丹参对持续癫痫幼鼠脑损伤保护作用的实验研究

目的 探讨丹参对持续癫痫发作诱发幼鼠脑神经元损伤是否具有保护作用。方法 皮下及腹腔注射贝美格针诱发健康幼龄鼠癫痫持续状态发作。光镜下观察神经元病变情况；电镜观察海马神经元超微结构的改变。结果 持续癫痴组幼鼠脑组织光镜下可见明显的神经元病变。电镜下可见海马区神经元的超微结构病变。丹参治疗组神经元病变均轻于持续癫痴组；而正常对照组未见类似病变。结论 丹参在组织、细胞和亚细胞水平对持续癫病幼鼠脑神经元损伤具有一定的保护作用，为临床有效防治小儿惊厥性脑损伤提供了可靠的实验依据。     

神经节苷脂对急性低氧大鼠脑皮层神经元的保护作用研究

目的 观察外源性神经节苷脂对急性减压低氧大鼠脑神经元的保护作用，为临床应用提供依据。方法 １５只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为：低氧组Ａ、低氧组Ｂ与常氧组。低氧组Ａ置于海拔７０００ｍ，持续５ｈ，低氧组Ｂ在低氧３ｄ前腹腔注射神经节苷脂（１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ），其余与低氧组Ａ相同。电镜观察各组脑皮层神经元的超微结构改变。结果 低氧组Ｂ动物的脑神经元胞体、细胞骨架和突触结构损伤的程度明显轻于低氧组Ａ。结论 神     

大鼠急性脑损伤后神经元类凋亡的观察

目的：观察急性脑损伤后神经元凋亡现象。方法：以大鼠急性弥漫性脑创伤模型为研究对象，采用光镜、电镜观察方法对模型的损伤情况进行组织、细胞形态观察；以DNA－梯形凝胶电泳、凋亡细胞原位末端标记法（TUNEL）对急性脑损伤后鼠脑皮层、海马区神经元DNA损伤情况进行观察。结果：大鼠致伤后，光镜下观察到神经元出现皱缩变性；电锏 上观察发现，伤后2h可观察到神经元类凋亡，24h最为严重，持续到7d；DNA－梯形凝胶电泳显示伤后24h海马及皮层区出现DNA梯状电泳；神经元TUNEL染色伤后2h即可见，24h最为明显，7d时仍高于正常。结论：大鼠急性脑创伤后脑组织中存在神经元类凋亡现象，并在创伤后较长时间内持续存在。     

高压氧对幼鼠与成年鼠海马神经元超微结构影响的观察

目的 探讨高压氧（HBO）对正常幼鼠与成年鼠海马神经元超微结构的影响。方法 将健康SD幼鼠与成年大鼠暴露于0．25MPa(2．5ATA）HBO或高压空气（HBA）环境中1－3个疗程,各疗程结束当日取海马组织观察形态变化。结果 HBO处置引起海马组织内神经元核膜不平滑甚至模糊,部分线粒体肿胀、嵴模糊,部分粗面内质网（RER）扩张、脱颗粒。幼鼠1个疗程后可见轻微上述变化,处置次数增多,上述变化越明显;成年鼠2个疗程后出现神经元超微结构改变,但不及幼鼠显著。停止HBO处置后20d多数改变已恢复。HBA组明显改变。结论 长程HBO暴露可致大鼠海马组织内神经元超微结构损伤,相同方案HBO处置,幼鼠的结构改变早于成年鼠,且程度重、恢复时间相对要长;这种结构改变主要与HBO有关,非HBA所致,而且是可逆的。     

