大鼠重症急性胰腺炎发病机制中p38丝裂原活化蛋白激酶的作用研究

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)特异性抑制剂SB203580对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)的保护作用。方法以胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠建立SD大鼠SAP模型。将45只SD大鼠随机分为3组,假手术组(SO组,n=15);SAP组(SAP组,n=15);SB203580治疗组(SB组,n=15)。术后3、6、12 h处死大鼠并取血。对胰腺进行病理组织学评分,测定大鼠腹水量。检测血清淀粉酶,ELISA法测定血清IL-6和IL-10水平。并采用免疫组化法观察大鼠胰腺组织p38 MAPK下游靶点P-ATF2表达情况。结果 SO组胰腺组织存在P-ATF2弱表达,SAP组各时间点P-ATF2表达水平明显升高(P<0.01),SB组各时间点表达水平较SAP组下降明显(P<0.01)。SAP组6、12 h时间点IL-6水平,3、6 h时间点IL-10水平,血清淀粉酶,腹水量明显高于SB组(P<0.05)。SAP组各时间点胰腺组织病理学积分显著高于SB组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论阻断p38 MAPK信号传导通路可以明显缓解大鼠重症急性胰腺炎的病情。预示此信号传导通路可以为SAP的治疗提供一个有价值的标靶。     

清热熄风活血汤调控JNK/p38 MAPK信号通路改善脑梗死大鼠脑组织损伤的干预机制

目的 基于氨基末端蛋白激酶(JNK)/丝裂原活化蛋白激酶p38抗体(p38 MAPK)信号通路探究清热熄风活血汤对脑梗死大鼠脑组织损伤的干预作用的机制。方法 选取30只SD健康雄性大鼠，其中10只为正常组，其余20只建立脑梗死模型并分为脑梗死组、清热熄风活血汤组，对各组大鼠进行学习记忆能力、神经功能评价，检测各组大鼠脑组织梗死面积、含水量，酶联免疫吸附试验检测Th1/Th2趋化因子、氧化应激、炎症反应指标水平，Western印迹检测JNK/p38 MAPK通路蛋白相对表达量。结果 脑梗死组、清热熄风活血汤组各时间点逃避潜伏期显著长于正常组，清热熄风活血汤组各时间点逃避潜伏期显著短于脑梗死组(P<0.05);清热熄风活血汤组大鼠神经功能缺损(mNSS)评分显著低于脑梗死组(P<0.05)。脑梗死组、清热熄风活血汤组脑含水量显著高于正常组，清热熄风活血汤组大鼠梗死面积、含水量均显著低于脑梗死组(P<0.05)。与正常组比较，其他两组γ-干扰素(IFN-γ)水平较低，白细胞介素(IL)-2、IL-4、大鼠总抗氧化能力(TAOC)、活性氧(ROS)、细胞间黏附分子(ICAM)...     

脑血疏口服液通过p38MAPK通路抑制帕金森病大鼠黑质神经炎症反应

目的研究脑血疏口服液(NXS)通过调节p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路抑制帕金森病(PD)大鼠的神经炎症反应,从而发挥对黑质多巴胺(DA)能神经元的保护作用。方法单侧纹状体内注射神经毒素6-羟多巴胺(OHDA)(12μg/4μl)制备大鼠PD模型。将PD大鼠随机分为模型组(10只)、NXS组[10只,NXS灌胃,2.36 g/(kg·d),共30 d],另10只正常大鼠纹状体内注射生理盐水4μl作为对照组。采用免疫组织化学染色法检测各组黑质DA能神经元[酪氨酸羟化酶(TH)阳性]、小胶质细胞(Iba1阳性)的形态变化,免疫组织化学法和Western印迹法检测中脑黑质Iba1、核因子(NF)-κB、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、p38MAPK和p-p38MAPK的变化。结果与模型组相比较,NXS组旋转圈数显著减少(P0.05)。免疫组织化学结果显示,与对照组相比,模型组黑质TH阳性细胞数目明显减少(P0.05),Iba1、iNOS、NF-κB和p38MAPK免疫反应强度均明显增加(P0.05);NXS组黑质TH阳性细胞明显增多(P0.05),Iba1、iNOS、NF-κB和p38MAPK免疫反应强度均显著降低(P0.05)。Western印迹结果显示,与对照组比较,模型组损毁侧黑质Iba1、iNOS、NF-κB、p38MAPK和p-p38MAPK表达明显升高,而NXS组上述分子表达均有明显降低(P0.05)。结论 NXS可能通过抑制PD大鼠p38MAPK信号通路和降低炎症因子的表达,从而对DA能神经元发挥保护作用。     

