烫伤大鼠脾脏高迁移率族蛋白B1表达对调节性T淋巴细胞免疫功能的影响

目的 探讨严重烫伤大鼠延迟复苏后脾脏高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达对调节性T淋巴细胞(Treg)表型及其介导T淋巴细胞免疫功能的影响.方法 将104只Wistar大鼠按随机对照表法分为正常对照组8只、假烫组32只、烫伤组32只、丙酮酸乙酯(EP)治疗组32只.后2组大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤,伤后6 h腹腔注射林格液或EP液延迟抗休克,伤后12 h起每隔12 h给予4 mL林格液或EP液至伤后48 h;假烫组除于37℃模拟烫伤外其余处理同烫伤组.于伤后1、3、5、7 d处死各致伤组大鼠,另处死正常对照组大鼠,免疫磁珠法分离大鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg,ELISA法检测脾脏HMGBI含量及T淋巴细胞上清液中IL-2水平,采用流式细胞仪检测Treg表面分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)表达,同时检测T淋巴细胞增殖活性(数据以吸光度值表示).对数据进行多组间方差分析和2组独立样本间的t检验.结果 (1)烫伤组大鼠脾脏HMGBI含量伤后1～7 d显著高于假烫组,其中第1天达峰值[(46.7±8.3)ng/mg蛋白];EP治疗组大鼠脾脏HMGBI含量伤后1～7 d明显低于烫伤组.(2)与假烫组比较,烫伤组大鼠伤后1～5 d CTLA-4表达明显增强(t值分别为10.459、12.051、4.029,P<0.05或P<0.01);EP治疗组伤后1～7 d CTLA-4表达较烫伤组显著降低(t值分别为2.796、9.913、9.581、10.022,P<0.05或P<0.01).(3)与假烫组比较,烫伤组大鼠伤后1～7 d脾脏T淋巴细胞增殖活性明显受抑,其中伤后1 d达低谷(0.167±0.059);IL-2水平伤后1～7 d显著下降,其中伤后5 d达低谷(44±24)pg/mL.与烫伤组比较,EP治疗组伤后各时相点脾脏T淋巴细胞增殖受抑状态明显缓解,且IL-2水平明显上升.结论 严重烫伤后HMGB1产生可诱导Treg向成熟发展,从而介导T淋巴细胞增殖反应低下,免疫功能抑制.EP通过抑制HMGB1的合成与释放,改善烫伤延迟复苏大鼠的细胞免疫功能紊乱.     

早期肠内免疫营养对烫伤大鼠免疫功能的影响

目的了解早期肠内免疫营养对烫伤大鼠全身及肠道免疫功能的影响。方法将健康SD大鼠分为标准营养组（EN组）和免疫营养组（EIN组），每组32只。将两组大鼠制成烧伤总面积30％TBSA的Ⅲ度烫伤模型，于伤后1、4、7、10d检测其外周血T淋巴细胞亚群、肠黏膜增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平、浆细胞数量及肠黏液分泌型免疫球蛋白A（S-IgA）含量的变化。另取8只健康大鼠检测上述指标作为正常参考值。结果（1）与正常值比较，伤后EN组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋降低但CD8^＋升高，与各项指标大部分时相点比较，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。伤后10d与EN组（CD4^＋／CD8^＋为1．26±0．10）比较，EIN组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋（CD4^＋／CD8^＋为1．86±0．25）升高而CD8^＋下降（P〈0．01）。（2）伤后4、7、10d，EIN组肠黏膜PCNA表达水平、浆细胞数量及肠黏液S-IgA含量较EN组明显升高（P〈0．05或P〈0．01）。结论烫伤后早期给予肠内免疫营养，可以提高全身及肠道免疫功能，效果优于标准肠内营养。     

