妇女做对照(对照组),所有数据采用SPSS16.0进行统计学分析.结果 自然流产组绒毛滋养细胞中凋亡指数为(32.45±5.87)％,明显高于对照组的(19.38±4.16)％,差异有统计学意义(P＜0.01).Bax和Bcl-2在两组合体滋养细胞中的阳性率比较显示,自然流产组中Bax阳性率增高,Bcl-2阳性率下降,Bcl-2/Bax比值升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 绒毛合体滋养细胞凋亡明显增加、Bax阳性率增高和Bcl-2阳性率下降在自然流产中产生重要作用.     

低温-复温对大鼠肾脏细胞凋亡的影响及丹参的保护作用

目的 探讨低温-复温过程对大鼠肾脏细胞凋亡的影响及丹参的保护作用.方法 建立Wistar大鼠肾脏离体非循环灌注模型,随机分为4组(n=12):对照组、低温保存组、低温-复温组、丹参实验组.采用TUNEL法检测肾组织细胞凋亡情况,免疫组化SABC法观察Caspase-3、Bcl-2蛋白表达情况.结果 低温-复温组细胞凋亡指数为(53.2±17.1)%,显著高于对照组(0.2±0.1)%和低温组(0.3±0.1)%(P<0.01);丹参实验组细胞凋亡指数(36.7±14.6)%明显低于低温-复温组(53.2±17.1)%(P<0.05);丹参实验组Caspase-3表达(5.4±1.3)%低于低温-复温组(11.9±6.2)%(P<0.05),而Bcl-2表达(1.8±0.3)%高于低温-复温组(0.7±1.5)%)(P<0.05).结论 低温-复温过程可造成肾脏细胞凋亡显著增加;丹参可减少肾脏复温相关性细胞凋亡,其机制可能与抑制Caspase-3活性、上调Bcl-2基因表达有关.     

活性氧对缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响及其机制

目的 研究和探讨缺氧状态下大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)内活性氧(reactive oxygen species,ROs)对细胞凋亡的影响及其调控机制.方法 原代培养正常大鼠PASMCs,选用第2～4代用于实验.分别在常氧及低氧条件下使用ROS清除剂Tiron进行分组干预.通过四唑硝基蓝(NBT)还原法、2,7-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内ROS水平,原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 ①缺氧组细胞ROS水平[NBT:(0.214±0.024),DCFH-DA:(39.33±3.27)]明显高于对照组[NBT:(0.114±0.017),DCFH-DA:(15.84±2.86)](均P<0.01);②缺氧组细胞凋亡指数(2.42±0.74)显著低于对照组(4.50±0.45)(P<0.01),Tiron+缺氧组细胞的凋亡指数(5.75±0.94)与缺氧组比较则明显升高(P<0.01);③与对照组[Bcl-2:(0.098±0.017),Bax:(0.210±0.031),Bcl-2/Bax:(0.465±0.021)]相比较,缺氧组Bcl-2蛋白表达(0.141±0.024)增强(P<0.05),Bax蛋白表达(0.074±0.020)减弱(P<0.05),Bcl-2/Bax比值(1.973±0.283)升高(P<0.01);④和缺氧组比较,缺氧+Tiron组Bcl-2蛋白表达(0.124±0.018)降低(P<0.05),同时Bax蛋白表达(0.182±0.019)增强(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(0.678±0.071)(P<0.01).结论 缺氧状态时大鼠PAsMCs内ROS生成增多,ROS可通过促进Bcl-2/Bax蛋白表达比值升高来抑制PASMCs凋亡,从而在缺氧性肺动脉重建的发病机制中发挥重要作用.     

抗精子抗体和抗子宫内膜抗体与不孕及流产的关系

目的　探讨抗精子抗体（ＡｓＡｂ）与抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）在不孕、流产中的作用及二者关系,进一步 揭示不孕、流产的病因。方法　采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）同时检测３４５例不孕、流产妇女血清中的ＡｓＡｂ与 ＥＭＡｂ,按ＡｓＡｂ检测结果分阳性组和阴性组,比较两组ＥＭＡｂ阳性率的差异。结果　原发不孕及自然流产妇女中, ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率高达１６．６７％和１９．５１％,而ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率高达４３．６４％和４２．８６％,显著高于 ＡｓＡｂ（－）组（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。继发不孕妇女中ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率为１８．１８％,ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率 为３２．２％,二者无显著性差异（０．０１＞Ｐ＞０．０５）。结论原发不孕及自然流产妇女中因个体免疫反应差异使某些 人易对体内、外物质发生免疫反应而产生抗体,从而导致不孕或流产。     

亚硝基脲类和亚硝基硫脲类的理化性质及致突变能力

本题选择N,N′-二甲基亚硝基脲(DMNU),N,N′-二乙基亚硝基脲(DENU),及其类似物N,N′-二甲基亚硝基硫脲(DMNTU)、N,N′-二乙基亚硝基硫脲(DENTU)为代表,测定了这些化合物的水解反应速度、脂溶性(HPLC的logk′值)、水解产物和致突变能力。证明了硫脲的脂溶性大于脲的脂溶性。DMNTU对TA100菌株的致突变能力最强,其它较弱。     

水疗联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响

目的探讨新生儿游泳联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响。方法将经阴道顺产分娩的正常新生儿100例随机分为两组，观察组（水疗联合抚触组）50例，对照组（单纯沫浴组）50例。①测定两组10日、28日的体重、身长、上臂围；②观察记录胎便转黄时间，测定皿清胆红素；③记录24h睡眠时间。结果两组新生儿10日、28日体重、身长、上臂同增长有显著差异（P〈0．05），两组新生儿5日时，胎便转黄时间及黄疸指数比较均有显著性差异（P〈0．01），两组睡眠时间比较有统计学意义（P〈0．05），两组并发症比较无统计学意义（P〉0．05）。结论新生儿水疗联合抚触可促进新生儿的生长发育，能加速胎粪的早排出，减轻生理性黄疸程度，有效地降低新生儿高胆红素血症的发病率，提高睡眠质量。     

气血与足月妊娠分娩关系的探讨

论述足月妊娠分娩的发动和维持依靠气的推动、温煦、气化、固摄功能和血的营养、濡润功能。顺利分娩既要气血充足，还要气顺血和。临床研究结果表明调补气血，是促进产程，预防难产的重要手段。实验研究结果阐明调补气血中药加强产力、促进产程主要是从改善产妇全身情况，提高机体抗应激、抗疲劳、耐缺氧能力，即所谓使产妇气血充足调和，充分发挥气血在分娩过程中的生理作用。