宫内高血糖环境及生后早期过度喂养对子代大鼠代谢的远期影响

目的 通过建立大鼠孕期高糖模型,观察出生后早期过度喂养对子代远期代谢的影响.方法 成年Wistar大鼠妊娠第5天,给予链脲霉素50 mg/kg腹腔内注射,建立高糖环境模型.将子代大鼠分为3组:宫内血糖环境正常组(CP组):仔鼠8只;宫内高血糖环境模型鼠出生仔鼠,且每只糖尿病母鼠哺乳喂养8只仔鼠(DP-1组);宫内高血糖环境,每只糖尿病母鼠哺乳期喂养4只仔鼠(DP-2组).观察出生后3～10周3组仔鼠体重变化,仔鼠10周龄时行口服葡萄糖耐量实验(OGTT),11周龄行高胰岛素一正葡萄糖钳夹实验,并采用酶联免疫吸附法测量胰岛素水平评价其胰岛功能.结果 DP-1和DP-2组仔鼠出生后3～10周的体重增长率分别为(6.68±1.70)%和(6.03±1.85)%,均显著高于CP组[(4.74±0.93)%,P<0.05].3组仔鼠10周龄OGTT结果差异均无统计学意义(P>0.05);DP-1组基础胰岛素水平[(0.76±0.37)μg/L]低于CP组及DP-2组[(1.13±0.25)μg/L和(1.06±0.14)μg/L,P<0.05];DP-1组平均葡萄糖输注速率高于DP-2组[(4.93±1.11)U/(kg·h)与(3.72±1.07)U/(kg·h),P<0.05].结论 宫内高血糖环境暴露下的子代大鼠出生后3～10周体重增长过快,出生后早期过度喂养会加速胰岛素敏感性的下降.     

孕期高脂肪饮食通过胰腺Pax6信号通路诱导孕鼠胰岛素抵抗的相关研究

目的:研究孕期高脂肪饮食对孕鼠胰岛功能的影响和机制.方法:将30只孕鼠随机分为HF组与NC组(每组15只),分别摄取高热卡(高脂肪)及正常热卡饮食,孕期监测大鼠体重.孕鼠妊娠第20天禁食12h后测空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)的水平,计算胰岛素敏感指数(ISI)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),随即行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰岛素释放试验(IRT).取血后处死孕鼠,即刻留取胰腺组织.RT-PCR和Real-time PCR法检测胰腺组织中配对盒因子6(Pax6)转录因子及其靶基因Pdx1,MafA和GLUT2的表达.结果:HF组大鼠妊娠期体重明显增加(P＜0.05).妊娠晚期,HF组孕鼠FBG显著高于NC组[(6.62 ±0.78)mmol/L vs (4.96±0.67)mmol/L,P＜0.05],HOMA-IR显著高于NC组(1.64±0.29 vs 1.36±0.23,P＜0.05).OGTT和IRT结果显示,HF组孕鼠出现糖耐量受损及胰岛素抵抗;两组孕鼠FINS水平无显著差异.HF组孕鼠胰腺组织中Pax6转录因子及其靶基因Pdx1、MafA和GLUT2的表达均显著降低(P＜0.05).结论:孕期高脂肪饮食可能通过降低胰腺Pax6转录因子及其靶基因的表达诱导孕鼠发生糖耐量受损及胰岛素抵抗.     

子宫内高糖环境与子代成年期瘦素抵抗的动物实验研究

目的 探讨宫内暴露于高糖环境下的仔鼠成年期瘦素水平的变化以及对其生长发育的影响.方法 采用成年Wistar雌鼠与Wistar雄鼠杂交,在孕鼠妊娠第5天给予20%链脲霉素50 mg/kg腹腔内注射,建立高糖环境模型,为高糖组;孕鼠腹腔内仅注射柠檬酸缓冲液作为对照组.测量两组仔鼠3～10周龄的体重增长;仔鼠11周龄时,采用酶联免疫吸附试验检测其血浆瘦素水平,分析瘦素与仔鼠生长发育的相关性;应用免疫组化方法及实时定量PCR技术分别检测仔鼠下丘脑瘦素受体蛋白及mRNA表达水平[以积分吸光度(IA)值表示].结果 (1)高糖组母鼠空腹血糖为(28.3±5.1)mmol/L,明显高于对照组的(6.3±1.4)mmol/L,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).仔鼠11周龄时,高糖组仔鼠空腹血糖为(5.1±0.8)mmol/L,对照组仔鼠空腹血糖为(5.3±0.6)mmol/L,两组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)高糖组仔鼠出生后3～10周的体重增长率为649.7%,显著高于对照组的479.2%,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)高糖组仔鼠基础胰岛素水平为(0.76±0.37)μg/,L,对照组仔鼠为(1.06±0.14)μg/L,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);高糖组仔鼠基础瘦素水平为(113±37)μg/L,对照组仔鼠为(128±40)μg/L,两组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(4)高糖组仔鼠瘦素水平与体重增长率无相关性(r=-0.501,P=0.311);对照组仔鼠瘦素水平与体重增长率有显著负相关关系(r=-0.553,P=0.001).(5)高糖组仔鼠11周龄时下丘脑瘦素受体蛋白表达水平为4125±414,对照组仔鼠11周龄时下丘脑瘦素受体蛋白表达水平为4244±511,两组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).高糖组仔鼠11周龄时下丘脑瘦素受体mRNA表达水平中位数为1.25,对照组仔鼠11周龄时下丘脑瘦素受体mRNA表达水平中位数为1.80,高糖组虽低于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大鼠宫内高糖环境会导致仔鼠出生后3～10周体重过快增长,而瘦素水平无下降趋势,提示可能存在一定程度的瘦素抵抗;但未影响仔鼠出生后11周时的下丘脑瘦素受体表达水平的变化,宫内暴露于高糖环境下仔鼠发生的成年期瘦索抵抗并非通过下丘脑瘦素受体水平的变化所导致.     