CD4＋CD25＋Treg与脓毒症患者细胞免疫紊乱之间的关系

目的：检测脓毒症患者外周血中CD4＋CD25＋Treg的比例（Treg％）变化．并探讨它和患者细胞免疫紊乱之间的关系。方法：收集ICU病房的脓毒症患者为病例组（n=27）．健康查体者为对照组（n=40）。将脓毒症患者根据28天预后分为死亡组（n=8）和存活组（n=19）。监测APACHEⅡ评分．Treg％、CD3％,CD4／CD8．Ag—NORs数量（IS％）等。以上指标各组进行比较．统计分析。结果：和对照组相比,病例组Treg％明显升高．CD3％,CD4／CD8、IS％明显下降．均有显著统计学意义（P〈0.001）。行相关分析发现脓毒症患者的Treg％和CD4／CD8,IS％呈负相关,分别有r=-0．484（P〈0．01）及r=-0．588（P〈0．01）。同样发现．死亡组和存活组相比．前者Treg％明显升高（P〈0．001）,CD3％、CD4／CD8、JS％明显下降（分别有P〈0．001、P〈0．05．P〈0．001）。结论：脓毒症患者早期就有CD4＋CD25＋Treg的明显升高．并发生细胞免疫紊乱,因CD3％、CD4／CD8．IS％明显下降．升高的CD4＋CD25＋Treg通过一定途径参与细胞免疫功能紊乱的发生。     

丙酮酸乙酯对烫伤延迟复苏大鼠肾组织高迁移率族蛋白B1表达和急性肾损伤的影响

目的观察丙酮酸乙酯（EP）对烫伤延迟复苏大鼠肾组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达及急性肾损伤的影响。方法采用30％体表面积Ⅲ度烫伤延迟复苏大鼠模型,78只大鼠随机分为假伤组（n=18）、烫伤组（n=30）和EP治疗组（n=30）;采用逆转录聚合酶链反应检测各组大鼠肾组织HMGB1 mRNA表达,蛋白印迹法及免疫组化法检测。肾组织HMGB1蛋白表达;同时测定血尿素氮（BUN）含量并观察。肾组织病理变化。结果与假伤组比较,严重烫伤后。肾组织HMGBl基因／蛋白表达于伤后8～72h显著增强（P〈0．05）,BUN含量在伤后8h及24h显著升高（P〈0．05）。与烫伤组比较,EP治疗组肾组织8、24、72h时HMGBl表达均显著下调,BUN含量在8、24h时亦明显下降（P〈0．05）;光镜下观察烫伤组肾组织炎性细胞浸润,肾小管结构破坏出现浊肿、变性,而EP处理后。肾脏病理改变不同程度地减轻。结论HMGB1作为晚期炎性因子参与了烫伤后。肾组织炎症反应的病理过程,应用EP治疗可有效下凋。肾组织HMGB1表达,并显著减轻烫伤延迟复苏所致的急性肾损伤。     

原发性肝癌患者外周血Th17与CD4^＋CD25^＋调节性T细胞表达的相关性研究

目的探讨原发性肝癌患者外周血Th17和CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达水平及其相关性。方法选取2008年6月—2009年5月浙江大学医学院附属第一医院30例原发性肝癌患者和25名健康人群,采血并分离其外周血单个核细胞。利用流式细胞仪分别测定Th17和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的表达,采用t检验分析两组的表达差异。同时,采用Spearman检验对原发性肝癌患者外周血中Th17和CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达进行相关性分析。结果健康对照组外周血中Th17细胞为（2．10±0．87）％,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞为（7．10±2．32）％,原发性肝癌组外周血中Th17细胞为（3．38±1．68）％,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞为（11．78±5．62）％,两组差异具有统计学意义（t=3．640和4．162,P值均〈0．01）。原发性肝癌患者组外周血Th17细胞与CD4^＋CD25^＋Fosp3^＋调节性T细胞表达呈正相关（r=0．821,P〈0．01）。结论原发性肝癌患者外周血Th17和CD4^＋CD25^＋Fosp3^＋调节性T细胞表达水平较高,二者呈正相关。CD4^＋CD25^＋Fosp3^＋调节性T细胞可能通过促进Th17细胞分化导致肿瘤的发生与发展。     

