日本血吸虫多肽SJMHE1通过抑制哮喘小鼠肺组织中Th2细胞和ILC2反应减轻小鼠气道炎症

目的 探索日本血吸虫多肽SJMHE1 (VPGGGTALLRCIPVLDTLSTKNED)对卵清蛋白诱导的哮喘小鼠2型辅助T(Th2)细胞、2型固有淋巴细胞(ILC2)反应的干预作用和机制.方法 将6～8周龄雄性BALB/c小鼠随机分成PBS组、卵清蛋白(OVA)组、OVA-PBS组和OVA-SJMHE1组.用OVA诱...     

雷公藤内酯醇对实验性哮喘小鼠气道炎症反应的影响

目的探讨雷公藤内酯醇对支气管哮喘小鼠血浆IgE、BALF中炎症因子、BALF液中细胞总数及细胞分类变化以及肺组织病理变化的影响,评估该药物对支气管哮喘小鼠气道炎症反应及气道重塑干预过程可能的机制及作用,明确雷公藤内酯醇对支气管哮喘小鼠的临床应用价值。方法 40只Balb/c雌性小鼠分为模型组、正常组、低剂量TP治疗组、高剂量TP治疗组,用OVA致敏的方法建立哮喘模型;低剂量组、高剂量按100μg/kg、200μg/kg腹腔注射TP溶液。检测各组小鼠肺组织病理改变、血浆IgE、BALF中炎症细胞、炎症因子表达情况。结果运用TP治疗的小鼠其支气管周围和血管周围炎症浸润程度减轻,TP可抑制血浆IgE水平,减少BALF中的炎症细胞数及其比例和炎症因子的上升。结论推测TP可能通过降低血浆IgE水平,减轻相应炎症因子及减少气道炎性细胞的浸润,尤其是对Eos的抑制效应,从而达到治疗哮喘的目的。     

硫酸脑苷酯活化Ⅱ型NKT细胞对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察硫酸脑苷酯活化Ⅱ型NKT细胞对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:32只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组,每组8只。对照组和哮喘组分别采用PBS和卵清白蛋白(OVA)致敏和激发,硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组采用OVA致敏,分别在激发前给予硫酸脑苷酯腹腔注射和硫酸脑苷酯活化的Ⅱ型NKT细胞尾静脉注射。分别采用HE和PAS染色检测肺组织学和气道杯状细胞;姬姆萨染色检测支气管肺泡灌洗液(BALF)各细胞分类计数;ELISA法检测血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5水平;流式细胞仪检测肺Ⅱ型NKT细胞、IL-4+和IFN-γ+Ⅱ型NKT细胞的数量。结果:硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞减少。硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组小鼠BALF中嗜酸细胞百分比、血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5水平明显低于哮喘组(均P<0.05)。硫酸脑苷酯治疗组小鼠肺IL-4+和IFN-γ+Ⅱ型NKT细胞的数量明显高于哮喘组(均P<0.01)。结论:硫酸脑苷酯可能通过活化Ⅱ型NKT细胞抑制哮喘小鼠气道炎症。     