糖代谢异常孕妇体质量及相关因素对新生儿出生体质量的影响

目的 探讨影响糖代谢异常孕妇新生儿出生体质量的相关因素.方法 选择2005年1月-2009年12月在北京大学第一医院分娩的临床资料齐全的妊娠合并糖代谢异常足月单胎孕妇1157例,根据孕前体质指数(BMI)分成4组:53例BMI＜18.5 kg/m2为低体质量组,647例BMI18.5～23.9 kg/m2为理想体质量组,323例BMI 24.0～27.9 kg/m2为超体质量组,134例BMI≥28.0 kg/m2为肥胖组.1157例新生儿按出生体质量分为:出生体质量2500～4000 g为正常体质量儿(987例),其中545例出生体质量3000～3500 g为适宜体质量儿;出生体质量≥4000 g为巨大儿(112例);出生体质量＜2500 g为低体质量儿(58例).记录其孕前体质量、身高、糖代谢异常诊断时间及诊断时体质量、孕期血脂水平、不良产史、糖尿病家族史、分娩孕周、分娩时体质量、新生儿出生体质量.分析孕前BMI、孕期体质量增长(分娩时体质量-孕前体质量)、诊断糖代谢异常的孕周、诊断后孕妇体质量增长(分娩时体质量-诊断糖代谢异常时体质量)、孕期血脂水平、不良产史及糖尿病家族史对新生儿出生体质量的影响及计算孕前不同BMI孕妇分娩适宜体质量儿的孕期体质量适宜增长范围.结果 (1)新生儿平均出生体质量:低体质量组为(3142±333)g,理想体质量组为(3339±476)g,超体质量组为(3381±581)g,肥胖组为(3368±644)g.新生儿出生体质量随孕前BMI增加而增加,低体质量组新生儿平均出生体质量低于其他3组,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);但理想体质量组、超体质量组、肥胖组间分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(2)分娩正常体质量儿和巨大儿孕妇的孕期体质量增长:分娩正常体质量儿及分娩巨大儿的各组孕妇孕期体质量增长为,理想体质量组分别为(13.5±4.5)及(17.1±5.4)kg,超体质量组分别为(11.6±4.9)及(15.3±6.4)kg,肥胖组分别为(10.3±5.0)及(14.7±7.4)kg,3组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);低体质量组分娩巨大儿的孕妇仅1例,无法进行统计学分析.(3)分娩正常体质量儿和巨大儿孕妇的糖代谢异常诊断孕周:理想体质量组分别为(27.8±5.8)及(29.8±5.3)周,超体质量组分别为(26.7±6.8)及(30.2±4.1)周,两者分别组内比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);肥胖组分别为(26.2±7.5)及(25.7±9.3)周,差异无统计学意义(P＞0.01);低体质量组分娩巨大儿孕妇例数仅1例,无法进行统计学分析.(4)分娩正常体质量儿与巨大儿孕妇的血脂水平:分娩巨大儿孕妇血清甘油三酯水平[(3.1±1.5)mmol/L]明显高于分娩正常体质量儿的孕妇[(2.7±1.2)mmol/L,P＜0.01];分娩巨大儿孕妇血清高密度脂蛋白胆固醇水平[(1.4±0.3)mmol/L]明显低于分娩正常体质量儿的孕妇[(1.7±0.9)mmol/L,P＜0.05];分娩巨大儿孕妇血清低密度脂蛋白胆固醇及总胆固醇水平[分别为(2.8±0.8)及(5.4±1.1)mmol/L]均低于分娩正常体质量儿的孕妇[分别为(3.0±0.9)及(5.6±1.1)mmol/L],但差异无统计学意义(P＞0.05).(5)影响新生儿出生体质量的相关因素:将年龄、不良产史、糖尿病家族史、孕前BMI、孕期体质量增长、诊断糖代谢异常后孕妇体质量增长、孕期血脂水平、糖代谢异常分类、诊断孕周等因素进行logistic多元回归模型分析,最终进入回归模型的变量中排在前3位的是孕前BMI、孕期体质量增长及高密度脂蛋白胆固醇水平(P＜0.01).结论 妊娠合并糖代谢异常孕妇新生儿出生体质量与孕前BMI、孕期体质量增长、孕期血浆高密度脂蛋白胆固醇水平相关.     