乌司他丁对烫伤大鼠全身炎症、脏器微血管通透性和组织含水率的影响

目的：研究乌司他丁对50％总体表面积烫伤大鼠全身炎症、脏器微血管通透性和组织含水率的影响。方法：32只雄性SD大鼠随机分为烫伤组和乌司他丁组（n=16）,两组动物均造成50％总体表面积Ⅲ度烫伤。于烫伤后即刻静脉分别注射生理盐水或乌司他丁40000U／kg。于烫伤后4h取血浆测定肿瘤坏死因子-α、C反应蛋白和髓过氧化物酶,然后处死动物,采用伊文斯蓝法测定心、肝、肺、肾和小肠微血管通透性,干／湿重法测定组织含水率。结果：烫伤后4h乌司他丁组血浆C反应蛋白含量和髓过氧化物酶活性显著低于烫伤组（P均〈0．01）。乌司他丁组肺、肾和小肠组织伊文斯蓝含量和含水率均显著低于烫伤组（P〈O．05或P〈0．01）。结论：乌司他丁能抑制致死性烫伤休克大鼠血浆促炎症因子水平,减轻组织炎症反应,降低脏器微血管通透性和组织水肿,减少血管内液体丢失,可用于烧伤休克的早期药物治疗。     

高压氧和乌司他丁联合治疗急性坏死性胰腺炎的实验研究

目的探讨高压氧（HBO）及乌司他丁（ULT）单独或联合应用治疗急性坏死性胰腺炎（ANP）的疗效及其作用机理。方法将健康SD大鼠120只按随机数字表法随机均分为6组：正常对照组、假手术组、急性坏死性胰腺炎组（ANP组）、ANP高压氧治疗组（HBO组）、ANP乌司他丁治疗组（ULT组）、ANP高压氧和乌司他丁联合治疗组（HBO＋ULT组），分别采用HBO、ULT单独或者联合治疗ANP动物模型，观察细胞因子和血清淀粉酶（AMS）水平的变化以及胰腺病理组织学改变。结果ANP动物模型建立后2、6及8h，除6-酮-前列腺素F1a（6-keto-PGF1a）外，HBO组、ULT组及HBO＋ULT组血清AMS、肿瘤坏死因子α（TNFα）及血栓素B2（TXB,）明显低于ANP组（P〈0．01）；HBO组血清AMS及TNFα均高于HBO＋ULT组（P〈0．01）；ULT组与Ht30＋ULT组比较．只有AMS的差异有统计学意义（P〈0．01）。ANP组胰腺病理组织学评分及CD8计数明显比HBO组、ULT组及HBO＋ULT组高（P〈0．05），而CD4计数、CD4／CDS比值均比其它处理组低（P〈0．05）。HBO组、ULT组胰腺病理组织学评分明显比HBO＋ULT组高（P〈0．05）。结论①高压氧和乌司他丁都能有效地抑制血清胰酶及细胞因子的分泌与释放．改善胰腺局部免疫功能；②高压氧和乌司他丁联合治疗能取得比单用其中一种方法更好的疗效。     

CD4+ CD25+ Treg细胞延长大鼠肾移植术后存活时间的量效关系分析

目的观察肾移植受者（Wistar大鼠）应用供者（SD大鼠）抗原特异性CD4^＋CD25^＋免疫调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg细胞）对移植肾存活时间的影响，为CD4^＋CD25^＋Treg细胞在体内应用提供定量分析依据。方法SD大鼠为供者，Wistar大鼠为受者，建立同种肾移植动物模型；免疫磁珠（MACS）法分选Wistar大鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞，检测CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞的纯度，并诱导其对SD大鼠供者抗原的特异性表型；根据在肾移植术中经受者尾静脉注射不同数量（2×10^5、5×10^5、1×10^6、2×10^6）的供者抗原特异性CD4^＋CD25^＋T细胞分为：实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组，并以未注射组作为对照。术后观察移植肾的存活时间；监测血肌酐（cr）的水平；按照BanffSchema标准进行移植肾病理诊断，并根据Watanabe的方法进行半定量评分。结果肾移植术后实验Ⅲ组平均存活时间最长，为（31．4±4．6）d，对照组平均存活时间最短，为（11．7±6．2）d；各实验组与对照组间血Cr检测结果比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；实验Ⅲ组和Ⅳ组不同时段的移植肾病理检查半定量评分结果与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论初步证实在受者体内应用适当数量的供者抗原特异性CD4^＋CD25^＋Treg细胞，能够改善移植肾的功能，有效延长大鼠肾移植术后的存活时间。     

