二十碳五烯酸联合依托泊苷对人肺腺癌A-549细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究二十碳五烯酸(EPA)联合依托泊苷对人肺腺癌A-549细胞株增殖与凋亡的影响.方法 分别用终浓度为40 μg/ml EPA、10 μg/ml依托泊苷、40 μg/ml EPA+ 10μg/ml依托泊苷、20μg/ml依托泊苷、40 μg/ml EPA+ 20μg/ml依托泊苷孵育A-549细胞,采用MTT法、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭双染法、吖啶橙/溴化乙锭双染法及流式细胞术研究细胞增殖抑制率、细胞形态学及凋亡情况.结果 EPA联合依托泊苷对A-549细胞的增殖抑制率显著高于依托泊苷单独的作用(P均＜0.05).细胞荧光染色显示:EPA联合依托白苷组的凋亡细胞数量多于依托泊苷单独作用组.EPA联合依托泊苷组的S期及G2/M期细胞显著多于依托泊苷单独作用的细胞(P均＜0.05).结论 EPA可能具有增强依托泊苷抑制人肺腺癌A-549细胞增殖、促进A-549细胞凋亡的作用.     

二十碳五烯酸（EPA）对胃癌细胞增殖与凋亡的影响

目的观察二十碳五烯酸（EPA）对人胃癌细胞系增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法以终浓度为10、20、40μg／ml的EPA作用于SGC-7901和MGC-803人胃癌细胞系24-72h。采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞技术分析细胞周期分布与细胞凋亡,利用荧光探针rhodamine 123测定线粒体膜电位,酶联免疫吸附法测定线粒体和胞浆中细胞色素C水平,荧光光谱法测定凋亡效应酶半胱天冬蛋白酶-3（caspase-3）活性。结果经10-40μg／ml EPA处理的胃癌细胞增殖率显著降低,且呈现时间依赖性。与对照组比较,经40g／ml EPA作用72h后,SGC-7901和MGC-803细胞G0／G1期细胞的比例均增加（P=0.006、P=0.009）。经40g／ml EPA作用24h后,胃癌细胞线粒体膜电位显著低于对照组（P=0.001、P=0.047）;线粒体内细胞色素C的含量明显少于对照组（P=0.001、P=0.000）,而细胞浆中细胞色素C含量显著高于对照组（P=0．001、P=0．000）。在SGC-7901细胞中,caspase-3活性随着EPA（40g／mL）作用时间延长而升高。结论EPA通过诱导细胞周期阻滞和激活线粒体通路,抑制人胃癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

苦参碱联合顺铂对 SiHa细胞 TSLC1基因表达的影响

目的：探讨苦参碱联合顺铂抑制人宫颈癌SiHa细胞及对肺癌肿瘤抑制因子1（TSLC1）基因表达的效果。方法取对数生长期的SiHa分为对照组、苦参组、顺铂组和联合组,采用四甲基偶氮唑蓝比色法（ MTT）测定4组联合干预SiHa细胞2d后的抑制率;采用实时荧光定量（ RT－PCR）技术检测各组处理后TSLC1基因mRNA表达水平的变化。结果对照组、顺铂组、苦参碱组和联合组的SiHa细胞抑制率分别为0、61．24％、70．31％和74．20％,药物干预组均高于对照组（ t 值分别为14．21、17．44、11．20,均P＜0．05）,同时联合组高于苦参碱和顺铂单独干预（t值分别为4．47、3．21,均P＜0．05）,而顺铂和苦参碱组间差异无统计学意义（t＝0．71,P＞0．05）。对照组、苦参碱组、顺铂组和联合组干预SiHa细胞后TSLC1mRNA表达量分别为1．00±0．00μg／mL,23．53±0．01μg／mL,84．33±0．03μg／mL和90．23±0．01μg／mL,苦参碱组、顺铂组和联合组干预组明显高于对照组（ z值分别为9．41、10．72、13．23,均P＜0．05）,其中苦参碱组和联合组TSLC1mRNA表达量组间比较差异无统计学意义（z＝1．24,P＞0．05）,但均高于顺铂组（z值分别为6．04、5．47,均P＜0．05）;析因设计方差分析结果表明顺铂和苦参碱均为SiHa细胞抑制率和TSLC1基因表达的影响因素,而且两者存在交互作用,联合应用使效果增加。结论苦参碱联合顺铂能抑制人宫颈癌SiHa细胞增殖,提高TSLC1mRNA表达量。     

