芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后热休克蛋白70的影响

目的观察芪棱汤对脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70(Hsp 70)的影响,为益气养阴活血法治疗脑梗死提供实验依据。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组及芪棱汤组,并予相应药物腹腔注射。采用颈内动脉线栓加环扎法复制大鼠脑缺血再灌注模型。于再灌注后不同时间点观察大鼠缺血脑组织Hsp 70的表达。结果假手术组无Hsp70蛋白表达,其他各组Hsp70蛋白表达较假手术组高,芪棱汤组在再灌注24h、48h段Hsp70表达较模型组高,且芪棱汤组在再灌注24h段增加Hsp70蛋白表达方面优于补阳还五汤组。结论芪棱汤可以促进Hsp70的蛋白表达,对脑缺血再灌注所导致的脑损伤起保护作用。     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后一氧化氮合酶的影响

研究发现,一氧化氮( Nitric Oxide,NO)在脑缺血损伤中起着重要作用,而一氧化氮合酶(Nitric oxide synygase,NOS)是NO合成的关键因素,NOS分为3种,即内皮型NOS( endothelial NOS,eNOS)、神经元型NOS(neuronal NOS,nNOS)及诱导型NOS( in - ducible NOS,iNOS),eNOS和nNOS又合称为结构型NOS(constitutcive NOS,cNOS).本实验通过观察芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后一氧化氮合酶的影响,探讨益气养阴活血法治疗缺血性中风的作用机理.     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后卡配因(Calpain1)通路的影响

1材料与方法1·1实验材料1·1·1实验动物SD雄性大鼠126只,SPF级,体重300g±30g,月龄4月左右,由广东省医学实验动物中心提供,合格证号2005A010。1·1·2主要药品与试剂芪棱汤精制液、芪棱汤去养阴药精制液由深圳市人民医院制剂中心提供;Calpain1小鼠单克隆抗体及MAP2小鼠单克隆抗体购自天津灏洋生物有限公司,PowerVision二步法试剂盒及DAB显色系统购自北京中山生物技术有限公司,TUNEL凋亡检测试剂盒购自福州迈新生物技术公司。1·2实验方法1·2·1动物分组大鼠126只用随机数字法分为以下5组:芪棱汤组(治疗组)、芪棱汤去养阴药组(治…     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后MAP-2表达的影响

目的探讨芪棱汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后微管相关蛋白-2（MAP-2）表达的影响及其神经保护作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、补阳还五汤组（对照组）及芪棱汤组（治疗组）。复制大鼠局灶性脑缺血再灌注模型并给予相应药物。在再灌注不同时点采用免疫组织化学法测MAP-2表达。结果正常组、假手术组可见MAP-2广泛表达；模型组、对照组及治疗组梗死中心区和周围区在再灌注即刻均出现表达下降，中心区随着再灌注时间延长持续下降，而梗死周围区在再灌注24h降至最低后表达有所上升；治疗组可增加MAP-2表达、促进其修复，以再灌注24h及48h明显，与模型组有明显差异，对照组在48h MAP-2表达亦增加，而治疗组效果更显著。结论芪棱汤能减少MAP-2丢失和促进其修复，具有良好的神经保护作用。     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的:研究芪棱汤对脑缺血再灌注后,"缺血半暗带"神经元细胞凋亡的影响.方法:采用线栓加环扎法模型,运用TUNEL法,在脑缺血再灌注后不同时间点检测凋亡细胞数目的变化.结果:在再灌注各时间段,补阳还五汤及芪棱汤均能减少缺血半暗带神经元细胞的凋亡(P＜0.05),而芪棱汤的效果优于补阳还五汤(P＜0.05).结论:芪棱汤可以减少脑缺血再灌注损伤后细胞的凋亡,从而达到脑保护的作用.     

芪棱汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的形态学研究

目的:研究芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法:根据文献方法改进.将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、芪棱汤组(益气养阴活血)、补阳还五汤组(益气活血).大脑中动脉闭塞后2h开始给药,每日2次.以TTC染色测定脑梗塞体积、HE染色观察脑组织的病理形态、透射电镜观察神经元超微结构改变.结果:与补阳还五汤比较,芪棱汤能显著改善缺血引起脑组织病理与神经元超微结构改变.结论:芪棱汤对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,疗效优于补阳还五汤.     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后血管生成的影响

