去磷酸化RB蛋白表达状况对阿霉素诱导人乳腺癌细胞凋亡和抑制其增殖的关系

目的探讨去磷酸化RB蛋白表达状况对阿霉素(ADR)诱导人乳腺癌细胞(MCF-7/S)凋亡和抑制其增殖的影响。方法应用MTT比色法检测ADR对MCF-7/S细胞增殖抑制作用,同时应用末端标记(TUNEL)法测定ADR诱导MCF-7/S细胞凋亡程度。采用免疫细胞化学法检测去磷酸化RB蛋白的表达状况。结果ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为0.128mg.L-1;ADR作用组MCF-7/S细胞的凋亡率及去磷酸化RB蛋白的表达量分别与对照组细胞相比明显增高。结论去磷酸化RB蛋白的表达量与ADR抑制MCF-7/S细胞增殖和诱导MCF-7/S细胞凋亡呈正相关。     

大豆异黄酮联合顺铂对A549细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨大豆异黄酮(ISF)联合顺铂(DDP)化疗对A549肺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法观察ISF和DDP联用对A549肺癌细胞增殖的影响,并计算联合指数(Q值)判定联合用药的相互作用,同时采用TUNEL染色法检测二者对A549细胞凋亡的影响。结果 ISF和DDP单独使用均可时间和浓度依赖性地抑制肺癌A549细胞的增殖。DDP浓度在3 mg/L时,ISF和DDP联用后抗细胞增殖作用增强,二者有相加或协同作用,且在一定浓度范围内,联合用药对细胞生长的抑制作用呈量效关系。ISF单用或和DDP联用均可浓度依赖性地诱导肺癌细胞凋亡。结论 ISF可通过诱导A549细胞凋亡而发挥抗肺癌作用;ISF和DDP联用可增强对肺癌A549细胞增殖的抑制和凋亡的诱导,二者具有协同抗肿瘤作用。     

FTY720对人乳腺癌MCF-7细胞、喉癌Hep-2细胞增殖的影响

目的:探讨FTY720抑制人乳腺癌MCF-7细胞和喉癌Hep-2细胞增殖作用。方法:将人乳腺癌MCF-7细胞和喉癌Hep-2细胞用不同浓度FTY720作用48 h,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测其对细胞周期及凋亡率的影响。结果:MTT结果显示,FTY720对乳腺癌MCF-7细胞和喉癌Hep-2细胞增殖均有抑制作用,而且对喉癌Hep-2细胞抑制作用的浓度依赖性高于对乳腺癌细胞的作用;流式细胞术检测结果显示,FTY720可将乳腺癌MCF-7细胞阻滞于G1期,将喉癌Hep-2细胞阻滞于G2/M期,并明显促进乳腺癌MCF-7细胞凋亡。结论:一定浓度的FTY720能明显抑制体外培养的乳腺癌和喉癌细胞增殖,调节其细胞周期,诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡。     

桦褐孔菌提取物体外抗肿瘤活性及对细胞周期的影响

目的 研究桦褐孔菌提取物的抗肿瘤活性及对人乳腺癌MCF-7 细胞周期的影响及其可能机制。方法 使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测桦褐孔菌提取物对HepG2、A549、SGC-7901、HeLa和MCF-7细胞增殖的抑制作用并计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC₅₀);选择抑制效果最好的MCF-7细胞株,观察其作用后细胞的形态学改变、细胞凋亡率和细胞周期的变化;并通过Western Blot实验检测细胞周期相关蛋白Cyclin D1、CDK4、PCNA和NUSAP1的表达。结果 桦褐孔菌提取物可有效抑制HepG2、A549、SGC-7901、HeLa和MCF-7细胞增殖,作用48 h后的IC₅₀分别为2.34、3.71、2.24、2.27、0.59 mg/ml;桦褐孔菌提取物可引起MCF-7细胞显著的形态学改变;可诱导MCF-7细胞凋亡,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);并明显影响MCF-7细胞的细胞周期分布,使细胞阻滞于S期(P＜0.01);桦褐孔菌提取物可抑制MCF-7细胞中Cyclin D1、CDK4、PCNA、NUSAP1蛋白的表达,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 桦褐孔菌提取物可抑制多种组织来源的肿瘤细胞增殖,其中对MCF-7细胞抑制效果最好,可以诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期达到抗肿瘤作用,可能是通过下调Cyclin D1、CDK4、PCNA和NUSAP1的蛋白表达来调控细胞周期,从而抑制肿瘤细胞过度增殖。本实验为桦褐孔菌提取物的药用开发提供新的方法和思路。     