姜黄素抗脑缺血再灌注损伤作用与MAPK信号通路的相关性分析

目的 探讨姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)、C-Jun氨基末端(JNK)/应激化蛋白激酶(SAPK)及p38MAPK信号转导通路的影响.方法 采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO)建立局灶性脑缺血模型,观察不同浓度姜黄素(20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg)对脑缺血再灌注损伤后大鼠神经行为学评分的影响,并用Western blot法检测p38MAPK、P-p38MAPK、ERK1/2、P-ERK1/2及JNK的表达.结果 假手术组无神经行为学改变;各用药组神经行为学评分明显低于缺血再灌注组(P<0.05).与缺血再灌注组相比各用药组p-p38MAPK及JNK表达明显降低(P<0.05),而P-ERK1/2表达显著增加(P(0.05),p38MAPK及ERK1/2表达各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其保护作用机制可能与抑制p38MAPK和JNK/SAPK信号转导通路以及增强ERK1/2信号转导通路有关.     

异氟醚吸入对新生大鼠认知功能的影响及p38MAPK抑制剂的干预作用

目的探讨p38细胞内丝裂原活化蛋白激酶通路（MAPK）通路在异氟醚诱发新生大鼠认知功能障碍中的作用。方法将60只7日龄SD大鼠随机分为5组各12只。其中A组正常饲养;B、C组均置于自制麻醉气体吸入箱中并分别吸入1.2%、1.8%异氟醚,D、E组处理分别同B、C组,但在吸入异氟醚前30 min腹腔注射p38MAPK抑制剂SB203580。6周后各组均进行行为学实验观察逃逸潜伏期（T1）、空间探索时间（T2）,并取海马组织采用Western blot法测定p38蛋白含量。结果 B、C组T1均显著长于A组,而D、E组分别显著短于B、C组（P均〈0.05）;B、C组T2均显著短于A组,而D、E组分别显著长于B、C组;B、C组海马区p38蛋白含量显著高于A组,而D、E组分别显著低于B、C组（P均〈0.05）。结论异氟醚诱发新生大鼠认知功能障碍与p38MAPK通路活化有密切关系,抑制该通路活化可减轻认知功能损害。     

癫痫大鼠海马p38MAPK变化及W-7对其的影响

目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK) 在癫痫大鼠海马结构的活性变化,并观察钙调蛋白抑制剂W-7的干预作用.方法 健康SD大鼠38只,随机分为,对照组、癫痫组和W-7低剂量、中剂量、高剂量组,免疫组织化学方法和免疫印记方法检测海马组织p38MAPK蛋白表达的变化.结果 癫痫组p38MAPK蛋白阳性细胞表达率较对照组明显增加,W-7各剂量的组明显较对照组降低(P<0.05或P<0.01),其中W-7高剂量组降低最为明显.结论 戊四氮导致癫痫大鼠海马中p38MAPK蛋白阳性细胞表达率增高,W-7对戊四氮诱导的癫痫大鼠具有保护作用,其作用与p38MAPK的蛋白表达相关.     

依达拉奉对大鼠脑缺血模型MAPK表达的影响

目的探讨自由基清除剂依达拉奉对大鼠脑缺血后丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法大脑中动脉阻断法制备大鼠脑缺血再灌注模型,缺血60min后再灌注23h,术前30min及再灌注2h时尾静脉注射依达拉奉1.0mg.kg-1或0.9%氯化钠注射液2ml.kg-1。观察大鼠脑缺血后神经功能缺损症状,TTC染色法检测梗死体积,Fluoro-Jade C法检测细胞死亡,采用免疫印迹法检测MAPK家族三个主要成员:蛋白激酶P38(P38 MAPK),细胞外信号调节激酶(ERK1/2)和c-jun氨基末端激酶(JNK)的表达。结果依达拉奉改善大鼠脑缺血再灌注23h后神经功能缺损症状,减少梗死体积和细胞死亡(P<0.05);大鼠脑缺血后MAPK家族被激活(P<0.01),依达拉奉能显著降低P38MAPK和JNK的激活,但对ERK1/2的表达无明显影响。结论依达拉奉可能能够通过抑制脑缺血后细胞内P38MAPK和JNK信号传导通路,减轻大鼠脑缺血损伤。     