妊娠期糖代谢异常母亲之子代的早期生长模式

目的 了解不同糖代谢状态孕妇后代在婴儿早期的生长模式.方法 选择2007年1月1日至2009年12月31日在北京大学第一医院分娩,且在生后6～12周完成随访的7600例单胎新生儿作为研究对象,其中母亲妊娠期糖代谢正常者6955例,糖代谢异常者645例.以母亲糖代谢情况和新生儿是否为巨大胎儿为分层因素将婴儿分为4组:糖代谢正常非巨大儿组6432例,糖代谢正常巨大儿组523例,糖代谢异常非巨大儿组588例,糖代谢异常巨大儿组57例.比较4组婴儿出生体重、复查时体重及日增长体重情况.采用t检验、单因素方差分析、LSD法进行统计学分析.为校正随访时天数对婴儿体重增长的影响,以随访天数为协变量,比较4组出生后体重增长情况的差别.结果 糖代谢正常组与糖代谢异常组比较,2组婴儿出生体重差异无统计学意义[(3367.0±420.3)g与(3368.2±475.1)g,t=-0.061,P＞0.05];糖代谢异常组复查时体重及日增长体重均低于糖代谢正常组,差异均有统计学意义[复查时体重:(5393.9±647.2)g与(5459.3±625.2)g;日增长体重:(42.9±9.5)g与(44.0±9.5)g,t=2.464和2.874,P均＜0.05].糖代谢正常非巨大儿、糖代谢异常非巨大儿、糖代谢正常巨大儿和糖代谢异常巨大儿组婴儿出生体重分别为(3300.6±359.2)g、(3282.1±397.0)g、(4183.8±203.8)g和(4256.8±248.8)g;复查时体重分别为(5400.5±590.7)g、(5325.8±618.8)g、(6182.7±584.7)g和(6096.5±502.4)g;日增长体重分别为(44.1±9.4)g、(43.2±9.4)g、(42.4±10.9)g和(39.6±10.0)g.4组间各指标比较,差异均有统计学意义(F值分别为1140.471、313.376、10.830,P均＜0.001).4组间体重日增长协方差分析比较发现,糖代谢正常非巨大儿组分别高于糖代谢异常非巨大儿、糖代谢正常巨大儿组和糖代谢异常巨大儿组,糖代谢正常巨大儿组高于糖代谢异常巨大儿组,糖代谢异常非巨大儿组高于糖代谢异常巨大儿组(P均＜0.05或0.01).结论 在脱离母体高血糖影响后,妊娠期高血糖孕妇子代在婴儿早期的生长速度可能呈现暂时减慢.     

宫内轻度高糖暴露及出生后高脂饮食对子鼠体质量和脂代谢的远期影响

目的 通过建立孕鼠宫内轻度高糖环境模型,探讨宫内轻度高糖暴露及出生后高脂饮食对子鼠体质量和脂代谢的远期影响.方法 21只Wistar孕鼠随机分为高糖组(14只)和对照组(7只),高糖组孕鼠一次性腹腔注射20％的链脲佐菌素25 mg/kg,诱导宫内轻度高糖环境模型;对照组孕鼠以同样方法仅行腹腔注射等体积的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液.将其子鼠分为高糖环境正常饮食(DN)组,高糖环境高脂饮食(DF)组,对照正常饮食(CN)组,对照高脂饮食(CF)组.记录两组孕鼠的血糖水平和4组子鼠出生后体质量变化,测定28周龄时各组子鼠肠系膜、附睾和肾周等内脏脂肪含量以及甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C)水平.结果 (1)高糖组孕鼠孕期平均血糖水平为(16.6±3.4) mmol/L,显著高于对照组的(5.8 ±1.1) mmol/L,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2) CN组子鼠在出生时、3周龄、4周龄时的体质量分别为(6.6±0.5)、(35.6±4.4)、(71.5±6.8)g,DN组子鼠分别为(7.4±0.6)、(44.1±5.9)、(79.6±7.4)g,DF组子鼠分别为(7.4±0.2)、(43.9 ±6.9)、(76.1 ±5.8)g,DN组及DF组均明显高于CN组,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);CF组子鼠分别为(6.7±0.5)、(33.0±6.5)、(66.1±10.2)g,与CN组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(3)超过4周龄以后,直至28周龄时,各组子鼠体质量增长均呈增高趋势,但各组分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(4)DN组、CF组和DF组的子鼠肾周脂肪含量分别为(13.8±3.3)、(14.3±3.2)、(18.4±1.3)g,均明显高于CN组的(9.7±3.5)g,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);CF组和DF组的子鼠附睾脂肪含量均明显高于CN组,分别比较,差异也均有统计学意义(P＜0.05).各组子鼠肠系膜脂肪含量分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(5)DN组、CF组和DF组的子鼠TG水平分别为(0.52 ±0.14)、(0.52±0.09)、(0.54±0.17) mmol/L,明显高于CN组的(0.41 ±0.09) mmol/L,分别比较,差异有统计学意义(P＜0.05),但前3组之间分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);各组子鼠HDL-C分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 宫内轻度高糖环境下,子鼠出生时和生后早期存在体质量增长过快的趋势,远期出现内脏脂肪含量增多和脂代谢紊乱的情况,出生后高脂饮食使这些代谢紊乱进一步加重.     

