Notch1/Hes1通路活化通过抑制氧化应激改善高糖诱导的心肌细胞肥大

目的研究Notch1/Hes1信号通路活化对高糖诱导的心肌细胞肥大的影响,及其对氧化应激的作用。方法原代培养大鼠心肌细胞,采用图像分析法检测心肌细胞表面积,BCA试剂盒分析细胞总蛋白含量,采用RTq PCR和Western blot技术检测Notch1、Hes1、超氧化物歧化酶(SOD1)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达水平,相关试剂盒检测细胞匀浆中丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量。结果与对照组比较,高糖能明显诱导心肌细胞表面积及总蛋白含量的增加(P0.05),心肌细胞中Notch1、Hes1蛋白表达量也明显降低(P0.05),同时氧化应激产物MDA、NO明显升高(P0.05),并且SOD1显著降低、iNOS显著升高(P0.05);激活Notch1/Hes1信号通路能够显著降低高糖引起的心肌细胞肥大及氧化应激损伤(P0.05),而Notch1干扰慢病毒可阻断Notch1对心肌细胞肥大及氧化应激的上述改善作用(P0.05)。结论激活Notch1可以降低高糖诱导的心肌细胞肥大,其作用机制可能与降低细胞氧化应激损伤有关。     

沉默转化生长因子β1表达与抑制肾小管上皮细胞(HK-2)Notch信号通路的相关性研究

目的探讨沉默转化生长因子β1(TGF-β1)表达与抑制肾小管上皮(HK-2)细胞Notch信号通路的相关性。方法检测TGF-β1在DN的表达;TGF-β1小干扰RNA(TGF-β1-siRNA)和阴性对照(siRNA-NC)转染HK-2,空脂质体转染细胞为对照,检测各组TGF-β1;将HK-2分为低糖、高糖、siRNA-NC+高糖和TGF-β1-siRNA组+高糖组,检测细胞存活,凋亡及Cleaved caspase 3、Notch1和Hes1表达。结果 TGF-β1在DN表达高于正常肾组织(P0.05);TGF-β1-siRNA组TGF-β1表达低于对照组(P0.05);高糖组细胞存活低于低糖组,凋亡率、Cleaved caspase 3、Notch1和Hes1高于低糖组(P0.05),siRNA-NC+高糖组细胞存活、凋亡及Cleaved caspase 3、Notch1和Hes1表达与高糖组相当(P0.05);TGF-β1-siRNA+高糖组细胞存活高于高糖组,凋亡及Cleaved caspase 3、Notch1和Hes1低于高糖组(P0.05)。加入GSI细胞存活、凋亡及Cleaved caspase 3、Notch1和Hes1表达与沉默TGF-β1一致。结论 TGF-β1在DN高表达,高糖能抑制HK-2的存活,促进凋亡,沉默TGF-β1能减弱这种效果,可能与Notch信号通路调控有关。     

虾青素调控Nrf2/HO-1/NQO1通路减轻心肌缺血再灌注大鼠氧化应激损伤

目的 研究虾青素对心肌缺血/再灌注(I/R)大鼠氧化应激损伤的影响及其机制。方法 将SD大鼠分为假手术组、心肌I/R组和虾青素低、中、高剂量组,采用冠状动脉结扎法建立心肌I/R大鼠模型,虾青素低、中、高剂量组分别灌胃25、50、100 mg/kg虾青素,其余组灌胃生理盐水。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTn)I水平及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织形态;TUNEL染色检测大鼠心肌组织中细胞凋亡率;Western印迹法检测大鼠心肌组织中核因子E2相关因子(Nrf)2/血红素加氧酶(HO)-1/醌氧化还原酶(NQO1)通路相关蛋白表达。结果 与假手术组相比,心肌I/R组血清CK-MB、cTnI水平、MDA含量及心肌组织中细胞凋亡率显著升高(P<0.05),血清GSH-Px活性及心肌组织中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平显著降低(P<0.05),心肌组织出现明显的病理损伤;使用虾青素后,大鼠血清CK-MB、cTnI水平、MDA含量及心肌组织中细胞凋亡率显...     