清热解毒方药含药血清对脂多糖刺激下人单核细胞MAPK通路的干预作用

目的探讨清热解毒方药毒素清含药血清对单核细胞THP-1内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,从炎症细胞通路层面揭示该药治疗肺炎的机制。方法制备毒素清低、中、高浓度含药血清,以脂多糖(LPS)刺激的单核巨噬细胞为研究对象,将培养好的细胞分为:空白组(10%空白药物血清)、模型组(10%空白药物血清+1μg/ml LPS)、毒素清低、中、高浓度组(含10%相应药物血清+1μg/ml LPS)。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-8,Western印迹检测P38MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)46/54、细胞外调节蛋白激酶(ERK) 42/44蛋白磷酸化水平。结果与空白组比,模型组细胞IL-1、IL-6、IL-8的表达及P38MAPK、JNK46/54、ERK42/44蛋白的磷酸化水平均显著升高,毒素清不同浓度含药血清组上述指标较模型组降低,以中高浓度组尤为显著(P0. 05)。结论 LPS作为感染刺激物作用于单核巨噬细胞,激活了该细胞内MAPK信号通路,促进了炎症因子的分泌。清热解毒方药毒素清减轻肺部炎症损伤的机制与其抑制单核巨噬细胞内MAPK通路的活化,降低炎症细胞因子的表达有关。     

塞来昔布对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大及MAPK/ERK通路的影响

目的研究塞来昔布对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的心肌细胞肥大及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路的影响。方法细胞培养大鼠H9c2心肌细胞,将细胞分为5组:空白组(未加任何药物处理);AngⅡ组(加入1μmol/L的AngⅡ诱导心肌肥大);AngⅡ+塞来昔布50 mg/L、100 mg/L、150 mg/L组,各组细胞加入药物培养48 h后用于后续实验。观察细胞形态学变化,测定细胞表面积和细胞中总蛋白浓度变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白质免疫印迹检测各组细胞中p38MAPK、ERK1/2、磷酸化(p)-ERK1/2、p-p38MAPK蛋白相对表达量。结果与空白组比较,AngⅡ组细胞形态增大,细胞贴壁不牢,漂浮细胞增多;与AngⅡ组比较,塞来昔布各处理组细胞形态变小,漂浮细胞减少;与空白组比较,AngⅡ组细胞表面积显著增大(P0.05),细胞中总蛋白浓度显著升高(P0.05),细胞凋亡率显著增加(P0.05),细胞中p-ERK1/2、p-p38MAPK蛋白相对表达量显著减少(P0.05);与AngⅡ组比较,塞来昔布处理各组细胞表面积显著减少(P0.05),细胞中总蛋白浓度和细胞凋亡率显著降低(P0.05),细胞中p-ERK1/2、p-p38MAPK蛋白相对表达量显著增多(P0.05);AngⅡ+塞来昔布50 mg/L组和100 mg/L组细胞表面积、细胞中总蛋白浓度、细胞凋亡率显著高于空白组(P0.05),细胞中p-ERK1/2、p-p38MAPK蛋白相对表达量低于空白组(P0.05),AngⅡ+塞来昔布150 mg/L组细胞表面积、细胞中总蛋白浓度、细胞凋亡率及细胞中p-ERK1/2、p-p38MAPK蛋白相对表达量与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论塞来昔布对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大具有抑制作用,其抑制心肌细胞肥大的作用可能与激活MAPK/ERK信号通路有关。     

