MSTI基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖与凋亡的影响

目的：探讨MST1（mammalian sterile 20-like kinase1）基因对人乳腺癌细胞MCF-7增殖与凋亡的影响。方法：构建含有标签蛋白FLAG的MSTI质粒pCMV-FLAG-MST1；将构建好的pCMV-FLAG-MST1质粒在脂质体lipofectamine2000的介导下转染MCF-7细胞，通过Western印迹法分析MST1在MCF-7中的表达情况；分别在转染后12、24、36和48h通过MTF法观察MST1对细胞增殖的影响；转染后36h加入5-溴-2’脱氧尿嘧啶（bromodeoxy uridine，BrdU），通过其掺入比率显示MST1对细胞增殖的影响；转染后36h加入顺铂，作用14h后通过AnnexinV检测其对细胞凋亡的影响。结果：成功构建pCMV—FLAG-MST1质粒；MTT及BrdU检测显示，转染pCMV—FLAG-MST1质粒后MCF-7细胞增殖明显受到抑制；AnnexinV检测结果提示，高表达MST1后，细胞的凋亡率相对增高。结论：在乳腺癌细胞MCF-7中高表达MST1，不仅可以抑制细胞增殖，还可以促进细胞凋亡。     

HAP1对乳腺癌细胞MCF-7生物学特性影响的观察

目的:探讨亨廷顿相关蛋白1(HAP1)基因过表达对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖、体外迁移侵袭和细胞凋亡的影响及其可能机制.方法:通过转染的方法将逆转录病毒pBabe-puro(嘌呤霉素)HAP1质粒和pBabe-puro质粒导入人乳腺癌细胞系MCF-7,用嘌呤霉素筛选稳定表达两质粒的细胞系,荧光定量PCR和蛋白质印迹法鉴定是否成功构建HAP1过表达细胞系;细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验检测细胞的生长增殖,Transwell小室法检测细胞的侵袭和迁移,流式细胞仪检测细胞的凋亡.结果:成功构建稳定表达pBabe-HAP1的MCF-7-pBabe-puro-HAP1细胞模型.CCK-8检测72 h细胞增殖率,MCF-7-pBabe-puro-HAP1为(75.97±6.76)％,明显低于MCF-7-pBabe-puro细胞(93.98±6.63)％(P=0.03)及MCF-7细胞(100.00±0.oo)％,P=0.004;MCF-7-pBabe-puro-HAP1细胞克隆形成率为(22.67±1.26)％,明显低于MCF-7(35.00±0.50)％(P=0.000)和MCF-7-pBabe-puro细胞(33.83±0.76)％,P＝0.000;Transwell小室侵袭和迁移实验表明,MCF-7-pBabe-puro-HAP1组的侵袭(3.33±0.58,P=0.000)和迁移(50.00±3.61,P＜0.01)能力明显降低;流式细胞仪检测细胞凋亡,MCF-7-pBabe-puro-HAP1凋亡率为(8.03±0.15)％,高于MCF-7-pBabe-puro(3.13土0.25)％(P=0.000)和MCF-7细胞(3.33±0.35)％,P=0.000.结论:HAP1基因能够抑制肿瘤细胞增殖和迁移侵袭,并能诱导细胞凋亡,其可能作为一个抑癌基因在肿瘤发生发展中发挥重要作用.     

Wnt信号通路在姜黄素诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡中作用机制

目的 探讨Wnt通路在姜黄素诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡中的作用机制.方法 将MCF-7细胞培养液随机分为5组,分别加入15、30、60、120μmol/L的姜黄素,对照组不加,培养12,24,48 h后采用CCK-8法检测细胞增殖能力.分A、B两组(剂量组、时间组)采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术(FCM)观测细胞凋亡及细胞周期分布;Western Blotting法检测A、B两组的Wnt通路相关蛋白,并进行相应的相关性分析探讨Wnt通路与乳腺癌MCF-7细胞凋亡的关系.结果 CCK-8结果显示,随培养时间延长,姜黄素各浓度组MCF-7细胞增殖抑制率逐渐增高(均P<0.05);在同一时间点,随着姜黄素浓度升高,细胞增殖抑制率逐渐增高(均P<0.05).FCM染色结果显示,随着姜黄素浓度增加、作用时间延长MCF-7细胞凋亡指数逐渐上升(均P<0.05),且G1/S期细胞增加越多(P<0.05).Western Blotting实验结果显示MCF-7细胞中Wnt1、β-catenin的表达下调程度呈现剂量时间依赖性(P<0.05).相关性分析显示细胞抑制率、G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率均与Wnt通路相关蛋白Wnt1、β-catenin的表达呈现较明显的相关性(P<0.05).结论 姜黄素的抗癌活性与抗增殖能力具有明显的剂量时间依赖性,且Wnt通路在姜黄素诱导乳腺癌MCF-7细胞抑制、凋亡过程中发挥了重要作用.     

