肾透明细胞癌中Smad3、4和磷酸酶及张力蛋白同源蛋白的表达及意义

目的检测肾透明细胞癌中Smad蛋白(Smad)3、4和磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)的表达,观察其临床意义。方法 56例肾透明细胞癌患者临床资料及术后标本作为观察组,40例距肿瘤边缘3 cm的正常肾皮质作为对照组。应用免疫组化方法检测两组中Smad3、4和PTEN的表达。结果两组Smad3、4和PTEN表达阳性率差别均显著。观察组Smad3、4和PTEN表达阳性率与肿瘤最大径、Fuhrman分级密切相关,而与性别、年龄因素无关。相关性分析显示观察组中Smad3和PTEN、Smad4和PTEN间表达均呈正相关性。结论肾透明细胞癌术后组织中Smad3、4和PTEN低表达是促进肿瘤的发生和进展的重要因素。     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2在四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织中的动态表达

目的:探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2在四氯化碳(CCl 4)诱导的肝纤维化大鼠肝组织中的动态表达。 方法:采用腹腔注射CCl 4的方法建立大鼠肝纤维化模型,用HE和Masson三色染色检测大鼠肝脏组织的病理组织学变化,采用免疫组织化学染色、蛋白质印迹法及实时荧光定量PCR技术检测大鼠肝组...     

血管内皮生长因子在动脉粥样硬化缺血性脑卒中模型大鼠脑组织中的表达

目的探讨动脉粥样硬化基础上缺血性脑卒中模型大鼠脑组织中血管内皮生长因子表达规律及意义。方法大鼠被随机分为对照组和模型组,后者制备动脉粥样硬化大鼠模型,然后再被分为动脉粥样硬化模型假手术组、动脉粥样硬化模型持续缺血0.5、6、12、24 h组,运用逆转录聚合酶链式反应技术检测血管内皮生长因子mR-NA表达及免疫组织化学法检测血管内皮生长因子蛋白表达及变化。结果各动脉粥样硬化模型组与对照组比较血管内皮生长因子表达有明显升高(P<0.05),各持续缺血组与假手术组比较血管内皮生长因子基因及蛋白表达均有明显升高(P<0.05),并随时间发生规律性变化,其中血管内皮生长因子的基因及其蛋白产物在持续缺血6 h组均达到峰值。结论机体长期存在动脉粥样硬化基础病变对缺血性脑卒中脑组织血管内皮生长因子基因及其蛋白产物的表达有正向调控作用,缺血后可随时间变化。本实验结果可为动脉粥样硬化基础上缺血性脑卒中的发生、发展、治疗及预后估计提供一定的理论基础。     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2与疾病关系的研究进展

细胞进行各项代谢活动都离不开细胞内外的信号转导,这些信号转导的过程大多是通过各种介质间的相互作用实现的.磷酸化和去磷酸化是蛋白质常见的化学修饰之一.蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)非受体(PTPN)11型基因编码的Src同源酪氨酸磷酸酶(SHP)-2包含N末端的两个Src结构域和C末端的1个PTP结构域,在静息条件下SH2催...     

蛋白酪氨酸磷酸酶1B在肥胖大鼠下丘脑的表达

目的观察高脂饲料诱导的肥胖大鼠下丘脑蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP-1B）的表达。方法SD大鼠20只随机分为正常饲料组和高脂饲料组喂养8周。测定大鼠Fins、BG、TG、TC、瘦素、副睾脂肪垫重量、PTP-1B活性;观察肝脏形态学改变;蛋白印迹法检测下丘脑组织中PTP-1B蛋白含量。结果（1）高脂组胰岛素敏感性降低,出现瘦素抵抗和肝脏脂肪变性;（2）高脂组大鼠下丘脑PTP-1B蛋白表达和活性增加。结论高脂饲料可诱导大鼠下丘脑PTP-1B蛋白表达和活性升高,这可能是肥胖引发下丘脑产生胰岛素抵抗和瘦素抵抗的机制之一。     

