中华猕猴桃汁的防癌作用——(二)在体外模拟胃液中对亚硝胺合成的阻断作用—Ames试验方法检测

本文研究了猕猴桃汁对N-二甲基亚硝胺体外合成的阻断作用,以鼠伤寒沙门氏菌致突变试验检验。 将二甲基亚硝胺的前体物质-亚硝酸钠和氨基比林,在体外模拟胃液条件下(pH3.3,37％℃)保温一小时,以鼠伤寒沙门氏菌变异株TA100,按常规方法(平皿掺入试验)检验致突变性。当两种前体浓度达5mg/ml以上时,如不加阻断剂,均显示出突变阳性反应,提示反应体系中形成了有致突变性的亚硝胺。如果同时加入猕猴桃汁,可以阻断亚硝胺合成,在5mg/ml和8mg/ml两个浓度的测定结果均未出现致突变作用。在5mg/ml反应体系中,分别加入桃汁和维生素C溶液进行对比,发现桃汁的阻断效率高于维生素C,每皿菌落数均值分别为252±4.2(桃汁),和445±81.2(同浓度维生素C),两者差异有显著性(P<0.01)。结果证明猕猴桃汁对体外亚硝胺合成的阻断作用优于同浓度的维生素C溶液。同样条件下单独保温的亚硝酸钠氨基比林或磷酸缓冲液均无致突变作用。 同样条件下处理的样品(亚硝酸钠,氨基比林各5mg/ml,加到pH3.3磷酸缓冲液中,37℃混合保温1小时)经水蒸气蒸馏,二氯甲烷萃取,浓缩后用气相色谱—质谱联机分析,确认为N-二甲基亚硝胺(NDMA)。     

中华猕猴桃的防癌作用 (四)浓缩猕猴桃汁阻断N-亚硝酰胺的体内合成——大鼠胚胎毒性实验

在妊娠第7、8、9天经口给孕鼠不同剂量的前体物亚硝酸钠(分别为0.125、0.25、0.50、1.00和2.00mmol/kgBW)和乙基脲(剂量是亚硝酸钠的二倍),同时给浓缩猕猴桃汁或4％淀粉液。不给猕猴桃汁的各组随前体物剂量增大,活胎率下降,吸收胎率逐渐增加,分别为5.21％,43.66％,71.70％,85.80％和100％。最高剂量组胚胎全部死亡,并有半数孕鼠中毒死亡。单给高剂量亚硝酸钠或乙基脲则不引起胚胎或孕鼠死亡。表明亚硝酸钠和乙基脲在大鼠体内合成N-亚硝基乙基脲,并通过胎盘引起胚胎死亡。前体物与胚胎毒性之间有明显的剂量反应关系。同时给孕鼠浓缩猕猴桃汁的各组在亚硝酸钠0.125-0.50mmol/kgBW者胚胎存活率无明显减少,仅最高剂量组活胎率明显减少,吸收胎率达58.6％,但无孕鼠中毒死亡。实验结果表明浓缩猕猴桃汁能明显阻断大鼠体内N-亚硝基乙基脲合成,预防所引起的胚胎毒性。     

化学致癌物和突变原与大鼠血红蛋白的结合

血红蛋白可同化学致癌物和突变原化合,这种烷基化作用提供了一种剂量监测方法。其作用机理是,它们与细胞大分子中的亲核点形成共价键。作者测定了15种致癌物和致突变物与大鼠血红蛋白化合的情况。此项研究中用雄性Sprague-Dawley大鼠,重200～250 g。使用C~(14)放射性同位素标记物。所用15种化学致癌物是:甲基·甲磺酸盐,二甲基亚硝酸胺,N-亚硝酸甲基脲,苯并(a)芘,甲基-N′-硝基-N-亚硝基奎尼定,3-甲基胆蒽,亚硝基二乙胺,苯,2-乙酰胺基芴,7,12-二甲基苯并蒽,黄曲霉毒素B_1,联苯胺,氯仿,四氯化碳。给大鼠灌胃实验试剂(1 ml/kg体重),乙醚麻醉后,用肝磷脂化的注射器作心脏穿刺,收集血液(24     