Apogossypolone抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖及诱导细胞凋亡

目的:研究Apogossypolone(ApoG2)对人乳腺癌细胞系MCF-7体外的增殖抑制和诱导凋亡作用.方法:采用MTT法和平板克隆形成实验检测ApoG2作用于MCF-7细胞后,对其体外增殖和细胞克隆形成能力的影响;Hoechst 33258荧光染色法观察ApoG2(20μmol/L)作用48 h后,细胞凋亡的形态学变化;FCM检测ApoG2作用于MCF-7细胞后的细胞凋亡率以及细胞周期的变化.结果:ApoG2药物在浓度为5μmol/L、作用14 d后就能对MCF-7细胞增殖起到明显的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;平板克隆实验表明,经不同浓度(5、10和20 μmol/L)ApoG2作用14 d后,对MCF-7细胞克隆形成能力呈现明显的抑制作用,且同样呈剂量和时间依赖性.Hoechst 33258荧光染色结果显示,ApoG2与MCF-7细胞共培养72 h后,细胞呈现明显的核固缩和碎裂、染色质凝集和凋亡小体形成等细胞凋亡现象.FCM检测结果显示,20 μmol/LApoG2作用72 h后,细胞凋亡率较对照组升高,而且S期和G2/M期细胞比例较对照组升高(P＜0.05).结论:ApoG2能够抑制人乳腺癌细胞系MCF-7的增殖和克隆形成,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡.     

电化学疗法对乳腺癌MCF-7细胞凋亡及细胞内钙离子浓度的影响

目的探讨电化学疗法(ECT)对乳腺癌MCF-7细胞内钙离子浓度及细胞凋亡、坏死和细胞生长抑制的影响。方法将MCF-7细胞分为对照组及实验组,对照组为0 C(C:库仑),实验组按电量不同分为4组:3 C、5 C、10 C及20 C组。每组重复6孔,用不同电量处理MCF-7细胞后培养6 h和24 h,通过MTT法、GENMED细胞钙离子浓度比色法、流式细胞仪和激光共聚焦分别检测细胞生长抑制率、细胞内Ca2+浓度、观察凋亡和坏死情况。组间均数比较采用方差分析,应用SNK方法进行两两比较,应用5×2析因分析探讨电量与时间对细胞的影响。结果不同电量干预MCF-7细胞后培养6 h及24 h,细胞生长抑制率(6 h:F=508.43,P=0.000;24 h:F=232.76,P=0.000)、坏死率(6 h:F=2282.07,P=0.000;24 h:F=2644.60,P=0.000)、细胞内Ca2+浓度(6 h:F=1416.06,P=0.000;24 h:F=2394.26,P=0.000)随电量增加而增加,电量及培养时间之间具有交互作用(F=288.93,P=0.000;F=2305.39,P=0.000;F=1651.96,P=0.000)。流式细胞仪检测细胞凋亡率结果显示,细胞凋亡率在3、5、10 C组明显增高,而20 C组细胞凋亡率降低,电量及培养时间有交互作用(F=51.20,P=0.000)。结论 ECT可抑制乳腺癌MCF-7细胞株的生长并诱导其凋亡,并引起细胞内Ca2+浓度升高。低剂量ECT主要诱导细胞凋亡,高剂量ECT主要引起细胞坏死。     

miR-15a诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的作用机制

目的 探讨miR-15a在诱导乳腺癌细胞凋亡中的作用及机制.方法 采用定量聚合酶链反应检测人乳腺上皮细胞株MCF-10A和乳腺癌细胞株MCF-7中miR-15a的表达水平.采用软件预测miR-15a的靶点,并通过荧光素酶报告基因系统验证.将miR-15a经脂质体法转染MCF-7细胞,采用Western blot法检测Bcl-2蛋白的表达,并采用流式细胞术检测MCF-7细胞的凋亡率.结果 miR-15a在乳腺癌细胞株MCF-7中的表达明显低于乳腺上皮细胞株MCF-10A (0.253∶1,P＜0.0001).miR-15a可显著抑制抗凋亡基因Bcl-2 3′-UTR荧光素酶报告基因的表达(P＜0.05).与未转染组(对照组)相比,miR-15a转染组MCF-7细胞中Bcl-2的表达水平显著下降,凋亡明显增加(P＜0.05).结论 miR-15a 作为一个潜在的抑癌基因,可通过靶向于Bcl-2诱导乳腺癌细胞MCF-7发生凋亡,其可为乳腺癌的临床治疗提供新的靶点和理论依据.     