血红素加氧酶-1调节CD4~+T细胞亚群拮抗过敏性哮喘的实验研究

制备哮喘小鼠模型,干预血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达,探讨HO-1在过敏性气道炎症中抗炎及其对T辅助细胞(T helper,Th)1、Th2、Th17和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的调节作用。用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏、激发BALB/c小鼠制备以嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)浸润为主的哮喘动物模型,并在致敏、激发中给予HO-1底物氯化高铁血红素(hemin)诱导HO-1高表达。经肺脏组织病理切片,血清OVA特异性IgE水平,肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)炎症细胞分类计数观察哮喘小鼠气道炎症程度;western blot和real-time PCR分别检测肺脏和脾脏组织HO-1基因表达和蛋白量,肺脏组织Th1、Th2、Th17及Treg分泌的细胞因子及特定转录因子基因表达;流式细胞术分析脾脏CD4+T细胞亚群。实验结果显示,OVA致敏、激发后(OVA组),小鼠肺脏和脾脏HO-1表达较正常组增高,血红素干预后(OVA+hemin组),HO-1蛋白表达则进一步升高;肺脏病理组织学显示OVA组见大量炎症细胞浸润,以EOS为主,伴BALF中细胞总数和EOS数及血清OVA特异性IgE增加,但经血红素干预后,上述现象明显减轻;OVA组肺组织中T-bet表达及IFN-γ水平降低;但GATA-3和RORγt表达及IL-4、IL-17A和IL-6水平较正常组显著增高,而血红素能逆转该结果;进一步显示OVA+hemin组Foxp3表达和IL-10及TGF-β水平较其余两组显著增高;脾脏CD4+T细胞亚群结果显示OVA组可见大量Th2,Th17略有增多,Th1和Treg则略降低,血红素干预明显下调Th2和Th17细胞比例,显著提升Treg细胞比例,而Th1则呈现升高趋势。结果表明,上调HO-1表达能显著拮抗EOS性气道炎症,该作用是通过调节Th17/Treg和Th1/Th2细胞平衡,促进TGF-β和IL-10分泌以抑制气道炎症。     

抗小鼠TLR2胞外段单表位抗体TSP-2对OVA诱导的小鼠过敏性哮喘气道炎症的影响

目的观察抗小鼠TLR2胞外段单表位（mTLR2ECD）抗体（TSP-2）对OVA诱导的小鼠过敏性哮喘气道炎症的影响。方法用肺泡灌洗、组织切片及特异染色、免疫组化、ELISA法检测TSP-2对小鼠哮喘模型的气道炎症和炎症细胞的浸润以及肺组织中肺泡及支气管结构的影响。结果发现静脉给予抗体TSP-2能有效抑制气道炎症和炎症细胞的浸润。主要表现在肺泡灌洗液中的白细胞浸润减少、减轻血清中OVA特异性IgE抗体的降低以及抑制OVA诱导的小鼠肺泡毛细血管充血水肿等病理变化。结论抗体TSP-2对过敏性哮喘的病理变化有一定的抑制作用。     

紫草醌通过TGF-β1/Smad3信号通路改善哮喘小鼠气道重塑

目的探讨紫草醌对哮喘小鼠气道重塑的影响及其作用的机制。方法建立OVA诱导的哮喘Balb/c小鼠慢性气道炎症模型,经腹腔注射紫草醌0.5 mg/kg、2 mg/kg及4 mg/kg 3种剂量,对照组用生理盐水代替;取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行细胞涂片,Diff-Quick染色进行炎症细胞的分类及计数;采用ELISA法检测小鼠BALF细胞因子及IgE水平;肺组织HE及Masson染色观察其病理学改变。试剂盒检测肺组织中HYP含量;Western blot法检测小鼠肺组织中α-SMA、TGF-β1、p-Smad3、Smad3水平。结果紫草醌抑制了BALF中炎症细胞数量的增加,并降低了BALF中总IgE及OVA特异性IgE含量,调节BALF中Th1/Th2细胞因子的平衡;紫草醌能减轻小鼠慢性气道炎症模型的炎性细胞浸润和胶原沉积,减少胶原纤维的形成并抑制支气管平滑肌的增生;Western blot结果显示,紫草醌抑制了α-SMA、TGF-β1、Smad3的蛋白表达量,并抑制Smad3的磷酸化水平。结论紫草醌能改善哮喘小鼠的气道重塑,...     