不同程度烫伤应激对大鼠皮下移植瘤生长的影响

目的：探讨应激反应对大鼠皮下移植瘤生长的影响。方法：将大鼠乳腺癌细胞Walker-256癌细胞株注入Wistar幼鼠腹腔,5d后抽取腹水,浓缩,经Wistar大鼠腹股沟皮下接种,建立Wistar大鼠皮下移植瘤模型。选取24只荷瘤大鼠,随机分为实验对照组（未烫伤）、轻度烫伤组（10％TBSA,100℃水中烫伤5s）、重度烫伤组（15％TBSA,100℃水中烫伤10s）,每组8只。烫伤后12h尾静脉取血,ELISA法检测血自细胞介素-18（IL-113）水平,放射免疫法测定血清皮质醇水平;烫伤后1、7、13d测定皮下肿瘤体积,伤后13d进行肿瘤的病理学观察。结果：烫伤后大鼠血浆IL-1G水平较实验对照组[（5．01±2．51）pg／m1]明显升高（P〈O．01）,重度烫伤组[（155．78±18．30）pg／ml]较轻度烫伤组[（94．12±15．31）pg／m1]升高更加明显（P〈O．01）;烫伤后大鼠血清皮质醇水平也较实验对照组[（60．51±16．70）μg／L]明显升高（P〈O．01）,重度烫伤组[（115．78±17．42）μg／L]较轻度烫伤组[（87．19±13．28）μg／L]升高更加明显（P〈O．05）。烫伤后1d,各组间肿瘤体积差异无统计学意义（P〉0．05）;烫伤后7d和13d,对照组与轻度烫伤组肿瘤体积差异无显著性（P〉0．05）,重度烫伤组肿瘤体积明显大于实验对照组和轻度烫伤组（P〈0．05）。病理学观察显示,烫伤组肿瘤细胞密度均较实验对照组大;各组均有纤维组织增生和炎细胞浸润,尤以重度烫伤组为甚。结论：重度烫伤后应激反应促进肿瘤的生长。     

不同纯化方法对大鼠胰岛收获效果的研究

目的 探讨不同纯化方法对提高大鼠胰岛收获效果的作用。方法 随机选取SD雄性大鼠20只,按胰腺消化和胰岛纯化的方法的不同分为4组,消化过程中胆总管灌注胶原酶V,每组5只：①A组：Ficoll-400法纯化胰岛。②B组：光镜下移液吸移管手工挑拣纯化（手工法）胰岛。③C组：胰腺消化过程加入乌司他丁5000U／L．Ficoll-400法纯化胰岛。④D组：胰腺消化过程加入乌司他丁5000U／L,手工法纯化胰岛。结果 纯化后胰岛的收获量分别为A组（122±25．30）个,B组（179±21．02）个,C组（187±24．89）个和D组（276±24．85）个。乌司他丁灌注组（C组和D组）胰岛细胞的收获量与相应纯化方法的无乌司他丁灌注组（A组和B组）差异有统计学意义（P〈0．01）。手工法纯化组（B组和D组）胰岛的收获量与Ficoll-400纯化组（A组和C组）差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 手工法可明显提高胰岛的收获量,乌司他丁灌注胰腺对大鼠胰岛分离具有保护作用。     

CD4+CD25+调节性T细胞在肝移植术后腹腔感染中的表达及其作用

目的研究移植后细菌感染CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（Treg）表达的变化。方法以DA大鼠为供体,LEW大鼠为受体,采用改良的Kamada二袖套法建立肝移植模型。术后随机分为3组,G1组术后3d腹腔生理盐水注射;G2组术后3d给予腹腔大肠杆菌注射;G3组术后常规给予免疫抑制药物CsA,3mg/（kg·d）。感染后7d处死动物,每组6个样本,检测血清ALT、TB,并采用流式细胞术检测脾脏Treg的水平,RT-PCR方法检测脾脏Foxp3和肝脏IL-10、TGF-β mRNA的表达。结果G3、G2组Treg表达水平显著升高,分别为：（16.72±0.95）%,（27.4±1.09）%,与G1（9.88±0.98）%比较差异均有统计学意义（P〈0.01）;脾脏Foxp3和肝脏IL-10、TGF-β mRNA表达水平均增加;感染组的肝功虽然较差,与排斥组相比无统计学意义,但从病理切片观察该组肝脏的急性免疫排斥反应减轻,Banff评分有统计学意义。结论大鼠肝移植术后腹腔细菌感染增加了脾脏Treg的表达,促进了免疫抑制作用的发挥,部分减轻了急性排斥反应。     