索拉非尼联合表阿霉素对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用

[目的]探讨索拉非尼联合表阿霉素对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用。[方法]绘制MCF-7细胞生长曲线并在第14d检测其体外克隆形成率;MTT法测定72h时索拉非尼及表阿霉素单用与联用对MCF-7细胞的增殖抑制率。[结果]细胞生长曲线显示MCF-7细胞第1-4d生长速度较快,第4d后生长速度减慢,第10d后生长趋于停滞;第14dMCF-7细胞的克隆形成率为37.2%。在72h时间点,索拉非尼及表阿霉素单药对MCF-7均有抑制作用,两药联合则为协同或相加作用。[结论]索拉非尼和表阿霉素对乳腺癌MCF-7细胞增殖有抑制作用,联合用药表现出协同或相加作用。     

新藤黄酸抑制人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的实验研究

目的 探讨新藤黄酸对人乳腺癌细胞株MCF-7的增殖抑制情况及其作用机制。方法 0.5～20μg／ml新藤黄酸处理MCF-7细胞72h,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测MCF 7细胞增殖抑制率;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染色检测细胞凋亡率;线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）检测线粒体跨膜电位变化;Western blotting检测Fas、FasL、caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果 0.5～20μg／ml新藤黄酸均能够抑制MCF-7细胞增殖,且增殖抑制作用呈浓度依赖,半数抑制浓度（IC₅₀）为1763 μg／ml。0.5～3.0μg／ml新藤黄酸即可诱导MCF-7细胞凋亡,凋亡作用呈时间和浓度依赖。0.5μg／ml新藤黄酸处理MCF 7细胞48h后早期凋亡率为3.7％,总凋亡率为7.2％,72h早期凋亡率为6.7％,总凋亡率为13.7％;3μg／ml新藤黄酸48h后早期凋亡率为69.5％,总凋亡率为71.7％,72h早期凋亡率为76.9％,总凋亡率为81.5％。0.5、1.0、1.5 μg／ml新藤黄酸导致线粒体跨膜电位下降的细胞比例升高,促凋亡相关蛋白 FasL、caspase-3、caspase-8、caspase-9表达水平呈浓度依赖性上升,Fas和Bax蛋白表达水平变化不大,抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平则呈浓度依赖性下降。结论 新藤黄酸通过诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡,抑制细胞增殖,其诱导凋亡的分子机制与死亡受体及线粒体凋亡途径密切相关。     

REGgamma基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响

目的:探讨蛋白酶体激活因子REGgamma(REGγ)基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的作用.方法:构建真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ,通过脂质体转染将REGγ基因导入MCF-7,以G418(800mg/L)连续筛选获得稳定高表达REGγ基因的细胞株,以转染空载体和未转染细胞作为对照.分别利用MTT法及免疫细胞化学方法检测各组细胞PCNA的表达分析REGγ基因对细胞增殖的影响;以Caspase-3分光光度法及AnnexinV-FITC的流式细胞仪(FCM)来检测细胞凋亡的变化;以透射电镜(TEM)观察细胞超微结构的改变.结果:获得稳定转染且高表达REGγ的细胞株.经Western Blot检测转染REGγ基因的细胞(实验组),其REGγ蛋白表达明显高于对照组细胞(P＜0.05);未转染组、空载体组和实验组细胞的倍增时间分别为34.6、35.1、26.7h.提示实验组细胞倍增时间缩短;MTT法绘制生长曲线提示实验组细胞生长明显加速;免疫细胞化学检测PCNA结果显示,未转染组、空载体组和实验组细胞的染色灰度值分别为89.61±14.32、87.95±16.38、133.47±8.14,表明实验组细胞PCNA表达明显增强(P＜0.01);Caspase-3分光光度法检测显示,实验组细胞的OD值普遍低于对照组(P＜0.05);Annexin V-FITC的FCM检测显示,实验组细胞的凋亡率明显低于对照组(P＜0.01);TEM观察实验组细胞表现为核仁肥大,线粒体、高尔基体丰富或扩张,未见凋亡小体形成.结论:REGγ基因具有促进乳腺癌MCF-7细胞增殖并抑制其凋亡的作用.     