FTY-720 通过S1P1 受体调节哮喘小鼠气道炎症

目的:探究S1P1对哮喘小鼠气道炎症的影响,并研究FTY-720的作用机制是否与S1P1/WNT1/RAC1/P38-MAPK信号通路有关。方法:30只雄性BALB/c小鼠随机分为3组,OVA建立小鼠哮喘模型,24 h后检测小鼠病理组织学变化;小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞数量,中性粒细胞数量、淋巴细胞数及细胞炎症因子水平;检测小鼠血清中IgE含量;Western blot检测小鼠肺组织S1P1、WNT1/RAC1/P38-MAPK等蛋白表达。结果:FTY-720可显著降低哮喘小鼠肺内炎症因子IL-1、IL-4、IL-5及血清中IgE水平,降低WNT1/RAC1/P38-MAPK等蛋白含量,抑制哮喘。结论:S1P1可参与哮喘发生并通过WNT1/RAC1/P38-MAPK通路改善哮喘小鼠气道炎症。     

CD11b激动剂leukadherin-1通过促进髓源性抑制细胞聚集和活化缓解小鼠内毒素休克发病

目的研究CD11b激动剂白细胞黏附素1(LA1)对髓源性抑制细胞(MDSC)的聚集和免疫抑制功能的影响,并检测其对脂多糖(LPS)诱导的内毒素休克模型小鼠的治疗效果。方法 C57BL/6雌性小鼠腹腔注射LA1 (40μg/g),12 h和48 h后,流式细胞术检测脾脏MDSC及其亚型粒细胞性髓源性抑制细胞(G-MDSC)和单核细胞性髓源性抑制细胞(M-MDSC)的比例。取C57BL/6雌性小鼠股骨及胫骨,体外诱导MDSC,通过实时定量PCR分析LA1处理对其免疫抑制相关因子白细胞介素10(IL-10)、NADPH氧化酶1 (NOX1)及诱导型一氧化氮合酶(i NOS) mRNA水平的影响。用C57BL/6雌性小鼠随机分为PBS组、LA1组、PBS联合LPS组和LA1联合LPS组,通过流式细胞术检测MDSC、G-MDSC及M-MDSC的比例及巨噬细胞表面CD86和CD40的表达,HE染色检测肝肺组织病理损伤,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肝肺组织细胞凋亡情况,观察小鼠死亡率反映小鼠病情的严重程度。通过以上检测指标分析LA1对内毒素休克小鼠体内MDSC的聚集及对病情的影响。结果 LA1处理12、48 h,均显著上调小鼠脾脏中MDSC的比例。与对照组相比,LA1处理12 h可显著上调G-MDSC的比例;体外实验发现,LA1可诱导MDSC中IL-10、NOX1及i NOS高表达;体内实验中,与PBS联合LPS组相比,LA1联合LPS组脾脏MDSC及G-MDSC的比例显著增加,肝、肺组织损伤减轻,死亡率下降,巨噬细胞活化程度显著降低。结论 CD11b激动剂LA1可通过促进MDSC的聚集及其免疫抑制相关因子的表达缓解内毒素休克的发病。     

HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节趋化因子及受体对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的 观察HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节趋化因子及趋化因子受体对急性哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的治疗作用.方法 以卵清蛋白(OVA)致敏小鼠,建立小鼠急性哮喘模型,同时肌肉注射HSP70/CD80 DNA疫苗.观察小鼠气道反应性,外周血IgE,肺组织炎症和黏液分泌情况,CCL5和CCL17在气道表达情况.Real-time PCR检测肺组织CCR5和CCR4基因表达.结果 与对照小鼠相比,急性哮喘小鼠的气道反应性明显增高,血清IgE含量明显升高(P＜0.05),肺组织炎细胞浸润明显(P＜0.05),大量黏液形成.HSP70/CD80 DNA疫苗治疗小鼠后,能有效减轻气道高反应性,降低血清IgE含量,降低抑制气道炎细胞浸润,减少黏液分泌(P＜0.05);且CCL5在气道上皮呈阳性表达,CCL17呈阴性(P＜0.05);肺组织CCR5基因表达增加和CCR4表达减少(P＜0.05).结论 HSP70/CD80 DNA疫苗可通过增强CCL5在气道上皮中的表达,减少CCL17表达;上调CCR5抑制CCR4,使CCR5/CCR4升高,从而恢复Th 1/Th2平衡,起到治疗哮喘的作用.     