远志皂苷通过TLR4/NF-κB信号通路对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的机制

目的 探讨远志皂苷(Ten)对高糖诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的影响及其对Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB信号通路的调控机制。方法 高糖诱导HK-2细胞糖尿病肾病模型,不同浓度Ten处理HK-2细胞,噻唑蓝(MTT)法筛选Ten适宜浓度;实验分为NG组、HG组、HG+Ten组、HG+Ten+pcDNA组、HG+Ten+TLR4组;流式细胞术检测凋亡率;试剂盒检测丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)水平与超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;Western印迹检测TLR4、p-p65、p65、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达量。结果 MTT检测结果显示,选用Ten 150μmol/L进行后续实验;与NG组比较,HG组凋亡率、TLR4、Bax、TLR4、p-p65蛋白、MDA、ROS水平明显升高,Bcl-2蛋白水平、SOD、GSH-Px活性明显降低(P<0.05);与HG组比较,HG+Ten组凋亡率、Bax、TLR4、p-p65蛋白、MDA、ROS水平明显降低,Bcl-2蛋白水平、SOD、GSH-Px活...     

脑缺血损伤中Notch信号通路活性的非配体依赖性改变及其作用

目的观察脑缺血损伤Notch信号转导通路的非配体依赖性活性变化及其对缺血损伤的影响。方法建立神经元样PC12细胞氧糖剥夺(OGD)模型模拟脑缺血损伤。OGD 12 h行Notch1-siRNA,实时PCR技术检测Notch1 mRNA表达,Western印迹技术检测Notch1、Notch1胞内段NICD蛋白表达,流式细胞仪检测Notch1-siRNA对缺血损伤细胞凋亡率。结果 OGD组Notch1 mRNA表达较正常对照组显著升高,OGD+Notch1-siRNA组较OGD组显著降低(P<0.05);OGD组Notch1及NICD蛋白表达较正常对照组均显著升高,OGD+Notch1-siRNA组较OGD组显著降低(P<0.05);OGD+Notch1-siRNA组细胞凋亡率较OGD组显著升高(P<0.05)。结论缺血性脑损伤可诱导非配体依赖性的Notch1信号转导通路活化,其可能在脑缺血特定时程发挥抗凋亡脑保护作用。     

虾青素对骨关节炎软骨细胞氧化损伤及炎性的影响

目的研究虾青素对骨关节炎(OA)软骨细胞氧化损伤及炎性的逆转作用。方法选择15只5月龄新西兰兔,采用内侧副韧带、前后交叉韧带切断并切除内侧半月板的OA动物模型制作方法,体外分离培养软骨细胞。以假手术组细胞为正常对照组,造模组细胞为OA软骨细胞,分别加入10、20、30μg/ml虾青素(低、中、高剂量);从第9周开始,每周处死1组动物,分离培养软骨细胞。连续8 w,DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平,Griess法测定培养上清中氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,RT-PCR法检测各组细胞相关炎性因子(IL)-1β、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、转录调节因子p53基因mRNA的表达。结果 DCFH-DA法检测细胞内ROS水平,对照组与模型组差异显著(P<0.01);虾青素低、中、高剂量组与模型组差异显著(P<0.01)。模型组中NaNO2、SOD、GSH-Px与对照组差异显著(P<0.01);NaNO2、SOD、GSH-Px水平虾青素低、中、高剂量组与模型组差异显著(P<0.01,P<0.05)。模型组中IL-1β、iNOS、p53基因mRNA的表达量与对照组及各剂量虾青素组差异显著(P<0.01)。结论虾青素对OA软骨细胞的氧化损伤及炎性有逆转作用,具有研发成为OA治疗药物的潜能。     