Role of exon 7 PTEN Gene in Endometrial Carcinoma

Background: Endometrial carcinoma is the most common malignant tumor of the female genital tract andthe fourth most common cancer in Iranian women after breast, colorectal and lung cancers. Various geneticalterations appear to be early events in the pathogenesis of endometrial carcinoma and it seems that PTEN isthe most commonly mutated gene in the endometrioid subtype. The aim of the present study was to investigatethe correlation between mutations in exon 7 of PTEN gene and endometrial carcinoma. Materials and Methods:Seventy-five patients with endometrial carcinoma and 75 females whose underwent hysterectomy for non tumoralindication were selected for evaluation of PTEN mutations in exon 7 by PCR-SSCP and sequencing. Correlationsbetween the frequency and type of mutation and the pathologic findings of the cancer (tumor subtype, stageand grade) were assessed. Results: All of the samples were obtained from Iranian patients. 60 % (45 cases) ofthe tumors were endometriod and 40% (30 cases) were of serous type. The grade distributions of the 75 casesaccording to the FIGO staging system were as follows: low grade, 20 cases; high grade 55 cases, low stage, 41cases; high stage 34 cases. For exon 7 of the PTEN gene, the analysis showed that there were no mutations in ourcases. Conclusions: Our findings in the present study suggest that exon 7 of PTEN does not play any significantrole in the development of endometrial carcinoma in Iranian cases.     

MMP-7和PTEN蛋白在原发性肝细胞性肝癌中的表达及其意义

目的探讨基质金属蛋白酶7(matrilysin,MMP-7) 和PTEN在原发性肝细胞性肝癌(HCC)中的表达状况,并探讨他们之间的关系及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测原发性肝细胞性肝癌150例、肝硬化50例、肝炎50例、正常肝组织30例中MMP-7、PTEN的表达。结果MMP-7,PTEN主要表达于细胞质,MMP-7和PTEN在原发性肝细胞性肝癌、肝硬化、肝炎和正常肝组织的表达差异有统计学意义,且MMP-7在原发性肝细胞性肝癌组织中的表达明显高于在正常肝组织中的表达（χ²=20.17,P< 0.05）,而PTEN的阳性表达率明显弱于正常肝组织（χ² =16.26,P<0.05）。MMP-7,PTEN关系密切,呈负相关。结论PTEN、MMP-7的表达一定程度上反映HCC侵袭性强弱,PTEN缺失可引起MMP-7表达增加,在HCC侵袭、转移中发挥作用。     

Anticancer Activity of Petroselinum sativum Seed Extracts on MCF-7 Human Breast Cancer Cells

Pharmacological and preventive properties of Petroselinum sativum seed extracts are well known, but theanticancer activity of alcoholic extracts and oil of Petroselinum sativum seeds on human breast cancer cellshave not been explored so far. Therefore, the present study was designed to investigate the cytotoxic activitiesof these extracts against MCF-7 cells. Cells were exposed to 10 to 1000 μg/ml of alcoholic seed extract (PSA)and seed oil (PSO) of Petroselinum sativum for 24 h. Post-treatment, percent cell viability was studied by 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2, 5-biphenyl tetrazolium bromide (MTT) and neutral red uptake (NRU) assays, andcellular morphology by phase contrast inverted microscopy. The results showed that PSA and PSO significantlyreduced cell viability, and altered the cellular morphology of MCF-7 cells in a concentration dependent manner.Concentrations of 50 μg/ml and above of PSA and 100 μg/ml and above of PSO were found to be cytotoxic inMCF-7 cells. Cell viability at 50, 100, 250, 500 and 1000 μg/ml of PSA was recorded as 81%, 57%, 33%, 8%and 5%, respectively, whereas at 100, 250, 500, and 1000 μg/ml of PSO values were 90%, 78%, 62%, and 8%,respectively by MTT assay. MCF-7 cells exposed to 250, 500 and 1000 μg/ml of PSA and PSO lost their typicalmorphology and appeared smaller in size. The data revealed that the treatment with PSA and PSO of Petroselinumsativum induced cell death in MCF-7 cells.     

