一种显示网状纤维的方法

网状纤维是一种嗜银纤维 ,如用一般的银浸染 ,纤维难于分辨 ,而采用碳酸铵银法染色网状纤维的结构则显示得异常清晰。因而 ,碳酸铵银法是一种较理想的显示网状纤维的方法 ,现将该方法介绍如下 :1 .用岑克液或 1 0 %福尔马林固定脾、肝标本。 2 .切片脱蜡后蒸馏水洗数次。 3.将切片放入 0 .3%高锰酸钾内 5 min。 4.切片经水洗后入 5 %草酸漂白 ,至切片上的组织呈现为白色为止。 5 .蒸馏水洗数次后 ,置切片于碳酸铵银内 ( 5 0℃ ) 30 min。铵银液配方 :1 0 %硝酸银 1 0 ml,磷酸钾饱和液 1 0 ml,上述二液混合后产生沉淀 ,倾去上层液体 ,将沉淀…     

大白鼠消化管粘膜中的非典型肥大细胞的标本制作和观察

<正> 取成年大白鼠(体重150—200克)的食管、腺胃、小肠下段和大肠,分别固定于纯甲醇和10%福尔马林液中24小时。另取肠系膜制成铺片标本,以5 ml 注射器分别抽取10%福尔马林和纯甲醇,直接喷射于铺片标本上,固定10—15分钟。福尔马林固定之标本需用蒸镏水洗一次,铺片干后可直接染色,其余标本按常规包埋切片。切片厚度4—     

10%福尔马林与中性福尔马林的比较

传统上我们都采用 1 0 %福尔马林固定组织。福尔马林系甲醛液的俗称 ,是由甲醛 ( Formaldeny de HCHO)气体饱和于水而成。一般市售的福尔马林含甲醛 37%～40 %。配法 :取 40 %甲醛液 1 0 ml与蒸馏水90 ml混合 ,即得 4%甲醛 ,亦即 1 0 %福尔马林。由于福尔马林久存则氧化产生甲酸 ,呈酸性 ,固定标本不适宜 ,特别是需长期固定的组织更不适合 ,故我们主张采用中性福尔马林固定组织标本。其配法如下 :40 %甲醛 1 0 0 ml酸性磷酸钠 (或无水磷酸二氢钾 ) 4.0 g磷酸氢二钠 6 .5 g蒸馏水 90 0 ml因中性福尔马林中加入了磷酸缓冲液 ,不易被氧化 ,能…     

成纤维细胞复合染料染色法

成纤维细胞是疏松结缔组织中常见的细胞,也是功能较重要的细胞.迄今为止,各种书籍、文献均介绍:在光镜下成纤维细胞轮廓不清,只能从核及胞质上辨别.给教学工作带来了极大的不便.为了改变这种状态,我们尝试用复合染料染成纤维细胞,得到了良好的效果.1 材料和方法(1)取材大白鼠肠系膜.(2)固定100%乙醇50ml,甲醇50ml配成的混合固定液,固定10分钟.(3)染色复合染料染色20分钟(复合染料配制:2%碱性品红,2%偶氮焰红,各50ml分别溶解后,两种溶液混合,滤过、沉淀,取沉淀物在烤箱中烤干,取沉淀物0.5克,加70%酒精100ml,再加三聚乙醛1ml为原液.取原液10ml加70%乙醇30ml,再加0.1     

利用醛复红染色法制作家兔皮下疏松结缔组织铺片标本

目的 探讨适用于家兔皮下疏松结缔组织铺片标本的制片方法。方法 家兔3只,分别经腹腔注射10g/L锥虫蓝生理盐水溶液10～12ml。每天1次,连续注射3d后,于第4天取皮下疏松结缔组织进行铺片。待铺片晾干后,用福尔马林-酒精固定液固定约6h。然后,分别入醛复红、核固红和伊红染色液进行染色。每步之间用自来水冲洗。最后,常规脱水、透明、封片。 结果 巨噬细胞呈不规则形,分布在纤维中间,胞质中可见粗大的锥虫蓝颗粒。细胞核呈红色。醛复红染色30～40min时,弹性纤维呈紫色或蓝紫色,胶原纤维呈浅红色。结论 该法操作步骤简单,结果稳定可靠,是制作家兔皮下疏松结缔组织铺片标本适宜的方法。     

心脏原发性肿瘤4例临床病理分析

收集大连市中心医院外科手术切除的4例心脏肿瘤,标本经10%福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,其中1例加作网状纤维染色,另外3例加作AB/PAS和免疫组化染色。     

