早期培养人胎胸腺基质细胞的组织化学和免疫组织化学观察

１３例胸腺组织取自３．５至４个月新鲜死亡人胎，剪碎后种在培养瓶内。所用培养液为ＤＭＥ，另加５％胎牛血清、１０％新生牛血清及Ｄ－缬氨酸６５０ｍｇ／Ｌ早期培养中出现两类不同形态的细胞。上皮样细胞的ＮＥ、ＡｃＰ活性及ＰＡＳ反应较弱，ＡＴＰ酶和５－ＮＴ活性较强，角蛋白呈阳性。成纤维样细胞显示较强的ＮＥ、ＡｃＰ活性及ＰＡＳ反应，Ｖｌｍｅｎｔｉｎ呈阳性。３例培养中均含两类细胞，表明培养细胞仍为胸腺基质细胞的混合体。     

成年小鼠胸腺内神经肽免疫组织化学研究

目的：探讨成年ＢＡＬＢ／ｃ鼠胸腺内血管活性肠肽（ＶＩＰ），Ｐ物质（ＳＰ），５－羟色胺（５－ＨＴ），生长抑素（ＳＯＭ）以及神经肽Ｙ（ＮＰＹ）免疫反应性的分布及与Ｔ细胞发育的关系。方法：利用免疫组织化学方法在组织原位显示胸腺内的神经肽，结果；各种神经肽的免疫反应性主要位于髓质，均可见到阳性神经纤维，并与胸腺细胞密切接触，除ＳＰ外，其它神经肽在皮，髓质交界区的血管平滑肌上均有表达，这些神经肽也都与肥大细     

早期培养人胎胸腺基质细胞的组织化学和免疫组织化学观察

３例胸腺组织取向３．５至４个月新鲜死亡人胎，剪碎后种在培养瓶内。所用培养液为ＤＭＥ，另加５％胎牛血清、１０％新生牛血清及Ｄ－缬氨酸６５０ｍｇ／Ｌ。早期培养中出现两类不同形态的细胞。上皮样细胞的ＮＥ、ＡｃＰ活性及ＰＡＳ反应较弱，ＡＴＰ酶和５＇－ＮＴ活性较强，角蛋白呈阳性。成纤维样细胞显示较强的ＮＥ、ＡｃＰ活性及ＰＡＳ反应，Ｖｉｍｅｎｔｉｎ呈阳性。３例培养中均含两类细胞，表明培养细胞仍为胸腺基质细胞的     

大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体的研制与鉴定

采用脾内免疫法，制备出两组大鼠抗小鼠胸腺基质细胞（Ｔｈｙｍｉｃｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓ，ＴＳＣ）的大－小鼠Ｂ细胞杂交瘤，已获４０个单抗分泌细胞株。小鼠胸腺切片免疫组织化学染色结果：（１）髓质ＴＳＣ反应阳性，皮质ＴＳＣ反应阴性；（２）皮、髓质ＴＳＣ反应均呈阳性且强度相似；（３）髓质ＴＳＣ反应强于皮质ＴＳＣ；（４）皮质ＴＳＣ反应强于髓质ＴＳＣ；（５）胸腺细胞的反应呈弥漫性。本实验结果不仅有利于鉴别ＴＳＣ亚群并且对研究Ｔ细胞发育有重要意义。     

成年小鼠胸腺内神经肽免疫组织化学研究

目的：探讨成年ＢＡＬＢ／ｃ鼠胸腺内血管活性肠肽（ＶＩＰ）、Ｐ物质（ＳＰ）、５羟色胺（５ＨＴ）、生长抑素（ＳＯＭ）以及神经肽Ｙ（ＮＰＹ）免疫反应性的分布及与Ｔ细胞发育的关系。方法：利用免疫组织化学方法在组织原位显示胸腺内的神经肽。结果：各神经肽的免疫反应性主要位于髓质，均可见到阳性神经纤维，并与胸腺细胞密切接触。除ＳＰ外，其它神经肽在皮、髓质交界区的血管平滑肌上均有表达。这些神经肽也都与肥大细胞密切相关。结论：ＶＩＰ、ＳＰ、５ＨＴ、ＳＯＭ及ＮＰＹ可能参与成熟Ｔ细胞的功能调节。ＶＩＰ、５ＨＴ、ＳＯＭ、ＮＰＹ可能有控制Ｔ细胞迁移的功能。     

