miR-155在过氧化氢诱导晶状体上皮细胞氧化应激损伤中的作用及靶向SIRT1调控机制

目的:探讨微小RNA(miR)-155对过氧化氢(H 2O 2)诱导晶状体上皮细胞(LECs)氧化应激损伤的作用及其调控沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)的机制。 方法:取对数生长期HLE-B3细胞株,分别于0、50、100、200、400、800 μmol/L H 2...     

miR-15a对高糖诱导人晶状体上皮细胞氧化应激损伤的促进作用及其机制

目的探讨微小RNA15a(miR-15a)对高糖诱导的人晶状体上皮细胞(LECs)抗氧化应激能力的调控作用及其可能的作用机制。方法收集糖尿病性白内障(DC)患者晶状体前囊膜组织标本及健康供体前囊膜组织标本各26个, 采用实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测组织中miR-15a和沉默信息调节蛋白1(SIRT1)的表达。取人晶状体上皮细胞系HLEB-3细胞分别于0、10、20和50 mmol/L葡萄糖条件下培养24 h, 采用实时荧光定量PCR法检测细胞中miR-15a表达;采用Western blot法检测细胞中SIRT1、叉头转录因子3a(FOXO3a)、p53蛋白表达;采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用2’’, 7’’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针法检测细胞内源性活性氧簇(ROS)含量, 试剂盒检测细胞内源性活性氧总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)浓度。将miR-15a对照和miR-15a抑制剂分别转染至HLEB-3细胞, 在50 mmol/L葡萄糖条件下培养24 h, 采用流式...     

虾青素对晶状体上皮细胞氧化应激损伤的抑制作用及其机制

目的研究虾青素对过氧化氢(H2O2)诱导晶状体上皮细胞HLEB-3氧化应激损伤的调控作用及其可能的作用机制。方法将HLEB-3细胞于不同浓度H2O2(0、50、100、200、500、750 μmol/L)下培养, 噻唑蓝(MTT)法检测细胞抑制率, 计算半数抑制浓度(IC50)。将HLEB-3细胞使用不同浓度(0、5、10、20、50 μmol/L)虾青素培养, MTT法检测细胞存活率。将HLEB-3细胞分为4个组, 其中正常对照组用完全培养基培养、氧化应激组于250 μmol/L H2O2培养基中培养, 10 μmol/L虾青素组和20 μmol/L虾青素组分别于相应浓度虾青素+250 μmol/L H2O2培养基中培养, 各组均培养24 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;采用ELISA法检测细胞一氧化氮(NO)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)活性和丙二醛(MDA)含量;采用Western bolt法检测细胞核核因子E2相关因子2(Nrf2)、细胞质Nrf2和血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达。另将细胞分为正常对照-小干扰R...     

长链非编码RNA-P21在过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞损伤中的表达

目的检测过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞HLE-B3生物活性及长链非编码RNA-p21(lncRNA-p21)的表达变化。方法将HLE-B3细胞分为正常对照组和过氧化氢组, 分别用正常培养液和含200 μmol/L过氧化氢的培养液培养24 h。采用MTS比色法检测细胞活力;采用活性氧试剂盒检测细胞活性氧簇(ROS)的水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用Caspase-3活性试剂盒法检测细胞Caspase-3活性;采用Western Blot方法检测细胞凋亡相关Bax, Bcl-2蛋白表达;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用EDU增殖试剂盒检测细胞增殖能力;采用实时荧光定量PCR法检测细胞中lncRNA-p21的表达;采用荧光原位杂交实验法检测细胞中lncRNA-p21的定位。结果过氧化氢组细胞ROS水平为4.65±0.38, 明显高于正常对照组的1.00±0.01, 差异具有统计学意义(t=16.66, P<0.05)。与正常对照组相比, 过氧化氢组细胞凋亡率显著上升, Caspase-3活性增强, 凋亡蛋白Bax相对表达量明显升高, 差异均有统计学意义(t=20.69、3...     