可乐定联合剥夺睡眠诱发癫（癎）发作的SPECT脑血流灌注显像研究

目的 探讨可乐定加剥夺睡眠诱发癫（癎）发作,获取发作期SPECT显像结果的可行性及临床价值.方法 选择临床确诊的癫（癎）患者52例,口服可乐定并剥夺睡眠以诱发癫（癎）（简称可乐定组）,在视频脑电图（VEEG）监测下,当患者出现临床发作和（或）VEEG出现典型癫（癎）波时,30 s内静脉注射99Tcm-双半胱乙酯（ECD）,30 min后行脑血流灌注断层显像.同时,选择同等条件下癫（癎）患者47例作为对照,通过单纯剥夺睡眠以诱发癫（癎）（简称剥夺睡眠组）.应用SPSS 10.0统计软件对2组患者癫（癎）诱发率进行x2检验.结果 可乐定组的52例癫（癎）患者中,39例（75.0%）口服可乐定后1～2 h出现了VEEG异常,其中亚临床发作（仅出现典型癫（癎）波）92.3%（36/39）,临床发作7.7%（3/39）.发作期SPECT定位阳性率为94.9%（37/39）,均表现为高血流灌注灶.剥夺睡眠组的47例患者中,诱发率为38.3%（18/47）,其中亚临床发作77.8%（14/18）,临床发作22.2%（4/18）.2组诱发率差异有统计学意义（x2=13.614,P＜0.01）;2组临床发作率差异无统计学意义（x2=1.253,P＞0.05）.结论 可乐定联合剥夺睡眠对癫（癎）的诱发率明显高于单纯剥夺睡眠,前者可在有限的时间内诱发癫（癎）,以亚临床发作为主,故可作为进行发作期SPECT脑显像安全、有效的诱发方法.     

应用MRI海马体积测量评价颞叶癫(癎)、局灶性颞叶外癫(癎)和原发性癫(癎)大发作

目的:应用MRI体积测量评价颢叶癫痢、局灶性颞叶外癫痢和原发性癫痢大发作患者的海马体积改变,探讨海屿硬化与癫痫发作的关系.材料和方法:74例癫癎患者和30例健康志愿者为研究对象,其中50例颞叶癫癎手术病理证实为海马硬化,6例局灶性颞叶外癫癎为临床诊断和证实,其余18例为原发性癫痫大发作.三组病例的平均病程无明显统计学差异.以正常对照组双侧海马体积的平均值减2倍标准差作为正常下限值来判断病例组双侧海马的绝对体积是否异常,绝对体积行标化处理.结果:50例颞叶癫癎患者中,33例(66%)的病侧海马体积小于正常,其中10例(20%)的对侧海马体积也小于正常.在6例局灶性颞叶外癫痢和18例癫癎大发作患者中,所有病例的双侧海马体积均在正常范围内.结论:颞叶癫癎具有特殊的病理改变,而有别于局灶性颞叶外癫痢和原发性癫癎大发作.MRI海马体积测量对探讨海马硬化与癫痢发作的关系具有很好的研究价值.     

急性脑创伤后迟发性神经元死亡的实验观察

目的：探讨急性脑创伤后迟发性神经元损伤的病理形式及过程。方法：以大鼠脑创伤模型和体外培养海马神经元为研究对象,采用光镜、电镜方法对模型的损伤情况进行形态观察;以DNA－Ladder、TUNEL法对神经DNA损伤情况进行观察。结果：光镜下观察见神经元出现变性;电镜下观察神经元坏死、凋亡、伤后1d时最严重;DNA Ladder实验可见梯度电泳带,TUNEL法伤后2h神经元即有染色,伤后1d时最明显,伤后7d时仍高。体外实验神经元划伤后崩解、坏死,正常神经元在划伤神经元培养液中培养后出现凋亡。结论：急性脑创伤后由于多种因素的作用,导致迟发性神经元死亡,主要表现为坏死和凋亡,凋亡持续时间较长。     

反复性脑缺血神经元选择性易损性的病理观察

目的 研究反复性脑缺血神经元选择性易损性。方法 应用光镜、电镜对比观察大鼠反复性与单次性脑缺血神经元损害的程度、密度和分布。结果 反复缺血组神经元缺血性损伤和超微结构损害明显重于单次缺血组。单次缺血易损部位主要为海马、新皮层、纹状体、丘脑、小脑、脑干等。反复缺血易损区的分布与单次缺血基本相似，但下丘和小脑对反复缺血抵抗，而海马和丘脑腹侧呈现显著的累积性损害。结论 反复性脑缺血神经元选择性易损，巨及其机制均有别于单次性脑缺血。     

实验性癫痫大鼠海马损害与磁共振波谱对照研究

目的 :观察癫痫持续不同时间氢质子磁共振波谱 (1 H MRS)检测的致痫灶 NAA和 Cho异常与海马结构损害的相关性。方法 :2 1只 Wistar大鼠 ,实验组 15只 ,10 % Pilocarpine 35 0 mg/ kg腹腔注射 ,诱发反复全面强直阵挛发作 ,光镜观察发作持续 5min至 6 0 h大鼠海马区神经元和胶质细胞变化 ,并计数海马 CA1 和 CA3段残存正常神经元数量 ;离体1 H MRS测定代谢产物 NAA和 Cho含量变化。结果 :癫痫持续 (SE) 5～ 30 min,光镜观察到神经元变性 ,1 HMRS检测出 NAA值降低 ;SE30 min～ 3h部分神经元坏死、少许丢失 ,轻度胶质增生 ,NAA明显降低 ;SE3～ 6 h后 ,大部分神经元坏死、丢失 ,胶质增生明显 ,形成典型的海马硬化 ;除NAA值降低外 ,1 HMRS还检测出 Cho值升高。结论 :1 HMRS检出的 NAA可反映癫痫脑损害程度 ,并且癫痫发作持续时间与 NAA值和残存正常神经元数量呈显著的负相关。Cho值升高在海马硬化形成后检出 ,可能反映胶质增生     

