分泌抗人早期T细胞单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

以胎儿胸腺细胞免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，用Ｂ淋巴细胞杂交瘤技术产生了两种单克隆抗体，分别命名为ＳＭＵ１３、ＳＭＵ１４。初步鉴定的结果表明，１）ＳＭＵ１３，ＳＭＵ１４是抗早期Ｔ淋巴细胞的单克隆抗体，但与浆细胞也发生反应；（２）两株单抗的特性，反应谱与ＣＤ３８抗原相似；（３）ＳＭＵ１３，ＳＭＵ１４在白血病免疫学分型中可以明确判断白血病细胞的来源，具有结合补体的能力，在急性Ｔ淋巴细胞白血病的治疗中可发挥     

分泌抗人IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

应用人ＩｇＧ免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾脏与ＳＰ２／０小鼠骨髓瘤细胞在ＰＥＧ作用下融合，经３次克隆化后获得五株抗人ＩｇＧ单克隆抗体的杂交瘤细胞，用被动血凝法和ＥＬＩＳＡ检测培养上清滴度为２￣４，用琼脂双扩散法证明此单克隆抗体只与人ＩｇＧ发生反应，产生透明沉淀线。经ＩｇＧ亚类血清鉴定，其单克隆抗体均属ＩｇＧ－Ｇ１亚类抗体。五株杂交瘤细胞在液氮保存数月，经反复复苏培养，不改变其分泌抗体的性能。     

分泌抗人胎盘型谷胱甘肽S-转移酶单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

通过B淋巴细胞杂交技术,成功地制备了分泌抗GST-π单克隆抗体的杂交瘤细胞株A_1和A_2。对获得的两株杂交瘤细胞株进行了染色体核型分析和DNA含量测定。结果表明,它们确系NS-1小鼠骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞的杂交体,抗体类型鉴定结果表明,杂交瘤A_1只分泌IgG_1类免疫球蛋白,而A_2只分泌IgG_(2a)类免疫球蛋白,且两类免疫球蛋白均由k型轻链组成。两株杂交瘤分泌的单克隆抗体仅与GST-π特异反应,与GST的其它类型同功酶及其它可溶性抗原均无交叉反应。     

分泌抗巨细胞病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立

用CMV-AD_(169)病毒株免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP_(2/0)细胞融合,获得5株分泌抗CMV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,其细胞培养上清液效价(ELISA)为1∶32～1∶128,腹水效价为10~4～10~5,经证实McAb为IgG2a或IgM,均具有HCMV种特异性,可作为特异、敏感的免疫试剂,用于巨细胞病毒感染的早期快速诊断。     

分泌抗人喉癌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及临床意义

用喉癌抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选获得４株分泌抗人喉癌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，均收集到腹水型ＭｃＡｂ，并验证其滴度高，纯化效果好，特异性强。用其中３株ＭｃＡｂ混合，对１２４例喉癌及４０例正常人血清予以检测，结果喉癌患者血清中喉癌相关抗原水平明显高于对照组，Ｐ＜０．０１，且随病情的加重，喉癌相关抗原水平呈上升趋势。故本室建立的抗人喉癌混合ＭｃＡｂ可作为一种较为理想的肿瘤标记物，为喉癌的诊断、病情监测、预后判定提供了一种敏感、特异的测试手段。     

分泌抗SPA单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与鉴定

以 SPA 作基础免疫 BALB/C 小鼠后,融合前三天直接脾内免疫,取脾细胞与 SP_2/O 瘤细胞常规融合,融合率100%;以快速 ELISA 法检测抗体,阳性率60%。5次有限稀释法克隆化后获得7株杂交瘤细胞,作中和抑制试验,证实为 SPA 特异性抗体。经鉴定属 IgG2a 及 IgG2b 亚类。电镜观察细胞融合,发现其细胞内含逆转录病毒。杂交瘤细胞液氮保存与体外连续传代一年,仍保持原有各种特性。     

分泌抗——HBe单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＨＢｅＡｇ阳性血清纯化ＨＢｅＡｇ，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，反复克隆化培养，最终获得４株分泌抗－ＨＢｅ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中两株进行了鉴定。其细胞培养上清中的ＥＬＩＳＡ效价的分别为１：８００和１：５００，诱生同属小鼠腹水中的ＥＬＩＳＡ效价均为１：１０００，特异性试验表明，两株杂交瘤分泌的抗体为特异性抗体，小鼠Ｉｇ亚类鉴定，两株抗体均为ＩｇＧ１亚类球蛋白。细胞染     

三株抗人B淋巴细胞表面抗原单克隆抗体的研制及初步鉴定

用慢性Ｂ淋巴细胞白血病患者外周血白血病细胞免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，以Ｂ淋巴细胞杂交瘤技术产生了三种单克隆抗体，分别命名为ＳＭＵ＿（１０）、ＳＭＵ＿（１１）ＳＭＵ＿（１２）。初步鉴定的结果表明，（１）ＳＭＵ＿（１０）、ＳＭＵ＿（１１）是抗成熟阶段Ｂ细胞及浆细胞的单抗，二者的特性及反应谱相类似；（２）ＳＭＵ＿（１２）是一非系限性单抗，与成熟Ｔ细胞、分化后期的Ｂ细胞及部分粒单细胞反应；（３）ＳＭＵ＿（１０）、ＳＭＵ＿（１１）、ＳＭＵ＿（１２）可较好地判明白血病细胞的来源及Ｂ细胞的分化阶段，在白血病的免疫学分型中具有实用价值；（４）三株单抗是新的抗Ｂ细胞特异性单抗。     