锌对CHO细胞内谷胱甘肽S-转移酶等生化指标的影响

<正> 对人类食管癌高、低发区的流行病学调查表明,缺锌可能与人类食管癌发病有一定关系。 动物实验也证明,缺锌可显著加速和提高甲基苄基亚硝胺(MBNA)对大鼠食管肿瘤的诱发。关于缺锌影响癌变过程的机理尚未阐明。我们的研究表明,用接近生理浓度的锌预处理CHO细胞能显著抑制N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍的致突变作用。有人曾观察到缺锌会导致大鼠食管和前胃组织中参于化学致癌物解毒过程的重要酶系谷胱     

中华猕猴桃的防癌作用——一、中华猕猴桃汁阻断N-亚硝基吗啉合成

我国特产中华猕猴桃汁在模拟胃液的条件下,能阻断N-亚硝基吗啉的形成。在37℃,pH3.13-3.28,吗啉及亚硝酸钠浓度各为2.0mM,经0.5、1.0及2.0小时,其阻断率分别为98.54％,96.43％及97.99％;此结果优于柠檬汁,后者阻断率分别为84.55％,34.79％及37.43％;并优于含同样量的抗坏血酸溶液,其结果分别为97.56％、89.48％及65.62％。将猕猴桃汁中抗坏血酸经酶氧化后,不同时间阻断率仍分别高达90.24％、88.47％及79.84％;氧化后的柠檬汁阻断率分别为65.04％、10.13％及50.58％。抗坏血酸溶液氧化后,保温2小时的阻断率为22.08％。 用高压液相色谱测猕猴桃浓缩计中还原型抗坏血酸,其量为264mg/100ml,柠檬汁中含量为37.0mm/100ml,其范围分别为215.4至384.6mg/100ml及21.2至67.5mg/100ml。     

Ames试验研究鞣酸和相关化合物的毒性和抗突变性

[目的 ]Ames试验研究鞣酸和相关化合物抗突变作用。 [方法 ]应用平皿掺入和悬浮培养抗突变性方法 ,比较研究鞣酸和相关化合物在无抑制和抑制浓度减少 2 硝基芴 (2 NF)、4 硝基喹啉 1 氧化物 (4 NQO)和N 甲基 N 硝基 N 亚硝基胍 (MNNG)回复菌落数。 [结果 ]鞣酸和相关化合物月桂木立口 酸、鞣花酸、木立口 酸丙脂、木立口 酸甲脂、木立口 酸和儿茶素抑制Ames试验沙门氏菌菌株生长 ,这种抑制作用与减少Ames试验回复突变和诱发突变菌落数相关。应用悬浮培养方法 ,鞣酸和相关化合物在无抑制浓度和抑制浓度对 2 NF、4 NQO和MNNG无抗突变作用。 [结论 ]Ames试验悬浮培养法是研究抑菌剂类化合物抗突变有用方法 ,可区别由毒性和抗突变作用减少的回复菌落数。     

中华猕猴桃的防癌作用 (五)阻断大鼠和健康人体内N-亚硝基脯氨酸的合成

本文报导中华猕猴桃对体内N-2硝基脯氨酸(NPRO)合成的阻断效果。研究对象为15只雄性Wistar大鼠和10名男性健康志愿者。用自身对照分期观察。大鼠实验表明,中华猕猴桃汁可阻断体内NPRO合成(阻断率59.6％),且效果优于同浓度维生素C溶液,志愿者食入150g含75mg维生素C的中华猕猴桃可完全阻断服300mgNaNO_3和500mg脯氨酸后体内的NPRO合成,而75mg维生素C仅部分阻断。     

