种子细胞在骨组织工程中的研究现状(综述)

骨组织工程是目前医学科学发展的前沿学科,亦是一门涉及多个医学领域的交叉学科,种子细胞又在其中起着关键作用。该文对目前各类常用种子细胞的优缺点进行了概述比较。     

骨组织工程种子细胞研究进展

骨组织工程技术的核心是选取优良的骨种子细胞。近年来,人们对各型种子细胞都进行了大量的研究和探索,并逐步筛选出了一些较好的种子细胞。现阶段,常用的种子细胞有骨髓基质细胞、胚胎干细胞、成骨细胞、基因修饰细胞等。以上种子细胞虽然在基础研究和临床应用中都取得了较好的效果,但仍存在诸多缺点和不足,需进一步地克服和改良。     

BMP在骨折治疗中的应用

骨折愈合是一个复杂的病理生理过程,有多种生长因子参与并发挥着重要的作用。近年来,大量的研究表明,骨形态发生蛋白(BMP)是关键的骨生长因子,对骨折愈合起着重要的作用。本文对近年来国内外这一领域的相关研究作一综述。     

新型磷酸钙骨水泥与骨髓间充质干细胞的共培养研究

目的 探讨新型可注射磷酸钙骨水泥与骨髓间充质干细胞共培养的可行性,为组织工程化骨的构建提供科学依据。方法采用浸提法制备CPC浸提液,加入到人骨髓间充质干细胞的培养体系中。MTT法测定细胞相对增殖率,进行细胞毒性反应分级：流式细胞仪检测CPC浸提液培养的hBMSCs的细胞周期。将新型磷酸钙骨水泥在不同凝结时间分别加入到BMSC浓度为1×10^7／L的6孔培养板中,逐日观察材料边缘细胞贴壁生长情况,培养一周后扫描电镜观察;取第三代BMSC,将密度调至1×10^7／L加入到12孔培养板,注入糊状磷酸钙骨水泥（成团期）,分别于培养1天、3天、5天、1周终止培养进行扫描电镜观察。结果新型磷酸钙骨水泥的细胞毒性反应为0～Ⅰ级,基本无毒性。光镜下见细胞在大部分组的CPC材料边缘生长良好,未见细胞变形、坏死;扫描电镜观察见大量细胞紧贴材料生长,细胞生长良好,细胞呈不规则的多角形、近圆形,在骨水泥表面与其他细胞相连融合成片。结论新型可注射性磷酸钙骨水泥具有良好的生物相容性．骨髓间充质干细胞能够在常规培养体系中与新型可注射可降解磷酸钙骨水泥共培养。     

新型磷酸钙骨水泥与骨髓间充质干细胞的共培养研究

目的探讨新型可注射磷酸钙骨水泥与骨髓间充质干细胞共培养的可行性,为组织工程化骨的构建提供科学依据。方法采用浸提法制备CPC浸提液,加入到人骨髓间充质干细胞的培养体系中,MTT法测定细胞相对增殖率,进行细胞毒性反应分级;流式细胞仪检测CPC浸提液培养的hBMSCs的细胞周期。将新型磷酸钙骨水泥在不同凝结时间分别加入到BMSC浓度为1×107/L的6孔培养板中,逐日观察材料边缘细胞贴壁生长情况,培养一周后扫描电镜观察;取第三代BMSC,将密度调至1×107/L加入到12孔培养板,注入糊状磷酸钙骨水泥(成团期),分别于培养1天、3天、5天、1周终止培养进行扫描电镜观察。结果新型磷酸钙骨水泥的细胞毒性反应为0～Ⅰ级,基本无毒性。光镜下见细胞在大部分组的CPC材料边缘生长良好,未见细胞变形、坏死;扫描电镜观察见大量细胞紧贴材料生长,细胞生长良好,细胞呈不规则的多角形、近圆形,在骨水泥表面与其他细胞相连融合成片。结论新型可注射性磷酸钙骨水泥具有良好的生物相容性,骨髓间充质干细胞能够在常规培养体系中与新型可注射可降解磷酸钙骨水泥共培养。     

白藜芦醇在ST2细胞增殖及成骨分化过程中的作用研究

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)对ST2细胞(小鼠骨髓间充质干细胞)增殖及成骨分化的作用,以期为颞下颌关节骨关节炎的治疗提供思路。方法对第3代ST2细胞分别用0、5、10、15和20μmol/L的RES培养,48 h后采用MTT检测细胞的增殖,采用Real time RT-PCR和Western blot检测成骨特异性蛋白Runx2、Osterix的表达。结果不同浓度RES对ST2细胞无显著的促增殖作用,但RES能增强ST2细胞的成骨分化能力,且具有剂量依赖性。结论 RES可促进ST2细胞的成骨分化,可能为颞下颌关节骨关节炎的治疗提供新的思路。     