老年急性轻型缺血性脑卒中患者血清S100β蛋白、Aβ42表达水平与脑卒中后认知功能障碍的关系

目的 探讨老年急性轻型缺血性脑卒中(MIS)患者血清S100β蛋白、β-淀粉样蛋白(Aβ)42表达水平与脑卒中后认知功能障碍(PSCI)的相关性。方法 老年MIS患者91例按脑卒中3个月蒙特利尔认知评估(MoCA)量表评分分为PSCI组(MoCA评分<26分)39例与非PSCI组52例(MoCA评分≥26分)。比较两组入院时血清S100β蛋白、Aβ42水平,应用Logistic回归模型确定PSIC的独立影响因素,采用Pearson相关分析检验PSCI组血清S100β蛋白、Aβ42水平与MoCA评分的相关性,并应用受试者工作特征(ROC)曲线对S100β蛋白、Aβ42水平预测PSCI的能力进行评价。结果 相比非PSCI组,PSCI组年龄较大,糖化血红蛋白(HbA1c)水平较高,且血清S100β蛋白、Aβ42水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析得出,年龄(OR=1.335)、血清S100β蛋白水平(OR=1.581)、血清Aβ42水平(OR=1.644)为PSCI的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,入院时血清S100β蛋白...     

溴结构蛋白4在食管鳞癌中的表达及JQ-1对其活性的抑制作用

目的探讨溴结构蛋白(BRD)4在食管鳞癌中的表达特征及靶向抑制内源性BRD4的活性对食管鳞癌细胞增殖的影响及作用机制。方法免疫组化染色检测80例食管鳞癌和配对癌旁组织中BRD4的表达情况,分析BRD4的表达与临床病理特征的关系,分析其在预后评估中的价值。小分子抑制剂JQ-1作用于食管鳞癌细胞EC109,MTT分析抑制内源性BRD4的活性对细胞增殖的影响;流式细胞术分析JQ-1干预对细胞凋亡的影响;Western印迹检测细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果 BRD4阳性表达于细胞质和细胞核,癌组织较癌旁组织表达显著增高;BRD4的表达与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移和病理分期显著相关(P0.01),BRD4高表达的患者预后不良。JQ-1显著抑制食管鳞癌细胞的增殖;JQ-1干预24 h,EC109细胞的凋亡率显著上升;细胞凋亡执行蛋白cleaved-caspase3和cleaved-PARP1表达显著上调。结论 BRD的表达与食管鳞癌疾病进展明确相关,是潜在的预后评估标记物;抑制内源性BRD的活性通过诱导细胞凋亡抑制食管鳞癌细胞的增殖。因此,BRD4是潜在的食管鳞癌治疗靶点。     

老年眼睑基底细胞癌患者癌组织中空泡膜蛋白1、磷酸酶及张力蛋白同源蛋白和抗转移蛋白23的表达及意义

目的检测老年眼睑基底细胞癌患者癌组织空泡膜蛋白(VMP)1、磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)和抗转移蛋白(NM)23的表达及相关性。方法 97例老年基底细胞癌患者术后存档的蜡块组织及临床资料为观察组,上述肿瘤组织周边切缘为正常鳞状上皮组织患者60例为对照组,采用免疫组织化学染色方法检测VMP1、PTEN和NM23表达。结果观察组VMP1、PTEN和NM23表达阳性率明显低于对照组,观察组VMP1、PTEN和NM23表达阳性率与肿瘤最大径、是否侵犯皮肤外结构、转移及Ki67表达密切相关。观察组VMP1、PTEN和NM23表达具有正相关性。结论老年眼睑基底细胞癌患者癌组织中VMP1、PTEN和NM23蛋白表达均下调,三者具有协同正向作用,共同促进肿瘤的发生和进展。     

蛋白磷酸酶2A Cα在昆虫杆状病毒中的表达及活性

目的利用昆虫杆状病毒系统表达蛋白磷酸酶(PP)2A Cα亚基并进行活性分析。方法先将PP2A Cα构建进入昆虫杆状病毒表达载体,然后将其转染到昆虫细胞Sf9中并进行蛋白表达,最后检测PP2A Cα的功能。结果 Western印迹结果表明PP2A Cα蛋白已经在昆虫细胞成功表达;PP2A活性检测和GST pull-down实验结果表明PP2A Cα蛋白既有生物学功能,又有结构学功能。结论昆虫杆状病毒载体系统可以成功表达有活性的PP2A Cα蛋白。     