中华猕猴桃的防癌作用——(六)阻断孕鼠、孕妇体内N-亚硝基脯氨酸合成

本文报导,中华猕猴桃汁阻断孕鼠及孕妇体内N-亚硝基脯氨酸(NPRO)合成作用,并首次报道NPRO可通过胎盘进入胎内。21只孕鼠实验中,在体内合成高量NPRO的同时,胎内检出了NPRO。中华猕猴桃汁可通过阻断NPRO在体内合成从而阻止其进入胎内。27名孕妇观察也见到同样的结果,仅在4名未服猕猴桃汁孕妇的羊水中检出低量NPRO。     

JWA在N-甲基-N''-硝基-N-亚硝基胍诱导的人支气管上皮细胞凋亡中的作用

目的 探讨JWA在化学致突变物烷化剂N-甲基-N＇-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）诱导人支气管上皮（HBE）细胞凋亡中的作用及其可能机制.方法 用噻唑蓝（MTT）法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Western blot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检测JWA基因近端启动子的结合蛋白.结果 MNNG处理HBE细胞24h均可诱导细胞发生凋亡,并呈现明显的剂量-效应关系;MNNG诱导HBE细胞凋亡过程中伴随着JWA蛋白表达升高.进一步用2.0μg/mlMNNG处理HBE细胞24h后,用Southwestern方法从HBE细胞核蛋白中检测出一与JWA近端启动子能特异性结合的转录因子.结论 MNNG激活HBE细胞中核转录因子与JWA近端启动子结合后可能激活了细胞内凋亡的信号通路.     

新的急性灭鼠剂-溴甲灵衍生物的合成

Dreikorn等以抗植物真菌有效化合物2,4,6-三氯-N-2′4′,6′-三硝基二苯胺为导向化合物,找到新的急性灭鼠剂溴甲灵(Bromethalin),其化学名为N-甲基-2,4-二硝基-N-(2,4,6-三溴苯基)-6-(三氟甲基)苯胺。他们认为,二苯胺类N-甲基衍生物的适口性优于其N-H化合物。在该思想指导下,又合成了系列N-烷基二苯胺类化合物。我们围绕溴甲灵进行化学结构改造,希望找到新的急性灭鼠剂。首先,评价三氟甲基在苯环上的位置对毒力的影响。结果表明,三氟甲基在苯环的4位或5位,其毒力均明显降低。其次,为了比较二苯胺类N-H化合物与其N-甲基衍生物的毒力和适口性,我们还合成了一系列N-H衍生物,且发现2,4-二硝基-N-(2,4,6-三溴苯基)-6-(三氟甲基)苯胺(86111)的毒力高于溴甲灵,并有非常好的适口性。     

中华猕猴桃的防癌作用——(七)阻断慢性萎缩性胃炎病人体内N-亚硝基脯氨酸合成

本文报导了中华猕猴桃汁阻断慢性萎缩性胃炎(CAG)病人体内N-亚硝基脯氨酸(NPRO)合成的作用。在11名CAG病人的自身对照研究中,病人食入300mg NaNO_3和500mg脯氨酸后,尿中NPRO从本底值26.3nmol升至63.9nmol;同时服4.1ml浓缩猕猴桃汁后,多数人尿中NPRO明显下降,阻断率达94.4％。此外,有2人体内NPRO合成水平很高,提示可能有较高的癌变危险性。     

野珍珠汁的急性毒性和致突变性试验研究

野珍珠汁为天然植物大乌泡（Rubus multibracteatus level.et Vant.)的果实所榨取的原汁,富含VB1、VB2、VC、铁等营养素,可作饮料和保健食品。根据《食品安全性毒理学评价程序》的要求,采用小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠微核试验、小鼠精子畸变试验对其急性毒性和致突变性进行了测试。试验结果：野珍珠汁经口急性毒性（LD50）大于21．5g/kg体重,属实际无毒物质;在Ames试验、小鼠微核试验、小鼠精子畸变试验中均未呈现致突变性。     