目的从血管生成的角度探讨益气养阴活血法及其代表方芪棱汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机理。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、芪棱汤去养阴药组(对照组)、芪棱汤组(治疗组)。采用颈内动脉线栓法复制大鼠脑缺血再灌注(MCAO/Reperfusion)模型。在再灌注不同时点采用免疫组织化学法测血管内皮生长因子(VEGF)、血管紧张素(Ang)-2,CD34标记微血管计数。结果假手术组VEGF表达、Ang-2表达极弱;除缺血再灌注6h外,各相应再灌注时间点12h、1d、3d、7d,治疗组及对照组VEGF表达、Ang-2表达较模型组明显增多,且治疗组与对照组比较有显著差异。CD34标记微血管计数再灌注各时间点,治疗组、对照组与模型组比较均有显著差异;治疗组与对照组比较有显著差异。结论芪棱汤通过促进VEGF、Ang-2表达的上调,促进微血管新生,可能是其抗脑缺血再灌注损伤的作用机制之一;益气养阴活血法优于益气活血法。     

芪棱汤对脑缺血再灌注大鼠caspase-9蛋白的影响

目的 探讨芪棱汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注不同时间点caspase-9表达的影响及其对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞致短暂局灶性脑缺血模型，于各灌注时间点拔出线栓使血流再通，形成大鼠脑缺血再灌注模型。大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、芪棱汤去养阴药组、芪棱汤组，于缺血2h再灌注2、4、6、12、24、48h进行神经功能评分，用免疫组织化学法检测各组梗死边缘区caspase-9表达的动态变化。结果 各组大鼠神经功能评分差异均有显著性，芪棱汤组明显优于其他各组。随着再灌注时间的延长，caspase-9阳性细胞计数的表达不断增加，至再灌注24h时到达高峰，再灌注48h时阳性细胞计数表达开始减少。再灌注各时点各组阳性细胞计数显示，芪棱汤去养阴药组和芪棱汤组的阳性细胞数均少于对照组；再灌注4h时芪棱汤组与芪棱汤去养阴药组阳性细胞计数差异无显著性；再灌注6、12、24、48h时芪棱汤组阳性细胞数少于芪棱汤去养阴药组。结论 芪棱汤与芪棱汤去养阴药可能通过抑制caspase-9的释放和激活而减少脑缺血再灌注损伤，且芪棱汤疗效优于芪棱汤去养阴药。     

芪棱汤对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨芪棱汤对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用.方法采用线栓加环扎法制备大鼠脑缺血-再灌注模型,将其分为空白对照组、假手术组、缺血再灌注组、芪棱汤组与补阳还五汤组.对大鼠进行神经学评分,并测定脑梗死边缘区 Ca2 浓度.结果缺血 3h时各组神经学评分及细胞 Ca2 相近,缺血 12h之后各个时点两用药组神经学评分及 Ca2 浓度均低于缺血再灌注组,芪棱汤组数据又低于补阳还五汤组.结论芪棱汤对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤有保护作用.     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后nestin蛋白表达的影响

目的观察芪棱汤对脑缺血再灌注后nestin蛋白表达的影响,为益气养阴活血法治疗缺血性中风提供实验依据。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、芪棱汤去养阴药组及芪棱汤组,采用颈内动脉线栓加环扎法复制大鼠脑缺血再灌注模型。于再灌注后不同时间点进行神经学评分,用免疫组化法检测nestin蛋白表达。结果假手术组神经学评分均正常,其余各组大鼠神经功能评分差异均有显著性,芪棱汤组明显优于其他组;假手术组未见nestin蛋白表达,模型组、芪棱汤去养阴药组和芪棱汤组nestin蛋白表达差异有显著性,芪棱汤组nestin蛋白表达明显高于其他各组。结论芪棱汤可以促进nestin蛋白表达,从而对缺血再灌注所导致的脑损伤起保护作用。     

补阳还五汤和有效部位组方对沙土鼠脑缺血及再灌注后脑组织EAA的影响

目的：比较研究补阳还五汤和其有效部位组方抗脑缺血及其再灌注损伤与脑组织兴奋性氨基酸（EAA）的关系。方法：采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型,于缺血15min和再灌注48h取脑组织测定Glu、Asp、GABA和Gly。结果：①缺血15min后,脑组织Glu和Asp含量明显升高,GABA含量升高,补阳还五汤可使脑组织Glu含量降低,有效部位组方可使脑组织Glu和Asp含量均降低（P＜0．05）。②缺血15min再灌注48h后,脑组织Glu和Asp含量均显著升高（P＜0．05）,补阳还五汤可使脑组织Glu含量降低,而有效部位组方可使脑组织Glu和Asp含量均降低（P＜0．05）。结论：兴奋性氨基酸的兴奋毒性参与了脑缺血及其再灌注后的脑损伤,补阳还五汤和其有效部位组方抗缺血性脑损伤的作用机理可能与其对抗脑缺血及其再灌注后EAA的升高有关。     