二甲双胍抑制慢性哮喘小鼠气道炎症、重塑及新生血管形成

目的:探讨二甲双胍对慢性哮喘气道炎症、重塑及新生血管形成的影响及可能机制。方法:采用卵白蛋白(OVA)致敏并激发制备慢性哮喘小鼠模型,给予二甲双胍干预,与生理盐水对照组和慢性哮喘模型组相比,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数、外周血免疫球蛋白、气道重塑及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)蛋白水平的变化。结果:慢性哮喘小鼠BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞百分比较对照组升高(P0.01),血清OVA特异性IgE明显升高(P0.01),给药组可降低上述指标(P0.05)。肺组织HE染色可见气道壁炎症细胞浸润、杯状细胞增生、上皮下胶原沉积等病理改变,免疫组化CD31染色观察到气道上皮下新生血管数目和面积增加;二甲双胍部分抑制了上述病理过程。肺组织免疫组化p-AMPK染色观察到其在模型组气道壁的表达较对照组下降(P0.05),给药组升高明显(P0.01)。结论:慢性哮喘中AMPK磷酸化表达水平受抑制。二甲双胍可能通过激活AMPK来抑制慢性哮喘气道炎症、重塑及新生血管的形成。     

OVA-Fc融合基因疫苗对哮喘小鼠的疗效观察

目的探讨OVA-Fc融合基因疫苗治疗哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的效果。方法分别将制备的OVA-Fc-pcDNA3．1质粒、OVA-pcDNA3．1质粒、pcDNA3．1质粒,皮下免疫Balb／c哮喘小鼠模型,40d后,观察肺组织的病理变化,并检测肺泡灌洗液中细胞总数及嗜酸粒细胞计数,细胞因子的含量以及血清中OVA特异的IgE抗体的水平。结果OVA-Fc-pcDNA3．1基因修饰的DNA疫苗免疫小鼠后,能有效抑制哮喘小鼠肺组织的炎细胞浸润,肺泡灌洗液中细胞总数明显下降（P〈0．05）,嗜酸性粒细胞的总数明显下降（P〈0．05）,肺泡灌洗液中IL-10、INF-Y的分泌增加（P〈0．05）,血清中OVA特异的IgE抗体能有效的得以控制（P〈0．05）。结论OVA-Fc-pcDNA3．1基因修饰的DNA疫苗可较OVA变应原基因更强的特异性地抑制哮喘小鼠的气道炎症,有望对哮喘的治疗具有重要的价值。     

PLGA为佐剂的OVA纳米疫苗皮下注射可预防小鼠过敏反应性气道炎症和调节Thl/Th2反应

目的 探讨聚乳酸.羟基乙酸共聚物[poly(D,L-lactic-co-glycolic)acid,PLGA]包裹的卵清蛋白(OVA)纳米癌苗(POM)对哮喘小鼠的免疫治疗效果.方法 包裹不同剂量(低、中、高)的OVA纳米粒子和对照(OVA、空白纳米粒子、PBS)通过皮下注射给予小鼠,再用OVA进行致敏和激发,通过肺组织学、支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数、测定BALF和脾细胞培养上清液中细胞因子的含量,观察小鼠呼吸道炎症和免疫学改变.结果 肺部组织学和BALF中细胞计数结果显示,与PBS对照组相比,OVA治疗组、中剂量和高剂量OVA纳米组的肺部嗜酸性浸润显著减轻,BALF中总细胞和嗜酸性细胞显著减少.卸胞因子测定结果显示,与PBS对照组相比,中、高剂量OVA纳米组的BALF和脾细胞培养上清液中IFN-γ显著升高,Ⅱ,4水平显著降低.OVA治疗组中IL-4水平显著下降,而IFN-γ水平无显著差异.结论 OVA纳米疫苗可预防哮喘嗜酸性气道炎症,其可能的机制之一是调节了过敏性哮喘的Th1/Th2失平衡反应.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对哮喘小鼠肺组织中PTEN基因表达的影响