人脑胶质瘤中PTEN基因突变和蛋白表达的研究

目的 :研究人脑胶质瘤中PTEN蛋白表达和PTEN基因突变情况。方法 :应用免疫组化技术和聚合酶链反应 -单链构象多态性分析 (PCR SSCP)技术 ,检测 10 2例人脑胶质瘤中PTEN蛋白表达及PTEN基因突变。结果 :PTEN阳性染色主要定位于细胞质中。 10 2例中PTEN蛋白表达 5 5 / 10 2(5 3 9% ) ,高分化组 (Ⅰ级和Ⅱ级 ) 32 / 39(82 1% )与低分化组 (Ⅲ级和Ⅳ级 ) 2 3/ 6 3(36 5 % )之间差异有极显著意义 ,P <0 0 1;4 2例胶质母细胞瘤中共有 11例发生PTEN基因突变 ,突变率为 2 6 % (11/ 4 2 ) ;6 0例其他胶质瘤中仅 1例发生突变 ,胶质母细胞瘤突变率显著高于其他胶质瘤 ,χ2 =11 6 2 ,P <0 0 1。结论 :PTEN基因突变或缺失在人脑胶质瘤的发生发展中起重要作用 ,与肿瘤恶性分化程度密切相关     

瘦素上调乳腺癌细胞端粒酶的活性及其分子机制研究

  目的  观察瘦素(leptin)对乳腺癌细胞端粒酶的活性影响, 并探讨其可能的分子机制。  方法  采用ELISA检测瘦素对人乳腺癌细胞MCF-7端粒酶活性的影响。应用实时荧光定量PCR和Western blot法测定瘦素对MCF-7细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT)及STAT3 mRNA和蛋白表达水平的影响。  结果  瘦素可增加MCF-7端粒酶的活性, 且呈剂量依赖性, 当浓度是10 nmol/L时, 活性增加2.8倍; 而采用瘦素受体单克隆抗体ZMC-2时则可明显抑制端粒酶的活性; 端粒酶的活性与hTERT紧密相关, 瘦素不仅增强了端粒酶的活性, 同时也增加了hTERTmRNA的表达水平, 且呈剂量依赖性, 经瘦素10 nmol/L处理后, hTERT蛋白表达水平增加2.9倍; 在瘦素处理MCF-7细胞后, hTERT的表达水平与磷酸化STAT3的水平呈现相关性上升, 提示STAT3途径可能参与了瘦素诱导hTERT的表达。  结论  在乳腺癌MCF-7细胞中, 瘦素可能通过STAT3途径促进hTERT的表达, 并最终上调端粒酶的活性。      

miR-214通过PTEN调控AKT信号通路抑制鼻咽癌细胞凋亡CSCD

目的探讨miR-214通过PTEN调控下游AKT信号通路激活对鼻咽癌细胞凋亡的影响。方法miR-214抑制剂转染鼻咽癌5-8F和6-10B细胞。MTT法评估细胞增殖情况。Annexin-V/PI染色法检测两种鼻咽癌细胞凋亡情况。Western blot和real-time PCR检测miR-214抑制剂对PTEN基因转录和蛋白表达以及对AKT信号通路和凋亡相关蛋白表达水平的影响。检测shRNA沉默PTEN基因转录和蛋白表达后,miR-214抑制剂对鼻咽癌细胞凋亡影响。结果miR-214抑制剂可抑制鼻咽癌细胞生长,诱导5-8F和6-10B细胞凋亡。miR-214通过靶向3'-UTR区域调控PTEN基因转录和蛋白表达。抑制miR-214可促进PTEN的表达,抑制AKT信号通路激活,进而调控下游细胞周期和凋亡相关蛋白表达。沉默PTEN基因转录和蛋白表达可逆转miR-214抑制剂对鼻咽癌细胞AKT信号通路活性和凋亡的影响。结论miR-214可通过直接靶向PTEN基因转录促进AKT信号通路激活抑制鼻咽癌细胞凋亡。     