显示肝、肾上腺脂类油红O方法探讨

油红 O为脂溶性 ,它是目前被认为最优良的脂肪染色染料 ,在脂肪内能高度溶解 ,从而染色 ,能保存组织中的脂肪滴。配制染料的溶剂是染色成败的关键 ,在此介绍一种油红 O染色的改进。油红 O原配方是由异丙醇 ,我们改用酒精配制效果同样满意。1取材 :小狗肝脏、肾上腺固定于 1 0 %中性甲醛溶液内 1～ 2 d。 2蒸馏水洗冰冻切片 1 0～ 2 0 μm入蒸馏水。 3用 70～ 80 %异丙醇或酒精稍洗或用蒸馏水稍洗。 4入油红 O染色 1 5～ 2 5 min。油红 O配方 :油红 O1 g,异丙醇 1 0 0 ml或 70 %酒精 1 0 0 ml,将油红 O放入烧瓶于水浴中加温溶解或放入温箱…     

疏松结缔组织铺片法改良

疏松结缔组织分布广泛,其中含有三种纤维和六种细胞.为使一张铺片中两种纤维和三种细胞呈现不同颜色,我们对Weigeyt方法进行改良,同时选用伊红Y和番红花O显示胶原纤维和肥大细胞,又选用健康妊娠期小白鼠、并给炎症刺激.制出的铺片满意,方法稳定可靠.1 材料和方法1.1 动物和试剂(1)选用健康妊娠期小白鼠并给刀割伤一次.(2)试剂:1注射液0.5%台盼兰生理盐水.2 固定液1:9甲醛90%乙醇混合液.3染色液 碱性复红染液:碱性复红4g间苯二碱4g蒸馏水200ml.配后加浓硫酸4ml即可应用;1%伊红水溶液(染前滴几滴冰醋酸促染);1%番红花O水溶液(染前滴几滴苯胺油促染).     

油红o显示培养平滑肌细胞中的脂类

关于用油红O方法显示脂类,在国内外已被广泛应用。但用油红O方法显示培养的平滑肌细胞国内仍未见报导,也难以显示。国外虽有报导,但必须经过DMPA(N-N-demethyl-1,3-propa-mediaine)处理后才能使培养的平滑肌细胞中的脂类被油红O染色。从文献报导中多用家兔主动脉平滑肌进行培养,未见用人胎儿主动脉平滑肌进行培养,观察其脂类的分布。本室在抗衰老研究中以油红O显示整体主动脉染色基础上,进一步在细胞水平上观察细胞内脂质堆积情况和动脉粥样硬化病变状态。1培养液:用浓度为10%的高脂血清和LDL(低密度脂旦白)作培养液。2材料:引产或流产5个月胎儿主动脉平滑肌,HAO2-6(人动脉平滑肌细胞第二例第六代)。3步聚:(1)在无菌条件下将主动脉平滑肌剪成小块贴在盖玻片上,然后放入培养瓶中,于37℃温箱中培养:在10%的高浓度高脂血清中分别培养96,144,192小时;在LDL培养液中培养24和48小时。(2)将培养成活的平滑肌细胞(盖玻片上)从培养瓶中取出,必须用蒸馏水彻底洗掉浮在盖玻     

介绍一种脂肪染色——油红滴染法

<正>油红染色在病理科作为脂肪特殊染色应用,传统方法一般为浸染法。根据本科室的工作情况,实验改用滴染法,配成的工作液也可以重复使用,效果良好,现介绍如下。1材料与方法1.1材料1%油红液:1 g油红,溶于纯异戊醇或无水乙醇100 m L。工作液:取储存液1 m L(VP管),加2~3滴蒸馏水,混匀,形成悬浊液,密封,2 000 r/min离心10 min。     

家鼠类肾上腺嗜铬细胞简易染色法

一、染色方法 :( 1 )固定小家鼠肾上腺髓质于下列固定液中 2 4hr:即 3%重铬酸钾水溶液 1 0 ml,1 0 %福尔马林 2 0 ml,蒸馏水2 0 ml。 ( 2 )移浸入 3%重铬酸钾水溶液 48hr。( 3)水洗 2 4hr。 ( 4 )石蜡包埋、切片。 ( 5 )切片脱蜡至蒸馏水。 ( 6 )常规苏木素染液 1 5 min、水洗。 ( 7) 1 %盐酸酒精分化适度、水洗1 5 min。 ( 8)各级酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。结果 :肾上腺髓质嗜铬细胞颗粒呈现棕黄色 ,细胞核呈蓝色。二、注意事项 :( 1 )动物选择家鼠类 ,组织力求新鲜。 ( 2 )固定液临用前配制。 ( 3)组织铬化过程需每日更换新液…     