骨组织工程的发展趋势

自从提出组织工程的概念以来,组织工程尤其是骨组织工程获得了飞速发展,目前被认为是最快能获实际应用的领域。十余年来随着对骨组织工程三要素（细胞,支架材料,生长因子）认知的加深,其中大量工作围绕支架材料开展。总的来说,支架材料如果按制备方法来分类可以分为两大种类：预设计支架和非预设计支架,本综述分别对其进行了详细介绍。鉴于传统骨组织工程策略中因细胞产品标准在实际中面临的难题,其实际应用等待很长时期．本文同时也列举了近年来提出并得到应用的基于组织工程概念的实用发展策略。     

SVF-gel联合PRP注射在脂肪填充中的应用进展

脂肪组织已经成为组织工程和再生医学中一个很有吸引力的细胞来源.但单纯的脂肪填充,脂肪存活率不高,后期吸收快,导致填充很难具备理想的效果.脂肪干细胞胶(SVF-gel)以及富血小板血浆(PRP)的衍生物:脂肪源性干细胞(ADSCs)、血小板源性生长因子(PDGF)、转化生长因子-表皮生长因子(TGF-EGF)、血管内皮生...     

人脐静脉内皮下层间充质干细胞的研究进展

间充质干细胞（Mesenchymal stem ceils，MSCs）是一群多分化潜能细胞，目前主要应用于支持造血干细胞生长，还可以作为组织工程上的种子细胞以及基因治疗的靶细胞。问充质干细胞广泛分布于各种不同的组织，如骨髓、外周血、脂肪、脐血、胎肺、胎肾等组织均可分离出MSCs.     

氟化物对骨髓间充质干细胞影响的研究进展

氟是自然界广泛存在的一种重要元素, 适量摄入可预防龋齿、促进骨骼发育。但长期过量摄入, 可引发氟中毒, 损害牙齿、骨骼、心肌、血管等组织或器官。骨髓间充质干细胞(BMSCs)凭借自身多向的分化潜能特性在骨损伤的修复过程中发挥着重要作用。因此, 研究BMSCs对治疗因氟中毒所致的氟骨症具有重要意义。本文总结了氟化物对BMSCs影响及作用机制的研究进展, 为氟骨症发病机制研究和临床治疗提供新的思路。     

新型天然陶瓷化骨组织工程支架材料的制备和特性研究

目的 作者用物理化学方法自制新型的陶瓷化骨材料。测试其理化性质及力学强度，为骨组织工程研究提供可供选择的支架材料。方法 将猪肋骨分为未处理骨、脱蛋白骨和脱蛋白脱脂骨三组，经不同煅烧温度及时间处理得到多种陶瓷化骨。用扫描电镜现察其形貌特征。用X-射线能谱和X-射线衍射分析材料成份。并对材料的力学性能进行分析测定。结果 各种处理所得到的陶瓷化骨保持原骨组织的天然网状孔隙系统；所含的原子均只有钙和磷。比值约1．72；主要成份均为羟基磷灰石；900℃煅烧2h以上条件所得陶瓷化骨中的羟基磷灰石呈细结晶状态。有较高抗压强度。900℃煅烧1h以下条件所得骨抗压强度很低。结论 猪骨通过不同预处理后煅烧所得的陶瓷化骨理化性能相同。皆保持天然多孔结构。900℃煅烧2h以上有较好抗压性能。仅含钙磷原子。化学成份为细结晶羟基磷灰石。但是否是一理想支架材料，尚需要进一步验证其降解性和组织相容性。     

大鼠脂肪干细胞治疗卵巢早衰的实验研究

目的探讨大鼠脂肪干细胞对卵巢早衰(POF)的治疗作用。方法以顺铂连续7 d腹腔注射8~10周龄的SD大鼠建立POF模型,在造模后连续腹腔注射大鼠脂肪干细胞进行治疗,并在治疗后观察卵巢组织结构,检测雌二醇(E_2)及卵泡刺激素(FSH)分泌水平以评价大鼠脂肪干细胞对卵巢早衰的治疗效果。结果成功建立大鼠卵巢早衰模型,经过治疗后,大鼠的体重明显增加,死亡数量减少,卵巢组织结构逐渐恢复正常,E_2及FSH分泌恢复正常。结论大鼠脂肪干细胞对卵巢早衰具有治疗作用。     

胚胎干细胞实验方法及其在发育毒性研究中的意义

胚胎干细胞是一种存在于着床前早期胚胎中具有发育全能性的细胞 ,可在体外培养、传代并保持其全能性。在一定条件下 ,胚胎干细胞可发育成各种细胞 ,包括心肌细胞。胚胎干细胞试验就是利用胚胎干细胞在体外分化成心肌细胞的能力来检测受试物的胚胎毒性、致畸性 ,并对其进行评价。本文介绍了目前已建立的胚胎干细胞试验的主要实验方法及应用情况     