人参皂甙Rg3诱导人肝癌细胞凋亡作用的研究

目的 研究人参皂甙Rg3抑制人肝癌细胞生长及诱导凋亡作用机制。方法 体外培养人癌细胞（SMMC-721），观察人参皂甙Rg3高剂量组（80μg／m1）、中剂量组（40μg／m1）、低剂量组（20μg／m1）、阳性顺铂对照组（DDP，80μg／m1）和空白对照组（P13S）于12h、24h、48h、72h培养后，肝癌细胞的形态学和生长情况。采用MTT法，分析人参皂甙Rg3对细胞生长抑制率的影响。通过电镜观察细胞凋亡的形态学特征。结果 应用人参皂甙Rg3后，普通光镜下发现细胞数随Rg3浓度增加而减少，呈剂量依赖性，人参皂甙R西高、中、低剂量组细胞生长的抑制率分别为34．6％、19．1％和6．1％，与未处理空白对照组的细胞生长抑制率（5．7％）相比，以人参皂甙Rg3高剂量组于作用72h后对细胞生长的抑制作用最明显（P〈0．001），中剂量组次之（P〈0．05），低剂量组及Rg32h，24h，48h组未见明显差别。阳性对照顺铂组的细胞生长抑制为22．2％。人参皂甙Rg3作用72h后的电镜分析显示，细胞出现典型的凋亡形态学改变。结论 人参皂甙Rg3具有抑制人肝癌细胞生长作用，与促进细胞凋亡机制有关。     

白藜芦醇对小鼠前脂肪细胞凋亡及细胞周期的影响

目的研究白藜芦醇（Res）对小鼠前脂肪细胞凋亡及细胞周期的影响及其机制。方法分别用25、50、75、100μmol／L的Res干预小鼠前脂肪细胞24、48、72h,并设0μmol／LRes为阴性对照组（每组设3个复孔,重复3次）。全自动倒置荧光显微镜观察细胞的形态学变化、细胞增殖．毒性检测试剂盒检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞凋亡与细胞周期。结果形态学上．经50μmol／LRes干预48h后的小鼠前脂肪细胞具有典型凋亡形态学改变。细胞增殖-毒性检测发现,0、25、50、75、100μmol／LRes干预24h细胞增殖率分别为100％、（97．00±1．00）％、（91．00±2．65）％、（90．67±2．52）％和（86．00±3．61）％;干预48h细胞增殖率分别是100％、（86．67±2．52）％、（76．00±2．00）％、（34．33±2．08）％和（30．33±2．52）％;干预72h,细胞增殖率分别是100％、（82．00±2．65）％、（65．67±3．06）％、（21．00±3．61）％和（16．33±3．21）％。偏相关分析结果显示细胞增殖率与干预时间、Res浓度均呈负相关关系（r=-0．72、-0．83,均P〈0．01）。0、25、50、75、100μmol／LRes干预24h,G0／G1期的细胞比例分别为（27．23±2．63）％、（39．03±2．74）％、（80．20±5．15）％、（87．97±3．12）％和（90．80±2．08）％;S期的细胞比例分别为（72．43±2．99）％、（63．93±6．90）％、（19．80±5．15）％、（12．20±2．86）％和（9．20±2．08）％,2个细胞周期的50、75、100μmol／LRes干预组与阴性对照组之间的细胞比例差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。0、25、50、75、100μmol／LRes干预48h,细胞凋亡率分别为（2．90±0．10）％、（5．40±3．81）％、（8．23±4．24）％、（29．77±6．18）％和（27．23±3．17）％;细胞坏死率分别为（7．50±0．87）％、（12．00±4．89）％、（12．27±3．81）％、（12．67±6．13）％和（20．73±2．64）％,100μmol／L的干预组的细胞调亡率、坏死率与阴性对照组的差异均具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）,其他各组与阴性对照组的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论在一定的剂量范围内（0～100μmol／L）,Res可能抑制小鼠前脂肪细胞生命周期并促进其凋亡。     