Mallory三色法在小肠染色上的应用

本法主要是显示肌纤维、血细胞、结缔组织纤维和神经纤维等结构。原来我们将此法用在垂体染色上 ,现在我们用来染小肠、皮肤及含有结缔组织的器官等 ,可供教学及科研定性、定量分析 ,效果好 ,较传统的 H.E染色可更清晰地分辨各种结构。1 .组织固定 :取一小段用 Bouin氏液固定 2 4hr,常规包埋、切片、脱蜡。 2 .染色液的配制 :磷钨酸 5 g,橘红 G lg,苯胺蓝 0 .5 g,酸性复红 1 .5 g,蒸馏水 1 0 0 ml。先使磷钨酸溶于水内 ,逐次将染料加入 (要在前一染料完全溶解后 ,再加次一染料 )将三种染料混在一起用。 3.染色方法如下 :( 1 )常规方法脱蜡…     

HB防腐固定液对尸体固定效果的观察

目的探讨HB防腐固定液(HB液)是否能够取代福尔马林用于尸体防腐固定。方法检测HB液中的挥发性有害成分,观察单纯使用HB液和福尔马林固定后以及先用福尔马林固定再用HB液浸泡固定尸体的防腐效果(肉眼、组织学、病原学检查)及其对尸体的长期保存效果。结果 HB液中的挥发性有害成分明显低于福尔马林,但对新鲜标本的固定效果不良且易发生腐败;先经福尔马林固定的标本再用HB液浸泡固定能够有效地防止尸体腐败、保存组织结构、保持标本的弹性、韧性和完整性;HB液长期浸泡固定标本的效果与福尔马林的固定效果相同。结论使用HB液能够取代福尔马林进行尸体防腐,降低空气中挥发性有毒物质的含量,减少甲醛对师生们的刺激。但HB液不能直接用于新鲜标本的防腐固定。     

A■NAE染色反应在淋巴增生病变中的初步观察

本文报道应用A(?)NAE染色反应在各种淋巴增生病变中的初步观察结果及对辅助诊断的价值。材料与方法一、材料来源:本研究材料取自23例淋巴结反应性增生组织,16例恶性淋巴瘤病变组织,4例组织细胞增生病变组织,25例淋巴细胞白血病的外周血液。此外,有5例围产期胎儿新鲜脾、胸腺组织和4例成人扁桃体手术标本作对照。二、研究方法:(1) 细胞悬液制备:将病变组织剪碎,过滤获细胞悬液,再经Ficoll分层液分离得单一核性细胞,制成涂片,缓冲福尔马林钙液(pH6.7)固定10分钟,进而染色。(2) 组织切片制备:新鲜组织立即固定缓冲福尔马林蔗糖液,4℃,24小时以上,后移至Holt's     

改良镀银染色在大鼠脑缺血选择性神经元及轴突溃变中的应用

常规染色难以直接证实所有坏死或溃变的神经元 ,但镀银染色可显示溃变的神经元及轴突和轴突终末。本文介绍一种研究海马缺血性神经元死亡及其轴突溃变程度和时间过程的改良镀银染色方法。1　材料与方法1.1　动物模型　大鼠急性前脑缺血 2 0 min再灌流 2 d或 4d,1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉下 ,4%多聚四醛经左心室升主动脉灌注固定 ,取脑在同样的固定液中后固定 4～ 5 d,包括背侧海马的 2 0 μm冰冻切片 ,做改良的 Gallyas et al镀银方法染色 ,相邻切片作 HE常规染色。1.2　银染工作液的配制1.2 .1　预处理液　 9% Na OH和 1.2 % NH4NO3等…     

改良网状纤维、丽春红组合染色用于杯状细胞染色效果的观察

正网状纤维染色在病理诊断中的应用非常广泛,特别是在协助肿瘤诊断和鉴别诊断中有较大帮助。目前,文献报道网状纤维染色应用于杯状细胞染色少见。作者经过摸索,采用改良Gomori网状纤维-丽春红组合染色法用于显示杯状细胞效果较好,现介绍如下。1 材料与方法1.1 材料收集2019年7月海军军医大学附属长海医院病理科送检的经外科手术切除的十二指肠标本9例,标本均经10%中性福尔马林固定后取材,行常规流程制成3 μm厚石蜡切片,     