苦参碱对高糖诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响

目的探讨苦参碱对高糖诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响。方法将H9C2心肌细胞随机分为正常糖组、正常糖苦参碱组、高糖组和高糖苦参碱组。实时荧光定量PCR检测超氧化物歧化酶2(SOD2)、Gp91phox、BAX、BCL-2、TNF-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6 mRNA表达;Western blot检测SOD2、P67phox、BAX、BCL-2、剪切形式半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(C-Caspase-3)、NF-κB P65亚基磷酸化(P-P65)和NF-κB P65总蛋白(T-P65);试剂盒检测细胞内丙二醛质量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及过氧化氢酶(CAT)活性;TUNEL检测细胞凋亡。结果正常糖组与正常糖苦参碱组丙二醛和GSH-Px及CAT活性等指标比较,无统计学差异(P>0.05);与正常糖组比较,高糖组丙二醛、P67phox、P-P65、BAX、C-Caspase-3蛋白、Gp91phox、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达和细胞凋亡率明显升高,GSH-Px、CAT活性明显降低[(0.98±0.02)U/mg vs(3.82±0.05)U/mg,(12.18±0.52)U/mg vs(34.82±0.63)U/mg,P<0.05],SOD2、BCL-2蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05);与高糖组比较,高糖苦参碱组丙二醛、P67phox、P-P65、BAX、C-Caspase-3蛋白、Gp91phox、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达和细胞凋亡率明显降低,GSH-Px、CAT活性、SOD2、BCL-2蛋白及mRNA表达明显上调(P<0.05)。结论苦参碱可以明显改善高糖诱导的H9C2心肌细胞损伤,这可能与其抗氧化、抗炎和抗凋亡活性有关。     

Six1基因在肺癌组织表达水平及RNA干扰抑制其表达后对肺癌细胞生物学特性的影响

目的探讨Six1基因在肺癌组织表达及抑制其表达后对肺癌细胞增殖凋亡的影响。方法提取肺癌及癌旁组织蛋白,Western印迹检测Six1的表达; Six1-siRNA转染人肺癌A549细胞,分为空白组和阴性对照组(NC组)、Six1-siRNA组,转染48 h后通过Western印迹检测各组细胞Six1的表达; CCK8检测Six1-siRNA转染A549细胞24～72 h的细胞增殖;流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡率; Western印迹检测增殖相关蛋白细胞增殖核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)家族Bcl-2相关X蛋白(Bax)及Notch1信号通路Notch1和Hes1的蛋白表达。结果 Six1在肺癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0. 05); Six1-siRNA转染能明显降低A549细胞Six1的表达;与空白组比较,Six1-siRNA组细胞24～72 h的细胞增殖均显著降低,在48 h的细胞凋亡率显著升高,PCNA、Notch1和Hes1蛋白表达均显著降低,Bax蛋白表达显著升高(P<0. 05)。结论 Six1在肺癌组织中高表达,通过RNA干扰抑制其表达可通过下调Notch1信号通路降低肺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,对细胞增殖凋亡的影响方式是下调PCNA和上调Bax蛋白表达。     

年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中miR-181a和SIRT1的表达关系及意义

目的探讨白内障晶状体上皮细胞微小RNA-181a(miR-181a)与沉默信息调节因子(SIRT)1的表达关系,研究其在年龄相关性白内障患者的诊治及病情评估方面的临床意义。方法选取诊断为年龄相关性白内障患者62例为白内障组,另选取同期近视矫正手术患者42例为对照组,利用RT q-PCR法,检测两组晶状体上皮细胞miR-181a与SIRT1表达水平;Pearson法测定miR-181a与SIRT1相关性;利用Lipofectamine 2000转染miR-181a模拟物和抑制剂,调节人晶状体上皮细胞miR-181a表达水平,RT q-PCR法检测SIRT1表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测晶状体上皮细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱氨酸(GSH)、谷胱氨酸过氧化物酶(GSH-Px)水平。结果与对照组相比,白内障组miR-181a表达水平显著升高,SIRT1表达水平显著降低(P<0.05);Pearson相关分析显示,miR-181a和SIRT1呈负相关关系(r=-0.719,P<0.05);miR-181a模拟物组SIRT1表达水平显著低于模拟物阳性对照组(P<0.05),miR-181a抑制剂组,SIRT1表达水平显著高于抑制剂阴性对照组(P<0.05);白内障组SOD、GSH、GSH-Px水平明显低于正常组(P<0.05),MDA水平明显高于正常组(P<0.05);miR-181a表达水平与SOD、GSH、GSH-Px因子呈负相关关系(r=-0.702,-0.739,-0.776),与MDA水平呈正相关关系(r=0.679);SIRT1表达水平与SOD、GSH、GSH-Px呈正相关关系(r=0.699,0.743,0.763),与MDA水平呈负相关关系(r=-0.684)。结论白内障晶状体上皮细胞中miR-181a高表达,SIRT1低表达,miR-181a可调控人晶状体上皮细胞中SIRT1表达;SIRT1低表达可促使晶状体上皮细胞凋亡,从而影响或导致了年龄相关性白内障的发病。     