胎儿生长受限大鼠胰岛素敏感性的动态变化

目的 探讨胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)大鼠胰岛素敏感性的变化规律.方法 母鼠受孕后第1天始随机分为对照组和低蛋白组,各10只.低蛋白组孕鼠采用低蛋白饮食法建立FGR模型.低蛋白组仔鼠中出生体重低于对照组仔鼠平均出生体重两个标准差者定为FGR鼠.测定对照组和FGR仔鼠(每组雌雄各8只)生后3、7、14、30、60及90 d空腹血浆血糖(fasting plasma glucose,FPG)及空腹血清胰岛索(fasting serum insulin,FINS),计算胰岛素抵抗指数及胰岛素敏感指数.90 d时测定血甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和糖化血红蛋白,同时行腹腔葡萄糖耐量实验.结果 (1)低蛋白组仔鼠平均出生体重为(4.92±0.36)g,低于对照组的(6.43±0.59)g,差异有统计学意义(t=14.73,P＜0.05).(2)雄性FGR鼠生后60 d时FPG高于对照组[(9.38±1.57)mmol/L与(5.58士1.24)mmol/L],直至90 d[(8.95±1.83)mmol/L与(6.21±1.14)mmol/L],差异有统计学意义(t=-3.291,P＜0.05);雌性FGR鼠90 d时FPG为(9.08±1.65)mmol/L,高于对照组的(6.73土0.67)mmol/L,差异有统计学意义(t=-3.226,P＜0.05);雄性FGR鼠FINS 30 d时开始高于对照组,直至90 d时;雌性FGR鼠60及90 d时FINS 高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);雄性及雌性FGR鼠胰岛素抵抗指数及胰岛素敏感指数分别于30 d及60 d始与对照组相比出现改变,直至90 d,差异有统计学意义(P均＜0.05).腹腔葡萄糖耐量实验结果显示,从0 min始各时间点雄性和雌性FGR鼠血糖均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)生后90 d时,雄性FGR鼠糖化血红蛋白为(7.03±0.54)%,高于对照组的(4.37±0.64)%,差异有统计学意义(t=-8.028,P＜0.05).无论雄性或雌性仔鼠,2组血脂水平差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 FGR鼠在生后早期尚能维持正常的FPG和FINS水平,随着日龄增加,胰岛素敏感性从青年期逐渐降低,直至成年期,而且雄性FGR鼠更易发生胰岛素抵抗.

Abstract：

Objective To investigate the regular pattern of dynamic changes of insulin sensitivity in fetal growth restriction (FGR) rats. Methods Twenty pregnant female rats were randomly divided into two groups as normal-protein group (NP) and low-protein group (LP), which respectively received normal protein diet (20% protein) and low protein diet (8% protein) during pregnancy. Weights of newborns were measured within 6 hours after birth, and the LP offspring whose birth weights were at least 2 standard deviations below the mean of NP offspring (≤2 standard deviations) were defined as FGR rats. At day 3, 7, 14, 30, 60 and 90 after birth, rats were fasted for 12 hours and then angular vein blood was collected to measure fasting plasma glucose (FPG) and fasting serum insulin (FINS) level. At 90 days of age, intraperitoneal glucose tolerance test (IPGTT)was performed; and blood triglyceride ( TG ), low-density lipoprotein cholesterol ( LDL-C ),high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) and glycosylated hemoglobin Alc (HbAlc) were measured. Insulin sensitivity was evaluated by FINS, insulin resistance index (HOMA-IR), insulin sensitivity index (ISI) and IPGTT. Results (1) Birth weights of LP offspring [(4. 92 ± 0. 36) g]were significantly lower than those of NP ones [(6. 43 ± 0. 59) g] (t = 14. 73, P＜0. 05). The incidence of FGR in LP was 88. 2% ; and for the male and female rats, the FGR rate was 94. 1% and 83. 1%, respectively. (2) FPG levels in the male FGR rats were significantly higher than in the NP from the age of 60 days [(9.38 ± 1.57) mmol/L vs (5. 58 ± 1.24) mmol/L] to 90 days [(8. 95 ±1.83) mmol/L vs (6. 21± 1.14) mmol/L] (t=-3. 291, P＜0. 05), while FPG levels in female FGR rats increased significantly only at 90 days of age [(9. 08±1.65) mmol/L vs (6.73±0. 67) mmol/L](t=-3. 226,P＜0. 05). FINS levels were significantly higher in FGR rats than in the NP from the age of 30 days (male FGR rats) or 60 days (female FGR rats) to 90 days (P＜0. 05, respectively).Similarly, HOMA-IR was significantly higher in FGR rats than in the NP at the age of 30 days (male FGR rats) or 60 days (female FGR rats) to 90 days (P＜0. 05, respectively). ISI in male FGR rats showed a reduction in comparison with the NP from the age of 30 to 90 days, while as to the female FGR rats it was significantly lower than in the NP only at 60 days of age and continued to 90 days (P＜0. 05, respectively). IPGTT showed that after injection of glucose, blood glucose at all four points (from 0 min to 120 min) in both male and female FGR rats were higher than that in the NP (P＜0. 05). (3) No significant difference was observed in TG, LDL-C and HDL-C at 90 days of age between the FGR rats and NP ones, while HbA1c in the male FGR rats was significantly higher than that in the NP [(7. 03±0. 54) % vs (4. 37±0. 64)%,t= -8. 028, P＜0. 05]. Conclusions FGR rats are able to maintain glucose balance and normal insulin levels during their earlier age, while insulin sensitivity decreased from adolescence to adulthood. The change of insulin sensitivity is different between male and female FGR rats, and male FGR rats are more likely to develop insulin resistance.     