晶状体再生的研究进展

晶状体再生是指以干细胞为材料, 在体外或体内通过构建适宜晶状体发育的微环境诱导再生新的晶状体组织的过程。再生的晶状体组织可用于建立生物模型进行药物实验或研究晶状体疾病的病理变化, 更有望取代人工晶状体成为白内障治疗的新选择。目前对于其研究主要集中在信号通路、体外晶状体再生和晶状体原位再生这三个方面。Wnt通路和细胞极性通路被进一步阐释, 人诱导多能干细胞成为体外晶状体再生新的选择, 微创术式的应用也为晶状体原位再生提供了必要条件。(国际眼科纵览, 2023, 47:30-35)     

吲哚菁绿对人晶状体上皮细胞生物学行为和转分化的抑制作用及其机制

目的研究吲哚菁绿(ICG)对人晶状体上皮细胞(HLECs)生物学行为和转分化的抑制作用及其机制。方法将HLECs细胞系分为空白对照组、5%葡萄糖溶液(GS)组和0.5%、1.5%、2.5% ICG组, 分别用平衡盐溶液、5% GS以及0.5%、1.5%和2.5%的ICG溶液处理3 min, 然后在新鲜培养基中孵育24 h。采用流式细胞术检测HLECs凋亡水平;采用Western blot法检测HLECs凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和caspase-9表达水平;采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)和5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)法检测HLECs增生过程;采用细胞划痕实验检测HLECs迁移能力;采用Transwell法检测HLECs迁移和侵袭过程。采用Western blot法检测HLECs转分化相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、纤维连接蛋白(FN)和波形纤维蛋白(vimentin)表达水平。结果空白对照组、5% GS组、0.5% ICG组、1.5% ICG...     

MicroRNA与白内障发病相关性的研究进展

微小RNA(miRNA)是一种非编码小分子RNA, 可以特异性结合目标mRNA的3’’非翻译区, 从而诱导目标mRNA降解或抑制其翻译, 最终影响细胞增生、分化以及凋亡等重要的生物学过程。白内障是全球首位致盲眼病, 是一种由晶状体混浊引起的视力下降疾病, 包括年龄相关性白内障、糖尿病性白内障、先天性白内障及后发性白内障。近年来研究发现, 多种miRNA在晶状体组织中表达, 影响晶状体上皮细胞的增生、迁移、上皮-间质转化及凋亡, 参与不同类型白内障的发生及发展。本文就不同miRNA在各类型白内障中作用机制的研究进展进行综述, 从而为白内障的防治提供新的思路与方法。     

miR-15a对高糖诱导人晶状体上皮细胞氧化应激损伤的促进作用及其机制

目的:探讨微小RNA15a(miR-15a)对高糖诱导的人晶状体上皮细胞(LECs)抗氧化应激能力的调控作用及其可能的作用机制。方法:收集糖尿病性白内障(DC)患者晶状体前囊膜组织标本及健康供体前囊膜组织标本各26个,采用实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测组织中miR-15a和沉默信息调节蛋白1(...     

高度近视白内障患者人工晶状体计算公式的研究进展

高度近视合并白内障患者数量日益增长, 复明性白内障手术逐渐向屈光性白内障手术转变, 良好的术后视力是高度近视白内障患者术后的目标。由于眼轴长度测量误差、术后有效晶状体位置变化和人工晶状体(IOL)计算公式选择不当等因素, 高度近视白内障术后屈光预测准确性欠佳, 严重影响患者视觉质量和满意度。随着IOL计算公式的不断发展, SRK/T和Holladay1等薄晶状体会聚公式中眼轴长度、角膜曲率等不断优化, 以Barrett Universal Ⅱ公式为代表的厚晶状体会聚公式应用逐渐广泛, 基于人工智能的Hill-RBF公式、基于光线追踪的Olsen公式和OKULIX软件以及结合多种理论的Kane公式和EVO公式等新型IOL计算公式陆续问世, 白内障术后屈光预测有了更多的选择和保障。本文总结不同种类IOL计算公式的优化与进展, 为提高高度近视白内障患者IOL度数计算的准确性提供更多的选择。     