多西紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其相关基因表达的影响机制

目的探讨多西紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其相关基因表达的影响机制。方法采用MTT比色法分析多西紫衫醇对人乳腺癌MCF-7肿瘤细胞的增殖作用,应用光镜、电镜分别进行细胞形态学及超微结构的观察;采用Annexirr V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率和周期变化,以及应用免疫组化方法检测Bax,Bcl-2基因蛋白的表达变化。结果多西紫杉醇对人乳腺癌MCF-7肿瘤细胞有生长抑制作用,并呈现量效关系,可随着作用时间的延长出现形态学以及超微结构的改变,而细胞凋亡率以及周期亦随剂量呈递增关系,并可上调bax和下调Bcl-2的蛋白表达。结论多西紫衫醇对人乳腺癌MCF-7细胞具有明显抑制生长的作用,并可进一步诱导细胞凋亡,其机制可能与调节Bax,Bcl-2等凋亡基因有关。     

miR-125b对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨miR-125b对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法培养乳腺癌MCF-7细胞,用miR-125b模拟物和miR-125b抑制物转染乳腺癌MCF-7细胞,检测miR-125b表达,乳腺癌MCF-7细胞活力、凋亡情况、细胞周期及Cyclin A1、Cyclin D1、Bcl-2及Bax蛋白表达水平。结果 miR-125b模拟物和miR-125b抑制物转染乳腺癌MCF-7细胞1、2、3、4 d后,乳腺癌MCF-7细胞活性均显著降低(均P0. 05)。miR-125b模拟物组乳腺癌MCF-7细胞凋亡率均显著低于miR-125b抑制物组(均P0. 05); miR-125b抑制物组细胞周期G1期显著长于miR-125b模拟物组(P0. 05)。两组Cyclin A1、Cyclin D1、Bax及Bcl-2表达水平比较,差异均有统计学意义(均P0. 05)。结论 miR-125b抑制剂可显著抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

玉米赤霉烯酮对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响

目的 观察真菌雌激素玉米赤霉烯酮（ZEA）对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响,并初步探讨其分子生物学作用机制。方法 用噻唑蓝比色法观察ZEA对MCF-7细胞增殖活力流式细胞术观察ZEA对MCF-7细胞增殖活力和细胞周期分布的影响;用凋亡DNA片段检测试剂盒和流式细胞术从不同方面检测ZEA对细胞凋亡的影响;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹技术检测ZEA对bcl-2和bax mRNA和蛋白质表达的影响。结果 MCF-7细胞生长为雌激素依赖性：溶剂对照组（外源性雌激素缺乏且内源性雌激素耗尽的条件下）细胞增殖活力为100％,10nmol／L雌二醇组细胞增殖活力为257．6％;另外,以溶剂对照组发生凋亡率为100％来计,10nmol／L雌二醇组细胞凋亡率只有为10．8％。ZEA对MCF-7细胞生物学效应的影响同雌二醇类似：在2～96nmol／L浓度范围内,ZEA可快速恢复MCF-7细胞增殖活力（96nmol／L组细胞增殖活力为对照组的2．4倍）,提高S期细胞分布比例（96nmol／L组S期细胞分布比例为对照组的2．3倍）,降低凋亡百分率（96nmol／L组细胞细胞凋亡率为对照组的23．7％）,并呈现出良好的剂量-效应关系。RT-PCR和蛋白印迹结果分析显示,ZEA能够促进bcl-2 mRNA和蛋白质表达,对bax的表达则表现出抑制作用。结论 同雌激素类似,ZEA可提高MCF-7细胞增殖活力并促进有丝分裂指数;通过对bcl-2和bax表达的调节作用,ZEA可抑制雌激素耗尽所诱导的MCF-7细胞凋亡。     