大鼠周围神经损伤后感觉神经元死亡性质的探讨

目的 :研究周围神经损伤后 ,脊神经节感觉神经元的死亡性质。方法 :切断并原位吻合一侧大鼠坐骨神经 ,对侧不作任何处理、作为对照 ,于术后不同时间取L4～L6脊神经节作光镜和电镜染色观察脊神经节感觉神经元胞体形态的变化。结果 :光镜下 ,损伤的脊神经节感觉神经元胞体染色质浓染 ;电镜下 ,细胞膜内陷分割细胞内容物成凋亡小体 ;而对侧脊神经节感觉经元胞体均一、无变化。结论 :大鼠坐骨神经损伤后 ,脊神经节感觉神经元的死亡主要形式是细胞凋亡     

五味子及其与丹参 灵芝 柴胡配伍对慢性肝损伤的影响

目的 观察五味子和五味子与丹参、柴胡、灵芝配伍对慢性肝损伤的治疗作用。方法 采用四氯化碳（CCl4)和D－氨基半乳糖（D－GlaN)多次注射造成两种慢性肝损伤模型,给予同一剂量的药物,测定血清谷丙转氨酶（ALT）、胆碱酸酶（CHE）、肝匀浆ALT、CHE、谷胱苷肽（GSH）、丙二醛（MDA）和碱性磷酸酶（ALP）,HE染色观察肝组织形态学。结果 五味子对CCl4慢性肝损伤所至的血清与匀浆ALT显著降低（P＜0.01),CHE升高（P＜0.01),ALP与MDA下降（P＜0.01)。五味五＋丹参对慢性肝损伤酶的作用与五味子相似,组织形态学结果与生化结果基本一致。五味子＋柴胡与五味子＋灵芝的作用弱于前者,但病理组织形态学结果不支持二者的治疗作用。对D－GlaN所致慢性肝损伤五味子能加强枯否细胞的吞噬功能,增加蛋白合成,消除MDA对细胞的损伤,改善细胞代谢。五味子＋丹参的生化结果与组织形态学结果显示其治疗作用强于五味子,对纤维组织增生的抑制作用是其特点。五味子＋灵芝虽有降ALT和升高CHE作用（P＜0.05,P＜0.01),但对匀浆CHE无效,而组织形态学显示受损的肝细胞无改善。五味子＋柴胡对酶的作用较差,组织形态学显示受损的肝细胞无明显改善。结论 五味子对两种慢性肝损伤有较好的治疗作用,五味子与丹参配伍的作用强于五味子,对纤维组织增生有明显抑制作用是其特点。     

丹参对大鼠烫伤早期肝脏超微结构改变的影响

目的:观察大鼠严重烫伤早期肝脏超微结构的变化及丹参的影响作用。方法:建立30％Ⅲ度烫伤模型,88只Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组,8只)、平衡液复苏组(B组,40只)和丹参治疗组(C组, 40只),B、C两组烫伤后立即按Parkland公式腹腔注射平衡液120ml/kg,C组在同样治疗的基础上腹腔注射丹参注射液3ml/kg,B、C两组分别于伤后3,6,12,24,48h各时相点任选两只动物肝脏,取其左外叶分两份标本分别置于95％酒精和2．5％戊二醛小瓶中固定,光镜、电镜下观察肝组织形态学变化。结果:肝组织形态学和超微结构改变在伤后6h开始出现,并进行性加重,48h最明显;丹参治疗组肝组织病理改变轻于复苏组。结论:严重烫伤早期肝组织超微结构即可发生改变,丹参治疗后肝组织超微结构改变减轻。     

丙咪嗪对脑外伤后大鼠海马内神经元再生的促进作用

目的 观察丙咪嗪对脑外伤后大鼠海马内神经元再生的影响,以探讨其治疗机制.方法 成年雄性SD大鼠40只,随机均分为损伤治疗组、损伤对照组、未损伤治疗组和未损伤对照组.采用鼠侧向液压冲击脑损伤装置建立急性脑创伤模型,丙咪嗪治疗2个月后处死动物,观察各组大鼠海马内新生细胞和神经元的数量.结果 大鼠海马内新生细胞和神经元的数量损伤组均明显高于未损伤组(P＜0.01),而且无论有无脑创伤,丙咪嗪治疗组均高于相应的对照组(P＜0.05).结论 丙咪嗪能够与颅脑创伤协同作用共同促进海马内神经元的再生.     