热化疗对肺部肿瘤细胞生长影响的研究

[目的]研究热化疗联合对肺部肿瘤细胞生长的影响。[方法]构建人谷胱甘肽硫转移酶P1(glutathione- s-transferase P1,GSTP1)基因的真核表达载体,转染人肺腺癌A549细胞,然后按临床常用剂量,用6．25、12．50、25．00、50．00、100．00、200．00μg/L紫杉醇处理转染和未转染的A549细胞,并联合43℃加热,用噻唑蓝比色法(MTT法)和流式细胞术(FCM)检测转染前后A549细胞在不同条件下的生长和细胞周期分布,并运用SPSS 11．5对数据进行统计分析。[结果]两种细胞在6．25、12．50、25．00、50．00、100．00μg/L浓度的紫杉醇作用下,未转染细胞增殖率低于转染细胞(P< 0．05)。43℃加热,两种细胞在6．25、12．50、25．00、50．00、100．00、200．00μg/L浓度的紫杉醇作用下,未转染细胞增殖率高于转染细胞(P<0．05);流式细胞仪检测两种细胞的生长周期,与未转染细胞相比,转染细胞的G0／G1期(53．30％与67．40％)和G2M期(8．82％与19．60％)延长,S期缩短(37．90％与13．00％),均P<0．05。[结论]热化疗联合治疗可以逆转肺部肿瘤细胞的耐药,为进一步研究预防肺癌发生及其与职业性肺癌的关系奠定了基础。     

紫杉醇联合顺铂对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的逆转作用

目的:探讨紫杉醇联合顺铂对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的逆转作用。方法:取对数生长期SK-OV3/DDP细胞进行实验。实验分为顺铂组、紫杉醇组、联合组和空白对照组。顺铂组细胞给予顺铂15μg/ml;紫杉醇组细胞给予紫杉醇3.13μg/ml;联合组细胞给予顺铂15μg/ml+紫杉醇3.13μg/ml;空白对照组细胞不给予任何药品。所有细胞均培养48 h后进行实验。采用MTT法检测细胞的生长抑制率。采用流式细胞术检测各组细胞的细胞周期和凋亡率。结果:顺铂组细胞生长抑制率与空白对照组无明显增加(P<0.05),证实SKOV3/DDP对顺铂的耐药,紫杉醇组和联合组细胞生长抑制率较空白对照组和顺铂组明显增加(P﹤0.05),联合组细胞生长抑制率最高,较紫杉醇组增加更为明显(P﹤0.05)。顺铂组与空白对照组细胞多被阻滞于G1和S期,紫杉醇及联合组细胞多被阻滞于G2/M期,联合组作用较紫杉醇组更加明显(P﹤0.05)。顺铂组细胞凋亡率与空白对照组无明显差异(P>0.05),紫杉醇组和联合组细胞凋亡率较空白对照组和顺铂组明显增加(P﹤0.05),联合组细胞凋亡率最高,较紫杉醇组增加更为明显(P﹤0.05)。结论:紫杉醇联合顺铂可明显逆转卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP对顺铂的耐药性。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合顺铂对宫颈癌细胞凋亡作用的体外研究

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(SAHA)联合顺铂(DDP)对宫颈癌SiHa细胞生长抑制和促凋亡的效果。方法:以1μmol/L SAHA、2μmol/L SAHA、4μmol/L SAHA和1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml DDP分别组成单药组和不同SA-HA+DDP联合用药组,分别应用MTT方法检测细胞增殖抑制率,应用流式细胞术检测SiHa细胞早期凋亡的情况。结果:联合用药组肿瘤细胞大量坏死明显,对细胞增殖的抑制率明显高于相应单药组(P<0.05);SAHA与中低剂量的DDP联合给药表现为协同作用,而与较高剂量的DDP联合用药表现为单纯相加作用;联合作用较二者单独用药细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论:SAHA对宫颈癌细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用,SAHA联合DDP有协同增敏作用。     