CUE结构域蛋白2对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响研究

目的探讨CUE结构域蛋白2(CUEDC2)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法肾小管上皮细胞HK-2分为高糖处理组(HG)、转染对照载体后给予高糖处理组(NC+HG)、转染过表达CUEDC2载体后给予高糖处理组(CUEDC2+HG)及对照组(Con)。流式细胞仪测定细胞凋亡;试剂盒检测细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平和培养液中TNF-α、IL-8水平。结果与Con组比较,HG组细胞凋亡率、MDA、TNF-α及IL-8升高[(6.23±0.65)%vs(18.56±3.14)%,(0.06±0.01)vs(0.15±0.02)nmol/mg,(29.54±3.56)vs(56.10±6.30)mg/L,(10.42±1.23)vs(19.59±1.68)mg/L;P0.05],SOD活性降低[(36.20±2.78)vs(20.17±1.45)U/mg,P0.05];与NC+HG、HG组比较,CUEDC2+HG组细胞凋亡率、MDA、TNF-α及IL-8降低[(17.14±2.98)%vs(18.56±3.14)%vs(11.47±1.20)%,(0.14±0.01)vs(0.15±0.02)vs(0.10±0.02)nmol/mg,(55.49±5.97)vs(56.10±6.30)vs(41.20±3.75)mg/L,(19.59±1.68)vs(20.12±2.35)vs(14.65±1.42)mg/L,P0.05],SOD活性升高[(20.17±1.45)vs(19.64±1.37)vs(25.96±3.26)U/mg,P0.05]。结论过表达CUEDC2可减少高糖诱导的肾小管上皮细胞炎症因子释放,降低细胞氧化应激,减少细胞凋亡,保护高糖诱导损伤的肾小管上皮细胞。     

虾青素对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的保护作用

目的 研究虾青素对脂多糖(LPS)所致急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用.方法 雄性昆明种小鼠60只,随机分为正常对照组、急性肺损伤模型组、地塞米松阳性对照组(5 mg/kg)以及虾青素低、中、高剂量组(10、15、20 mg/kg)共6组.不同剂量虾青素给大鼠连续灌胃30 d后,腹腔注射脂多糖6.0 mg/kg建立ALI模型.在注射后6 h,收集腹主动脉血并进行左侧支气管肺泡原位灌洗以收集灌洗液,测定血中淋巴细胞亚群(CD+3、CD+4、CD+8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;测定各组的肺湿重/干重比、肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)含量及肺组织匀浆TNF-α、白细胞介素10(IL-10)含量.结果 虾青素各剂量组均能降低因LPS诱发的血TNF-α、IL-8、MPO、MDA含量与肺组织湿重/干重比的升高,同时抑制肺组织IL-10含量、血SOD与GSH-Px活性的降低,改善血中淋巴细胞亚群分布.结论 虾青素对LPS所致ALI具有预防性保护作用.     