白细胞介素-37在人外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞中的表达

目的：观察白细胞介素-37（IL-37）在健康人外周血 CD4＋CD25＋调节性 T细胞（Treg）中的表达情况。方法：采用免疫磁性分离法分离人外周血 CD4＋CD25＋Treg,流式细胞技术分析其分离纯度,观察刺激剂组（每1×105个 CD4＋CD25＋Treg细胞加入20μl Dynabeads（R） Human Treg Expander）、非刺激剂组、空白对照组（单纯10%FCS-RPMI 1640培养）CD4＋CD25＋Treg细胞增殖活性及其差异。分别采用 Western blot和免疫荧光共聚焦技术检测 IL-37的表达水平与定位改变。结果：MACS分离人外周血 CD4＋CD25＋Treg 细胞纯度为93%,台盼蓝染色细胞活性为98%。与非刺激剂组和空白对照组相比,刺激剂组 CD4＋CD25＋Treg 增殖活性随时间延长而逐渐增加;非刺激剂组与空白对照组其增殖活性差异无显著性。Western blot 结果显示,正常CD4＋CD25＋Treg细胞表达 IL-37,在刺激剂作用下随作用时间延长 IL-37表达量增加。免疫荧光显微镜和免疫荧光共聚焦图像显示,刺激72 h后 IL-37在 CD4＋CD25＋Treg细胞内明显表达,并且在细胞质中表达丰富,近胞膜处表达密度较高。结论：IL-37在健康人外周血 CD4＋CD25＋Treg 细胞中表达,当受到有效刺激后 IL-37表达明显上升。     

CD4＋CD25＋调节性T细胞与Foxp3表达在白癜风发病中的作用

目的：研究CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg细胞）与Foxp3基因表达与白癜风发病的关系及可能机制。方法：以确诊为进展期白癜风且治疗显效的24例患者为研究对象,患者确诊符合白癜风诊断及疗效标准。以16例健康志愿者作为对照。应用流式细胞术检测正常对照、白癜风患者治疗前后各自外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞的比例。采用密度梯度离心法从治疗前后的外周血中提取单个核细胞,以逆转录聚合酶链扩增方法检测其中Foxp3 mRNA的表达水平。结果：进展期且治疗显效的24例白癜风患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞的比例以及CD4＋CD25＋调节性T细胞在总CD4＋T细胞中所占比例明显均低于正常对照组（P〈0．05）。治疗后显效的进展期白癜风患者CD4＋CD25＋调节性T细胞的比例与治疗前相比明显升高（P〈0．05）,CD4＋CD25＋调节性T细胞中Foxp3 mRNA的表达水平比治疗也前明显增加（P〈0．05）。结论：进展期白癜风患者体内存在CD4＋CD25＋调节性T细胞的异常,CD4＋CD25＋Treg细胞的数量的减少和Foxp3表达的降低所造成的CD4＋CD25＋Treg细胞免疫抑制功能爱损可能是白癜风发病的一个因素。     

肾移植患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的观察肾移植患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的变化，探讨其在诊断移植肾急性排斥反应中的作用。方法采用流式细胞仪检测26例肾移植患者及30例正常对照组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平。结果①慢性肾衰竭患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。②非排斥组移植后1、2、4、8周CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显高于移植前（P〈0．01）。③急性排斥组排斥反应主要发生在术后第7～21d，其CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显低于同期的非排斥组（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的测定可以作为肾移植患者移植后急性排斥反应诊断和预测预后的重要指标。     

尿毒症患者和肾移植受者外周血调节性T细胞表达的意义

目的探讨尿毒症患者和肾移植受者外周血CD4^＋CD127^-调节性T细胞（CD4^＋CD127^- Treg）的表达水平及意义。方法采用流式细胞术测定13例尿毒症患者（尿毒症组）、13例肾移植受者（肾移植组）和20例健康志愿者（对照组）外周血CD4^＋CD127^- Treg和CD4^＋CD25^＋CD127^- Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果尿毒症组和肾移植组CD4^＋细胞中CD4^＋CD127^- Treg的比例明显低于对照组（P〈0．05，P〈0．01）；肾移植组CD4^＋CD25^＋CD127^- Treg的比例明显低于对照组（P〈0．05）。结论尿毒症患者外周血CD4^＋CD127^- Treg数量降低，免疫功能紊乱。肾移植受者外周血CD4^＋CD127^- Treg和CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg数量降低，免疫反应性增强。     