目的建立哮喘小鼠急性模型,探讨给予不同剂量的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)腹腔注射干预治疗,对小鼠气道炎症及肺组织中PTEN基因表达的影响。方法 32只SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为4组,正常对照组、哮喘组、EGCG(5 mg/kg)治疗组、EGCG(50 mg/kg)治疗组,应用卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立哮喘模型。采用苏木素-伊红染色观察小鼠气道炎症情况,无创通气方法检测小鼠气道反应性,ELISA方法检测小鼠血清中OVA特异性IgE的水平,Real-time PCR及免疫组化方法检测小鼠肺组织中人类第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)mRNA及蛋白表达,以及不同剂量EGCG干预治疗对其表达的影响。结果与正常组相比,哮喘组小鼠气道炎性细胞浸润明显增加,气道反应性增高,肺组织中PTEN表达下降,差异有统计学意义(P0.05),应用高低剂量的EGCG干预治疗后均可减轻气道炎性细胞浸润及降低气道高反应性,同时上调肺组织中PTEN基因的表达,与哮喘组相比差异有统计学意义(P0.05),且呈剂量依赖性。结论哮喘组小鼠肺组织中PTEN基因表达下降,EGCG干预治疗减轻小鼠气道炎症的,其可能通过上调PTEN基因的表达而发挥作用。     

雾化吸入干扰素γ阻断GATA-3表达防治哮喘的实验研究

目的 研究雾化吸入IFN-γ对支气管哮喘（哮喘）防治作用及其机制。方法 以Balb/c小鼠采用卵蛋白（OVA）、氢氧化铝建立哮喘模型（C组）,于23d至30d雾化吸入IFN-γ 12μg 1次/d,31d时取肺泡灌洗液（BALF）测定细胞成分,白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素5（IL-5）浓度,取血测定血浆IgE水平,观察肺组织病理学变化及GATA-3的表达。设正常对照组（A组）和哮喘模型PBS处理组（B组）。每组小鼠12只。结果 ①C组BALF中的嗜酸性粒细胞（EOS）数量明显低于B组（P〈0．01）;②C组BALF中的IL-4和IL-5的水平明显低于B组（P〈0．01）;③C组血浆中总IgE和OVA特异性IgE水平显著低于B组（P〈0．01）;④B组支气管平滑肌肥厚,黏膜充血、水肿,黏膜层增厚,并有EOS为主的炎性细胞浸润,管腔内可见黏液栓,支气管壁周围有EOS为主的炎症细胞浸润,而C组小鼠的上述炎症性改变则明显减轻;⑤免疫组化显示B组肺组织中GATA-3的表达明显增加,而C组GATA-3的表达明显减少。结论 雾化吸入IFN-γ可抑制哮喘鼠IL4、IL5的合成,抑制气道炎症,抑制EOS在气道内的炎性浸润及降低血浆总LgE和OVA特异性LgE水平,其机制可能与IFN-γ阻断GATA-3的表达,从而继发抑制Th2型反应有关。     

T-bet基因转染对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的： 观察气道内T-bet基因转染对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法: C57BL/6小鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、空质粒干预组(C组) 和T-bet质粒干预组(D组)。卵白蛋白(OVA) 抗原溶液腹腔注射致敏,滴鼻造模。正常对照组用生理盐水代替OVA,空质粒干预组和T-bet质粒干预组OVA激发48 h前,分别经鼻滴入50 μg空质粒和重组T-bet质粒。观察各组实验小鼠的肺组织炎症以及BALF中各类炎症细胞以及IL-4、IFN-γ水平的变化。 结果: Western blotting检测发现,小鼠气道转染pcDNA3-T-bet质粒48 h后肺组织T-bet蛋白表达显著增加。pcDNA3-T-bet质粒转染能较好抑制给药后48 h OVA激发的哮喘小鼠气道炎症（包括炎症细胞浸润,上皮细胞损伤、黏液分泌、血管壁水肿及管腔缩窄）;下调小鼠BALF中Th2因子IL-4并上调Th1因子IFN-γ水平。 结论: 气道内转染T-bet质粒能有效改善哮喘小鼠的气道炎症。     