Notch1信号通路在人脑胶质瘤U87细胞增殖、凋亡中的作用及机制探讨

目的 观察Notch1信号通路在人脑胶质瘤U87细胞增殖和凋亡中的作用,并探讨其机制.方法 将U87细胞随机分为A、B、C组,分别加入Notch信号激活剂rhNF-κB、抑制剂DAPT及PBS共培养48 h.用MTT法检测细胞吸光度值(A值)观察细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR、Western blot法分别检测U87细胞中的Notch1、Hes1、Bcl-2 mRNA及其蛋白.结果 培养24、48、72、96 h,A组细胞A值分别为0.185±0.007、0.398±0.012、0.735±0.015、1.083±0.031,B组分别为0.102±0.003、0.130±0.004、0.161±0.006、0.194±0.003,C组分别为0.167±0.005、0.265±0.008、0.496±0.011、0.737±0.016,A、B组与C组比较,P均＜0.05.A、B、C组细胞凋亡率分为0.96％±0.17％、26.51％±3.74％、8.76％±1.40％,A、B组与C组比较,P均＜0.05.与C组比较,A组细胞中Notch1、Hes1、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达量均显著增加(P均＜0.05),B组细胞中Notch1、Hes1、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达量均显著降低(P均＜0.05).结论 Notch1信号通路在人脑胶质瘤U87细胞增殖、凋亡中发挥了重要的调控作用,其机制可能与调节靶基因Hes1、抗凋亡蛋白Bcl-2表达有关.     

褪黑素抗心肌缺血/再灌注损伤的作用及其对Notch1/Hes1信号通路影响

目的 探讨褪黑素（melatonin,Mel）对减轻大鼠心肌缺血/再灌注（MI/R）损伤的作用及其对心肌Notch1/Hes1信号的影响。方法 90只雄性SD大鼠（200~250） g,随机分为3组（每组n=30）:假手术（Sham）组、溶剂对照（MI/R+V）组和Mel处理（MI/R+Mel）组〔10 mg/(kg·d),灌胃4周〕。行结扎大鼠冠状动脉左前降支手术造成MI/R模型,心肌缺血30 min,再灌注4 h后检测心肌Notch1 受体胞内区（Notch1 intracellular domain,NICD）及Hes1、PTEN、p-Akt/Akt比值和凋亡相关蛋白表达,再灌注6 h后检测梗死面积和心肌细胞凋亡率,再灌注72 h后检测心功能。结果 MI/R损伤显著下调左心射血分数（LVEF）与左心室短轴缩短率（LVFS）,增加心肌凋亡率及梗死面积。Mel口服预防性治疗4周可显著改善心功能并减轻心肌凋亡及梗死（P<0.01）。另外口服Mel治疗可显著激活心肌Notch1/Hes1信号通路并调控PTEN/Akt信号,从而下调心肌凋亡信号(P<0.05)。结论 口服Mel预防性治疗可显著减轻MI/R损伤后心肌梗死及凋亡水平,改善心功能。而且,Mel口服可显著上调缺血打击后心肌Notch1/Hes1信号并对PTEN/Akt信号发挥调控作用,下调心肌凋亡信号,从而保护心肌。     

维生素C、E对氟中毒大鼠不同组织抗氧化酶活性影响的研究

目的探讨氟中毒大鼠肝、肾、脑组织抗氧化酶类及脂质过氧化物的变化以及维生素 C、E 单独和联合干预以及不同剂量干预对高氟状态下大鼠抗氧化酶活性及脂质过氧化物的影响。方法将120只 Wistar 大鼠随机分为9绀,饮水染氟建立氟中毒大鼠模型,并灌胃给予维生素 C 和/或维生素 E;9月后处死大鼠取肝、肾、腑组织测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氧酶(CAT)活性和脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量。结果染氟组大鼠肝、肾、脑组织 MDA 含量显著增加,肝和腑绀织 SOD、GSH-Px 和 CAT 活性以及肾组织 GSH-Px 活性均显著降低(P<0.05),而肾组织 SOD、CAT 活性无明显变化;维生素 C、E 可不同程度地增强 SOD、GSH-Px 和 CAT 活性,降低 MDA 水平;联合干预维生素 C、E 可明显拮抗氟诱导的脂质过氧化作用,显著增强大鼠肝组织 SOD、GSH-Px 和 CAT活性;维生素 C 低制量干预对肾脏 SOD 和 CAT 以及脑 GSH-Px 和 CAT 具有明显的保护作用;维生素 E 高剂量干预显著增加脑 SOD 活性。结论维生素 C 和维生素 E 在一定剂量范围内可有效拮抗过量氟导敛的脂质过氧化作用,对氟中毒大鼠肝、肾、脑组织有明显的保护作用。     