大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体的研制与鉴定

采用脾内免疫法，制备出两组大鼠抗小鼠胸腺基质细胞的大一小鼠Ｂ细胞杂交瘤，已获４０个单抗分泌细胞株。小鼠胸腺切片免疫组织化学染色结果：（１）髓质ＴＳＣ反应阳性，皮质ＴＳＣ反应阴性；（２）皮，髓质ＴＳＣ反应均呈阳性且强度相似；（３）髓质ＴＳＣ反应强于皮质ＴＳＣ；（４）皮质ＴＳＣ反应强于髓质ＴＳＣ；（５）胸腺细胞的反应呈弥漫性。本实验结果不仅有利于鉴别ＴＳＣ亚群并且对研究Ｔ细胞发育有重要意义。     

小鼠胸腺基质细胞的类型和分布

本文用特殊染色方法和酸性复红法对小鼠胸腺内各种基质细胞进行了鉴别,从染色特性及细胞形态,可区分出各型上皮网状细胞、保姆细胞、巨噬细胞、肥大细胞的?光镜下观察了小鼠胸腺内各种基质细胞的分布,并证实小鼠胸腺髓质内含有胸腺小体。本文就电镜所见髓质两种上皮细胞类型并结合PAS反应,对髓质内亮细胞的特性进行了讨论。     

小鼠胸腺基质细胞单抗PF18-3的凋亡抑制作用及其识别分子的特征分析

目的：观察单抗PF18-3对小鼠胸腺树突状细胞系（MTSC4）增强胸腺细胞凋亡作用的影响并对PF18-3识别分子进行特征分析。方法：用DNA梯度断裂片段电泳检测PF18-3对凋亡过程的抑制作用；用膜蛋白斑点杂交和免疫共沉淀对其识别分子进行特征分析。结果：PF18－3抑制MTSC4对胸腺细胞凋亡的增强作用。其识别分子为分子量31000的膜蛋白，在不同胸腺基质细胞系分布不同，与其凋亡介导增强作用一致。结论：PF18－3识别分子参与凋亡介导增强过程，为非凋之介导分子CD95／配体（Fas/FasL）分子，值得进一步研究。     

萎缩胸腺内网状上皮细胞的形态学观察

104例尸检萎缩胸腺组织,用PAP法进行抗角蛋白多克隆抗体检测及组织学观察,发现61例病理性重度萎缩胸腺中,网状上皮细胞有4种分布类型①正常分布,②小叶中心集中分布,③小叶内平均分布,④消减型.7例生理性萎缩胸腺,均为消减型.胸腺网状上皮细胞形态有具细长突起(皮质)及短突起(髓质)2型.萎缩胸腺内有60.7%呈网状上皮增生,尤以髓质区明显.有12例胸腺组织行扫描电镜观察,见胸腺重度萎缩呈疏网型、蜂巢型及消减型序列发生.     

家兔视网膜的酶组织化学研究

用组织化学的方法测定家兔视网膜的酶分布情况,发现酸性磷酸酶分布于视网膜全层,以色素上皮层、杆锥体层、外核层和外网层较多。碱性磷酸酶除血管内皮外,均呈阴性反应。琥珀酸脱氢酶明显地分布在杆、锥体内端和色素上皮层。三磷酸腺苷酶活性大量分布在杆锥体的椭园体,中等量分布在色素上皮层和外核层。葡萄糖-6-磷酸酶和磷酸化酶主要局限于视网膜外网层以外部分。乳酸脱氢酶大量分布在杆锥体内端、神经节细胞层和神经纤维层。这些酶的分布特点提示,外网层以内的视网膜主要由糖元无氧酵解获得能量,而外网层以外的部分则通过有氧氧化获得能量。     