可溶性脑信号蛋白4D在心房颤动患者血清中的表达

目的观察可溶性脑信号蛋白(sSema)4D在心房颤动(AF)患者血清中的表达水平及对AF患者12个月内发生脑卒中事件的预测价值。方法 103例AF患者分为阵发性AF组(n=51)、非阵发性AF组(包括持续性AF和永久性AF,n=52)并设对照组(无AF发作史的窦性心律患者,n=51),测定血清sSema4D浓度。随访12个月,记录脑卒中事件发生情况。结果阵发性AF组[(8.50±2.21)ng/ml]、非阵发性AF组sSema4D水平[(9.30±2.31)ng/ml]均显著高于对照组[(6.51±1.21)ng/ml](P0.05),而非阵发性AF组sSema4D水平显著高于阵发性AF组(P0.05)。多因素Logistic回归分析显示高血清sSema4D、左房内径、男性、心率、高血压是AF发生的独立危险因素(P0.05),而高血清sSema4D、低国际标准化比值、心脏瓣膜病是预测AF患者发生脑卒中的独立危险因素(P0.05)。结论血清sSema4D水平在AF患者中升高,并且是AF患者12个月发生脑卒中事件的独立预测指标。     

YKL-40、RSK4、cyclinD1在结肠癌中的表达及意义

目的 探讨人软骨糖蛋白(YKL)-40、核糖体S6蛋白激酶(RSK)4、细胞周期蛋白(cyclin)D1在结肠癌中的表达及意义.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测86例结肠癌患者血清中YKL-40、cyclinD1、RSK4 mRNA表达水平;采用免疫组织化学法检测结肠癌组织及癌旁组织中YKL-4...     

Caveolin-1和miR-199a-5p在缺血性脑卒中患者外周血及模型大鼠脑组织、脾脏中的表达及其意义

目的探讨缺血性脑卒中(IS)患者外周血及模型大鼠脑组织、脾脏中miR-199a-5p和膜微囊蛋白(Cav)-1的表达水平及临床意义。方法初发IS患者(发病24 h内)外周血标本24例,同时收集在体检中心体检的健康人外周血标本22例。Ficoll淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC)。荧光定量PCR检测PBMC中miR-199a-5p和Cav-1的表达水平。采用改良Zea Longa线栓法构建SD大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)模型。再灌注24 h后进行神经功能评分,收集脑皮质和脾脏组织。荧光定量PCR检测脑皮质和脾脏miR-199a-5p和Cav-1表达水平。结果 IS患者外周血PBMC中miR-199a-5p表达明显升高(P0.001),Cav-1 mRNA表达显著下降(P0.05)。与假手术组比较,MCAO模型组脑皮质和脾脏miR-199a-5p明显升高(P0.001,P0.01),Cav-1 mRNA表达显著下降(P0.001,P0.01)。结论 miR-199a-5p和Cav-1可能为IS患者重要的炎症指标。     

急性缺血性脑卒中患者血清五聚素3和甲壳质酶蛋白40表达与心电图异常的关系

目的检测急性缺血性脑卒中患者血清中五聚素(PTX)-3和甲壳质酶蛋白(YKL)-40的表达,关注二者与心电图异常的关系。方法 67例缺血性脑卒中患者为观察组,25例经体检证实为未见明显器质性病变的成年人血清标本为对照组,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测两组PTX-3和YKL-40表达,同时对患者进行心电图检查。结果观察组血清中PTX-3和YKL-40表达量明显高于对照组,观察组血清PTX-3和YKL-40表达量与缺血区体积及病变严重程度相关。观察组心电图异常发生率为35.82%,异常心电图组PTX-3和YKL-40表达量明显高于正常心电图组(P0.05)。相关分析显示观察组中PTX-3和YKL-40呈正相关。结论缺血性脑卒中患者血清PTX-3和YKL-40表达升高且具有正向协同作用,二者表达与病变程度有关,也与心电图异常有一定关联。     