野生型PTEN基因在乳腺癌细胞中对表阿霉素的增敏作用

目的探讨野生型PTEN基因在人乳腺癌细胞系MCF-7和ZR-75-1中对表阿霉素的增敏作用。方法腺病毒介导野生型PTEN基因导入人乳腺癌细胞系MCF-7和ZR-75-1,RT-PCR检测PTEN mRNA的表达,Western blot检测转染后PTEN蛋白的表达;Ad-PTEN感染联合不同浓度的表阿霉素处理细胞,采用CCK-8法测定细胞增殖抑制率和联合效应。结果腺病毒介导的PTEN基因导入法可明显地增加细胞中PTEN基因的表达,野生型PTEN 基因转染联合表阿霉素使乳腺癌细胞MCF-7对表阿霉素的敏感度增加了两倍,而使乳腺癌细胞ZR-75-1对表阿霉素的敏感度增加了十倍。结论腺病毒重组的野生型PTEN基因联合表阿霉素对人乳腺癌细胞增殖具有显著的协同抑制效应。     

肝癌组织中PTEN基因蛋白表达的研究

目的 探讨肝癌组织中抑癌基因PTEN蛋白的表达情况及其临床病理意义。方法 应用免疫组织化学S－P法检测41例肝细胞癌、5例胆管细胞癌及其相应的癌旁组织中PTEN蛋白的表达情况，同时结合患者的临床病理资料进行分析。结果 46例癌旁组织PTEN全部阳性表达，癌组织中PTEN阳性表达率为36．9％，阴性表达率为63．1％。PTEN蛋白在肝癌组织中的阳性表达与患者性别、年龄及组织类型无明显相关性，但与组织分化程度明显相关。结论 肝癌组织中PTEN蛋白阴性表达率较高，说明PTEN基因失活在肝癌的发生发展中起着重要作用，PTEN阳性表达有一定的预后意义。     

Effects of Rapamycin on Cell Apoptosis in MCF-7 Human Breast Cancer Cells

Background: Rapamycin is an effective anti-angiogenic drug. However, the mode of its action remainsunclear. Therefore, in this study, we aimed to elucidate the antitumor mechanism of rapamycin, hypotheticallyvia apoptotic promotion, using MCF-7 breast cancer cells. Materials and Methods: MCF-7 cells were platedat a density of 15105 cells/well in 6-well plates. After 24h, cells were treated with a series of concentrations ofrapamycin while only adding DMEM medium with PEG for the control regiment and grown at 37oC, 5% CO2and 95% air for 72h. Trypan blue was used to determine the cell viability and proliferation. Untreated andrapamycin-treated MCF-7 cells were also examined for morphological changes with an inverted-phase contrastmicroscope. Alteration in cell morphology was ascertained, along with a stage in the cell cycle and proliferation.In addition, cytotoxicity testing was performed using normal mouse breast mammary pads. Results: Our resultsclearly showed that rapamycin exhibited inhibitory activity on MCF-7 cell lines. The IC50 value of rapamycin onthe MCF-7 cells was determined as 0.4μg/ml (p<0.05). Direct observation by inverted microscopy demonstratedthat the MCF-7 cells treated with rapamycin showed characteristic features of apoptosis including cell shrinkage,vascularization and autophagy. Cells underwent early apoptosis up to 24% after 72h. Analysis of the cell cycleshowed an increase in the G0G1 phase cell population and a corresponding decrease in the S and G2M phasepopulations, from 81.5% to 91.3% and 17.3% to 7.9%, respectively. Conclusions: This study demonstrated thatrapamycin may potentially act as an anti-cancer agent via the inhibition of growth with some morphologicalchanges of the MCF-7 cancer cells, arrest cell cycle progression at G0/G1 phase and induction of apoptosis inlate stage of apoptosis. Further studies are needed to further characterize the mode of action of rapamycin asan anti-cancer agent.     

PTEN基因甲基化及其表达异常与胃癌的关系

目的：探讨PTEN基因表达、启动子区甲基化与胃癌及其临床病理特征的关系。方法：采用甲基化特异性PCR法（MSP）和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法，分析胃癌组织及相应癌旁正常组织中PTEN基因启动子区甲基化及其mRNA表达情况。结果：48．2％（27／56）的胃癌组织和3．6％（2／56）的癌旁胃组织PTEN基因启动子区发生甲基化．癌组织PTEN基因启动子区甲基化率显著增高（P〈0．05）：其中，2例甲基化癌旁胃组织均为胃癌组织中有甲基化的病例．发生淋巴结转移的29例胃癌组织中．19例PTEN基因启动子甲基化；发生淋巴结转移的PTEN基因启动子甲基化显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。RT—PCR结果显示，所有甲基化的胃癌组织中PTEN mRNA均无表达，结论：胃癌中PTEN基因mRNA失表达与其启动子区甲基化有关，这可能是胃癌发生、发展以及转移的原因之一。