孕期高糖环境和早期过度喂养对子鼠成年后胰岛发育和胰岛素抵抗的影响

目的 探讨孕期高糖环境和早期过度喂养对子鼠成年后胰岛发育和胰岛素抵抗的影响.方法 清洁级健康成年雌性Wistar大鼠30只,雄性10只,合笼后次日晨阴道栓涂片3处不同视野发现精子,记为妊娠第1天,将孕鼠随机分为重度高糖组(按高糖环境造模成功后)孕鼠16只,对照组(正常饲养)孕鼠8只.通过减少母鼠哺乳子鼠数建立出生后早期过度喂养模型,根据孕鼠血糖水平和哺乳期喂养方式将子鼠分为血糖正常生长组(孕鼠血糖正常,哺乳期喂养子鼠8只);高糖生长正常组(孕鼠重度高血糖,哺乳期喂养子鼠8只);高糖生长过度组(孕鼠重度高血糖,哺乳期喂养子鼠4只).每周用电子秤称量子鼠体质量.应用酶联免疫吸附试验法测量各组子鼠26周龄时血清胰岛素水平.免疫组化法检测各组子鼠出生26周时胰岛β细胞形态学变化.结果 (1)两组孕鼠血糖:重度高糖组孕鼠血糖(28.3±5.1)mmol/L,明显高于对照组的(6.3±1.4)mmol/L,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)出生后3～7周、3～9周子鼠体质量增长率:高糖生长正常组子鼠分别为(4.6±1.3)%及(6.8±2.5)%,高糖生长过度组子鼠分别为(3.2±0.7)%及(4.6±1.2)%,血糖正常生长组子鼠分别为(2.9±0.6)%及(4.1±0.8)%,高糖生长正常组及高糖生长过度组不同时期子鼠体质量增长率均明显高于血糖正常生长组(P＜0.05).(3)各组子鼠出生后26周体质量:血糖正常生长组(486±132)g,高糖生长正常组(387±115)g,高糖生长过度组(382±122)g,高糖生长正常组及高糖生长过度组子鼠体质量低于血糖正常生长组,但分别比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(4)子鼠空腹血糖及胰岛功能各指标:各组子鼠空腹血糖均为正常水平.高糖生长正常组及高糖生长过度组子鼠胰岛素水平[分别为(10.9±3.3)及(12.6±3.3)mU/L]高于血糖正常生长组[(8.6±0.8)mU/L],高糖生长过度组子鼠胰岛素水平显著高于高糖生长正常组及血糖正常生长组(P＜0.05).高糖生长正常组、高糖生长过度组(分别为0.026±0.007、0.020±0.006)子鼠胰岛素敏感指数显著高于血糖正常生长组(0.003±0.004;P＜0.05);高糖生长过度组(2.40±0.62)子鼠胰岛素抵抗指数显著高于高糖生长正常组及血糖正常生长组(分别为2.13±0.68、1.73±0.25;P＜0.05).(5)胰岛发育的形态学改变:血糖正常生长组和高糖生长正常组子鼠的胰岛为圆形或椭圆形的细胞团,与外分泌组织界限清楚;胰岛β细胞分布均匀,胞质丰富,核多为圆形.高糖生长过度组子鼠的胰岛大小不一,多数胰岛增生肥大.(6)胰岛β细胞含量、β细胞相对容积及胰岛面积:高糖生长过度组子鼠分别为(1.81±0.31)%、(57.1±3.2)%及(39 067±3308)μm2,高糖生长正常组分别为(1.34±0.43)%、(60.9±0.6)%及(30 570±4824)μm2,血糖正常生长组分别为(1.11±0.26)%、(63.7±2.7)%及(26 443±4431)μm2,高糖生长过度组子鼠胰岛β细胞含量及胰岛面积均明显高于其他两组(P＜0.05),而β细胞相对容积明显低于其他两组(P＜0.05).结论 孕鼠重度高糖可导致低体质量子鼠出生,生后出现明显的追赶生长现象,并有成年后胰岛素抵抗趋势,早期过度喂养加速了这一进程;重度高糖孕鼠的子代至成年期时,胰腺形态学发育并无异常,提示重度高糖环境下对子代代谢编程可能主要改变胰岛β细胞功能;孕鼠重度高糖下过度喂养的子鼠胰岛形态和功能都出现了早期损伤,提示胰岛代偿能力减弱,有进一步发展为糖耐量受损及糖尿病的可能.     