外源性一氧化氮对旋毛虫感染小鼠抗氧化能力的影响

目的探讨外源性NO供体亚硝基铁氰化钠(SNP)对旋毛虫病小鼠肝脏、外周血中抗氧化酶活性及脂质氧化的影响。方法采用消化法分离旋毛虫肌幼虫,感染BALB/c小鼠,400条/只。42 d后,收集感染鼠及正常小鼠外周血、肝脏。设A组(感染鼠肝脏匀浆物+SNP)、B组(正常鼠肝脏匀浆物+SNP)、C组(感染鼠外周血+SNP)、D组(正常鼠外周血+SNP)。每组内设5个SNP反应终浓度,分别为0(空白对照)、2、5、10、30μmol/L,37℃反应30 min,测定各组超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及脂质氧化(MDA)含量。结果与正常鼠相比,旋毛虫感染鼠肝脏、外周血中SOD、CAT、GSH-Px活性上升,MDA含量增加,差异均有统计学意义(P均0.05);在A、B组中,10、30μmol/L SNP作用下SOD、CAT、GSH-Px活性较空白对照降低(P均0.05);与2~30μmol/L SNP反应后,MDA含量较空白对照明显升高(P均0.05)。在C、D组中,30μmol/LSNP作用下SOD、CAT、GSH-Px活性显著下降,MDA浓度升高,与空白对照比较差异均有统计学意义(P均0.01)。在2~30μmol/L浓度区间,SNP浓度与旋毛虫感染鼠肝脏、外周血中SOD、CAT、GSH-Px活性呈负相关(r肝SOD=-0.901,r肝CAT=-0.802,r肝GSH-Px=-0.847,r血SOD=-0.899,r血CAT=-0.685,r血GSH-Px=-0.635,P均0.05),与MDA含量呈正相关(r肝MDA=0.697,r血MDA=0.764,P均0.05)。结论旋毛虫感染可致小鼠肝脏、外周血中活性氧自由基产生增加,SOD、CAT、GSH-Px活性升高;外源性NO可降低旋毛虫感染小鼠SOD、CAT、GSH-Px活性,抑制小鼠的抗氧化能力。     

糖络通对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经细胞凋亡及抗氧化酶表达的影响

目的观察糖络通对大鼠糖尿病周围神经病变(DPN)的疗效,并探讨其在抗氧化损伤中的作用。方法 SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型,对模型大鼠每日灌胃糖络通,8 w后检测坐骨神经细胞凋亡数目,乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-Ohd G)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。结果与模型组比较,糖络通明显减少DPN大鼠坐骨神经细胞凋亡数目,降低MDA、LDH、8-Ohd G的含量,增加抗氧化酶SOD、GSH-Px的表达(P0.05)。结论糖络通能有效上调抗氧化酶SOD、GSH-Px的表达,减轻氧化损伤,降低坐骨神经细胞的凋亡。     