阿魏酸钠对MCAO大鼠缺血／再灌注损伤p38MAPK信号通路的影响

目的 探讨阿魏酸钠(SF)在抗大鼠脑缺血/再灌注损伤过程中对p38MAPK信号通路的影响.方法 采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO)建立大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,大鼠于MCAO前1 h股静脉注射不同剂量SF100 mg/kg、50 mg/kg、20 mg/kg及p38MAPK抑制剂SB203580,观察各组脑缺血再灌注损伤后大鼠神经学评分,TUNEL法检测神经细胞的凋亡及Westernblot检测p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达.结果 假手术组无神经学改变,SF100 mg/kg、50 mg/kg及p38MAPK抑制剂SB203580组神经学评分明显低于缺血再灌注组(P<0.05),各用药组间无明显差异.SF100 mg/kg、50 mg/kg、20 mg/kg及p38MAPK抑制剂SB203580TUNEL阳性细胞率(%)均较缺血再灌注组明显下降.假手术组未见p-p38MAPK表达,缺血再灌注组p-p38MAPK显著增高,SF100 mg/kg、50 mg/kg、20 mg/kg对脑组织总p38MAPK表达影响不明显(P>0.05),主要下调p-p38MAPK表达.结论 阿魏酸钠对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用机制可能与抑制p38MAPK信号传导通路有关.     

丙泊酚靶向调节MAPK/ERK信号通路干预心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的:探讨丙泊酚靶向调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)通路干预心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制。方法:分别构建体内大鼠心肌梗死模型和体外原代心肌细胞糖氧剥夺(OGD)模型模拟MIRI,实验分为对照组、模型组、阴性对照组和丙泊酚组。分别用流式细胞术检测原代心肌细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌细胞凋亡相关蛋白及MAPK/ERK信号通路相关蛋白表达;使用转录组测序和VIPER方法检测心肌组织中蛋白质活性;通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色和苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌梗死面积、心肌组织变化;检测各组血清心肌酶活性。结果:与模型组比较,丙泊酚组丙泊酚处理后原代心肌细胞凋亡率、凋亡蛋白Caspase-3和Bax表达明显降低(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显升高(P<0.01),血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白T(cTnT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平明显下降(P<0.01),心肌梗死面积明显缩小,磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、磷酸化...     

小檗碱改善血管性痴呆大鼠学习记忆与P38MAPK 通路的关系

目的观察小檗碱对血管性痴呆(VD)大鼠海马区炎性趋化因子单核细胞趋化蛋白(MCP)-1和P38丝裂原活化蛋白激酶级联途径(P38MAPK通路)蛋白表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分为模型组,小檗碱低、中、高剂量组、正常组和假手术组,采用夹闭单侧颈总动脉和再通的方法建立VD模型。采用Morris水迷宫试验检测大鼠的空间学习和记忆能力,免疫组织化学方法检测大鼠海马区MCP-1和P38MAPK通路蛋白表达变化。结果相比于正常组、假手术组,模型组大鼠在行为学上出现学习记忆能力下降;与模型组比较,小檗碱各剂量组的学习记忆力则有明显改善。与假手术组相比,模型组大鼠海马区MCP-1和P38MAPK通路蛋白表达水平明显升高(P0.05);与模型组相比,小檗碱各剂量组海马区MCP-1和P38MAPK通路蛋白表达水平明显下降(P0.05),并存在剂量依赖现象。结论小檗碱可抑制VD大鼠脑海马区MCP-1和P38MAPK通路蛋白的表达,这可能是小檗碱改善VD个体学习记忆的分子机制之一。     

基于MAPK通路探究下调miR-15b对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨MAPK通路下调微小RNA-15b(miR-15b)对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用。方法 购买48只大鼠随机分为4组各12只,其中空白组不做处理,模型组、上调组、下调组构建心肌细胞缺血再灌注损伤大鼠模型,做miR-15b慢病毒滴定,采用实时荧光定量聚合酶联反应检测miR-15b基因表达量,采用酶联免疫吸附试验检测白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;采用超声心动图监测左心室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP);采用Western印迹检测心肌细胞缺血再灌注损伤大鼠丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路表达量。结果 与上调组相比,下调组miR-15b表达量、IL-6、TNF-α、MDA、SOD、LVEDP水平、MAPK信号通路蛋白表达量明显降低,LVSP水平显著升高(均P<0.05)。结论 通过下调miR-15b可能经作用于MAPK信号通路,能够抑制体内炎症反应,对大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤症状进行减轻,从而发挥其保护作用。     