Gomori氏六胺银染色在病理切片方面的应用

Gomori氏六胺银染色(GMS)原为1946年Gomori氏为显示糖原及粘液而设计的一种组织染色。后经Grocott氏改良并推广应用到切片的霉菌染色也得到较好的效果。本文使用GMS法显示病理切片上的各种霉菌,并分别与其他霉菌染色作了比较。此外,我们还应用GMS法染抗酸杆菌并与Wade—Fite(W—F)抗酸染色作对比观察。现将观察结果及体会整理于后,供同道参考。材料与方法一、溶液配制: 1、六亚甲基四胺—硝酸银储备液5%硝酸银溶液5ml 3%六亚甲基四胺溶液100ml 配法—将3%六亚甲基四肢水溶液加入5%硝酸银溶液中即形成一种白色沉淀,在摇动时立即溶解。澄清液在4℃冰     

介绍一种骨髓组织脱钙新方法

骨髓组织活检标本来之不易 ,在制片过程中若处理不当 ,会给诊断造成极大的困难。如何既快又好地制作高质量的骨髓病理组织切片对正确诊断尤为重要。笔者通过 2年的反复实践 ,摸索出一种骨髓组织脱钙后的常规制片方法(简称“新法”) ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　标本　中南大学湘雅医院骨髓穿刺的活检组织 4 0例。1.2　试剂　脱钙液 :2 %硝酸 ,即浓硝酸 2ml加 98ml自来水 ;固定液 :10 %福尔马林液 ;染色液 :Gill苏木精 ,沉淀酸化伊红Y乙醇液。1.3　方法　穿刺活检组织入 10 %福尔马林液中固定 30min ;入 2 %硝酸脱钙液 ,室温下脱钙。在…     

曲利本兰荧光染色技术的新应用

曲利本兰又名台盘兰(Trypan blue),弱酸性染料、主要用于活性染色,研究细胞的吞噬活动、间质细胞及网状细胞等。作者用曲利本兰作大白鼠皮下注射显示组织细胞吞噬活动实验中、以荧光显微镜观察,发现疏松结缔组织中弹性纤维显亮红色荧光,色泽鲜明,结构清晰。并同时取大动脉和肺等组织作低温冷冻切片,再以荧光镜检,大动脉和肺中弹性纤维亦显亮红色荧光,亮度更大,所观察的结构清晰完整、特别是大动脉外膜及中膜,肺内动静脉、各类支气管粘膜下层及肺泡膈中极纤细的弹性纤维皆明晰可见,切片中除弹性纤维呈亮红色荧光,其他结构不显荧光。本实验结果证实,曲利本兰用于荧光显微术研究某些器官内正常或病理情况下弹性纤维含量、分布和变化是有意义的。在有关荧光显微术的资料中,尚未见到曲利本兰用作荧光染色,以显示弹性纤维,特予以介绍。1.材料和方法:取雄性大白鼠一只、体重150—200克,在腹部用乙醇消毒处理后,每隔一天注射1%曲利本兰生理盐水注射液一次,共三次、第一、二次注射4-5ml,第三次注射2-3ml,全部作腹腔注射、照常给食。第三次注射后隔一次,将大白鼠处死,立即取材,取皮下组织作铺片。取肺和大动脉横切面作低温冷冻切片,-20至-25℃,切片厚10-15μ,直接附贴于盖玻片或载玻片,切片用电吹风机吹干或凉干、再滴加0.1M pH5.3-5.91磷酸缓冲液,放上盖片即可用荧光显微镜观察,亦可将切片烤干后,加DPX封片制成永久标本。2.荧光     

大鼠视网膜标本石蜡切片的固定方法

目的探讨制备大鼠视网膜石蜡切片的固定方法。方法将大鼠眼球固定于4%多聚甲醛(PFA)和不同浓度(1%、5%、10%、20%)甲醇组成的混和固定液中并制成石蜡切片,经HE染色后在显微镜下观察。结果经4%PFA+不同浓度甲醇固定的眼球外形均无明显变形和收缩。用添加1%和5%甲醇固定液固定的标本未见明显的视网膜脱离,而用添加10%和20%甲醇固定液的眼球的周边部视网膜出现轻度脱离。显微镜下视网膜组织结构完整清晰,各层细胞排列紧密,无明显裂隙,染色鲜艳。相反,采用福尔马林固定的视网膜发生严重脱离。结论 4%PFA+甲醇的固定方法即可保持视网膜结构完整,无脱离,又能提高抗原保存性,效果优于福尔马林固定液,是适合大鼠眼球,尤其是视网膜固定的一种有效方法。