神经干细胞及其应用研究新进展

<正>神经干细胞(neural stem cells,NSCs)不仅存在于所有哺乳动物胚胎发育期的脑内,而且在其成年之后也有,这已为神经科学界所普遍接受。神经干细胞由于具有自我更新和多向分化潜能,使神经系统损伤后的细胞替代治疗成为可能。神经干细胞     

153胚胎干细胞实验方法及其在发育毒性研究中的意义

胚胎干细胞是一种存在于着床前早期胚胎中具有发育全能性的细胞，可在体外培养、传代并保持其全能性。在一定条件下，胚胎干细胞可发育成各种细胞。胚胎干细胞试验就是利用胚胎干细胞在体外分化成心肌细胞的能力来检测受试物的胚胎毒性、致畸性，并对其进行评价。本文介绍了目前已建立的胚胎干细胞试验的主要实验方法及应用情况。     

间充质干细胞定向分化及其在肝脏疾病应用中的启示

间充质干细胞向肝细胞诱导分化成功后,分化后的肝细胞样细胞应用于肝病成为了研究热点。不仅未分化的间充质干细胞能治疗肝病,其来源的分化后的肝细胞样细胞亦能有效治疗肝病。因此,有必要对间充质干细胞分化前后的细胞治疗效果进行比较评价。本文从诱导分化培养方案、鉴定指标及相关细胞生物学功能进行述评。     

骨组织工程支架材料与新骨生长研究

本文对β-TCP、β-TCP／DCHA和HA材料的结构、表面生物活性及细胞在材料表面的牯附情况避行了检测与分析，用Micro-CT对制备的骨支架材料植入前后的结构进行了评价。将骨髓基质细胞进行培养、分化，扩增得到足够浓度的成骨细胞，并种植于骨支架材料复合培养后，再植入动物体＋观察成骨状况，研究成骨机制。结果表明：骨支架的孔隙中诱导生成新骨，随着新骨生长，支架材料在逐步降解，从而达到骨重建。研制出了具有三维多孔结构、适于新骨生长的孔径、可降解、表面生物活性好以及植入骨细胞后可以诱导新骨生成骨组织工程支架材料。     

辛伐他汀促大鼠BMSCs成骨分化作用机制的研究

[目的]研究辛伐他汀(aimvastatin,SIM)促进大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)向成骨细胞分化的作用机制.[方法]取4周雌性SD大鼠双侧股骨、胫骨骨髓细胞进行体外成骨诱导培养,并干第一次传代后(d 8)加入浓度为10-7mol/L SIM(给药组,SIM组)或等量溶剂培养(对照组,N组),d 16行碱性磷酸酶(ALP)染色,d 28行von Kossa染色观察细胞外基质矿化,并采用realtime RT-PCR法子上述两个时间点检测b-catenin、BMP-2、Smad1、ALP、OCN、mRNA的表达.[结果]①辛伐他汀可促进成骨诱导分化大鼠BMSCs的ALP表达及细胞外基质的矿化能力.②mRNA表达水平:d 16 SIM组ALP的表达显著高于N组;d 28 SIM组BMP-2、Smad1、OCN表达水平均明显高于N组,b-catenin的表达显著低于N组(P<0.05).[结论]辛伐他汀可促进大鼠BMSCs向成骨细胞分化,其作用机制可能与调节TGFβ/BMP、WNT信号途径相关基因的表达水平有关.     

骨组织工程高分子材料和复合材料的研究进展

支架材料是骨组织工程三大因素之一,作为一种载体,为细胞提供生存的三维空间。本文阐述了近年来常见高分子材料及复合材料的国内外研究进展,并分析了各种材料的优缺点。最后,指出了目前支架材料研究中仍存在的问题,并对其发展前景进行了展望。     

大鼠脂肪源性干细胞分离培养的实验研究

目的研究分离、培养、鉴定大鼠脂肪源性干细胞的实验方法。方法提取大鼠双侧腹股沟处脂肪组织,进行原代培养及流式细胞检测仪的鉴定。用MTT法检测不同原代细胞接种密度的细胞分裂增殖率的变化,并观察第1^第13代细胞分裂增殖的特点。结果大鼠脂肪源性干细胞的生长呈大量细胞集落,表面标记物CD44、CD105、CD49d表达阳性,CD106表达阴性。不同的原代细胞接种密度会影响细胞分裂增殖,以1×106/ml细胞密度接种时细胞的增殖速率高于其它对照组。该细胞株经多次传代后仍能保持较强的分裂增殖能力。结论大鼠脂肪源性干细胞分离培养方法简便,不同的原代细胞接种密度会影响细胞分裂增殖,细胞经多次传代后仍能保持较强的分裂增殖能力。