高脂饮食诱导妊娠期胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢特征

目的:探讨稳定、可靠、与妊娠期胰岛素抵抗相似的大鼠模型塑造方法。方法:用高脂饲料喂养5周性成熟Wistar雌性大鼠后受孕,采血动态监测糖脂代谢指标及体重变化,于妊娠末期评估胰岛素敏感性及葡萄糖耐量。取大鼠内脏脂肪和肝脏称重并将组织切片染色镜下观察。结果:高脂鼠体重明显高于对照鼠,孕期体重显著增加(P<0.01)。孕前升高的血脂、血糖、游离脂肪酸水平孕期进一步升高。葡萄糖耐量曲线下面积,高脂组高于普食组,孕鼠高于未孕鼠(P<0.05)。高脂妊娠大鼠内脏脂肪增多,出现脂肪肝,胰岛素耐量实验评估胰岛素抵抗明显(P<0.05)。结论:高脂饮食喂养孕鼠内脏脂肪堆积,糖脂代谢异常,胰岛素抵抗程度加重符合人类妊娠期糖尿病病理性胰岛素抵抗的特征。     

肝脏过氧化物体增殖物激活受体γ基因启动子甲基化及其mRNA表达下调降低胎儿生长受限大鼠胰岛素敏感性

目的 探讨肝脏过氧化物体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator-ativated receptorγ,PPARγ)基因启动子甲基化状态及其mRNA表达在胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)大鼠胰岛素敏感性降低中的作用. 方法 20只雌鼠受孕后第1天随机分为对照组和低蛋白组,各10只.低蛋白组采用低蛋白(粗蛋白含量为8.00％)法建立FGR模型.测定对照组仔鼠和低蛋白组FGR仔鼠生后3、7、14、30、60及90 d(每组每个时间点取雄性仔鼠8只)空腹血浆血糖和空腹血清胰岛素,计算胰岛素抵抗指数及胰岛素敏感指数.采用甲基化特异性聚合酶链反应和逆转录-聚合酶链反应技术测定仔鼠生后7和90 d时肝脏组织PPARγ基因启动子甲基化水平及其mRNA表达情况.采用Pearson相关分析及秩和检验分析肝脏组织中PPARγ基因启动子甲基化及其mRNA表达改变与胰岛素敏感性变化间的关系. 结果 (1)低蛋白组新生仔鼠平均出生体重为(4.92±0.36)g,低于对照组的(6.43±0.59)g(t=14.73,P＜0.05).低蛋白组仔鼠中FGR发生率为88.2％(97/110),其中雄性仔鼠FGR发生率为94.1％(48/51).(2)生后90 d时FGR仔鼠空腹血浆血糖、血清胰岛素和胰岛素抵抗指数显著高于对照组[空腹血浆血糖:(8.95±1.83) mmol/L与(6.21±1.14) mmol/L,t=-3.291,P＜0.05;血清胰岛素:(59.57±9.89) mU/L与(36.10±7.32) mU/L,t=-4.916,P＜0.05;胰岛素抵抗指数:0.967±0.297与0.410±0.135,t=-4.472,P＜0.05)],而胰岛素敏感指数低于对照组仔鼠(-3.043±0.294与-2.172±0.354,t=4.774,P＜0.05).(3)生后7d时,对照组仔鼠与FGR仔鼠PPARγ基因启动子甲基化程度差异无统计学意义(0/8与2/8,Fisher精确概率法,P＞0.05),生后90 d时FGR仔鼠甲基化程度高于对照组仔鼠(8/8与2/8,Fisher精确概率法,P＜0.05).PPARγ基因完全甲基化仔鼠PPARγ基因mRNA相对表达水平最低(27.2±1.6),其次是甲基化与非甲基化共存组(47.3±33.0),完全非甲基化组最高(144.6±21.2),差异均有统计学意义(P均＜0.05).(4)FGR仔鼠生后90 d时PPARγ基因mRNA表达量分别与空腹血浆血糖、血清胰岛素和胰岛素抵抗指数呈负相关(r分别为-0.819、-0.906和-0.860,P均＜0.05),而与胰岛素敏感指数呈正相关(r=0.947,P＜0.05). 结论 PPARγ基因启动子区高甲基化可能抑制其基因转录,从而参与FGR大鼠胰岛素抵抗的发生.     

妊娠期糖代谢异常孕妇并发子痫前期的相关因素探讨

目的探讨妊娠期糖代谢异常孕妇子痫前期的发病情况,以及与发病相关的因素。方法回顾性分析1981至2003年23年间,在我院分娩的1202例妊娠期糖代谢异常孕妇的病例资料,其中151例(Ⅰ组)并发子痫前期,1051例(Ⅱ组)未并发子痫前期,分析与子痫前期发病相关的危险因素。结果(1)妊娠期糖代谢异常孕妇子痫前期的发生率为12.6%(151/1202)。其中糖尿病合并妊娠(DM)、妊娠期糖尿病(GDM)、妊娠期糖耐量降低(GIGT)患者中,子痫前期的发生率分别为34.8%(39/112)、11.8%(89/753)、6.8%(23/337),3者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)Ⅰ组孕妇分娩前体重指数(BMI)为(31±4)kg/m2,Ⅱ组为(29±4)kg/m2,两组比较,差异也有统计学意义(P=0.027);Ⅰ组孕期血糖升高出现的时间[(27±11)周]明显早于Ⅱ组[(30±7)周],平均产次也高于Ⅱ组。(3)有不良孕产史、合并慢性高血压者,子痫前期的发生率分别为18.5%(32/173)、41.9%(18/43),明显高于无不良孕产史及慢性高血压者(P=0.03、0.000)。(4)Ⅰ组孕妇的口服50g葡萄糖负荷试验(GCT)、口服75g葡萄糖耐量试验(OGTT,空腹、服糖后2、3h)及糖化血红蛋白(HbA1c)各值均明显高于Ⅱ组。(5)需要胰岛素治疗者,子痫前期的发生率为15.6%,高于饮食控制者(9.9%,P=0.009);血糖控制不满者子痫前期的发生率为17.0%,明显高于血糖控制满意者(10.0%,P=0.000)。(6)logistic回归分析显示,妊娠期糖代谢异常孕妇合并慢性高血压、HbA1c水平升高为子痫前期发病的独立危险因素。结论不同类型糖代谢异常者,并发子痫前期的发生率存在明显差异,GDM确诊时血糖水平、孕期血糖控制情况等与子痫前期发病存在明显相关性,慢性高血压与糖代谢异常并存,将明显增加子痫前期的发生率。     