胃腺癌中原癌基因C-jun、C-fos和磷酸酶及张力蛋白同源蛋白的表达及意义

目的检测胃腺癌中原癌基因C-jun、C-fos和磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)的表达,关注其在不同临床病理特征中的意义。方法 72例胃腺癌根治术患者的临床资料及术后蜡块组织作为观察组,胃黏膜高级别上皮内瘤变组织32例作为对照组1,胃黏膜低级别上皮内瘤变组织32例作为对照组2,观察组中距肿物边缘5 cm的非肿瘤性胃黏膜组织32例作为对照组3。应用免疫组织化学SP法检测四组中C-jun、C-fos和PTEN的表达。结果四组中C-jun、C-fos和PTEN表达的阳性率差异显著。观察组中C-jun、C-fos和PTEN的阳性率均与肿瘤最大径、浸润深度和Ki67指数密切相关,PTEN的表达与脉管内瘤栓密切相关。相关分析显示观察组中C-jun和PTEN、C-fos和PTEN的表达呈负相关。结论胃腺癌术后组织中C-jun、C-fos高表达、PTEN低表达,三者异常表达均可以促进肿瘤的进展,C-jun与C-fos均与PTEN有相关性。     

干扰素诱导蛋白4蛋白激酶在不同类型系统性红斑狼疮肝损害中的表达研究

目的 比较干扰素诱导蛋白4(IFIT4)、蛋白激酶(PRKR)在不同类型狼疮肝损害患者的表达差异,及不同类型狼疮肝损害的临床表现及免疫学指标,分析总结其各自特点.方法 将符合狼疮性肝损害诊断的62例患者分为单纯肝酶升高组、单纯胆酶升高组和肝酶胆酶均升高组,再选取同期62例无狼疮性肝损害患者作对照,收集其相关临床数据及外周血白细胞IFIT4、PRKR基因表达进行比较分析.数据采用x2检验、方差分析及Pearson或Spearman相关分析.结果 ①胆酶升高组易并发皮肤黏膜损害(x2=5.625,P=0.018)、狼疮肾炎(x2=5.631,P=0.019),出现贫血及血小板减少(99+21,P=0.028;81±45,P=0.004)等血液系统损害,其C反应蛋白(CRP) (33±43.P=0.004),nRNP (x2=4.862,P=0.027)和抗SSA抗体(=8.087,P=0.004)阳性率均明显高于其他组;②系统性红斑狼疮性肝损害组抗核糖体蛋白(Rib)抗体阳性率明显高于无SLE性肝损害组(x2=19.542,P=0.000);③IFIT4在不同组中表达差异无统计学意义,蛋白激酶在单纯胆酶升高组中明显高表达(F=3.54,P=0.018),并与γ-俗氨酰转氨酶(γ-GGT)、碱性磷酸酶呈正相关(r=0.34,P＜0.05;r=0.3.P＜0.05).结论 不同类型肝损害有着不同的临床和实验室特点,蛋白激酶在单纯胆酶升高组明显高表达.     

早期生长反应-1蛋白和第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因在老年垂体瘤中的表达及其临床意义

目的探讨早期生长反应(Egr)-1蛋白和第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)在老年垂体瘤中的表达和意义。方法回顾性收集25例病理学诊断为非侵袭性垂体瘤,10例诊断为侵袭性垂体瘤的老年患者垂体瘤病理组织学样本及35例正常垂体组织标本。免疫组化法SP法检测Egr-1和PTEN在老年垂体瘤中的表达,并分析其意义。结果 35例老年性垂体瘤患者组织标本Egr-1和PTEN水平明显增高,与健康垂体组织差异具有统计学意义(P0.05);侵袭性垂体瘤中Egr-1水平明显高于非侵袭性垂体瘤(P0.05);与非侵袭性垂体瘤相比,侵袭性垂体瘤PTEN的表达明显降低(P0.05)。结论 Egr-1和PTEN两者联合检测对评价老年垂体瘤的预后有重要作用。     

水通道蛋白1和4在大鼠挫伤肺组织中的表达

目的探讨水通道蛋白(AQP)1和4在老年大鼠挫伤后肺组织中的表达。方法通过自由落体模型制作老年鼠肺挫伤模型,分别于伤后1,3和6 h处死,取右侧肺上叶组织测水含量,RT-PCR法测量AQP1和4的mRNA表达,Western印迹法检测蛋白AQP1和4的表达水平。结果伤后老年大鼠的肺组织水含量比明显增加,与假手术组相比,AQP1和4的mRNA和蛋白表达在术后逐渐升高,术后6 h有显著差异(P<0.05),AQP-1的蛋白表达量亦明显升高(P<0.05)。结论 AQP1和4在挫伤后的肺组织中表达升高,靶向调节二者的表达可能对于肺挫伤后肺水肿的治疗具有重要意义。     