活血开窍法对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织兴奋性氨基酸的影响

目的观察活血开窍法对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织兴奋性氨基酸（EAA）的影响。方法以大鼠局灶性脑缺血再灌注模型为研究对象,于缺血2h再灌注48h,取脑组织应用高效液相色谱法测定谷氨酸（Glu）、天门冬氨酸（Asp）的含量。结果缺血2h再灌注48h后,模型组、药物组与正常组大鼠比较,脑组织G1u及Asp含量升高（P〈0.01）;与模型组大鼠比较,醒脑通脉大、小剂量组脑组织中Glu、Asp含量显著降低（P〈0.01）。结论活血开窍法抗缺血性脑损伤的作用机制可能与其对抗脑缺血再灌注后EAA的升高有关。     

脑络欣通及其拆方对脑缺血再灌注大鼠脑组织GFAP、bFGF和GDNF蛋白表达的影响

目的 探讨中药复方脑络欣通及其拆方抗气虚血瘀证脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法 复制大鼠气虚血瘀证模型，线栓法大脑中动脉制作局灶性脑缺血再灌注模型，随机分为假手术组、模型组、益气组、活血组和脑络欣通组，予相应处理；采用免疫组织化学染色SABC法检测额顶叶皮质缺血半暗带区GFAP、bFGF和GDNF蛋白表达。结果 模型组GFAP、bFGF和GDNF蛋白表达较假手术组明显增强（P〈0．01）；各治疗组与模型组比较，在脑缺血再灌注48h和72h均有显著差异（P〈0．05或0．01）；在脑缺血再灌注24h，部分治疗组与模型组有显著差异（P〈0．05）；各治疗组间在脑缺血再灌注48h或72h有显著差异（P〈0．05）。结论 脑络欣通可通过抑制GFAP的表达，促进bFGF和GDNF蛋白的表达，调节不同细胞间相互作用，改善气虚血瘀证脑缺血再灌注损伤。     

电针对全脑缺血再灌注大鼠脑组织氨基酸递质的影响

目的:研究电针对全脑缺血再灌注损伤脑组织兴奋性氨基酸递质(EAA)的影响。方法:四动脉阻断法造成SD大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,高效液相色谱法测定脑组织谷氨酸(GLU)、天冬氨酸(ASP)和甘氨酸(GLY)含量,原子吸收分光光度计测定脑组织Ca2+含量,干湿重法测定脑组织含水量。结果:与假手术组比较,模型组脑组织GLU、ASP、Ca2+含量和含水量明显升高,GLY含量无明显变化;循经取穴电针能显著降低升高脑组织GLU、ASP、Ca2+含量和含水量,与模型组比较有显著性差异,对GLY含量无明显影响;穴位对照组和非穴位对照组脑组织GLU、ASP、GLY、Ca2+含量和含水量与模型组比较,均无显著性差异。结论:电针治疗脑缺血再灌注损伤的机制之一与降低EAA兴奋性毒性有关,并具有一定的穴位特异性。     

芎芪合剂对脑缺血再灌注损伤大鼠兴奋性氨基酸含量及代谢组学的影响

目的 从兴奋性氨基酸及代谢组学的角度,探讨芎芪合剂抗溶栓后脑缺血再灌注损伤的整体作用机理.方法 建立SD大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,模拟溶栓成功后的再灌注.分为假手术组、模型组、尿激酶组、芎芪合剂组、尿激酶加芎芪合剂组,每组30只.运用组织生化及核磁共振(NMR)代谢组学的方法,测定兴奋性氨基酸含量和血浆代谢组学相关指标.结果 芎芪合剂能够抑制MCAO大鼠缺血再灌注引起的缺血侧脑组织兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)含量的增高(P＜0.05),并使之趋向于正常;代谢组学检测结果显示,芎芪合剂能抑制MCAO大鼠缺血再灌注引起的血浆谷氨酸以及乳酸、肌酸、胆碱代谢水平的升高和苏氨酸、丙氨酸以及血糖代谢水平的减低(P＜0.05).结论 芎芪合剂能够调节大鼠缺血再灌注后的代谢平衡,从而起到抗脑缺血再灌注损伤的作用.     

养阴益气活血冲剂对大鼠脑缺血再灌注氧自由基损伤的保护作用

目的：观察养阴益气活血冲剂对大鼠脑缺血再灌注氧自由基损伤的保护作用。方法：采用四血管阻断法造成大鼠全脑缺血模型,利用试剂盒测定模型组和用药组血浆和脑匀浆液超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果：养阴益气活血冲剂在显著提高缺血再灌注大鼠血浆和脑组织中SOD活性的同时降低MDA含量。结论：养阴益气活血冲剂能抑制脂质过氧化反应,提高机体抗氧化能力,对缺血再灌注损伤有较好的治疗作用。