三焦点人工晶状体的临床应用进展

植入多焦点IOL是脱镜状态下获得有效远、近视力的最有效方法。近年来诞生的三焦点IOL能提供远、中、近视力矫正, 提供良好的全程视力。本文从三焦点IOL的设计类型、视觉质量、适应证、离焦曲线及术后不良反应等方面进行阐述, 为深入认识三焦点IOL提供理论依据。(国际眼科纵览, 2022, 46:113-118)     

关注有晶状体眼后房型人工晶状体植入术后白内障手术要点

随着年龄的增长, 越来越多有晶状体眼后房型人工晶状体(ICL)植入患者面临白内障对视力的威胁。此类患者白内障术前眼部检查时应该关注角膜内皮细胞密度是否大于2 000个/mm2、前房角的开放状态以及是否有视网膜脱离、脉络膜新生血管等眼底异常;眼部生物测量时应该关注前房深度和晶状体厚度的测量起止线, 若行ICL联合角膜屈光手术的患者要按照角膜激光手术后的检查要求使用2种以上设备测量角膜屈光力;人工晶状体类型选择时要考虑高度近视眼的组织结构特点, 相较于C形与L形襻, 平板襻在高度近视伴有大囊袋以及较大的撕囊直径患者中相对更为稳定;Kane、Barrett Universal Ⅱ、Olsen、Hill-RBF等人工晶状体屈光度计算公式在长眼轴人群中相对准确;推荐ICL取出与白内障超声乳化和人工晶状体植入术同时进行, 手术切口宜大于2.6 mm。飞秒激光辅助的白内障摘除手术, 虽然在减少角膜内皮细胞丢失、减轻角膜水肿、高质量撕囊等方面优于传统超声乳化白内障吸除术, 但因ICL的存在会引起飞秒切削气泡聚积、需要手动调整激光扫描定位以及较低拱高, 可造成撕囊和碎核的不完全, 建议谨慎使用。眼科医师...     

晶状体囊袋张力环在白内障手术中的应用

当晶状体悬韧带有异常时, 白内障手术的安全性将受到严重的威胁, 手术中玻璃体脱出、囊膜破裂、晶状体皮质残留及人工晶状体脱位等风险大大增加。晶状体囊袋张力环和相关的囊膜内装置的使用, 使眼科医生能够在复杂的白内障手术中轻松维持囊袋的稳定性, 增强了眼前节手术的可控性, 减少或减轻了术中、术后并发症, 改善了悬韧带异常相关疾病的预后。随着设计和材料的不断进步, 晶状体囊袋张力环的适应证逐渐扩展, 尤其对于高度近视患者而言, 可维持人工晶状体位置的稳定, 辅助支撑悬韧带松弛部位, 抑制术后残留的晶状体上皮细胞的迁移和增生, 改善患者视觉质量以及降低视网膜脱离的发生率。(国际眼科纵览, 2023, 47:315-321)     