人类胚胎胸腺细胞凋亡的定量研究

用５３例人类胚胎胸腺标本对胸腺细胞在发育过程中的凋亡现象进行了定量研究。结果显示，８周时开始出现胸腺细胞，１１周时腺实质开始区分出皮质和髓质。此后，皮质内正常胸腺细胞的量始终明显多于髓质，而凋亡胸腺细胞的量却明显少于髓质。不同发育阶段的胸腺细胞凋亡率，在皮质变化较小，波动于１．４％～４．７％之间；在髓质则变化较大，波动于６．５％～７４％之间，其峰值出现于１７～２２周。表明胸腺细胞的凋亡主要发生在髓质，而且具有明显的阶段性。     

小鼠自然杀伤细胞杀伤瘤细胞机理的探讨

小鼠脾脏中自然杀伤细胞经4层非连续性 percoll 密度梯度离心法得到分离和纯化.其分离纯度达43%。主要分布于2分层中,形态学特征表现为大颗粒型淋巴细胞的特征,酸性非特异性脂酶呈阳性反应,过氧化物酶反应呈阴性.自然杀伤细胞对 L615白血病细胞具有非抗体介导的杀伤活性即自然杀伤活性.该杀伤活性与自然杀伤细胞释放超氧阴离子自由基有着极其密切的关系,同时此杀伤活性可被内毒素所加强.关于3,4两层细胞,前者表现为非颗粒型大淋巴细胞的形态学特征,后者为小淋巴细胞.它们对瘤细胞皆不表现出杀伤活性,但是当与内毒素作用后,其杀伤活性骤增,可能与受激发后释放超氧阴离子自由基有关.     

体外诱导小鼠胚芽干细胞分化为肝细胞的实验研究

目的寻找一种诱导小鼠胚芽干细胞向肝细胞定向分化的最佳诱导剂。方法分离提取孕11 d小鼠胚胎的原始生殖细胞,体外培养扩增后,一部分胚芽干细胞接种到6孔培养板中。向不同孔中分别加入不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、表皮生长因子（EGF）、β-神经生长因子（β-NGF）、维甲酸（RA）、肝细胞提取液进行诱导分化。另一部分胚芽干细胞与胎肝组织共培养。将培养12 d的细胞采用靛青绿摄入试验和白蛋白（ALB）免疫细胞化学染色来鉴定原始生殖细胞向肝细胞分化的情况。结果与胎肝组织共培养和添加了β-NGF、肝细胞提取液的胚芽干细胞能够诱导成肝样细胞,这些肝样细胞能够摄取ICG并表达ALB,上述3组细胞ALB阳性细胞数较对照组明显增多（P〈0.05）。bFGF、EGF、RA并无诱导分化作用。结论β-NGF、胎肝组织产生的细胞因子及肝细胞提取液中的细胞因子可诱导小鼠胚芽干细胞向肝细胞分化。     

骨髓基质干细胞接种于纤维蛋白凝胶的体外培养

目的：研究经分离培养的免音舱基质子细胞(MSC)接种在可吸收性纤维蛋白凝胶上向成分细胞分化，表型维持的影响。方法：取兔骨髓基质子细胞于含100nl/L胎牛血清的DMEM培养液中培养，并向成管细胞诱导。将细胞与纤维蛋白凝胶复合，通过扫描电镜观察细胞附着情况，共聚焦显微镜观察I型胶原的分泌，组织化学染色检测碱性磷酸酶(ALP)阳性细胞，ALP含量测定。结果：骨髓基质子细胞在可吸收性纤维蛋白凝胶表面附着良好并继续增殖，可分泌I型胶原，这些细胞的ALP染色呈强阳性，细胞碱性磷酸酶含量增高。结论：具有良好的可塑性、低抗原性、好的降解吸收性的纤维蛋白凝胶具有促进骨髓基质细胞表达成管细胞表型、合成细胞外基质的功能，是良好的细胞载体。