曲古菌素A联合全反式维甲酸诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的协同作用

目的:探讨曲古菌素A(TSA)联合全反式维甲酸(ATRA)诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的协同作用及其相关机制。方法:TSA与ATRA联合或者单独作用于SiHa细胞,采用CellTiter 96Aqueous法检测细胞增殖情况,7AAD荧光染色法观察细胞凋亡形态,Annexin V/7AAD法流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot法检测P53、BCL-2和Caspase-3蛋白的表达变化。结果:细胞增殖实验结果显示TSA联合ATRA对SiHa细胞有显著的增殖抑制作用;7AAD荧光染色结果显示联合用药组细胞凋亡明显增加,出现核碎裂等典型凋亡改变;流式细胞术检测结果显示联合用药组凋亡率显著增高;Western Blot结果显示:与对照组比较,联合用药组中P53和活化性Caspase-3蛋白的表达水平显著升高,而BCL-2蛋白表达水平显著下降。结论:TSA联合ATRA在体外对SiHa细胞具有明显的协同抑制增殖和诱导凋亡作用,推测其机制可能与P53和活化性Caspase-3蛋白表达水平上调、BCL-2蛋白表达水平下调有关。     

金雀异黄素对人乳腺癌细胞MCF-7生长影响

目的 观察金雀异黄素在低雌激素水平情况下对雌激素依赖阳性人乳腺癌细胞MCF-7的生长影响.方法 采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期分布情况,磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(AnnexinV/PI)联合双染法检测细胞凋亡,间接免疫荧光法测定雌激素调节蛋白(prcsenilin2,PS2>)的表达.结果 当MCF-7细胞经过去雌激素处理以后,与对照组相比,金雀异黄素在5×10-7～10-5mol/L时可以促进细胞增殖,G0>/G1>期细胞向S期推进,PS2>蛋白表达增加,但是抑制细胞凋亡作用并不明显.结论 金雀异黄素在低雌激素水平情况下可以促进人乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖、DNA合成以及PS2>蛋白的表达,具有一定的雌激素样作用.     

大蒜油和白藜芦醇联合应用诱导胃癌细胞凋亡

目的探讨大蒜油和白黎户醇联合用约诱导胃癌MGC-803细胞凋亡作用。万法 噻唑蓝（MTT）法测药物对细胞增殖抑制；应用吉姆萨染色、流式细胞术、激光共聚焦扫描显微镜等方法观察药物作用后细胞凋亡情况。结果大蒜油和白藜芦醇联合用药6，12，24h明显抑制胃癌细胞增殖，抑制率分别为42.8％，59.8％和65．5％。用药后，吉姆萨和原位末端标记（TUNEL）染色可见明显的细胞凋亡；流式细胞术分析联合用药组早期细胞凋亡数为35．83％，大于两者单独用药之和；激光共聚焦扫描显微镜显示联合用药组含量明显低于对照组和单独用药组。结论大蒜油和白藜芦醇联合用药诱导胃癌，细胞凋亡效应比单独应用明显增强。     

开环异落叶松树脂酚对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响

目的研究开环异落叶松树脂酚(SECO)及其代谢产物肠内酯(ENL)、肠二醇(END)对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖的影响,揭示其可能的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定SECO、END与ENL对MCF-7细胞增殖的影响,并与染料木黄酮(GEN)进行对比。采用光学显微镜与流式细胞仪(FCM)检测了MCF-7细胞生长过程中受到的影响,分析了SECO抗乳腺癌的作用机制。结果低浓度SECO对MCF-7细胞增殖起促进作用,高浓度SECO对MCF-7细胞增殖起明显的抑制作用;呈现G2/M期阻滞。光学显微镜观察到细胞凋亡的形态。ENL与END则在不同浓度下均表现出抑制作用。结论SECO对MCF-7细胞的增殖具有浓度依赖效应,其抑制MCF-7细胞增殖作用可能与其代谢产物有关。     