新型农用杀菌剂氰菌胺致突变实验研究

目的探讨氰菌胺原药的致突变作用。方法小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验分别以1000、500、250mg/kg剂量经口给药2d,小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验分别以2000、1000、500mg/kg剂量经口给药5d,观察骨髓嗜多染红细胞微核率及睾丸初级精母细胞染色体畸变率。鼠伤寒沙门杆菌回复突变试验(Ames试验),选用TA97、TA98、TA100和TA102菌株,试验剂量为5000、1000、200、40μg/皿,观察各菌株的回变菌落数。结果小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变率与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。Ames试验,氰菌胺原药各剂量组的回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍,亦未见剂量-反应关系,Ames试验结果为阴性。结论上述致突变试验结果表明氰菌胺原药无致突变作用。     

六种天然食抗诱变性研究

Six natural foods were tested with Ames Test for their anti-mutagenic effect on 2-AF, AFTB, MNNG, NaN3 induced mutagenic activity in TA99 and TA100. The tested substances were extracted repeatedly with acetone. The revertants induced by 2-AF AFTB1 (with TA98, TA100). MNNG (with TA100) were significantly decreased when the six natural foods were added to the medium. The results revealed that all six natural foods showed remarkable inhibitory effect on 2-AF, AFTB1, MNNG induced mutagenic activity for strains TA98 and TA100 and suggested the presence of anti-mutagenic substances in the six natural foods. This experiment provides a scientific basis to the study of food substances for the prevention of carcinogenesis. It is considered that the six natural foods possess remarkable anti-mutagenic effect and is practically valuable in the field of chemoprophylaxis of Cancer in men.     

Interferon induction inhibition and mutagenic activity of nitrosated coal dust extract

Specified cytotoxicity and mutagenicity of coal dust extract (mixture of solvent extractions of bituminous coal nitrosated by NaNO2) were investigated because of the association of an excess risk of gastric cancer in coal miners. The effect of nitrosated coal dust on a cellular defense component of the interferon system, the induction of interferon (alpha/beta) in mammalian cell cultures by influenza virus, and mutagenicity, using the Salmonella/microsome assay, were determined. Nitrosated coal dust extract contained both bioactivation-independent and -dependent (microsome enzymatic activation) compounds that significantly inhibited the viral induction of interferon by greater than 50%. Nitrosated extract was mutagenic but exhibited no increase in mutagenic activity in the presence of microsomal enzymes. With further extraction of nitrosated coal dust extract by horse serum and fractionation thereof, the soluble chemical complexes formed with fractions of high molecular weight without bioactivation were dominant in both mutagenicity and inhibition of interferon induction. Low-molecular-weight fractions, with or without a metal chelator, and with or without bioactivation, all inhibited interferon induction comparably and significantly. There was no mutagenic activity manifested by these serum fractions. Metal-serum complexes were either not formed, or, if present, were ineffectual according to the biologic criteria employed. The findings of this study are discussed in terms of the association between nitrosated coal dust and gastric carcinogenesis.     

异丙草胺原药致突变性试验研究

目的探讨异丙草胺原药的致突变性,预测其遗传危害和潜在致癌作用的可能性。方法用昆明种小鼠经口灌胃染毒,骨髓微核试验的剂量分别为5000、2500、1250、625mg/kg,睾丸细胞染色体畸变试验的剂量为625.00、312.50、156.25mg/kg,分别取胸骨、睾丸组织,常规制片,镜下观察。鼠伤寒沙门氏菌回复突变(Ames)试验采用平板掺入法,剂量分别为0.5、1.0、2.0、5.0mg/皿。结果小鼠骨髓微核、睾丸细胞染色体畸变试验显示:异丙草胺原药染毒组与阴性对照组比较,差异无显著性(P>0.05);Ames试验显示各菌株的各剂量组的回变菌落数均未超过自发回变菌落数的两倍。结论在本试验条件下,未发现异丙草胺原药的致突变性。