RNA干扰树突细胞主要组织相容性复合物1表达后诱导抑制性T细胞对小肠移植耐受的影响

目的探讨RNA干扰树突细胞（Dc）组织相容性复合物1（MHC-1）表达后获得的CD8＋CD28-抑制性T细胞（Ts）对小肠移植免疫耐受的的影响。方法通过siRNA干扰DC MHC—I表达后,诱导获得CD8^＋CD28^-Ts。建立由Wistar大鼠移植到SD大鼠的小肠移植模型36例,随机分为A组（转染实验组）、B组（未转染组,注射普通T细胞）和C组（移植对照组,注射生理盐水）。术后14d,每组各随机挑选6例,取移植大鼠小肠和血液标本行移植小肠组织病理学检查．并检测移植大鼠血清TGF-β、IFN-γ水平及回肠黏膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性,观察移植大鼠的存活时间。结果术后第14天,A组移植大鼠血清中TGF—β和IFN-γ表达水平高于B、C组（P〈0．05）。A组大鼠肠黏膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性为（6．3±1．0）kU／g,明显高于B组的（3．6±0．9）kU／g和C组的（2．9±1．3）kU／g（P〈0．05）。A组移植小肠病理Parks评分分级明显低于B组和C组（P〈0．05）。A、B和C组移植后大鼠中位生存时间分别为32．0、17．5和21．0d,A组存活时间明显优于B组和C组（P〈0．05）。结论将RNA干扰DCMHC—I表达所获得的CD8^＋CD28^-Ts过继小肠移植大鼠．可以减轻移植大鼠的损伤程度．抑制免疫排斥反应．     

肠内免疫营养对烫伤大鼠内毒素和CD14/肿瘤坏死因子-α mRNA表达的影响

目的研究肠内免疫营养物对烫伤大鼠内毒素和CD14 mRNA、肿瘤坏死因子 (TNF)-α mRNA表达的影响及机制。方法致64只SD大鼠总体表面积(TBSA)30％Ⅲ度烫伤, 随机分为肠内免疫营养组(EIN组,32只)和标准肠内营养组(EN组,32只),另取8只大鼠作为伤前正常对照组(N组)。EIN组和EN组均给予等热量(125 Kcal／dl)肠内营养液。分别于伤前、伤后 1、4、7、10 d抽取静脉血和肝组织,检测血清内毒素和TNF-α浓度,RT-PCR检测肝组织CD14 mR- NA、TNF-α mRNA。结果烫伤后EN、EIN组血清内毒素、TNF-α浓度比伤前血清内毒素 (0．125±0．050)和TNF-α浓度(0．85±0．27)显著升高(P<0．01),且肝组织CD14 mRNA、TNF-α mRNA的表达明显增多;在伤后4、7、10 d,EIN组血清内毒素和TNF-α浓度以及肝组织CD14 mR- NA、TNF-α mRNA的表达均比EN组显著降低(P<0．05或P<0．01)。结论肠内免疫营养与标准肠内营养相比,可明显降低烫伤后血清内毒素水平,减少肝组织CD14 mRNA、TNF-α mRNA的表达,从而降低血清TNF-α浓度,改善烫伤后机体炎症反应。     

乌司他丁对肝癌患者高强度聚焦超声治疗后细胞免疫功能的影响

目的 探讨乌司他丁对肝癌患者高强度聚焦超声（HIFU）治疗后细胞免疫功能的影响。方法 择期行HIFU治疗的肝癌患者20例，ASAⅡ或Ⅲ级，随机分为2组（n=10）：对照组（C组）和乌司他丁组（U组）。U组于麻醉诱导后缓慢静脉注射乌司他丁20万U，C组输注等量生理盐水。于HIFU治疗前即刻（T1）、治疗结束即刻（T2）及治疗结束后24h（T3）采取肘静脉血样2ml，使用流式细胞仪检测CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞和NK细胞百分率。结果 与T1比较，C组T2、T3时CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞百分率差异无统计学意义（P〉0．05），T2时CD4^＋，CD8^＋比值增高，T2、T3时NK细胞百分率增高（P〈0．05），U组T2、T3时CD3^＋T淋巴细胞百分率差异无统计学意义（P〉0．05），T2时CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞百分率增高（P〈0．05），T2、T3时CD4^＋／CD8^＋比值、NK细胞百分率增高（P〈0．01）；与C组比较，T2、T3时U组NK细胞百分率增高（P〈0．05）。结论 乌司他丁可有效提高HIFU治疗肝癌患者的细胞免疫功能。     