POLH对过氧化氢诱导的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡的影响

目的　探究DNA聚合酶η（POLH）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡的防御机制。方法　以年龄相关性白内障患者的晶状体前囊膜组织和H₂O₂处理的晶状体上皮细胞系SRA01/04为研究对象,分别通过RT-PCR和免疫印迹实验验证POLH的表达并筛选H₂O₂最佳作用浓度用于后续实验,将培养的SRA01/04细胞分为H₂O₂组、H₂O₂+HA组和H₂O₂+OV-POLH组,采用RT-PCR和免疫印迹实验检测POLH mRNA和蛋白表达情况,免疫荧光法检测DNA氧化损伤标志物以及TUNEL实验检测细胞凋亡变化,免疫印迹实验检测细胞中BAX、BCL-2、Nrf2和Keap1蛋白表达。结果　RT-PCR结果显示,与透明晶状体前囊膜（1.00±0.22）相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组织中POLH mRNA相对表达量明显下降（0.38±0.62）（P<0.000 1）。RT-PCR和免疫印迹实验均显示,200 μmol·L^-1 H₂O₂处理的SRA01/04细胞中POLH表达量最低;TUNEL实验检测结果显示, 200 μmol·L^-1 H₂O₂处理后细胞的凋亡明显增加。RT-PCR和免疫印迹实验结果显示,与H₂O₂组和H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组SRA01/04细胞中POLH表达量显著升高（P<0.000 1）。免疫荧光染色结果显示,与H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组细胞的γH2A染色明显下降。免疫印迹实验检测结果显示,与H₂O₂组和H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组细胞促凋亡蛋白BAX表达量明显下降,而抑凋亡蛋白BCL-2表达量明显升高（均为P<0.01）;与H₂O₂组和H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组细胞Keap1蛋白水平明显下降,而转录调控蛋白Nrf2表达明显升高（均为P<0.01）。结论　过表达POLH可通过增强DNA损伤修复功能抑制H₂O₂诱导的晶状体上皮细胞凋亡,其抑制氧化应激机制可能与Nrf2-Keap1-ARE通路有关。     

白内障术后人工晶状体混浊的临床分析

目的: 分析白内障摘除联合人工晶状体(IOL)植入术后发生IOL混浊的特点以及IOL置换术的临床效果。方法: 回顾性病例研究。随机选取2000年1月至2022年12月在青岛眼科医院白内障科诊断为IOL混浊的50例(51眼)患者的临床资料。记录混浊IOL的材质、型号, IOL混浊的类型(暂时性或永久性), 混浊IOL的外观变化, IOL置换手术前后最佳矫正视力(BCVA)。手术前后BCVA比较采用配对样本t检验。结果: 术中植入发生暂时性IOL混浊的有4例(4眼), 均为表面疏水处理的亲水性丙烯酸酯IOL, 包括1枚球面L-312(Oculentis), 2枚809M(Carl Zeiss)和1枚839M(Carl Zeiss), 这4枚IOL在使用之前均从室外低温环境转移到室温环境, 且从发现IOL混浊到恢复不超过3 h;46例(47眼)为永久性IOL混浊, 包括37枚亲水性丙烯酸酯球面860UV(US), 3枚水凝胶折叠式H60M(Bausch and Lomb), 5枚表面疏水处理的亲水性丙烯酸酯球面L-312(Oculentis), 2枚三片式疏水性丙烯酸酯MA60MA(Alco...     

景深延长型人工晶状体的设计原理与临床效果

景深延长型(EDOF)人工晶状体(IOL)的出现是屈光性白内障手术时代的一大进步。EDOF IOL通过扩展景深或延长焦点的设计, 为患者术后提供良好的中间视力和视觉质量。本综述的目的是总结目前可供患者使用的各种EDOF IOL的设计原理、临床效果、屈光度计算公式和屈光结果、患者满意度。     

白内障氧化应激损伤诱导晶状体上皮细胞铁死亡

目的 本研究拟在白内障细胞模型中验证氧化应激损伤是否可诱导晶状体上皮细胞铁死亡。方法 分别采用H₂O₂和紫外线B(UVB)模拟白内障氧化应激损伤模型并进行体外细胞实验。采用流式细胞术分别对H₂O₂组(0 h、12 h、24 h)和空白对照组、UVB组(UVB照射)进行晶状体上皮细胞死亡的检测,空白对照组不做任何处理。采用荧光探针染色观察和流式细胞术检测不同浓度(0μmol·L^-1、100μmol·L^-1、200μmol·L^-1和300μmol·L^-1)H₂O₂组和空白对照组、UVB组引起的晶状体上皮细胞C11/BODIPY染色阳性细胞率,表征细胞脂质过氧化水平。结果 200μmol·L^-1 H₂O₂处理晶状体上皮细胞后,与0 h时相比,12 h时晶状体上皮细胞死亡率升高,但差异无统计学意义(P>0....     