姜黄素对人喉癌细胞株Hep-2增殖和端粒酶活性的影响

目的研究姜黄素（curcumin）对人喉癌细胞Hep-2增殖和端粒酶活性表达水平的影响。方法CCK-8法检测不同浓度姜黄素作用于Hep-2后24h、48h、72h的细胞增殖活性：集落形成试验检测不同浓度姜黄素作用于Hep-2后的细胞增殖抑制率;StretchPCR-银染法检测细胞端粒酶活性变化。RT—PCR分析端粒酶主要组分hTERT的mRNA表达情况。结果①姜黄素对Hep-2细胞的增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性。五种浓度（20μmol／L、40μmol／L、60μol／L、80μmol／L、100μol／L）姜黄素作用12、24、48、72小时后,IC50分别为81．17μmol／L、40．90μmol／L、33．26μmol／L、31．63μmol／L;②四种浓度（20μmol／L、40μmol／L、60μmol／L、80μmol／L）姜黄素作用于Hep-2细胞48h,-周后各组Hep-2细胞集落形成数和细胞增殖抑制率均呈浓度依赖性．其细胞增殖抑制率与对照组相比,分别为36．25％、57．4％、98．48％、100％;③60μmol／L姜黄素作用于Hep-2细胞24、48、72小时后。与对照组相比,端粒酶活性总光密度值（IOD）分别下降23．19％、60．28％和70．15％,各时间组间有显著性差异（P〈0．01）;端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA表达水平IOD值分别下降2．90％、58．69％和88．35％,各时间组间有显著性差异（P〈o．01）。结论姜黄素可抑制体外培养的Hep-2细胞的增殖活性,下调hTERTmR．NA的转录水平并抑制细胞的端粒酶活性,有较好的临床应用前景。     

黄芩提取物联合顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV-3凋亡的研究

目的:探讨黄芩提取物(Scutellaria Baicalensis)与顺铂(cisplatin,DDP)联合应用对卵巢癌细胞系SKOV-3增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT比色法检测S.Baicalensis与DDP联合应用对SKOV-3细胞增殖的影响,吖啶橙染色观察诱导细胞凋亡情况,流式细胞仪分析细胞周期及凋亡并计算细胞平均凋亡率,Westernblot技术观察细胞内p53、ERK1/2、p-STAT3的表达。结果:300μg/mlS.Baicalensis联合5μg/ml DDP给药:①48h后可使肿瘤细胞抑制率由单独应用DDP的15.8%提高到37.3%;②吖啶橙荧光染色可见细胞呈现明显凋亡形态,其凋亡率与10μg/ml DDP组相当;③流式细胞检测结果显示,可使细胞凋亡率从15.1%提高到42.2%(P<0.05);④westernblot结果显示,p53、ERK1/2、p-STAT3表达较5μg/ml DDP组单独给药组降低(P<0.05)。结论:S.Baicalensis与DDP联合应用增强对卵巢癌细胞株SKOV-3的致凋亡效应,联合应用可达到减毒增效的效果。     