激活Notch1通路减轻高温高湿条件下H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的明确Notch1通路在高温高湿条件下H9C2心肌细胞缺氧/复氧(Hypoxia/Reoxygenation,H/R)损伤中的作用及其潜在机制。方法常规培养H9C2心肌细胞并将其分6组即对照组;H/R组;高温高湿组;高温高湿+H/R组;高温高湿+Jagged1(Notch1激动剂)+H/R组;高温高湿+溶剂+H/R组。TUNEL法检测细胞凋亡,荧光探针JC-1检测线粒体膜电位,ATP检测试剂盒检测ATP含量,Western blot检测Notch1细胞内段(Notch1 intracellular domain,Notch1 ICD)、Hairy和分裂增强子(Hairy and enhancer of split,Hes1)、微管相关蛋白1轻链3(microtubuleassociated protein1 light chain 3,LC3)和p62的蛋白表达水平。结果与对照组相比,急性损伤H/R后,细胞凋亡增加(P0.05),线粒体膜电位降低(P0.05),ATP含量减少(P0.05),Notch1 ICD、Hes1、LC3-II/I(p62相应降低)表达升高(P0.05),而慢性损伤高温高湿后,细胞凋亡增加(P0.05),线粒体膜电位降低(P0.05),ATP含量减少(P0.05),Notch1 ICD、Hes1、LC3-II/I表达降低(p62相应升高)(P0.05);和H/R组或高温高湿组对比,高温高湿+H/R组中细胞凋亡进一步增加(P0.05),线粒体膜电位和ATP含量进一步降低(P0.05),Notch1ICD、Hes1、LC3-II/I表达进一步降低(p62进一步升高)(P0.05);和高温高湿+H/R组对比,加入Notch1激动剂Jagged1后,细胞凋亡减少(P0.05),线粒体膜电位和ATP含量增高(P0.05),Notch1 ICD、Hes1、LC3-II/I表达升高(p62相应降低)(P0.05)。结论激活Notch1通路通过促进自噬从而缓解高温高湿条件下H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤。     

萝卜硫素对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 研究萝卜硫素对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测萝卜硫素对SGC-7901细胞增殖的影响,流式细胞术分析萝卜硫素对SGC-7901细胞周期和凋亡的影响,蛋白免疫印迹法(Western blotting)分析萝卜硫素对SGC-7901细胞中Notch1、Hes1、Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。结果 萝卜硫素能够显著抑制SGC-7901细胞的增殖,促使其凋亡,表现出时间和剂量依赖性,萝卜硫素还能将SGC-7901细胞停留在G_1期;萝卜硫素能显著抑制Notch1、Hes1、Bcl-2蛋白表达,诱导促凋亡蛋白Bax表达,与对照组相比,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 萝卜硫素可以明显诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡,可能通过抑制Notch1/Hes1信号通路、降低Bcl-2/Bax比例实现。     

恩施硒茶多酚的抗衰老作用

目的探讨恩施硒茶多酚的抗衰老作用及其机制。方法复制D-半乳糖小鼠衰老模型,将60只昆明种小鼠按体质量随机分6组(n=10):空白组,模型组,香菇菌多糖组和恩施硒茶多酚低、中、高剂量组,分别给予生理盐水、D-半乳糖、香菇菌多糖、恩施硒茶多酚。测定胸腺和脾脏指数,取血、肝、脑测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)。结果恩施硒茶多酚能显著提高衰老模型小鼠胸腺指数和脾脏指数;显著降低MDA含量并提高SOD、GSH-Px和CAT活力。结论恩施硒茶多酚可通过增强机体免疫功能、提高机体抗氧化能力和直接清除自由基等方面发挥其延缓衰老的作用。     

cAMP反应元件结合蛋白在高糖所致内皮细胞损伤中的作用

目的探讨cAMP反应元件结合蛋白(CREB)在高糖致内皮细胞损伤中的作用。方法建立高糖诱导的血管内皮细胞损伤模型,将内皮细胞ECV304分为对照组、高糖组、转染PCI组、转染PCI+高糖组、转染PCI-CREB组和转染PCI-CREB+高糖组,采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果转染PCI-CREB组和转染PCI组内皮细胞存活率、SOD活性、MDA含量和细胞凋亡率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,高糖组内皮细胞存活率和SOD活性明显下降,而MDA含量和细胞凋亡率明显增加(P<0.05);转染PCI+高糖组内皮细胞存活率、SOD活性、MDA含量和细胞凋亡率与高糖组相比差异无统计学意义(P>0.05);与高糖组相比,转染PCI-CREB+高糖组细胞存活率和SOD活性明显高于高糖组(P<0.05),而MDA含量和细胞凋亡率明显低于高糖组(P<0.05)。结论过表达CREB对高糖诱导的内皮细胞损伤具有保护作用。