妊娠合并糖代谢异常孕妇胎盘内葡萄糖转运蛋白表达的变化

目的 研究妊娠合并糖代谢异常孕妇胎盘内葡萄糖转运蛋白(glucose transporter,GLUTs)的表达变化,探讨其对母儿间葡萄糖转运功能的影响及其与新生儿体重的关系. 方法 于北京大学第一医院收集孕前糖尿病孕妇的胎盘组织标本7例、妊娠期糖尿病A110例、妊娠期糖尿病A214例,妊娠期糖耐量受损10例及正常孕妇胎盘组织标本15例,用免疫组织化学方法测定GLUT1和GLUT3的表达,并记录新生儿出生体重. 结果 免疫组化显示GLUT1主要表达于胎盘的细胞滋养细胞和合体滋养细胞,各组间GLUT1的表达强度差异具有统计学意义(P＜0.01);GLUT3在部分胎盘绒毛问质的血管内皮细胞中表达.各组间的表达差异也具有统计学意义(P＜0.01).GLUT1的表达强度与新生儿出生体重存在等级相关性(rs=0.532,P＜0.01),GLUT3表达强度则与新生儿出生体重无相关性(rs=0.178,P＞0.01). 结论 妊娠合并糖代谢异常孕妇胎盘内GLUT1和GLUT3的表达增强,且GLUT1在胎儿对葡萄糖的摄取过程中可能发挥主要作用.     

妊娠合并糖代谢异常孕妇的体重适宜增长

目的 探讨适合糖代谢异常孕妇妊娠期适宜体重增长范围.方法 对2005年1月至2007年12月在北京大学第一医院分娩的妊娠合并糖代谢异常的足月单胎且病历资料完整的孕产妇661例进行回顾性分析.根据孕前体重指数(BMI)将研究对象分为低体重组(BMI<18.5)40例(Ⅰ组);正常体重组(BMI 18.5～23.9)400例(Ⅱ组);超重组(BMI 24～27.9)162例(Ⅲ组);肥胖组(BMI≥28.0)59例(Ⅳ组).分析孕前不同BMI组正常出生体重儿和巨大儿母亲的孕期增重,并计算出新生儿出生体重在3000～3500 g产妇的孕期平均增重,作为各孕前BMI组孕期适宜的体重增长.结果 孕前不同BMI组分娩巨大儿者孕期增重明显大于分娩正常体重儿者的孕期增重,Ⅱ组孕期平均增重分别为(17.0±5.2)kg和(14.1±4.7)kg,m组孕期平均增重分别为(16.8±7.3)kg和(11.9±5.1)kg,Ⅳ组孕期平均增重分别为(18.3±6.7)kg和(11.2±5.4)kg,差异有统计学意义(P<0.05).各组孕妇孕期平均体重增长和适宜增重范围:Ⅰ组(15.6±3.3)kg,(14.0～18.O)kg,Ⅱ组(13.9±4.6)kg,(11.0～16.5)kg,Ⅲ组(11.5±5.2)kg,(9.0～15.0)ks,Ⅳ组(10.1±2.9)kg,(7.0～12.7)kg.结论 对孕前不同体重的糖代谢异常孕妇进行血糖监测的同时,使其妊娠期体重增长在各自适宜的范围,有助于获得理想出生体重的新生儿.     

复方口服避孕药对多囊卵巢综合征患者糖代谢的影响

多数多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者存在糖代谢、脂代谢、代谢综合征等代谢障碍,罹患糖尿病、心血管疾病的风险增高。口服避孕药作为PCOS患者抗雄激素和调经治疗的一线药物取得令人满意的临床效果,但是这类可能导致糖代谢、脂代谢异常的药物,在应用于有代谢障碍的PCOS患者时可能会加剧其代谢障碍问题,而具有抗雄激素和抗盐皮质激素作用的含屈螺酮的复方口服避孕药——优思明,由于对糖代谢影响极小,有望成为这类PCOS患者的备选药物。     