分泌抗人精子单克隆抗体杂交瘤细胞的建立

用人精子免疫BALB/C小鼠,用杂交瘤技术制备出9株抗人精子单克隆抗体。经酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光实验证明,9株抗人精子单克隆抗体均能与人精子产生特异性免疫反应。连续传代及液氮中保存的杂交瘤细胞分泌抗人精子单克隆抗体的滴度持续稳定。     

PRODUCTION OF HYBRID CELL LINES SECRETING MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST POLIOVIRUS TYPE 2

By fusing NS-1 mouse myeloma cells with spleen cells'from immunized BALBi'c mice with MEF l strain type 2 poliovirus, 7 hybridoma cell lines secreting type 2 poliovirus monoclonal antibodies are established in our laboratory. These hybrid cells possess many of their parents' properties as chromosome number and morpho- logy producing cancer nodules by intraperitoneal injection and stable production of ;specific an- tibodies. The titer of neutralizing antibodies se- creted by hybrid cell in vitro cultured is l:80- 5120 and of antibodies in BALB/c mice ascitic fluid l:20480-327680. The monoclonal antibodies are strictly type-specific, some have different neutralizing activities to different strains of the same type poliovirus.     

分泌抗破伤风类毒素人单克隆抗体的人鼠杂交瘤细胞系的建立

作者采用小鼠骨髓瘤细胞系与破伤风类毒素免疫的人外周血淋巴细胞进行融合,对影响人-鼠杂交瘤细胞制备人单抗成功的因素进行了探讨。按免疫时间(天)及体外刺激与否分为四组、其中以 PWM+TT 体外刺激 PBL(比体外不刺激)的细胞融合率高,且易建成稳定分泌抗体的细胞系。经5次克隆化后获得5株抗 TT 的人单抗杂交瘤细胞系。经双扩确定 IgG2株,IgM3株。冻存10个月后复苏,传代及适当的克隆化后仍为阳性。上清液中人 IgM 的分泌量为0.42～1.15μg/ml。经染色体鉴定确为人-鼠杂种细胞。     

一组抗人髓系细胞分化抗原单克隆抗体的制备和初步应用

用新鲜白血病细胞或细胞株免疫BALB/c小鼠,经细胞融合技术制备得6株能稳定分泌抗人髓系细胞分化抗原单克隆抗体(以下简称单抗)的杂交瘤株.经鉴定该组单抗各自所识别的特异性抗原分子量为46～150kd.这些抗原在粒单系细胞膜上均有程度不等的表达,6种单抗中有5种具有结合兔补体的能力,其对白血病细胞株补体依赖的特异性细胞毒为73%～94%.两种单抗(Zh_(820),Zh_(114))对正常CFU-GM生长有抑制作用外,余4种单抗无明显影响.6种单抗均与FAB M_1～M_5型急性髓系白血病细胞有不同程度的阳性反应.     

霍乱弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞株建立

本法获得了841C71、841C72两个分泌抗霍乱弧菌菌体抗原单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。其培养上清抗体滴度为1∶8～1∶64,小鼠腹水抗体滴度为1∶1280～1∶5120。与霍乱弧菌小川型的反应滴度在1∶80～1∶160之间,但不与水弧菌及大肠杆菌等肠道杆菌发生交叉反应。此二株细胞产生的MAb为IgG类。     

一组抗人T淋巴细胞表面抗原单克隆抗体的制备及鉴定

用鼠细胞融合杂交瘤技术,获得3株分泌抗人T淋巴细胞表面抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别为SMU_1、SMU_2、SMU_3,为IgG_1类,不与补体结合。间接免疫荧光法表明,SMU_1、SMU_3分别与50.3±6.42%和51.5±6.37%的周血单个核细胞反应,SMU_2与68.89±9.92%的周血半个核细胞及74.68±8.08%的成熟粒细胞反应,3株单抗的分子量为54～62kD(未还原)。调变试验及竞争抑制试验表明SMU_1、SMU_3与WuT_3识别相同的抗原分子,但为不同的表位。SMU_2为一非系限性单抗。本组单抗对研究T淋巴细胞分化及临床白血病免疫分型是有意义的。     

分泌抗人精子单克隆抗体的杂交瘤细胞株(6B_4、7C_4)的建立

将经正常人的精子细胞免疫的 BALB/c 鼠脾脏取出,使此细胞与 NS1小鼠骨髓瘤细胞融合。用间接免疫荧光法等方法检测抗体,得到12个孔抗人精子阳性的杂交瘤。经过2～3次有限稀释法克隆化后建立了分泌抗人精子单克隆抗体的杂交瘤细胞株6B_4及7C_4。其染色体数目为86～88对,它对人精子有制动、凝集作用并有种间交叉反应,对人 LDH 活力有明显的消耗作用。证明该抗体有特异性。这些生物学特性对男性避孕有一定的实用价值。     

分泌抗B型肉毒毒素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

我国由肉毒毒素引起的食物中毒以A、B型最常见。但用常规法制备的抗血清在两型间常有交叉反应,不适于分型鉴定之用。即使应用亲和层析交叉吸收纯化,仍难以获得B型特异性抗体。为获得高效价的型特异性抗体,本研究以B型肉毒类毒素免疫纯系BALB/c小鼠,注射3次后,血清抗体琼脂双