薯蓣皂苷抑制ERK/p38MAPK信号通路减轻过敏性哮喘小鼠炎症反应

目的探讨薯蓣皂苷对过敏性哮喘小鼠炎症反应的影响及对ERK/p38MAPK信号通路的调控作用。方法 SPF级BALB/c小鼠40只,随机分为对照组、过敏性哮喘模型组、薯蓣皂苷组与地塞米松组,每组10只。利用卵白蛋白致敏联合雾化激发法建立小鼠过敏性哮喘模型。HE染色观察肺组织炎症细胞浸润情况;ELISA检测小鼠血清中OVA特异性免疫球蛋白和小鼠肺泡灌洗液中炎性因子表达;Western blot检测各组小鼠肺组织MAPK信号通路相关蛋白ERK1/2、p38 MAPK、JNK、p-ERK1/2、p-p38 MAPK及p-JNK蛋白表达。结果薯蓣皂苷降低过敏性小鼠肺组织炎性浸润,降低血清中OVA特异性IgE含量(P0.05),降低BALF中炎性因子IL-4、IL-5及IL-13,促进IFN-的表达水平(P0.05),抑制哮喘小鼠肺组织p-ERK1/2,p-p38 MAPK及p-JNK蛋白的表达水平(P0.05)。结论薯蓣皂苷抑制过敏性哮喘小鼠炎症反应,与MAPK信号通路相关。     

动态观察过敏原诱导的哮喘小鼠模型从急性炎症到慢性重塑的发展

目的:动态观察对比卵白蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠模型从气道的急性炎症到慢性重塑的相关炎症指标及气道重塑指标的变化。方法:60只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组和哮喘组。哮喘组给予OVA致敏和激发,正常对照组给予等量生理盐水(NS)作为对照,第21天开始,连续激发3 d,观察急性炎症反应;而后每周激发1次、每次激发后24 h内取材1次连续5周;动态观察对比OVA激发组和NS对照组小鼠气道炎症细胞的浸润情况、灌洗液细胞因子水平和气道重塑相关指标。结果:与NS组比较,OVA组肺组织的炎症细胞浸润明显,炎症因子升高;气道上皮细胞向杯状细胞转化明显;支气管外周胶原沉积显著。OVA组内比较,24 d组炎症细胞和炎症因子上升明显,而上皮细胞向杯状细胞的转化以及支气管外周胶原沉积相关重塑指标不明显,52 d组上皮细胞向杯状细胞的转化以及支气管外周胶原沉积相关重塑指标最为显著,而炎症细胞和炎症因子有所下降。结论:连续3次OVA激发可成功模拟炎症细胞和炎症因子显著的急性哮喘模型;每周1次、连续5周的OVA激发方式可成功模拟重塑明显的慢性哮喘模型。     