溶血磷脂酸受体3介导溶血磷脂酸诱导的血管平滑肌细胞表型转化

目的探讨溶血磷脂酸(LPA)受体在LPA诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用及相关信号传导通路。方法培养SD大鼠分化表型VSMC,培养液加胰岛素样生长因子(IGF-1)为IGF-1组,加溶剂载体为空白组,以不同浓度水平LPA(0.1～10μmol/L)刺激,依次为LPA 0.1组、LPA 1组和LPA 10组,并在LPA(1μmol/L)条件下,以LPA受体1,3拮抗剂二辛烷甘油焦磷酸盐(DGPP 8:0)为DGPP 1组,RT-PCR法检测平滑肌肌动蛋白α(SMA-α)和骨桥蛋白mRNA表达,Western blot法检测p38分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK),细胞外信号调节激酶(ERK)及其磷酸化蛋白水平。结果与空白组和IGF-1组比较,LPA 0.1组、LPA 1组和LPA 10组呈剂量依赖促进骨桥蛋白mRNA表达上升,SMA-αmR NA表达下降(P<0.01);与空白组比较,LPA 1组p38MAPK和ERK激活(P<0.01),DGPP 1组p38MAPK和ERK无明显变化(P>0.05)。结论与Gq蛋白偶联的LPA受体3介导了LPA诱导的VSMC表型转化,阻滞上述通路有可能成为控制与动脉粥样硬化和再狭窄等血管疾病相关的VSMC表型转化潜在的治疗干预靶点。     

橄榄苦苷对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡及JNK/p38 MAPK信号通路的影响

目的研究橄榄苦苷对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡及c-Jun氨基末端激酶(JNK)/促分裂素原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组(0.5 mg/kg)及橄榄苦苷高、低剂量组(40、20 mg/kg),每组14只。连续灌胃给药14 d,末次给药结束后采用线栓法建立脑缺血再灌注损伤模型,进行2 h缺血后再灌注24 h,测定神经症状评分、脑梗死面积、脑组织含水量、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关的x蛋白(Bax)mRNA表达及磷酸化的JNK(p-JNK)、磷酸化的p38 MAPK(p-p38)蛋白表达等指标。结果与模型组比较,橄榄苦苷高、低剂量组大鼠神经症状评分、脑梗死面积及橄榄苦苷高剂量组脑组织含水量均显著降低(P<0.05);与模型组比较,橄榄苦苷高、低剂量组大鼠Caspase-3、Bax mRNA及p-JNK、p-p38蛋白表达均明显降低(P<0.05),而Bcl-2 mRNA表达明显增加(P<0.05)。结论橄榄苦苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,该作用与抑制JNK/p38 MAPK信号通路的活化进而减少神经元凋亡有关。     

雷公藤多苷对湿疹大鼠皮损的预防作用及机制

目的 观察雷公藤多苷对湿疹大鼠皮损的预防作用,并探讨其作用机制与组胺受体H1(H1 R)/瞬时感受器电位受体1(TRPV1)通路、蛋白酶激活受体2(PAR-2)/TRPV1通路及丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)通路的关系.方法 取健康雄性大鼠50只,随机分为正常组、模型组和雷公藤多苷低、中、高剂量组,每组各...     

盐酸羟考酮通过JNK/p38MAPK信号通路调控异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡的机制

目的探究盐酸羟考酮对异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养心肌细胞H9c2,设置对照组、ISO组、盐酸羟考酮1μmol/L组、盐酸羟考酮5μmol/L组、盐酸羟考酮10μmol/L组、ISO+SB203580〔c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(JNK/p38MAPK)信号通路阻断剂〕组。噻唑蓝(MTT)法检测心肌细胞存活率;流式细胞学法检测各组心肌细胞的凋亡率;Western印迹检测心肌细胞的B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)及JNK/p38MAPK信号通路相关蛋白的表达;测定培养细胞上清液乳脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量。结果与对照组比较,ISO组心肌细胞存活率降低,各给药组心肌细胞存活率明显升高(P<0.05);与对照组比较,ISO组心肌细胞的凋亡率明显升高(P<0.05),而盐酸羟考酮可显著降低细胞凋亡率(P<0.05);与ISO组比较,盐酸羟考酮10μmol/L组LDH、CK水平及Bax、磷酸化(p)-JNK、p-p38MAPK表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2表达水平显著升高(P<0.05);阻断JNK/p38MAPK信号通路可显著增加细胞存活率(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.05),促进Bcl-2表达(P<0.05),而抑制Bax表达(P<0.05)。结论盐酸羟考酮对ISO诱导的心肌细胞损伤具有抗凋亡作用,其作用机制可能与抑制JNK/p38MAPK信号通路的活化有关。     