钙蛋白酶10基因多态性与妊娠期糖代谢异常的关系

目的 探讨孕妇钙蛋白酶10基因单核苷酸多态性(SNP)43、SNP-19和SNP-63与妊娠期糖代谢异常发生风险之间的关系.方法 选择2005年1月至2006年12月在北京大学第一医院分娩的156例妊娠期糖代谢异常患者(妊娠期糖代谢异常组)和114例孕周匹配的健康孕妇(对照组),应用引物引入限制性内切酶分析-聚合酶链反应方法检测两组孕妇钙蛋白酶10基因SNP-43、SNP-19和SNP-63的基因型.结果 (1)在妊娠期糖代谢异常组中,钙蛋白酶10基因SNP-19的基因型2R/2R频率(26.9%,42/156)和等位基因2R频率(48.9%,152/312)明显高于对照组[分别为12.3%(14/114)和36.8%(84/228)],分别比较,差异均有统计学意义(P=0.012,P=0.006).(2)根据有无糖尿病家族史分层分析发现,在家族史阳性的妊娠期糖代谢异常组中SNP-19基因型2R/2R+2R/3R分布占83%(47/57),明显高于对照组的52%(11/21,P=0.009),SNP-43基因型T/T+T/C分布占47%(27/57),明显高于对照组的14%(3/21,P=0.026).(3)对SNP-43、SNP-19和SNP-63位点进行单体型分析,发现在妊娠期糖代谢异常组中单体型121所占的比例明显高于对照组(P=0.036),而单体型221所占的比例明显低于对照组(P=0.042).结论 (1)钙蛋白酶10基因SNP-19多态性与妊娠期糖代谢异常有关,2R等位基因可能是妊娠期糖代谢异常发生的高危因素.SNP-19的基因型2R2R+2R/3R和SNP-63的基因型T/T+T/C可增加糖尿病家族史阳性个体妊娠期糖代谢异常的发生风险,而不影响家族史阴性个体的发病风险.(2)钙蛋白酶10基因SNP-43、SNP-19和SNP-63组成的单体型121可能是妊娠期糖代谢异常发生的高危因素,单体型221可能是其保护因素.     

二代测序技术在植入前遗传学诊断中的应用

二代测序技术在植入前遗传学诊断、筛查中的应用正在迅速发展,其不仅能进行胚胎染色体的全面筛查和诊断,还能检测单基因病。文章就二代测序技术在染色体病、单基因病的植入前     

婴幼儿胰岛素敏感性与母孕期糖代谢情况及糖尿病家族史的关系

目的 探讨影响婴幼儿期胰岛素敏感性的相关因素.方法 对北京大学第三医院儿童保健中心2006年1月到2008年5月建档并定期体检的符合人选标准的246名婴儿和120名幼儿进行回顾性分析,用胰岛素稳态模型法(homeostasis model assessment,HOMA)计算胰岛素抵抗指数(insalin resistance,IR)、胰岛素作用指数(insulin action index,IAI)、血糖胰岛素比值(fasting glu-cose-to-insulin ratio,FGIR)以及胰岛细胞功能(HOMA-β).数据用中位数(M)和P25～P75表示,不同孕母孕期糖代谢情况及糖尿病家族史时各指标差异的比较采用多个独立样本非参数秩和检验,有组间差异者(P＜0.05)再进行组间比较,调整P值结果以P＜0.017为差异有统计学意义.结果 母孕期有糖尿病的婴儿HOMA-IR[3.24(2.76～4.12)]和HOMA-β[164.00(114.44～192.85)]高于母孕期无糖代谢异常的婴儿[1.51(0.86～2.50)和67.07(41.83～106.22)](Z分别=3.76、3.35,P均＜0.017),而IAI[-7.18(-7.41～-7.02)]和FGIR[7.31(5.82～8.55)]低于母孕期无糖代谢异常的婴儿[-6.41(-6.92～-5.85)和14.84(9.49～24.79)],差异均有统计学意义(Z分别=3.76、3.71,P均＜0.017);与母孕期有糖耐量受损的婴儿相比,母孕期有糖尿病的婴儿HOMA-IR增高(Z=3.19,P＜0.017)、IAI降低(Z=3.19,P＜0.017).母孕期无糖代谢异常和仅有糖耐量受损的婴幼儿胰岛素敏感性差异无统计学意义(P＞0.017).一级亲属有糖尿病史与无糖尿病家族史的婴、幼儿比较HOMA-IR增高、IAI和FGIR降低[婴儿:HOMA-IR为3.24(2.73～4.13)和1.41(0.84～2.50)IAI为-7.18(-7.42～-7.00)和-6.34(-6.91～-5.82);FGIR为7.31(5.40～7.48)和14.87(9.53～25.17).幼儿:HOMA-IR为3.98(2.62～4.80)和1.70(0.92～3.04);IAI为-7.38(-7.57～-6.97)和-6.54(-7.11～-5.92);FGIR为6.17(6.04～8.00)和12.65(8.33～21.53).P均＜0.017],婴儿期HOMA-β增高[164.00(137.82～198.00)和67.06(40.40～106.83),P＜0.017].结论 母孕期有糖尿病和/或一级亲属有糖尿病史的婴幼儿胰岛素敏感性降低.     

糖代谢异常与子宫内膜癌关系的研究进展

机体糖、脂及蛋白质代谢异常导致的糖尿病、肥胖和高血压是子宫内膜癌发病的高危因素,代谢紊乱性疾病发生发展的各个环节与子宫内膜癌的发病机制密切相关,两者存在共同的激素水平异常及代谢酶类和细胞因子的表达异常。其中,糖代谢异常的可能致病基础胰岛素抵抗导致多种肿瘤的发生发展,其与子宫内膜癌发病的关系也日益受到重视。通过改善机体糖代谢状况,治疗糖尿病以及控制体质量等提高内膜癌治愈率,成为指导预防及治疗内膜癌的有效手段。