岩大戟内酯B诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的实验研究

目的：探讨岩大戟内酯B 对MCF-7 乳腺癌细胞生长抑制作用及其机理.方法：通过MTT 法观察各组细胞增殖能力;采用流式检测技术分析细胞周期;利用Annexin V/PI 双染检测细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态.结果：随着岩大戟内酯B 浓度增加对MCF-7 的抑瘤率增高;G2/M 期细胞减少,S 期细胞增多,出现S 期阻滞;晚期凋亡和死亡的细胞增加;电镜显示加药后细胞出现核固缩,细胞器空泡变性,凋亡小体形成,甚至出现坏死.结论：岩大戟内酯B 对乳腺癌MCF-7 细胞生长明显抑制作用,并诱导肿瘤细胞凋亡,为临床开发新药提供理论依据.     

类胡萝卜素对人乳腺癌细胞增殖及bcl-2基因表达的影响

目的 观察类胡萝卜素对人乳腺癌MCF－7细胞存活率、细胞周期和凋亡,以及对凋亡相关基因bcl－2的影响。方法 用MTT检测类胡萝卜素对MCF－7细胞作用的时间效应和剂量效应;流式细胞仪观察类胡萝卜素处理人乳腺癌细胞后细胞周期以及细胞凋亡的改变。用RT－PCR检测凋亡相关基因bcl－2的变化。结果 6种结构不同的类胡萝卜素对MCF－7乳腺癌细胞展现出不同的增殖抑制效果,60μmol／L的β－胡萝卡素和番茄红素在第4天的抑制率分别为88．4％和87．8％,而玉米黄素、角黄素、虾青素和玉米黄素双棕榈酸酯的抑制作用较弱。类胡萝卜素并不诱导87．8％,而玉米黄素、角黄素、虾青素和玉米黄毒素双棕榈酸酯的抑制作用较弱。类胡萝卜素并不诱导MCF－7细胞凋亡,番茄红素可阻滞细胞周期于G1／M,玉米黄素双棕榈酸酯可阻滞细胞周期于G0／G1期,而其他类胡萝卡素并不影响细胞周期。类胡萝卜素可不同程度地下调凋亡相关基因bcl－2mRNA的表达,bcl－2基因的下调与类胡萝卜素的抑制作用呈较明显的相关性。结论 类胡萝卜素可直接抑制人乳腺癌细胞MCF－7的增殖,不同结构的类胡萝卜素可能具有不同的抑制机制。     

ω-3PUFA及其诱导的外源性跨膜型TNFα对肿瘤细胞生长的影响

目的:探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)及其诱导的外源性跨膜型TNFα对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:将ω-3PUFA可调控的跨膜型TNFα真核表达载体转导入HL-60和MCF-7细胞,免疫荧光细胞化学方法检测ω-3PUFA对转染细胞外源基因表达的调控,生长曲线、流式细胞和DNA梯形带分析检测ω-3PUFA对转染细胞增殖能力和凋亡的影响。结果:在6.0×10-5mol/Lω-3PUFA诱导下转染细胞外源性跨膜型TNFα表达增加。HL-60和MCF-7细胞经6.0×10-5mol/Lω-3PUFA处理后增殖能力减弱,但只有HL-60细胞周期阻滞于G0/G1期及形成DNA梯形带。经ω-3PUFA处理后,以上变化在HL-60和MCF-7转染细胞中均更为显著。结论:ω-3PUFA诱导的外源性跨膜型TNFα基因产物可以增强ω-3多不饱和脂肪酸的抗肿瘤能力,而诱导细胞凋亡可能是其中重要机制之一。     