活性维生素D3对UUO模型大鼠P38MAPK信号通路的影响

目的探讨活性维生素D 3对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响及其机制。方法54只雄性SD大鼠随机分为UUO模型组、假手术组、活性维生素D 3干预组,其中36只SD大鼠建立UUO模型,活性维生素D 3干预组在建模起给予活性维生素D 30.5μg/d灌胃,分别于术后3、7、14 d各处死6只大鼠,免疫组化观察肾小管间质损害程度;Western印迹法检测P38MAPK及磷酸化P38MAPK蛋白表达量。结果与假手术组相比,UUO模型组磷酸化P38MAPK蛋白表达量随时间延长显著增加(P<0.01);活性维生素D 3干预组7 d、14 d磷酸化P38MAPK蛋白表达量较UUO模型组表达显著减少(P<0.05);P38MAPK蛋白表达量各组差异无统计学意义。结论活性维生素D 3抑制UUO大鼠肾组织中P38MAPK信号通路的激活,延缓肾间质纤维化。     

基于p38MAPK通路探讨疏肝健脾方药含药血清对LPS刺激下大鼠Kupffer细胞炎症损伤保护作用的机制

目的基于p38MAPK通路探讨疏肝健脾方药含药血清对脂多糖(LPS)刺激大鼠Kupffer细胞炎症损伤的保护作用。方法体外培养并鉴定SD大鼠Kupffer细胞,提取并制备疏肝健脾方药含药血清,在LPS刺激大鼠Kupffer细胞产生炎症反应基础上,对Kupffer细胞进行疏肝健脾方药含药血清、p38MAPK抑制剂药物干预,ELISA法检测Kupffer细胞上清液中白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量的表达,Western印迹检测Kupffer细胞TLR4、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白的表达。结果疏肝健脾方药含药血清提取量约为每只2~3 ml,大鼠获得纯化并经免疫荧光法鉴定Kupffer细胞(0.5~1.0)×107个,Typan blue染色测定细胞活力均在95%以上;LPS组较空白血清组IL-6、TNF-α水平均有显著升高(P0.01);与LPS组比较,各药物干预组IL-6、TNF-α表达水平显著降低(P0.01);与空白血清组比较,LPS组的p38MAPK、p-p38MAPK、TLR4蛋白表达均有显著升高(P0.01);与LPS组比较,SB239063能显著下调p38MAPK的蛋白表达水平(P0.01),肝健脾组亦有下调,但无显著差异(P0.05);疏肝健脾组、SB239063组的p-p38MAPK蛋白表达水平均下调显著(P0.01);TLR4蛋白表达水平以疏肝健脾组下调具有显著性差异(P0.01),SB239063组下调无显著差异(P0.05)。结论疏肝健脾方药可能对LPS刺激大鼠Kupffer细胞炎症损伤发挥保护作用,而含药血清可能是其重要作用途径之一。     

SB203580对烟雾暴露的哮喘大鼠的影响

目的建立烟雾暴露的支气管哮喘(简称哮喘)大鼠模型,观察p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)抑制剂SB203580对其的治疗作用。方法将Wistar大鼠随机分为4组,即正常对照组、哮喘组、烟雾暴露的哮喘组及SB203580干预组。动物肺功能仪测定大鼠呼气阻力、吸气阻力及肺顺应性,观察肺组织病理学改变,通过ELISA检测大鼠肺组织中IL-4、IL-5和IL-8的表达。结果与烟雾暴露的哮喘组相比,SB203580干预组大鼠的气道阻力显著下降,肺顺应性显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);气道炎症明显减轻;肺组织中IL-4、IL-5和IL-8的含量显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 p38 MAPK抑制剂SB203580可以改善烟雾暴露的哮喘大鼠的气道炎症,减轻其支气管收缩反应。