视黄醇结合蛋白4在糖尿病动脉粥样硬化大鼠血清中的表达及意义

目的 观察脂肪细胞因子视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4,RBP4)与晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein product,AOPP)在糖尿病动脉粥样硬化大鼠血清中的表达,探讨RBP4与糖尿病大血管病变的关系.方法 将36只SPF级健康Wistar雄性大鼠随机分为2组(各18只).A组为正常对照组,饲普通饲料.B组为糖尿病动脉粥样硬化组,饲以高脂高糖饲料并予腹腔一次性大剂量注射链脲佐菌素(STZ)及予维生素D3灌胃,建立糖尿病动脉粥样硬化模型.16 w后所有大鼠空腹过夜,应用10%水合氯醛腹腔麻醉后心脏采血离心分离血清,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量,酶联免疫吸附法(ELISA)测血清RBP4水平,紫外分光光度计法测血清AOPP含量.取腹主动脉做HE染色.结果 B组大鼠血清中TG、TC、LDL-C含量均较A组增高,HDL-C降低,RBP4显著增高.AOPP、血浆致动脉硬化指数(AIP)与RBP4呈正相关.腹主动脉HE染色显示B组动脉壁内侧内膜下有大量泡沫细胞聚集,纤维组织增生,部分纤维化和玻璃样变,并见明显钙化.A组无此改变.结论 根据上述结果,我们认为RBP4参与糖尿病的大血管病变,其可能机制是增强血管内膜氧化应激并影响血脂代谢.     

血清Hcy、hs-CRP、CysC水平在缺血性脑卒中患者脑微出血发生及预后中的应用

目的 探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、胱抑素(Cys)C水平在缺血性脑卒中患者脑微出血(CMBs)发生及预后评估中的应用价值。方法 回顾性分析114例缺血性脑卒中患者的临床资料,根据入院后头颅磁敏感检查结果将其分为无CMBs组73例与缺血性脑卒中并发CMBs(ISCMBs)组41例,同时根据发病后90 d改良Rankin评分量表(mRS)评分将ISCMBs患者分为预后良好组(mRS评分≤2分) 24例与预后不良组(mRS评分>2分) 17例。记录所有缺血性脑卒中患者一般资料及入院后24 h内血清Hcy、hs-CRP、CysC水平并根据分组情况进行比较,同时采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Hcy、hs-CRP、CysC在ISCMBs预后评估中的应用效果。结果 ISCMs组患者平均年龄、基线美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分、糖化血红蛋白(HbA1c)、腔隙性脑梗死数目及血清Hcy、hs-CRP、CysC水平均分别明显大于缺血性脑卒中无CMBs组(均P<0.05),高血压、糖尿病、长期饮酒史、既往脑卒中史比率均分别明显高于无C...     

GPR37通过调控炎症反应对缺血性脑卒中大鼠脑损伤恢复的作用机制

目的 探讨G蛋白耦联受体(GPR)37在缺血性脑卒中的表达变化,进而探究其通过调控炎症反应对脑损伤恢复作用机制。方法 选取50例缺血性脑卒中(AIS)患者为脑卒中组,同期选取50例健康体检志愿者作为健康对照组,研究患者血清GPR37变化与患者血清炎症因子水平、美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)及神经标志物相关性。构建大鼠模型,分为假手术组、GPR37基因敲除组、模型组及GPR37基因敲除+模型组4组,通过平衡木试验及抓握牵引试验对比4组行走协调能力及肌力,苏木素-伊红(HE)染色对4组脑组织形态学进行比较,甲苯胺蓝染色对比4组脑神经神态,免疫组化检测GPR37在大鼠脑组织表达,原位末端标记法(TUNEL)法检测4组神经细胞凋亡情况。建立细胞模型,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清及细胞上清液内白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达水平。通过Western检测GPR37蛋白在大鼠脑组织及神经细胞内表达。结果 脑卒中组血清GPR37较健康对照组明显偏低,S100β、NSE、IL-1β、TNF-β明显偏高(P<0.05),GPR37与S100β、N...