NP方案加同期照射对人肺腺癌细胞存活的影响

目的 探讨NP方案加同期照射对人肺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 以A549、H1299为实验对象,设单纯照射组（A组）、酒石酸长春瑞滨＋顺铂＋同期照射组（B组）,再按照照射剂量不同分为A-0、A-4、A-8组和B-0、B-4、B-8组.MTT方法用于检测酒石酸长春瑞滨＋顺铂＋同期照射对细胞增殖的影响,FACS用于检测酒石酸长春瑞滨＋顺铂＋同期照射对细胞凋亡的影响和细胞表面P-gp表达的影响.结果 除B-0组在48 h细胞抑制率与A-0组比较差异无统计学意义（P=0.103）外,B-0、B-4和B-8组在6,12,24和48 h时细胞抑制率均显著低于A-0、A-4和A-8组,差异均有统计学意义（P＜0.01）.A-0组细胞凋亡率（4.01±0.95）％,A-4组为（20.19±3.76）％,A-8组为（45.34±4.77）％.A-8组细胞凋亡率显著高于A-4组,A-4组细胞凋亡率显著高于A-0组,差异均有统计学意义（t =7.17,P=0.006;t=7.23,P=0.019）.B-0组细胞凋亡率（14.78±2.37）％,B-4组为（36.18±4.73）％,B-8组为（51.12±3.37）％.B-8组细胞凋亡率显著高于B-4组,B-4组细胞凋亡率显著高于B-0组,B-0组细胞凋亡率显著高于A-0组,B-4组细胞凋亡率显著高于A-4组,差异均有统计学意义（t=3.59,P=0.037;t=9.00,P=0.003;t=7.31,P=0.018;t=4.58,P=0.020）,B-8组细胞凋亡率与A-8组比较差异无统计学意义（t=1.71,P=0.185）.A-0组S周期细胞比例为（10.61±2.23）％,A-4组为（14.75±3.02）％,A-8组为（21.81±2.94）％;B-0组S周期细胞比例为（19.27±2.97）％,B-4组为（26.23±2.12）％,B-8组为（32.37±3.53）％.B-0、B-4和B-8组S周期细胞比例分别显著高于A-0、A-4和A-8组,差异均有统计学意义（t=4.04,P=0.027;t=5.35,P=0.013;t=3.98,P=0.028）.A-0、A-4和A-8组P-gp荧光强度分别为（7.32±0.75）、（6.57±0.93）、（6.32±0.86） MFI,差异无统计学意义（P＞0.05）.B-0、B-4和B-8组P-gp荧光强度分别为（5.12±0.81）、（3.76±0.74）、（2.16±0.24） MFI.B-0组P-gp荧光强度显著低于A-0组,B-4组P-gp荧光强度显著低于A-4组,B-8组P-gp荧光强度显著低于A-8组,差异均有统计学意义（t=-3.45,P=0.041;t=-5.85,P=0.010;t=-8.07,P=0.015）.B-4组P-gp荧光强度显著低于B-0组,差异有统计学意义（t=-8.07,P=0.015）,且与B-8组比较差异无统计学意义（t=-3.56,P=0.071）.结论 NP方案加同期照射可以显著抑制人肺癌细胞增殖和凋亡,且降低肺癌细胞表面P-gp的表达.     

雷帕霉素抑制人前列腺癌细胞PC-3生长及转移的实验研究

目的观察雷帕霉素（RPM）对人前列腺癌细胞PC-3生长、周期、凋亡及转移的影响,探讨RPM抑制前列腺癌细胞生长、转移的可能机制及临床应用前景。方法体外培养前列腺癌PC-3细胞,用不同浓度的RPM（10、25ng／m1）干预PC-3细胞。采用MTT法检测RPM对于PC-3细胞增殖的影响;流式细胞仪检测PC-3细胞周期及凋亡的变化;动物体内荷瘤实验检测对PC-3侵袭转移的影响。结果RPM能显著抑制PC-3细胞生长增殖,且呈时间和浓度依赖性,在25ng／36h时抑．ml36h制率达到（42．23±0．78）％,差异有统计学意义（P〈0．05）;流式细胞分析显示RPM能显著抑制细胞周期,使Go／G,期细胞增多（P〈0．05）,在25ng／ml、36h时Go／G1期细胞达到（92．17±0．69）％,并促进肿瘤细胞的早期凋亡（P〈0．05）,在25ng／ml、36h时凋亡率达到（28．75±1.31）％;动物体内荷瘤实验较对照组差别明显,对照组肿瘤重量与转移比率明显高于RPM组[（3．41±0．28）gVS（1．19±0．23）g,100％（7／7）vs 14．29％（1／7）,P〈0．05],肿瘤增长和转移被显著抑制。结论RPM明显抑制人前列腺癌细胞PC-3的生长及迁移,以RPM为基础的前列腺癌治疗方案可能在临床中具有良好的应用前景。     