甲基硒酸对乳腺癌细胞体外凋亡和细胞周期的影响

目的:观察甲基硒酸(MSA)对乳腺癌细胞系MCF-7凋亡和细胞周期的影响。方法:以不同浓度的MSA作用乳腺癌细胞系MCF-7,在不同时间内,观察不同浓度MSA对乳腺癌细胞凋亡率和细胞周期的影响。流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:①MSA可诱导乳腺癌细胞体外凋亡,随着药物浓度及作用时间的增加,乳腺癌细胞凋亡率逐渐增加。②MSA可改变乳腺癌的细胞周期,将乳腺癌细胞周期阻断在G1期,并且减少S期细胞的比例。结论:MSA可诱导乳腺癌细胞体外凋亡、调控乳腺癌细胞周期。MSA有望成为预防和治疗乳腺癌的一种新方法。     

槲皮素逆转人乳腺癌MCF - 7细胞阿霉素耐药及其相关机制的研究

目的 探讨槲皮素（quercetin,Que）逆转人乳腺癌MCF - 7细胞阿霉素（doxorubicin,Dox）耐药及其相关机制。方法 用不同浓度的槲皮素处理MCF - 7细胞及其阿霉素耐药的MCF - 7/dox细胞,MTT法筛选无毒剂量的槲皮素用于实验。用无毒剂量的槲皮素联合不同浓度的阿霉素处理MCF - 7和MCF - 7 /dox细胞,MTT法检测细胞增殖率,Transwell法检测细胞侵袭能力,流式细胞法检测细胞凋亡率和人乳腺癌干细胞表面标志物CD44+/CD24 - /low的表达, Western - blot检测人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因（Phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10 ,PTEN）及磷酸化的丝氨酸/苏氨酸激酶（Phosphorylated serine/threonine kinases,p - AKT）的表达。结果 与MCF - 7细胞组相比较,MCF - 7/dox细胞组的乳腺癌干细胞表面标志物CD44+/CD24 - /low表达增高(P＜0.01),且PTEN的表达降低、p - AKT的表达升高(P＜0.05);与单用阿霉素组相比较,阿霉素与槲皮素联合应用能抑制细胞增殖和侵袭、诱导细胞凋亡、杀死肿瘤干细胞,并能上调PTEN、下调p - AKT的表达。结论 槲皮素能有效逆转人乳腺癌MCF - 7细胞阿霉素耐药,其机制可能与槲皮素协同阿霉素杀死人乳腺癌干细胞,调控PTEN/AKT信号通路有关。     

MS-275与表阿霉素合用对乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275和表阿霉素联用诱导乳腺癌细胞株MCF-7细胞周期阻滞和细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:体外培养人乳腺癌细胞株MCF-7;应用MTT法检测表阿霉素单用以及和MS-275联用对细胞存活率的影响;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot分析P21、P53蛋白表达的差异。结果:MS-275和表阿霉素合用较表阿霉素单用能明显降低乳腺癌细胞的存活率,增加细胞的凋亡率,具有剂量的依赖性。单用表阿霉素可以使P21、P53蛋白上调,MS-275和表阿霉素合用较单用两种蛋白上调更加明显。结论:MS-275和表阿霉素合用较单用能增加对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性。其机制可能和MS-275预处理使染色质的构象发生改变,加强了表阿霉素诱导的P21和P53的表达有关。     

二氯二苯二氯乙烯的类雌激素活性的实验研究

目的研究二氯二苯二氯乙烯(DDE)的类雌激素活性对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响。方法采用了体外MCF-7细胞增殖试验检测了DDE(3×10-5、3×10-6、3×10-7、3×10-8、3×10-9 mol/L)的类雌激素活性,并用生长曲线分析对其作用机制进行了初步探讨。结果3×10-6 mol/LDDE染毒组吸光度值高于溶剂对照组且MST-7细胞增殖的生长曲线与10-9 mol/L17β-雌二醇染毒组相似。结论DDE具有刺激MCF-7细胞增殖的类雌激素活性,其机制可能与17β-雌二醇相同。