低+Gz重复暴露后对高+Gz致大鼠脑损伤的影响

目的：探讨低 Gz重复暴露后对高 Gz致脑损伤的影响。方法：SD大鼠40只，随机分为正常对照组（5只）， 10Gz/5min单次暴露组（5只）和 4Gz/3min暴露1次、3次和5次组（每组10只，每天暴露1次），分别于暴露后1d和6d再暴露于 10Gz/5min，于 10Gz暴露后3d处死取脑，观察脑组织病理损伤情况。结果： 4Gz/3min锻炼1-5次，每天1次，大鼠脑组织未见病理性损伤。而 10Gz/5min单次暴露后，在皮层、海马、丘脑等部位均可见到变性的神经元，个别脑区出现神经细胞凝固性坏死。经过 4Gz/3min锻炼3次和5次后再暴露于 10Gz，变性神经元的数目在顶叶皮层、梨状皮层、海马和丘脑下部等部位明显减少。结论： 4Gz/3min反复锻炼3次和5次，再暴露于损伤强度的 10Gz/5min，其神经元损伤程度明显轻于 10Gz/5min单次暴露。 Gz作用下在脑部同样存在缺血耐受现象。     

丹鹿健腰颗粒质量标准研究

目的建立丹鹿健腰颗粒的质量控制标准。方法采用TLC法对丹鹿健腰颗粒中的丹参、夏天无及鹿衔草进行定性鉴别;应用HPLC法对丹鹿健腰颗粒中的丹酚酸B、原阿片碱进行定量测定。结果丹参、夏天无及鹿衔草的TLC鉴别方法专属性强,简单可行。丹酚酸B、原阿片碱分别在0.4~2.0、0.3~1.2μg范围内呈良好的线性关系,r均为0.9999;平均回收率（n=6）分别为99.3%（RSD为0.7%）、98.8%（RSD为1.2%）。结论本研究所建立的质量标准方法稳定、准确、重复性好,可用于丹鹿健腰颗粒的质量控制。     

NF-κB在大鼠颅脑损伤后表达水平与细胞凋亡的关系

目的 探讨颅脑损伤后不同阶段NF-κB及其下游炎症因子与神经元凋亡的共变关系及可能的机制. 方法采用随机数字表法将大鼠分为颅脑损伤组、颅脑损伤+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组和假手术对照组,并在处理后6,24,168 h分别用免疫组化、RT-PCR、TUNEL法测定脑组织NF-κB、TNF-α和神经元凋亡水平. 结果在颅脑损伤后急性、亚急性期,颅脑损伤组损伤灶周围脑组织中NF-κB、TNF-α较假手术对照组和PDTC组表达明显增高,与神经元凋亡指数呈正相关;在颅脑损伤晚期颅脑拟伤组损伤灶周围脑组织中NF-κB、TNF-α表达有所下降,但仍高于假手术对照组和PDTC组,与神经元凋亡指数呈负相关. 结论 NF-κB和下游炎症因子可能在颅脑损伤后急性、亚急性期有促进神经元凋亡作用,在慢性期有抑制神经元凋亡作用.     

大鼠脑组织缺血再灌注损伤及丹参干预作用实验研究

目的：观察大鼠脑组织缺血再灌注后脑组织损伤变化及丹参的作用。方法：将42只SD大鼠随机分为正常组6只、缺血再灌注组（缺血组）18只和丹参治疗组（丹参组）18只，血管阻断法制作大鼠左侧脑缺血再灌注模型。丹参组于再灌注开始时腹腔注射丹参注射液（5ml／k），而缺血组注入等量生理盐水。观察时点为脑缺血再灌注后12h、24h和48h，观察大鼠脑组织病理变化，检测脑组织含水率及细胞凋亡情况（TUNEL法），检测脑组织丙二醛（malondialdehyde，MDA）、谷氨酸（glutamate，GLU）和7氨基丁酸（gamin-aminobutyric，GABA）含量变化。结果：与正常组比较，缺血组脑组织含水率、凋亡细胞数、MDA水平和GLU含量显著升高，GABA含量显著降低。与缺血组同时点比较，丹参组脑组织病理变化较轻，脑组织含水率、凋亡细胞数、MDA水平和GLU含量显著降低，GABA含量显著升高。结论：血管阻断法能造成显著的大鼠脑缺血再灌注损伤，丹参能有效降低其损伤效应。     