Apoptosis in human pancreatic cancer cells induced by eicosapentaenoic acid

OBJECTIVES: Clinical studies have shown that administration of eicosapentaenoic acid (EPA) to patients who have unresectable pancreatic cancer induces marked attenuation of cachexia. However, the exact mechanisms of the beneficial effect of EPA on pancreatic cancer are unknown. This examined the effect of EPA on proliferation of human pancreatic cancer cell lines and sought to clarify its mechanisms. METHODS: The effects of EPA on proliferation of three human pancreatic cancer cell lines (SW1990, AsPC-1, and PANC-1) were assessed. Induction of apoptosis and expressions of apoptosis-related proteins were measured. The effect of EPA on cyclo-oxygenase-2 expression in these cell lines was determined. RESULTS: EPA inhibited proliferation of all three human pancreatic cancer cell lines in a dose-dependent fashion. Simultaneously, EPA treatment induced apoptosis and this was associated with caspase-3 activation. EPA treatment was also associated with a decrease in intracellular levels of cyclo-oxygenase-2 protein. CONCLUSION: We have demonstrated that EPA inhibits human pancreatic cancer cell growth due at least in part to the induction of apoptotic cell death. Such apoptosis is associated with activation of caspase-3 and suppression of cyclo-oxygenase-2 expression. Greater understanding of the molecular events associated with the biological activity of EPA should enhance the therapeutic potential of administration of EPA to patients who have pancreatic cancer.     

沙利度胺联合顺铂对A549肺腺癌细胞株的体外实验

目的观察沙利度胺与顺铂（DDP）联合应用对A549人肺腺癌细胞凋亡的影响,观察沙利度胺对肺腺癌A549细胞VEGF、BFGF蛋白表达的影响。方法采用PI单染法流式细胞检测细胞凋亡率;采用免疫细胞化学方法检测沙利度胺处理后肺腺癌A549细胞VEGF、BFGF蛋白表达的变化。结果在一定浓度范围内,沙利度胺联合DDP处理组细胞凋亡率明显高于单药组;沙利度胺（7.5mg/L）作用于人肺腺癌A549细胞后,处理组的VEGF、BFGF蛋白表达与未加药组比较差异显著。结论沙利度胺DDP联合,可增加A549人肺腺癌细胞的凋亡率;沙利度胺可抑制A549人肺腺癌细胞VEGF、BFGF的蛋白表达。     

去甲斑蝥素联合ABT-737对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究去甲斑蝥素（norcantharidin,NCTD）联合ABT-737对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响。方法：采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测NCTD单药或联合ABT-737对宫颈癌细胞株HeLa、SiHa增殖的影响;采用流式细胞术分析NCTD联合ABT-737对宫颈癌细胞凋亡的影响。结果：NCTD单药能够显著抑制宫颈癌细胞株HeLa、SiHa的增殖,抑制作用呈剂量依赖性。NCTD与ABT-737联用后抑制作用明显增强。1 μmol/L ABT、60 μmol/L NCTD及两药联用诱导HeLa细胞的凋亡率分别为（31.65±7.75）%、（40.34±14.52）%和（63.03±10.90）%,诱导SiHa细胞的凋亡率分别为（9.76±0.04）%、（22.04±3.03）%和（58.36±2.31）%。NCTD、ABT两药联合的促凋亡作用比单药显著增强（P＜0.05）。结论：NCTD单药在体外能够明显抑制宫颈癌细胞HeLa、SiHa的增殖,与ABT-737联用后抑制增殖和促凋亡作用更加显著。     