人工晶状体植入术后视网膜脱离的相关危险因素

白内障是最常见的年龄相关性眼病, 也是造成老年人视力下降的主要原因之一。视网膜脱离(RD)是白内障手术的常见并发症之一, 尽管近年来白内障手术的安全性提高, 但RD发生的风险仍不能完全消除。白内障术后RD的发生与许多因素有关, 例如患者的自身眼部条件、人工晶状体的类型、眼外科医生的手术熟练度等。本综述就人工晶状体置换术后RD的相关危险因素及其特点进行简要阐述。     

激光角膜屈光术后人工晶状体度数计算方法的进展

近年来, 既往激光角膜屈光手术史的白内障患者逐年增加。由于激光角膜屈光手术改变了角膜形态, 使得传统的人工晶状体(intraocular lens, IOL)计算公式出现较大的术后屈光误差。误差来源包括角膜前表面曲率半径测量、角膜屈光力计算、眼轴长度测量、有效人工晶状体位置计算等。不需要屈光手术术前数据的IOL度数计算公式, 如Hoffer Q公式、Barrett True-K公式、Shammas-PL公式可应用于激光角膜屈光术后患者的IOL计算。基于光线追踪原理或人工智能的新一代IOL公式, 如Olsen公式、EVO公式、Hill-RBF公式、Kane公式等在常规白内障手术患者IOL度数计算中的准确性和预测性已被证实, 但在激光角膜屈光术后患者中的应用价值仍需进一步研究证实。(国际眼科纵览, 2022, 46:460-464)     

PUMA介导氧化应激诱导的人晶状体上皮细胞凋亡

目的探讨PUMA在氧化应激诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelialcell,HLEC)凋亡中的作用。方法体外培养的HLEC-B3,用50μmol·L-1H2O2刺激不同的时间后,Hoechst33258染色,凋亡细胞呈核固缩、碎裂形态,计数细胞凋亡率;采用West-ern blot方法检测PUMA及Caspase-3蛋白的表达水平。采用RT-PCR方法检测PUMAmRNA表达水平;设计合成针对人PUMA基因的小干扰片段(siPUMA1、siPUMA2)和一条阴性对照,用lipofectamine2000转染细胞后,验证干扰有效性,观察其对氧化应激诱导的HLEC凋亡的影响。结果 H2O2刺激HLEC4h、8h、12h后,细胞凋亡率分别为3.30%±0.25%、27.16%±0.31%、48.14%±0.57%,凋亡相关蛋白Caspase-3发生时间依赖的表达上调。H2O2可诱导PUMA mRNA及蛋白质表达上调。干扰PUMA的表达能减少H2O2诱导的细胞凋亡,H2O2处理HLEC-B312h后细胞凋亡率为48.24%±0.84%,而敲除PU-MA的表达后细胞凋亡率显著降低为13.72%±1.06%(siPUMA1)和17.56%±0.51%(siPUMA2)。结论 PUMA介导了H2O2诱导的HLEC凋亡,可能在白内障的发生发展中发挥重要作用。     

白内障患者角膜散光的治疗进展

术前角膜散光是影响屈光性白内障手术效果的重要因素。散光矫正型人工晶状体(Toric IOL)植入术是目前临床上矫正白内障术前散光的主要方式。Toric IOL的不同材料和形状以及高度近视长眼轴均会影响其在囊袋内的稳定性。准分子激光屈光手术可精准矫正白内障术后的残存散光, 但因为价格和二次手术等问题在临床未得到广泛应用。在角膜陡峭轴向上做白内障超声乳化手术切口矫正散光不会增加额外的风险, 但矫正幅度有限。弧形角膜切开术简便易行, 联合飞秒激光能进一步提高矫正的精确性, 有较的临床应用前景。(国际眼科纵览, 2022, 46:430-436)