高密度脂蛋白对严重烫伤大鼠肺功能的保护作用

目的了解高密度脂蛋白（HDL）对严重烫伤大鼠肺功能的作用及其机制。方法将Wistar大鼠分为对照组（15只）、烫伤组（60只）和HDL组（60只）。对照组大鼠不作处理；其余2组均造成30％TBSAIII度烫伤，伤后常规补液，其中HDL组伤后立即经尾静脉注入HDL（80mg／kg）。检测2组烫伤大鼠伤后12、24、48、72h血清胞间黏附分子1（ICAM—1）及肿瘤坏死因子α（TNF—α）的含量，并检测其动脉血二氧化碳分压（PCO2）氧分压（PO2）；观察大鼠伤后各时相点肺组织病理学变化。另检测对照组上述指标。结果与对照组比较，烫伤组大鼠伤后各时相点ICAM—1、TNF—α的含量及PCO，均显著升高（P〈0．05或P〈0．01），PO，显著降低（P〈0．05）。HDL组上述指标与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；但与烫伤组比较，各时相点ICAM—1、TNF—α含量均显著降低（P〈0，05或P〈0．01）。伤后48h，烫伤组ICAM-1、TNF—α分别为（3．42±0．25）μg／L、（4．04±0．28）ng／L，明显高于HDL组[（2．24±0．14）μg／L、（3．35±0．22）ng／L，P〈0．05或P〈0．01]。烫伤组大鼠伤后48h肺小血管周围炎性细胞浸润，肺内血管扩张出血，部分小血管管腔内红细胞淤滞凝集，形成“假血栓”；肺毛细血管内皮细胞连接松弛，内皮细胞水肿。HDL组肺内小血管周围炎性细胞浸润明显减轻；肺毛细血管内皮细胞连接较紧密。结论HDL对严重烫伤大鼠肺功能具有保护作用，可能与其抑制ICAM—1、TNF—α表达有关。     

脐带间充质干细胞对重度烧伤大鼠肾脏保护作用的研究

目的：观察脐带间充质干细胞（UCMSCs）移植对大鼠严重烧伤后肾脏损伤的影响,为干细胞应用于烧伤后的脏器保护研究奠定基础。方法：获取并分离培养孕大鼠UCMSCs并用流式细胞技术鉴定细胞表面抗原。48只SD大鼠随机分为4组：正常对照组（n=12）、生理盐水组（n=12）、乌司他丁组（n=12）和UCMSCs组（n=12）。正常对照组不作任何处理,立即活杀取材;其余3组制备20％TBSAIII度烧伤模型（98℃,12s）,于伤后48h分别静脉注射生理盐水0．1ml／g（生理盐水组）、乌司他丁1．6×105U／kg（乌司他丁组）和UCMSCs106／k（uCMSCs组）,于给药后7、14d观察大鼠肾脏组织病理学,免疫组化法观察组织凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,并进行血尿素氮（BUN）、肌酐（cr）水平的测定。结果：烧伤后7、14d的组织病理学观察显示,干细胞移植后的大鼠烧伤后肾脏组织充血、肿胀等病理学改变较乌司他丁组及生理盐水组有所减轻,随时间延长减轻更加明显;免疫组化观察显示UCMSCs组伤后7d和14d肾组织中Bcl-2的表达较乌司他丁组和生理盐水组明显增多,表明肾组织抗凋亡能力增强。大鼠烧伤后BUN和Cr均较正常对照组显著升高。乌司他丁治疗组除14dBUN较生理盐水组升高外,其余时间BUN和Cr均明显下降。UCMSCs组伤后7和14d两肾功能指标均明显下降,与生理盐水组和乌司他丁组比较差异均有显著性（P〈0．05）,显示干细胞治疗对肾功能有明显改善作用。结论：UC—MSCs移植可有效减轻重度烧伤后大鼠‘肾脏组织的损伤并改善肾脏功能。