较低浓度纳米二氧化钛颗粒对细胞增殖的影响及其机制研究

[目的]探讨不同浓度纳米二氧化钛（nanosized titanium dioxide,Nano-TiO2）颗粒对人肺上皮细胞（A549细胞）增殖的影响及其可能机制。[方法]采用不同粒径（5、10和40 nm）和浓度（0、0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16 mg/L）的Nano-TiO2处理A549细胞24 h,用四甲基偶氮唑盐（MTT）法和细胞计数法观察Nano-TiO2对细胞增殖的影响;用流式细胞术检测Nano-TiO2对细胞凋亡的影响;用蛋白质免疫印记法（Western Blot）测定Nano-TiO2对细胞外调节蛋白激酶（extracellular-receptor kinase,ERK）的影响。并采用ERK特异性抑制剂PD98059（20μmol/L）对细胞进行预处理30 min后,MTT法观察ERK抑制剂对低浓度Nano-TiO2（0.5 mg/L）调节细胞增殖的影响。[结果]不同粒径的Nano-TiO2均表现出较低浓度（≤4 mg/L）促进细胞增殖,较高浓度（≥8 mg/L）抑制细胞活力的作用,而更高浓度Nano-TiO2（16 mg/L）可引起细胞凋亡的发生。进一步研究发现,低浓度Nano-TiO2（0.5 mg/L）可引起细胞磷酸化ERK表达增强,ERK抑制剂PD98059可明显抑制低浓度Nano-TiO2（0.5 mg/L）的促细胞增殖作用。[结论]低浓度Nano-TiO2可通过激活ERK促进细胞增殖,较高浓度Nano-TiO2则引发细胞凋亡发挥其抑制细胞活力的作用;不同粒径Nano-TiO2的效应之间没有明显差异。     

5-ALA光动力对人子宫颈癌Hela细胞的杀伤作用及剂量研究

目的研究不同剂量氨基酮戊酸(5-ALA)光动力对人宫颈癌Hela细胞的杀伤作用,为宫颈癌的治疗提供有价值的参考。方法对人宫颈癌细胞株Hela培养、传代后分为两组,观察组给予不同剂量5-ALA光动力,对照组不给予5-ALA光动力,比较两组细胞增殖抑制率、Her-2/neu表达、凋亡率情况。结果观察组早期凋亡率、晚期凋亡率、总凋亡率均高于对照组(P0.05)。随着5-ALA光敏剂浓度增加,早期凋亡率、晚期凋亡率、总凋亡率也随之增加(P0.05)。观察组Her-2/neu阳性表达率为12.5%,明显低于对照组(P0.05)。光动力能量密度5、10、20 J/cm2细胞增殖抑制率明显大于1 J/cm2;10、20 J/cm2细胞增殖抑制率明显大于5 J/cm2;光敏剂浓度1、4 mmol/L细胞增殖抑制率明显大于0.1 mmol/L(P0.05)。光动力能量密度10、20 J/cm2细胞增殖抑制率比较,差异无统计学意义(P0.05);光敏剂浓度1、4 mmol/L细胞增殖抑制率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 5-ALA光动力对人宫颈癌Hela细胞具有明显的抑制作用,还可诱导细胞凋亡,5-ALA浓度为1 mmol/L,光动力能量密度10 J/cm2是最佳杀伤剂量。     

VEGF-C诱导宫颈癌Hela细胞Bcl-2、cyclinD1的表达

目的研究VEGF-C对体外培养的宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的分子机制。方法应用重组人VEGF-C蛋白体外刺激宫颈癌Hela细胞,MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞周期和凋亡、Western Blotting检测增殖凋亡相关基因Bcl-2、cyclin D1蛋白水平的变化。结果 10、20、50 ng/μl VEGF-C处理后,细胞增殖指数分别为(1.00±0.03)、(1.25±0.05)、(1.55±0.08)、(2.13±0.08),呈剂量依赖性升高(P0.05)。细胞周期S期比率呈剂量依赖性升高(P0.05),分别为(30.91±0.09)%、(37.95±0.27)%、(45.05±0.40)%、(64.26±0.20)%;细胞凋亡率呈剂量依赖性降低(P0.05),分别为(12.4±0.3)、(11.4±0.2)、(9.6±0.15)、(5.5±0.25)。Bcl-2、cyclin D1蛋白表达呈剂量依赖性升高。结论外源性VEGF-C通过细胞内信号的传递,诱导cyclin D1的表达,使肿瘤细胞S期加快,促进细胞周期的进程,来促进Hela细胞增殖;诱导Bcl-2的表达,抑制凋亡。