PLGA为佐剂的OVA纳米疫苗皮下注射可预防小鼠过敏反应性气道炎症和调节Th1/Th2反应

目的 探讨聚乳酸.羟基乙酸共聚物[poly（D,L-lactic-co-glycolic）acid,PLGA]包裹的卵清蛋白（OVA）纳米癌苗（POM）对哮喘小鼠的免疫治疗效果.方法 包裹不同剂量（低、中、高）的OVA纳米粒子和对照（OVA、空白纳米粒子、PBS）通过皮下注射给予小鼠,再用OVA进行致敏和激发,通过肺组织学、支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数、测定BALF和脾细胞培养上清液中细胞因子的含量,观察小鼠呼吸道炎症和免疫学改变.结果 肺部组织学和BALF中细胞计数结果显示,与PBS对照组相比,OVA治疗组、中剂量和高剂量OVA纳米组的肺部嗜酸性浸润显著减轻,BALF中总细胞和嗜酸性细胞显著减少.卸胞因子测定结果显示,与PBS对照组相比,中、高剂量OVA纳米组的BALF和脾细胞培养上清液中IFN-γ显著升高,Ⅱ,4水平显著降低.OVA治疗组中IL-4水平显著下降,而IFN-γ水平无显著差异.结论 OVA纳米疫苗可预防哮喘嗜酸性气道炎症,其可能的机制之一是调节了过敏性哮喘的Th1/Th2失平衡反应.     

哮喘小鼠CD4~+CD25~+Foxp3~+调节T细胞和Foxp3蛋白的变化及淫羊藿苷干预作用

目的:研究哮喘小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节T(Treg)细胞和Foxp3蛋白的变化,探讨淫羊藿苷对哮喘干预机制。方法:将BALB/c小鼠32只随机分为正常对照组、哮喘模型组、淫羊藿苷组、地塞米松阳性对照组,每组8只。哮喘模型制备用卵白蛋白(OVA)致敏大鼠并雾化吸入刺激,治疗组采用相应药物灌胃给药,对照组用等量生理盐水代替。最后一次激发24小时后,采用Buxco肺功能仪有创法检测小鼠气道反应性;HE染色评价观察小鼠肺组织病理形态学改变;流式细胞术检测脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例及Foxp3蛋白表达量;免疫印迹法测定肺组织Foxp3蛋白表达量;ELISA法测定血清及肺泡灌洗液(BALF)IL-10水平。结果:与正常对照组比较:模型组气道阻力及气道炎症指数显著增加(P<0.05);脾Treg细胞比例无明显变化(P>0.05);脾Foxp3蛋白表达显著下降(P<0.05),肺组织Foxp3蛋白表达显著升高(P<0.05),外周血IL-10水平显著下降(P<0.05),BALF中IL-10无显著差异(P>0.05);与模型组比较:淫羊藿苷组气道阻力和气道炎症明显减轻(P<0.05);脾Treg细胞比例和脾Foxp3蛋白表达水平无显著变化(P>0.05),但淫羊藿苷可进一步上调哮喘小鼠肺组织Foxp3蛋白表达量(P<0.05),并增加外周血IL-10水平(P<0.05)。结论:哮喘小鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞Foxp3蛋白表达水平下降,淫羊藿苷可显著改善哮喘小鼠气道炎症和气道高反应,可能与其上调肺组织Foxp3蛋白表达和增加外周血IL-10水平相关。     

大蒜素对过敏性哮喘小鼠气道炎症及cAMP/PKA/CREB通路的影响

目的 探究大蒜素对过敏性气道炎症的治疗作用及对cAMP/PKA/CREB通路的影响。方法 40只SPF级雄性BALB/c小鼠,随机分为空白组、模型组、大蒜素组、地塞米松组,每组10只。模型组与给药组利用卵白蛋白（OVA）致敏联合雾化激发的方法建立过敏性哮喘模型。检测炎症细胞数量变化;HE染色、Masson染色观察肺组织病理改变及气道重塑情况;ELISA检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ、TNF-α及IgE水平变化;免疫荧光方法观察肺组织cAMP蛋白表达变化;Western blot检测肺组织PKA、CREB、p-CREB蛋白表达变化。结果 大蒜素能够改善肺组织炎症病理损伤,调节气道重塑;降低BALF中炎性细胞数量、降低IL-4、IL-5、IL-13、TNF-α表达、降低IgE含量,上调IFN-γ表达;上调肺组织cAMP、PKA、CREB、p-CREB蛋白的表达。结论 大蒜素可能通过调控cAMP/PKA/CREB信号通路抑制过敏性哮喘小鼠气道炎症反应。