高压氧对一氧化碳中毒大鼠海马神经细胞线粒体膜电位与细胞凋亡的影响

目的 观察一氧化碳中毒（COP）后脑损伤时线粒体膜电位及细胞凋亡数量的变化以及高压氧（HBO）对其影响。方法Wistar大鼠共128只,采用配伍组设计,按随机抽样原则将动物分成4组16小组。正常对照组8只;CO组COP后第1,5,10,15,20天各8只;CO＋HP组高气压处理后第1,5,10,15,20天各8只：CO＋HBO组HBO处理后第1,5,10,15,20天各8只。用流式细胞仪测定COP大鼠在不同时间段海马神经细胞线粒体膜电位及海马神经细胞凋亡细胞相对百分比（％）的变化和HBO治疗后的改变。结果CO组在COP后大鼠海马神经细胞线粒体膜电位在第1,5,10天降低（P＜0．01－0．05）;CO＋HBO组在第1,5天降低（P＜0．01－0．05）。CO组COP后大鼠海马神经细胞凋亡细胞相对百分比在第1,5,10,15,20天高于对照组（P＜0．01）;而CO＋HBO组只在第1,5,10天高于对照组（P＜0．01）。结论COP后大鼠海马神经细胞线粒体膜电位降低,凋亡细胞数增加,并持续很长时间,而HBO处理可缩短线粒体膜电位降低的减少凋亡细胞数百分比。     

运动预处理对力竭运动诱导的大鼠大脑皮质细胞凋亡的影响

目的:探讨运动预处理对力竭运动诱导的大鼠大脑皮质细胞凋亡的保护作用。方法:40只雄性SD大鼠随机分为对照组(C组,n=8),力竭运动组(EE组,n=16),运动预处理组(EP组,n=16)。EP组进行持续4周的中等负荷游泳训练(无负重游泳,60 min/d,6 d/w)后,EE组和EP组负重3%体重进行一次性力竭游泳运动。HE染色观察神经细胞形态学变化,免疫组织化学法和蛋白免疫印迹方法检测各组大鼠大脑皮质Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:EE组大鼠大脑皮质神经细胞凋亡较EP组增多;EP组大鼠大脑皮质Bcl-2阳性表达强度较EE组升高,EP组大鼠大脑皮质Bax阳性表达强度较EE组下降。结论:运动预处理能够减少力竭运动诱导的大鼠大脑皮质细胞凋亡从而对大脑皮质产生保护作用;运动预处理可能通过影响Bcl-2、Bax蛋白表达从而对细胞凋亡起调控作用。     

脑外伤后氧化应激对神经细胞凋亡及c-myc蛋白表达的影响

目的　探讨氧化应激对脑损伤后神经细胞凋亡和c -myc蛋白表达的影响及c -myc基因在脑损伤神经细胞凋亡中的作用。　方法　 90只SD大鼠液压冲击致脑损伤后 ,随机分成两组 ,实验组给予单甲氧基聚乙二醇 -超氧化物歧化酶 (monomethoxypolyethleneglycolmodified -SOD ,MPEG -SOD) ,对照组给予等渗盐水 ,分别于伤后 3,12 ,2 4 ,4 8,72h采用原位末端标记法 (TdT -med iatedbiotinylated -dUTPnickendlabeling ,TUNEL)检测脑损伤区神经细胞凋亡 ,流式细胞仪检测神经细胞凋亡率 ;免疫组织化学法检测c-myc蛋白的表达。　结果　大鼠脑损伤后 3h ,在实验组和对照组均可检测到神经细胞的凋亡和c-myc蛋白的表达 ,至 2 4～ 4 8h达到高峰。实验组神经细胞凋亡率和c -myc蛋白的灰度明显较对照组低 (P <0 .0 1)。TUNEL阳性细胞数和c -myc蛋白灰度具有明显的相关性 (实验组r=0 .92 ,对照组r =0 .84 ,P <0 .0 1)。　结论　脑损伤后氧化应激诱导神经细胞凋亡和c -myc蛋白表达 ;c -myc蛋白可促进脑损伤后神经细胞凋亡